實(shí)驗(yàn)診斷骨髓細(xì)胞學(xué)和化學(xué)染色理論

1、 骨骨 髓髓 細(xì)細(xì) 胞胞 學(xué)學(xué) 檢檢 查查 全能干細(xì)胞全能干細(xì)胞 多能干細(xì)胞階段多能干細(xì)胞階段 祖細(xì)胞階段祖細(xì)胞階段 階段階段 1.BFU-E 髓系髓系 2.CFU-GM 全能干細(xì)胞全能干細(xì)胞 3.CFU-EO 4.CFU-Meg CFU-TL 淋巴系淋巴系 CFU-BL 血血 細(xì)細(xì) 胞胞 分分 化化 過過 程程 造血干細(xì)胞造血干細(xì)胞 髓性干細(xì)胞髓性干細(xì)胞 淋巴干細(xì)胞淋巴干細(xì)胞 原粒原粒 原單原單 原紅原紅 原巨核原巨核 原漿原漿 原淋巴原淋巴(B/T)(B/T) 早幼早幼 早幼早幼 幼巨核幼巨核 中性中性 嗜酸嗜酸 嗜堿嗜堿 中幼中幼 中幼中幼 中幼中幼 中幼中幼 顆粒巨顆粒巨 幼漿幼漿 中

2、性中性 嗜酸嗜酸 嗜堿嗜堿 幼單幼單 幼淋巴幼淋巴(B/T)(B/T) 晚幼晚幼 晚幼晚幼 晚幼晚幼 晚幼晚幼 產(chǎn)板巨產(chǎn)板巨 成漿成漿 中性中性 嗜酸嗜酸 嗜堿嗜堿 桿核桿核 桿核桿核 桿核桿核 網(wǎng)織網(wǎng)織 中性中性 嗜酸嗜酸 嗜堿嗜堿 分葉分葉 分葉分葉 分葉分葉 單核單核 成紅成紅 血小板血小板 淋巴淋巴( (大大/ /小小) ) 骨骨 髓髓 內(nèi)內(nèi)血血 液液 內(nèi)內(nèi) 血細(xì)胞的發(fā)育成熟實(shí)際上是一個(gè)連續(xù)的過血細(xì)胞的發(fā)育成熟實(shí)際上是一個(gè)連續(xù)的過 程。我們根據(jù)血細(xì)胞在各階段所表現(xiàn)出的形態(tài)程。我們根據(jù)血細(xì)胞在各階段所表現(xiàn)出的形態(tài) 特點(diǎn)特點(diǎn), ,人為地將各系細(xì)胞劃分成幾個(gè)階段。為人為地將各系細(xì)胞劃分成幾個(gè)

3、階段。為 使在辨認(rèn)的時(shí)候有一個(gè)相對(duì)統(tǒng)一的標(biāo)準(zhǔn)。但在使在辨認(rèn)的時(shí)候有一個(gè)相對(duì)統(tǒng)一的標(biāo)準(zhǔn)。但在 細(xì)胞分類中必然會(huì)碰到中間階段的細(xì)胞細(xì)胞分類中必然會(huì)碰到中間階段的細(xì)胞, ,一般一般 可劃入下一階段。可劃入下一階段。 原始原始 成熟成熟 胞體胞體: : 大大 小小 胞質(zhì)胞質(zhì): : 量量 少少 多多 色色 深藍(lán)深藍(lán) 淺藍(lán)或灰（紅）淺藍(lán)或灰（紅） 顆粒顆粒 無無 有（特異或非特異）有（特異或非特異） 胞核胞核: : 量量 大大 小小 形態(tài)形態(tài) 圓圓 不規(guī)則（或消失）不規(guī)則（或消失） 染色質(zhì)染色質(zhì) 疏松細(xì)致疏松細(xì)致 緊密粗糙緊密粗糙 色色 淡紫色淡紫色 深紫色深紫色 核仁核仁: : 可見可見 消失消失 血細(xì)

4、胞的分化、發(fā)育、成熟具有一定的血細(xì)胞的分化、發(fā)育、成熟具有一定的 規(guī)律性規(guī)律性, ,我們?cè)诒嬲J(rèn)細(xì)胞時(shí)需要掌握下列幾我們?cè)诒嬲J(rèn)細(xì)胞時(shí)需要掌握下列幾 個(gè)方面?zhèn)€方面: : 細(xì)胞大小細(xì)胞大小 核質(zhì)比例核質(zhì)比例 胞質(zhì)胞質(zhì) 量、顏色、內(nèi)含物、量、顏色、內(nèi)含物、 胞核胞核 大小、形狀、結(jié)構(gòu)、顏色、核膜、大小、形狀、結(jié)構(gòu)、顏色、核膜、 核仁。核仁。 胞體胞體: :血細(xì)胞隨著分化發(fā)育其體積逐漸變小血細(xì)胞隨著分化發(fā)育其體積逐漸變小 （巨核細(xì)胞系除外）（巨核細(xì)胞系除外） 早期紅細(xì)胞早期紅細(xì)胞成熟紅細(xì)胞成熟紅細(xì)胞 胞質(zhì)胞質(zhì)( (漿漿):): 血細(xì)胞隨著分化發(fā)育其胞質(zhì)血細(xì)胞隨著分化發(fā)育其胞質(zhì) 量量 由少到多由少到多 色

5、色 由深藍(lán)到淺藍(lán)或灰（紅）由深藍(lán)到淺藍(lán)或灰（紅） 顆粒顆粒 由無到有（特異或非特異）由無到有（特異或非特異）, ,但紅細(xì)胞系但紅細(xì)胞系 除外除外, ,小淋巴細(xì)胞可沒有顆粒。小淋巴細(xì)胞可沒有顆粒。 原始細(xì)胞原始細(xì)胞 幼稚細(xì)胞幼稚細(xì)胞 成熟細(xì)胞成熟細(xì)胞 胞核胞核: : 血細(xì)胞隨著分化發(fā)育其胞核血細(xì)胞隨著分化發(fā)育其胞核 體積體積由大到小由大到小 形態(tài)形態(tài)由圓到不規(guī)則（或消失）由圓到不規(guī)則（或消失）, ,淋巴細(xì)胞的淋巴細(xì)胞的 核型改變不明顯核型改變不明顯 染色質(zhì)染色質(zhì)由疏松細(xì)致到緊密粗糙由疏松細(xì)致到緊密粗糙 顏色顏色由染淡紫色到深紫色由染淡紫色到深紫色 成熟細(xì)胞成熟細(xì)胞幼稚細(xì)胞幼稚細(xì)胞原始細(xì)胞原始細(xì)胞

6、 核仁核仁: :血細(xì)胞隨著分化發(fā)育其胞核內(nèi)的核仁血細(xì)胞隨著分化發(fā)育其胞核內(nèi)的核仁 從有到無。從有到無。 原始細(xì)胞原始細(xì)胞早期幼稚細(xì)胞早期幼稚細(xì)胞中晚期幼稚細(xì)胞中晚期幼稚細(xì)胞 核仁核仁核仁核仁 涂片質(zhì)量涂片質(zhì)量: : a a厚薄厚薄 b b染色染色 c c部位選取部位選取 細(xì)胞發(fā)育連貫性細(xì)胞發(fā)育連貫性: : 注意細(xì)胞發(fā)育過程中各階段的主要特征注意細(xì)胞發(fā)育過程中各階段的主要特征 結(jié)合細(xì)胞功能結(jié)合細(xì)胞功能: : 細(xì)胞發(fā)育與細(xì)胞功能具密切關(guān)系細(xì)胞發(fā)育與細(xì)胞功能具密切關(guān)系 一、一、 紅紅 細(xì)細(xì) 胞胞 系系 統(tǒng)（統(tǒng)（2025%） 二、二、 粒粒 細(xì)細(xì) 胞胞 系系 統(tǒng)（統(tǒng)（5055%） 三、三、 巨巨 核核

7、 細(xì)細(xì) 胞胞 系系 統(tǒng)統(tǒng) 四、四、 單單 核核 細(xì)細(xì) 胞胞 系系 統(tǒng)統(tǒng) 五、五、 淋淋 巴巴 細(xì)細(xì) 胞胞 系系 統(tǒng)（統(tǒng)（2025%） 六、六、 漿漿 細(xì)細(xì) 胞胞 系系 統(tǒng)統(tǒng) 七、七、 其其 他他 細(xì)細(xì) 胞胞 骨髓象檢驗(yàn)的臨床應(yīng)用骨髓象檢驗(yàn)的臨床應(yīng)用 1.1.適應(yīng)癥適應(yīng)癥 臨床上通常出現(xiàn)下列情況時(shí)臨床上通常出現(xiàn)下列情況時(shí), ,可作骨髓細(xì)胞學(xué)檢查可作骨髓細(xì)胞學(xué)檢查: : a.a.外周血數(shù)量、成分、形態(tài)等異常者外周血數(shù)量、成分、形態(tài)等異常者 b.b.經(jīng)一定檢查原因不明的發(fā)熱、肝脾及淋巴結(jié)腫大經(jīng)一定檢查原因不明的發(fā)熱、肝脾及淋巴結(jié)腫大 c.c.出現(xiàn)原因不明的骨痛、骨質(zhì)破壞、黃疸、紫癜等出現(xiàn)原因不明的骨

8、痛、骨質(zhì)破壞、黃疸、紫癜等 d.d.需作治療觀察和其他檢查者需作治療觀察和其他檢查者 f.f.其他（活檢、標(biāo)記檢測(cè)、染色體檢查等）其他（活檢、標(biāo)記檢測(cè)、染色體檢查等） 2.2.禁忌癥禁忌癥 a.a.血友病或凝血因子重度缺陷者血友病或凝血因子重度缺陷者 b.b.穿刺部位有炎癥或畸形穿刺部位有炎癥或畸形 c.c.晚期妊娠的孕婦晚期妊娠的孕婦 骨髓穿刺方法骨髓穿刺方法: : （一）部位的選擇和條件（一）部位的選擇和條件 穿刺部位通常選擇穿刺部位通常選擇髓液豐富、淺表髓液豐富、淺表 易定位、避開重要器官。如髂后上棘、髂前易定位、避開重要器官。如髂后上棘、髂前 上棘、胸骨、脛骨等。上棘、胸骨、脛骨等。

9、被穿刺部位的體表皮膚應(yīng)無破損和炎癥被穿刺部位的體表皮膚應(yīng)無破損和炎癥 及畸型及畸型 1 1耐心解釋。耐心解釋。 2 2嚴(yán)格無菌操作。嚴(yán)格無菌操作。 3 3髓液應(yīng)控制髓液應(yīng)控制0.2ml0.2ml以內(nèi)。以內(nèi)。 4 4骨質(zhì)疏松或骨質(zhì)疏松或MMMM患者需小心。患者需小心。 5 5血小板減少等患者血小板減少等患者, ,穿刺后應(yīng)予壓迫。穿刺后應(yīng)予壓迫。 6. 6. 了解病史注意禁忌癥。了解病史注意禁忌癥。 結(jié)果的計(jì)算和填寫檢驗(yàn)報(bào)告單結(jié)果的計(jì)算和填寫檢驗(yàn)報(bào)告單: : 首先計(jì)算各系統(tǒng)各階段細(xì)胞所占百分比。然后將各階首先計(jì)算各系統(tǒng)各階段細(xì)胞所占百分比。然后將各階 段粒細(xì)胞百分率的總和除以各階段有核紅細(xì)胞白分率

10、段粒細(xì)胞百分率的總和除以各階段有核紅細(xì)胞白分率, , 得出粒紅比值（得出粒紅比值（G/EG/E）。據(jù)實(shí)填寫取材、涂片、染色。）。據(jù)實(shí)填寫取材、涂片、染色。 檢測(cè)結(jié)果分析與報(bào)告方式檢測(cè)結(jié)果分析與報(bào)告方式: : （一）結(jié)合臨床分析（一）結(jié)合臨床分析 1 1一般資料一般資料 2 2癥狀癥狀 3 3體征體征 （二）結(jié)合血象分析（二）結(jié)合血象分析 三系數(shù)量和質(zhì)量三系數(shù)量和質(zhì)量 （三）骨髓象分析（三）骨髓象分析 1 1小粒、油滴、色澤小粒、油滴、色澤 2 2有核細(xì)胞增生程度有核細(xì)胞增生程度 3 3細(xì)胞數(shù)量分析細(xì)胞數(shù)量分析 4 4細(xì)胞形態(tài)分析（粒、紅、巨、淋、細(xì)胞形態(tài)分析（粒、紅、巨、淋、 單、漿、其他異常

11、細(xì)胞）單、漿、其他異常細(xì)胞） （四）骨髓象與血象結(jié)合分析（四）骨髓象與血象結(jié)合分析 1 1骨髓象相似骨髓象相似, ,而血象有區(qū)別而血象有區(qū)別（溶貧、急性失血等）（溶貧、急性失血等） 2 2骨髓象有區(qū)別骨髓象有區(qū)別, ,而血象相似而血象相似（傳淋與慢淋、白血病與類白）（傳淋與慢淋、白血病與類白） 3 3骨髓象無變化骨髓象無變化, ,而血象有變化而血象有變化（傳單、部分淋巴瘤）（傳單、部分淋巴瘤） 4 4骨髓象有變化骨髓象有變化, ,而血象無變化而血象無變化（多發(fā)性骨髓瘤、戈謝?。ǘ喟l(fā)性骨髓瘤、戈謝?。?5 5骨髓象細(xì)胞難以辨認(rèn)骨髓象細(xì)胞難以辨認(rèn), ,而血象細(xì)胞易辨認(rèn)而血象細(xì)胞易辨認(rèn) （白血病、

12、血液寄生蟲、淋巴瘤）（白血病、血液寄生蟲、淋巴瘤） ( (五五) )報(bào)告方式報(bào)告方式: : 1.1.獨(dú)立性和肯定性結(jié)論獨(dú)立性和肯定性結(jié)論 2.2.符合性診斷符合性診斷 3.3.須依賴細(xì)胞化學(xué)染色的診斷須依賴細(xì)胞化學(xué)染色的診斷 4.4.疑似性診斷疑似性診斷 5.5.簡(jiǎn)明報(bào)告特征所見而不下結(jié)論簡(jiǎn)明報(bào)告特征所見而不下結(jié)論 6.6.血液病治療后復(fù)查報(bào)告血液病治療后復(fù)查報(bào)告a.a.有效有效 b.b.無效無效 粒細(xì)胞系粒細(xì)胞系 增多增多- - 原粒、早幼粒、中幼粒、晚幼粒和桿狀核原粒、早幼粒、中幼粒、晚幼粒和桿狀核 急急 性性 白白 血血 病病 等等 急性急性 早幼早幼 白血白血 病病 M2、 慢慢 性性

13、 粒粒 細(xì)細(xì) 胞胞 白白 血血 病病 等等 慢慢 性性 粒粒 細(xì)細(xì) 胞胞 白白 血血 病、病、 類類 白、白、 中中 毒毒 等等 減少減少- 再障、粒缺、急性造血停滯等。再障、粒缺、急性造血停滯等。 紅細(xì)胞系紅細(xì)胞系 增多增多 - - 原紅和早幼紅、原紅和早幼紅、 中幼紅和晚幼紅中幼紅和晚幼紅 減少減少 - - 巨核細(xì)胞系巨核細(xì)胞系 增多增多- - 減少減少- - 急性紅血病、急急性紅血病、急 性紅白血病性紅白血病 增生性貧血真紅、鉛增生性貧血真紅、鉛 中毒、紅白血病等中毒、紅白血病等 純紅再障、急性白血病未分化型、化療后等純紅再障、急性白血病未分化型、化療后等 MPD、ITP、急性巨核細(xì)胞白

14、血病、脾亢、急性巨核細(xì)胞白血病、脾亢、慢粒慢粒等等 再障、急性白血病、慢粒、化療后等再障、急性白血病、慢粒、化療后等 單核系細(xì)胞單核系細(xì)胞 增多增多- - 原單及幼單原單及幼單 成熟單核成熟單核 淋巴系細(xì)胞淋巴系細(xì)胞 增多增多- - 原淋及幼淋原淋及幼淋 成熟淋巴成熟淋巴 急性單核或粒急性單核或粒- - 單細(xì)胞血病、慢單細(xì)胞血病、慢 粒急單變粒急單變 急性急性單核細(xì)胞白血單核細(xì)胞白血 病病病、慢性粒單細(xì)病、慢性粒單細(xì) 胞白血病胞白血病 急性淋巴細(xì)胞白急性淋巴細(xì)胞白 血病、慢粒急淋血病、慢粒急淋 變、淋巴瘤等變、淋巴瘤等 慢性淋巴細(xì)胞白慢性淋巴細(xì)胞白 血病、淋巴瘤、血病、淋巴瘤、 巨球蛋白血癥等

15、巨球蛋白血癥等 再障、病毒感染再障、病毒感染 等等 細(xì) 胞 名 稱 血片 骨髓片 % 正常值 % 原始細(xì)胞 原始粒細(xì)胞 0.42 0.42 0.5 早幼粒細(xì)胞 1.27 0.81 1.0 中性中幼粒細(xì)胞 7.23 2.77 4.0 晚幼粒細(xì)胞 11.36 2.93 7.0 桿狀核細(xì)胞 2.0 2 0.01 4.47 15.0 分葉核細(xì)胞 52.0 12.85 4.38 7.0 嗜酸中幼粒細(xì)胞 0.5 0.49 晚幼粒細(xì)胞 0.8 0.64 桿狀核細(xì)胞 1.06 0.95 分葉核細(xì)胞 3.0 1.90 1.48 1.0 嗜堿中幼粒細(xì)胞 0.01 0.03 晚幼粒細(xì)胞 0.02 0.03 桿狀核細(xì)

16、胞 0.03 0.07 分葉核細(xì)胞 0.16 0.24 原始紅細(xì)胞 0.37 0.36 1.0 早幼紅細(xì)胞 1.34 0.88 3.0 中幼紅細(xì)胞 9.45 3.33 30.5 晚幼紅細(xì)胞 9.64 3.50 20.0 原始淋巴細(xì)胞 0.01 0.01 幼稚淋巴細(xì)胞 0.08 0.15 成熟淋巴細(xì)胞 40.0 18.90 5.46 9.0 原始單核細(xì)胞 0.01 0.02 幼稚單核細(xì)胞 0.06 0.07 成熟單核細(xì)胞 3.0 1.45 0.88 1.0 原始漿細(xì)胞 0.002 0.01 幼稚漿細(xì)胞 0.03 0.07 成熟漿細(xì)胞 0.54 0.38 組織細(xì)胞 0.20 組織嗜堿細(xì)胞 0.03

17、 吞噬細(xì)胞 0.19 內(nèi)皮細(xì)胞 0.04 脂肪細(xì)胞 成骨細(xì)胞 破骨細(xì)胞 共計(jì)數(shù)有核細(xì)胞數(shù) 200 個(gè) 粒紅比例 0.65:1 原始巨核細(xì)胞 幼稚巨核細(xì)胞 4.20 % 顆粒巨核細(xì)胞 58.30 % 產(chǎn)板巨核細(xì)胞 37.50 % 裸 核 1個(gè) 1. 骨髓增生明顯活躍,粒紅比例倒置。 2. 紅系增生明顯活躍占54.5%,以中晚幼階 段為主。幼紅細(xì)胞胞體較小、邊緣不整齊, 胞質(zhì)量少、偏藍(lán)。核漿發(fā)育失衡呈核老漿幼 狀。成熟紅細(xì)胞體積較小、中央淡染區(qū)明顯 擴(kuò)大,多色性紅細(xì)胞可見。紅系分裂象較易 見。鐵染色:外鐵()內(nèi)鐵幼紅細(xì)胞陽性率 3%, 3. 粒系增生活躍,比例相對(duì)減低占35.5%, 各階段粒細(xì)胞比

18、例和形態(tài)未見明顯異常。 4. 巨核細(xì)胞全片計(jì)數(shù)見76個(gè)（增生明顯活 躍）,成蔟血小板可見,形態(tài)未見明顯異 常。 5. 淋巴細(xì)胞比例相對(duì)減少,形態(tài)未見明顯異常。 6. 單核細(xì)胞比例未見改變,形態(tài)未見明顯異常。 7. 未見其他異常細(xì)胞和寄生蟲。 意見和建議意見和建議: 請(qǐng)結(jié)合臨床及其他鐵代謝檢查,考慮小細(xì)胞 低色素性貧血。 檢 驗(yàn) 者: 李XX 檢驗(yàn)日期:2007-6-11 粒 細(xì) 胞 系 紅 細(xì) 胞 系 淋 巴 系 單 核 系 漿 細(xì) 胞 其 他 巨 核 細(xì) 胞 系 細(xì)胞化學(xué)染色是將形態(tài)和功能相結(jié)合的科學(xué)。他細(xì)胞化學(xué)染色是將形態(tài)和功能相結(jié)合的科學(xué)。他在在 保持完整的細(xì)胞形態(tài)和細(xì)胞結(jié)構(gòu)的前提下保持

19、完整的細(xì)胞形態(tài)和細(xì)胞結(jié)構(gòu)的前提下, ,應(yīng)用化學(xué)應(yīng)用化學(xué) 反應(yīng)將被檢細(xì)胞內(nèi)的各類化學(xué)成分和細(xì)胞結(jié)構(gòu)及生理反應(yīng)將被檢細(xì)胞內(nèi)的各類化學(xué)成分和細(xì)胞結(jié)構(gòu)及生理 活性物質(zhì)原位的顯示。從而對(duì)分析細(xì)胞化學(xué)成分、生活性物質(zhì)原位的顯示。從而對(duì)分析細(xì)胞化學(xué)成分、生 理功能、新陳代謝及細(xì)胞生理和病理改變有著重要的理功能、新陳代謝及細(xì)胞生理和病理改變有著重要的 意義。意義。 細(xì)胞內(nèi)染色的范圍通常是細(xì)胞內(nèi)染色的范圍通常是: :蛋白類、多糖類、脂蛋白類、多糖類、脂 類、鹽類和金屬類等。類、鹽類和金屬類等。 采用的方法通常為采用的方法通常為: :化學(xué)結(jié)合、物理溶解及酶化學(xué)結(jié)合、物理溶解及酶- -底底 物反應(yīng)。物反應(yīng)。 a a

20、對(duì)各類白血病的確診對(duì)各類白血病的確診 b b對(duì)許多血液疾病鑒別診斷對(duì)許多血液疾病鑒別診斷 c c對(duì)各種良、惡性血液系統(tǒng)疾病療效和預(yù)對(duì)各種良、惡性血液系統(tǒng)疾病療效和預(yù) 后估計(jì)提供一定的信息后估計(jì)提供一定的信息 一過氧化物酶（一過氧化物酶（POXPOX） 血細(xì)胞中的過氧化物酶主要為髓過氧化物酶（嗜酸血細(xì)胞中的過氧化物酶主要為髓過氧化物酶（嗜酸 粒細(xì)胞內(nèi)為乳過氧化物酶）。在血液和骨髓細(xì)胞中粒細(xì)胞內(nèi)為乳過氧化物酶）。在血液和骨髓細(xì)胞中, , 粒細(xì)胞系和單核細(xì)胞系的嗜苯胺藍(lán)顆粒（粒細(xì)胞系和單核細(xì)胞系的嗜苯胺藍(lán)顆粒（A A- -顆粒）內(nèi)顆粒）內(nèi) 的溶酶體中存在有過氧化物酶。此酶的活性和多少與的溶酶體中存在

21、有過氧化物酶。此酶的活性和多少與 溶酶體的數(shù)量有關(guān)溶酶體的數(shù)量有關(guān), ,而與而與A A- -顆粒的多少無關(guān)。雖然淋顆粒的多少無關(guān)。雖然淋 巴細(xì)胞漿中也有嗜苯胺藍(lán)顆粒巴細(xì)胞漿中也有嗜苯胺藍(lán)顆粒, ,但因?yàn)榇祟w粒中不存但因?yàn)榇祟w粒中不存 在溶酶體在溶酶體, ,所以淋巴細(xì)胞過氧化物酶染色呈陰性反所以淋巴細(xì)胞過氧化物酶染色呈陰性反 應(yīng)。另外巨核細(xì)胞、紅細(xì)胞等也為陰性反應(yīng)。應(yīng)。另外巨核細(xì)胞、紅細(xì)胞等也為陰性反應(yīng)。 （一）原理（一）原理 過氧化物酶過氧化物酶 H H2 2O O2 2 H H2 2O O O O 無色聯(lián)苯胺無色聯(lián)苯胺 藍(lán)色聯(lián)苯胺藍(lán)色聯(lián)苯胺 （二）方法（二）方法 根據(jù)各公司產(chǎn)品說明書進(jìn)行根據(jù)

22、各公司產(chǎn)品說明書進(jìn)行 （三）正常陽性細(xì)胞（三）正常陽性細(xì)胞 1.1.中性粒細(xì)胞中性粒細(xì)胞 強(qiáng)陽性強(qiáng)陽性 2.2.嗜酸粒細(xì)胞嗜酸粒細(xì)胞 強(qiáng)陽性強(qiáng)陽性 3.3.單核細(xì)胞單核細(xì)胞 弱陽性或陽性（彌散狀）弱陽性或陽性（彌散狀） 4.4.淋巴細(xì)胞、紅細(xì)胞、漿細(xì)胞、組織細(xì)胞、巨核細(xì)胞等均為淋巴細(xì)胞、紅細(xì)胞、漿細(xì)胞、組織細(xì)胞、巨核細(xì)胞等均為 陰性陰性 病理變化病理變化 1 1增高增高-再生障礙性貧血、感染、急慢性淋巴細(xì)胞白血病、再生障礙性貧血、感染、急慢性淋巴細(xì)胞白血病、 2. 2. 減低減低-急慢性粒細(xì)胞白血病、急慢性粒細(xì)胞白血病、MDSMDS、風(fēng)濕熱、放射病等、風(fēng)濕熱、放射病等 3. 3. 缺乏缺乏先天

23、性髓過氧化物酶缺乏癥。先天性髓過氧化物酶缺乏癥。 過氧化物酶染色在急性白血病分型中的意義過氧化物酶染色在急性白血病分型中的意義 臨床上通常將臨床上通常將POXPOX染色陽性率染色陽性率3 3% %作為淋巴與非淋巴的分界標(biāo)作為淋巴與非淋巴的分界標(biāo) 準(zhǔn)若能結(jié)合其他化學(xué)染色、細(xì)胞免疫標(biāo)記、遺傳學(xué)和分子生準(zhǔn)若能結(jié)合其他化學(xué)染色、細(xì)胞免疫標(biāo)記、遺傳學(xué)和分子生 物學(xué)檢測(cè)則更好物學(xué)檢測(cè)則更好 二糖原染色（二糖原染色（PASPAS） 此試驗(yàn)中能被過碘酸此試驗(yàn)中能被過碘酸- -雪夫反應(yīng)呈陽性的多糖類物雪夫反應(yīng)呈陽性的多糖類物 質(zhì)有糖原、粘多糖、糖蛋白、糖脂、還包括一些磷脂質(zhì)有糖原、粘多糖、糖蛋白、糖脂、還包括一

24、些磷脂 類物質(zhì)等類物質(zhì)等, ,因此因此PASPAS陽性不能簡(jiǎn)單地就表明有糖原的陽性不能簡(jiǎn)單地就表明有糖原的 存在存在, ,只是在對(duì)血細(xì)胞的組織化學(xué)研究中通常習(xí)慣于只是在對(duì)血細(xì)胞的組織化學(xué)研究中通常習(xí)慣于 將將PASPAS陽性認(rèn)同于糖原。陽性認(rèn)同于糖原。 PASPAS染色雖然不完全代表糖原染色雖然不完全代表糖原, ,但在血液系統(tǒng)疾病但在血液系統(tǒng)疾病 特別在各類型急性白血病中卻有相當(dāng)大的應(yīng)用價(jià)值。特別在各類型急性白血病中卻有相當(dāng)大的應(yīng)用價(jià)值。 PASPAS染色若結(jié)合其他化學(xué)染色和細(xì)胞免疫表型檢測(cè)可染色若結(jié)合其他化學(xué)染色和細(xì)胞免疫表型檢測(cè)可 對(duì)部分疾病的診斷和鑒別對(duì)部分疾病的診斷和鑒別診斷提供一定的

25、價(jià)值。診斷提供一定的價(jià)值。 （一）原理（一）原理 過碘酸過碘酸 乙二醇乙二醇 雙醛基雙醛基 + + 無色品紅無色品紅 紫紅色化合物紫紅色化合物 （二）方法（二）方法 （三）正常陽性細(xì)胞（三）正常陽性細(xì)胞 1.1.粒系粒系陽性（且隨細(xì)胞的成熟逐漸增強(qiáng)）陽性（且隨細(xì)胞的成熟逐漸增強(qiáng)）. . 2. 2.單核單核-陽性（且隨細(xì)胞的成熟逐漸增強(qiáng)）陽性（且隨細(xì)胞的成熟逐漸增強(qiáng)）. . 3. 3.淋巴淋巴大部分陰性大部分陰性, ,少數(shù)呈陽性少數(shù)呈陽性. . 4. 4.巨核巨核強(qiáng)陽性強(qiáng)陽性( (粗顆?；驂K狀粗顆?；驂K狀).). 5. 5.漿系漿系-大部分陰性大部分陰性, ,少數(shù)呈陽性少數(shù)呈陽性. . 6. 6

26、.紅系紅系陰性陰性. . （四）臨床評(píng)價(jià)（四）臨床評(píng)價(jià) 紅系紅系 紅（白）血病、紅（白）血病、MDSMDS等幼紅細(xì)胞等幼紅細(xì)胞 可呈陽性?？沙赎栃浴?淋淋 粗顆?；驂K狀粗顆粒或塊狀 單單 細(xì)顆粒彌散狀細(xì)顆粒彌散狀 粒粒 細(xì)顆?；蚓鶆蚣t色細(xì)顆粒或均勻紅色 巨巨 粗顆?；驂K狀強(qiáng)陽性粗顆粒或塊狀強(qiáng)陽性 三堿性磷酸酶（三堿性磷酸酶（NAPNAP） 中性粒細(xì)胞堿性磷酸酶是中性粒細(xì)胞堿性磷酸酶是中性粒細(xì)胞中的特異性顆中性粒細(xì)胞中的特異性顆 粒（粒（S顆粒）所釋放的一種酶顆粒）所釋放的一種酶,存在于細(xì)胞漿內(nèi)的三級(jí)存在于細(xì)胞漿內(nèi)的三級(jí) 顆粒中呈不規(guī)則形的管狀結(jié)構(gòu)顆粒中呈不規(guī)則形的管狀結(jié)構(gòu),該酶的活力與積分受到

27、該酶的活力與積分受到 體內(nèi)許多因素的影響。如中性粒細(xì)胞的成熟度、體內(nèi)許多因素的影響。如中性粒細(xì)胞的成熟度、HbF、 內(nèi)分內(nèi)分 泌功能等均可使泌功能等均可使NAP的積分產(chǎn)生一定的差異的積分產(chǎn)生一定的差異,但但 正常人群中性粒細(xì)胞的陽性程度一般很少到正常人群中性粒細(xì)胞的陽性程度一般很少到三三分分,絕對(duì)絕對(duì) 達(dá)不到達(dá)不到四四分。分。 若結(jié)合染色體檢查可協(xié)助慢粒的診斷。若結(jié)合染色體檢查可協(xié)助慢粒的診斷。 （一）原理（一）原理 pH9.6pH9.6 -磷酸萘酚磷酸萘酚 + H+ H2 2O O -萘酚萘酚 + + 磷酸磷酸 堿性磷酸酶堿性磷酸酶 + + 重氮鹽重氮鹽 有色沉淀物有色沉淀物 （二）方法（二

28、）方法 （三）正常陽性細(xì)胞（三）正常陽性細(xì)胞 在血細(xì)胞中除成熟中性粒細(xì)胞陽性外,其他細(xì)胞基本 呈陰性。 （四）臨床評(píng)價(jià)（四）臨床評(píng)價(jià) 1.1.生理變化生理變化: : 年齡、應(yīng)激、妊娠可見增高或降低年齡、應(yīng)激、妊娠可見增高或降低 2.2.病理變化病理變化: : （1 1）增高）增高 感染、感染、AAAA、類白血病、急淋、其它、類白血病、急淋、其它 （2 2）減低）減低 粒缺、脾亢、感染（粒缺、脾亢、感染（G G ）、病毒、 ）、病毒、 白血病白血病 此酶主要分布在粒細(xì)胞和肥大細(xì)胞中。通常從原粒此酶主要分布在粒細(xì)胞和肥大細(xì)胞中。通常從原粒 細(xì)胞后期即可見有弱陽性反應(yīng)細(xì)胞后期即可見有弱陽性反應(yīng), ,

29、而到早幼粒細(xì)胞就可而到早幼粒細(xì)胞就可 見強(qiáng)陽性反應(yīng)。且酶的活性不隨細(xì)胞分化成熟而增見強(qiáng)陽性反應(yīng)。且酶的活性不隨細(xì)胞分化成熟而增 強(qiáng)。此酶的陽性產(chǎn)物比強(qiáng)。此酶的陽性產(chǎn)物比POXPOX更為特異。更為特異。 單核細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、巨核細(xì)胞等均為陰性單核細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、巨核細(xì)胞等均為陰性, ,所以所以 在臨床上將在臨床上將AS-DCEAS-DCE染色作為是粒細(xì)胞的標(biāo)志性酶。染色作為是粒細(xì)胞的標(biāo)志性酶。 一）原理一）原理 氯化醋酸氯化醋酸AS-DAS-D萘酚酯酶萘酚酯酶 氯化醋酸氯化醋酸AS-DAS-D萘酚萘酚 AS-DAS-D萘酚萘酚 + + 醋酸醋酸 + + 重氮鹽重氮鹽 有色沉淀物有色沉淀物 （二）

30、方法（二）方法 （三）陽性細(xì)胞（三）陽性細(xì)胞 中性粒細(xì)胞陽性外中性粒細(xì)胞陽性外, ,其他血液細(xì)胞均為陰性。其他血液細(xì)胞均為陰性。 （四）臨床評(píng)價(jià)（四）臨床評(píng)價(jià) 粒細(xì)胞及肥大細(xì)胞的標(biāo)志酶粒細(xì)胞及肥大細(xì)胞的標(biāo)志酶 非特異性酯酶是屬水解酶非特異性酯酶是屬水解酶, ,通?？煞譃橹行怎ッ竿ǔ？煞譃橹行怎ッ? (NAENAE) )、酸性、酸性 酯酶（酯酶（ANAEANAE）和丁酸酯酶（）和丁酸酯酶（NBENBE）。由較多的同工酶所組成）。由較多的同工酶所組成, ,在不同在不同 的細(xì)胞內(nèi)存在有不同的同工酶。電泳分析證明人血細(xì)胞含有九種酯的細(xì)胞內(nèi)存在有不同的同工酶。電泳分析證明人血細(xì)胞含有九種酯 酶同工酶酶同

31、工酶, ,如中性粒細(xì)胞含同工酶如中性粒細(xì)胞含同工酶1 1、2 2、7 7、9 9; ;單核細(xì)胞和血小板含單核細(xì)胞和血小板含 有同工酶有同工酶4 4、5 5。淋巴細(xì)胞含有同工酶。淋巴細(xì)胞含有同工酶1 1和和6 6等。其中同工酶等。其中同工酶4 4、5 5 能能 被被NaFNaF所抑制所抑制, ,所以對(duì)染色呈陽性的細(xì)胞作所以對(duì)染色呈陽性的細(xì)胞作NaFNaF抑制試驗(yàn)可鑒別中性抑制試驗(yàn)可鑒別中性 粒細(xì)胞和單核細(xì)胞。粒細(xì)胞和單核細(xì)胞。 非特異性酯酶檢測(cè)通常應(yīng)用于白血病的鑒別診斷非特異性酯酶檢測(cè)通常應(yīng)用于白血病的鑒別診斷, ,而白血病細(xì)胞而白血病細(xì)胞 的高度異型性或異質(zhì)性使酶活性的表達(dá)出現(xiàn)紊亂的高度異型性

32、或異質(zhì)性使酶活性的表達(dá)出現(xiàn)紊亂, ,所以組合酯酶檢所以組合酯酶檢 測(cè)比單一檢測(cè)更具價(jià)值和意義。測(cè)比單一檢測(cè)更具價(jià)值和意義。 在臨床上非特異性酯酶一般選用在臨床上非特異性酯酶一般選用: : -醋酸萘酚酯酶（醋酸萘酚酯酶（- NAE- NAE） -丁酸萘酚酯酶（丁酸萘酚酯酶（ NBE NBE） 醋酸醋酸AS-DAS-D萘酚酯酶（萘酚酯酶（ AS-DAE AS-DAE ） 若將上述任何一個(gè)酶與若將上述任何一個(gè)酶與POXPOX或或AS-DCEAS-DCE染色于染色于 同一張標(biāo)本片上同一張標(biāo)本片上, ,就被稱為雙酶（雙酯）染色。就被稱為雙酶（雙酯）染色。 可使粒細(xì)胞系和單核細(xì)胞系分辨得更清楚?？墒沽＜?xì)胞

33、系和單核細(xì)胞系分辨得更清楚。 （一）原理（一）原理（-NAE-NAE、AS-DAEAS-DAE、-NBE-NBE） -醋酸萘酚 -萘酚 + + 醋酸 -醋酸萘酚酯酶 + + 重氮鹽重氮鹽 有色沉淀物有色沉淀物 （二）方法（二）方法 （三）正常陽性細(xì)胞（三）正常陽性細(xì)胞 （四）臨床評(píng)價(jià)（四）臨床評(píng)價(jià) 此組合酶類染色此組合酶類染色, ,主要運(yùn)用于各種急性白血病的主要運(yùn)用于各種急性白血病的 鑒別診斷鑒別診斷, ,特別在急非淋（特別在急非淋（ANLLANLL）中的分型和亞型分）中的分型和亞型分 型提供重要依據(jù)。型提供重要依據(jù)。 骨髓鐵包括細(xì)胞內(nèi)鐵和細(xì)胞外鐵。細(xì)胞內(nèi)鐵為骨髓鐵包括細(xì)胞內(nèi)鐵和細(xì)胞外鐵。細(xì)胞

34、內(nèi)鐵為 幼紅細(xì)胞合成血紅蛋白時(shí)的利用形式幼紅細(xì)胞合成血紅蛋白時(shí)的利用形式,而細(xì)胞而細(xì)胞 外鐵是骨髓以含鐵血黃素形式存在的儲(chǔ)存鐵。骨外鐵是骨髓以含鐵血黃素形式存在的儲(chǔ)存鐵。骨 髓鐵染色可了解骨髓中幼紅細(xì)胞對(duì)鐵利用的功能髓鐵染色可了解骨髓中幼紅細(xì)胞對(duì)鐵利用的功能 和鐵原料在機(jī)體內(nèi)的吸受與儲(chǔ)存情況和鐵原料在機(jī)體內(nèi)的吸受與儲(chǔ)存情況,若將鐵染若將鐵染 色與血清、總鐵結(jié)合力等檢測(cè)綜合觀察色與血清、總鐵結(jié)合力等檢測(cè)綜合觀察,可了解可了解 機(jī)體內(nèi)鐵的動(dòng)態(tài)變化。所以鐵染色是診斷缺鐵性機(jī)體內(nèi)鐵的動(dòng)態(tài)變化。所以鐵染色是診斷缺鐵性 貧血最重要且較早期的指標(biāo)之一。貧血最重要且較早期的指標(biāo)之一。 細(xì)胞內(nèi)外的鐵與酸性亞鐵氰

35、化鉀反應(yīng)形細(xì)胞內(nèi)外的鐵與酸性亞鐵氰化鉀反應(yīng)形 成藍(lán)色的亞鐵氰化鐵成藍(lán)色的亞鐵氰化鐵, ,定位于含鐵的部位。定位于含鐵的部位。 正常值正常值: :細(xì)胞外鐵細(xì)胞外鐵-（+ +）-（+） 細(xì)胞內(nèi)鐵細(xì)胞內(nèi)鐵19-44%19-44%（-） 意義意義: :1 1、缺鐵性貧血明顯降低甚至陰性。、缺鐵性貧血明顯降低甚至陰性。 2 2、鐵粒幼細(xì)胞貧血明顯增多。、鐵粒幼細(xì)胞貧血明顯增多。 3 3、MDSMDS可見環(huán)形鐵粒幼細(xì)胞增多（可見環(huán)形鐵粒幼細(xì)胞增多（15%15%） 本病是一組骨髓造血干細(xì)胞克隆性疾病。本病是一組骨髓造血干細(xì)胞克隆性疾病。 外周血象外周血象- -主要表現(xiàn)在三系呈不同程度的主要表現(xiàn)在三系呈不同程

36、度的 改變改變, ,可見到各類細(xì)胞在數(shù)量、質(zhì)量上的異可見到各類細(xì)胞在數(shù)量、質(zhì)量上的異 常。常。 骨髓象骨髓象- -主要以各系病態(tài)造血為突出表現(xiàn)。主要以各系病態(tài)造血為突出表現(xiàn)。 分型分型; ;（-型）型） RARA; ;RASRAS; ;RAEBRAEB; ;RAEB-tRAEB-t; ;CMMLCMML。 難治性貧血難治性貧血: :伴有環(huán)行鐵粒幼細(xì)胞伴有環(huán)行鐵粒幼細(xì)胞(RARS)(RARS) 不伴有環(huán)行鐵粒幼細(xì)胞不伴有環(huán)行鐵粒幼細(xì)胞(RA)(RA) 難治性血細(xì)胞減少伴有多系增生異常難治性血細(xì)胞減少伴有多系增生異常(RCMD)(RCMD) 難治性血細(xì)胞減少伴有多系增生異常和環(huán)行鐵粒幼細(xì)難治性血細(xì)

37、胞減少伴有多系增生異常和環(huán)行鐵粒幼細(xì) 胞胞(RCMD-RS)(RCMD-RS) 難治性貧血伴有原始細(xì)胞過多難治性貧血伴有原始細(xì)胞過多(RAEB)(RAEB) 5q- 5q-綜合征綜合征( (原始細(xì)胞大于原始細(xì)胞大于20%20%的的AMLAML且有細(xì)胞遺傳學(xué)異且有細(xì)胞遺傳學(xué)異 常常) ) 骨髓增生異常綜合征骨髓增生異常綜合征, ,不能分類不能分類 白血病是一種造血系統(tǒng)的惡性疾病白血病是一種造血系統(tǒng)的惡性疾病, ,其特其特 點(diǎn)是大量原始和幼稚或異常細(xì)胞出現(xiàn)在骨點(diǎn)是大量原始和幼稚或異常細(xì)胞出現(xiàn)在骨 髓、外周血和其他器官或組織。髓、外周血和其他器官或組織。 根據(jù)白血病細(xì)胞的分化程度和白血病根據(jù)白血病細(xì)

38、胞的分化程度和白血病 的自然病程的自然病程, ,可分成急性白血病和慢性白血可分成急性白血病和慢性白血 病二大類。病二大類。 急性白血病的骨髓和外周血中主要的白急性白血病的骨髓和外周血中主要的白 血病細(xì)胞是以原始和早期細(xì)胞為主（骨髓血病細(xì)胞是以原始和早期細(xì)胞為主（骨髓 中達(dá)到或超過中達(dá)到或超過3030% %以上）。以上）。 根據(jù)白血病細(xì)胞的種類可將其分為急根據(jù)白血病細(xì)胞的種類可將其分為急 性淋巴細(xì)胞性白血病和急性非淋巴細(xì)胞性性淋巴細(xì)胞性白血病和急性非淋巴細(xì)胞性 白血病白血病。 原始或幼稚淋巴細(xì)胞為主原始或幼稚淋巴細(xì)胞為主, ,依據(jù)形態(tài)可依據(jù)形態(tài)可 分為三型分為三型: : L L1 1- -以小細(xì)胞型以小細(xì)胞型; ; L2L2- -大小細(xì)胞混合型大小細(xì)胞混合型; ; L3L3- -空泡型空泡型; ; 按照免疫學(xué)特點(diǎn)可分成按照免疫學(xué)特點(diǎn)可分成T-T-細(xì)胞和細(xì)胞和B-B-細(xì)胞細(xì)胞 二大類二大類, ,再分成多種亞型。再分成多種亞型。 形態(tài)學(xué)分型和免疫學(xué)分型目前二者無相形態(tài)學(xué)分型和免疫學(xué)分型目前二者無相 關(guān)性。關(guān)性。 急性非淋巴細(xì)胞性白血病根據(jù)發(fā)病細(xì)胞種類的急性非淋巴細(xì)胞性白血病根據(jù)發(fā)病細(xì)胞種類的 不同可分為不同可分為: : M M0 0- -極微分化型極微分化型; ; M M1 1- -粒細(xì)胞（未分化）型粒細(xì)胞（未分化）型; ;