臨床微生物檢驗(yàn)：實(shí)驗(yàn)二

1、臨床微生物學(xué)檢驗(yàn)臨床微生物學(xué)檢驗(yàn) 實(shí)驗(yàn)第二周實(shí)驗(yàn)第二周 實(shí)驗(yàn)內(nèi)容實(shí)驗(yàn)內(nèi)容 第一天：生物化學(xué)鑒定第一天：生物化學(xué)鑒定 葡萄糖、乳糖、葡萄糖、乳糖、VPVP、MRMR、硫化氫、硫化氫、 IndolIndol、枸、枸 椽酸鹽、雙糖鐵椽酸鹽、雙糖鐵 第二天：生物化學(xué)鑒定第二天：生物化學(xué)鑒定 苯丙氨酸脫氨酶、尿素酶、賴氨酸脫羧酶、鳥氨苯丙氨酸脫氨酶、尿素酶、賴氨酸脫羧酶、鳥氨 酸脫羧酶、酸脫羧酶、DNADNA酶、硝酸鹽還原、氧化發(fā)酵（酶、硝酸鹽還原、氧化發(fā)酵（O/FO/F） 第三天：生物化學(xué)鑒定第三天：生物化學(xué)鑒定 氧化酶、觸酶試驗(yàn)，第二天試驗(yàn)的結(jié)果觀察氧化酶、觸酶試驗(yàn)，第二天試驗(yàn)的結(jié)果觀察 目的要求目

2、的要求 1. 1. 掌握鑒別細(xì)菌常用生化反應(yīng)的掌握鑒別細(xì)菌常用生化反應(yīng)的原理、原理、 結(jié)果判定及接種方法。結(jié)果判定及接種方法。 2. 2. 掌握鑒別細(xì)菌常用的復(fù)合生化培養(yǎng)基掌握鑒別細(xì)菌常用的復(fù)合生化培養(yǎng)基 (KIA)(KIA)的原理、結(jié)果判定和應(yīng)用的原理、結(jié)果判定和應(yīng)用 第一天實(shí)驗(yàn)內(nèi)容第一天實(shí)驗(yàn)內(nèi)容 試劑（微量生化管）：試劑（微量生化管）： 葡萄糖、乳糖、葡萄糖、乳糖、VPVP、MRMR、硫化氫、硫化氫、IndolIndol、 枸椽酸鹽、枸椽酸鹽、KIA KIA 以上各種生化微量管以上各種生化微量管2 2支支/ /人人（KIA 1KIA 1支支/ /人）人） 菌種：大腸埃希菌、腸沙門菌、陰溝腸

3、桿菌、菌種：大腸埃希菌、腸沙門菌、陰溝腸桿菌、 福氏福氏1a1a志賀菌等志賀菌等 其他：砂輪、接種針、酒精燈其他：砂輪、接種針、酒精燈 指示劑指示劑 顏色改變顏色改變 感應(yīng)感應(yīng)pH范圍范圍 酸酸堿堿 溴甲酚紫溴甲酚紫 黃黃紫紫 5.26.8 溴麝香草酚藍(lán)溴麝香草酚藍(lán) 黃黃藍(lán)藍(lán) 6.07.6 甲基紅甲基紅 紅紅黃黃 4.46.0 酚紅酚紅 黃黃紅紅 6.88.4 中性紅中性紅 紅紅 黃黃 6.88.0 碳水化合物代謝試驗(yàn)碳水化合物代謝試驗(yàn) 1、糖、糖(醇、苷醇、苷)類發(fā)酵試驗(yàn)類發(fā)酵試驗(yàn) 原理：不同細(xì)菌含發(fā)酵糖原理：不同細(xì)菌含發(fā)酵糖(苷、醇苷、醇)類的酶不類的酶不 同，分解糖（苷、醇）能力不同，代

4、同，分解糖（苷、醇）能力不同，代 謝產(chǎn)謝產(chǎn) 物不同，指示劑呈酸性或堿性反物不同，指示劑呈酸性或堿性反 應(yīng)。應(yīng)。 指示劑為指示劑為 結(jié)果：結(jié)果： 產(chǎn)酸產(chǎn)酸：分解糖：分解糖( (苷、醇苷、醇) )產(chǎn)酸，產(chǎn)酸， 培養(yǎng)基變黃色培養(yǎng)基變黃色 產(chǎn)酸產(chǎn)氣產(chǎn)酸產(chǎn)氣：培養(yǎng)基變黃且出：培養(yǎng)基變黃且出 現(xiàn)氣泡現(xiàn)氣泡 無變化無變化： 某些細(xì)菌在代謝過程中分解葡萄糖產(chǎn)生某些細(xì)菌在代謝過程中分解葡萄糖產(chǎn)生 丙酮酸丙酮酸，丙酮酸可進(jìn)一步被分解為乳酸、乙酸、甲酸等，丙酮酸可進(jìn)一步被分解為乳酸、乙酸、甲酸等， 而使培養(yǎng)基的而使培養(yǎng)基的pHpH值下降至值下降至4.54.5以下，故加入甲基紅指示劑出以下，故加入甲基紅指示劑出 現(xiàn)現(xiàn)

5、紅色（陽性）紅色（陽性）。有些細(xì)菌分解葡萄糖產(chǎn)酸量少，或產(chǎn)生。有些細(xì)菌分解葡萄糖產(chǎn)酸量少，或產(chǎn)生 的酸進(jìn)一步轉(zhuǎn)化為其它物質(zhì)如醇、酮、醛、氣體和水，則的酸進(jìn)一步轉(zhuǎn)化為其它物質(zhì)如醇、酮、醛、氣體和水，則 培養(yǎng)基的酸堿度仍在培養(yǎng)基的酸堿度仍在pH6.2pH6.2以上，故加入甲基紅指示劑呈黃以上，故加入甲基紅指示劑呈黃 色（陰性）色（陰性） 細(xì)菌在葡萄糖代謝過程中生成細(xì)菌在葡萄糖代謝過程中生成丙酮酸丙酮酸，丙酮，丙酮 酸進(jìn)一步脫羧后可產(chǎn)生乙酰甲基甲醇。乙酰甲基甲醇在堿酸進(jìn)一步脫羧后可產(chǎn)生乙酰甲基甲醇。乙酰甲基甲醇在堿 性溶液中被空氣中的氧氧化為二乙酰（丁二酮），進(jìn)而與性溶液中被空氣中的氧氧化為二乙酰（

6、丁二酮），進(jìn)而與 培養(yǎng)基內(nèi)的蛋白胨的精氨酸所含的胍基發(fā)生反應(yīng)，生成培養(yǎng)基內(nèi)的蛋白胨的精氨酸所含的胍基發(fā)生反應(yīng)，生成紅紅 色化合物色化合物，即，即VPVP反應(yīng)陽性。反應(yīng)陽性。 VP試驗(yàn)試驗(yàn) MR試驗(yàn)試驗(yàn) 培養(yǎng)基培養(yǎng)基:葡萄糖蛋白胨水葡萄糖蛋白胨水 nVPVP試劑：試劑： 甲液：甲液：6%-6%-萘酚酒精溶液。萘酚酒精溶液。 乙液：乙液：40%KOH40%KOH溶液、溶液、0.3%0.3%肌酐。肌酐。 n結(jié)果判定：陽性結(jié)果判定：陽性: :紅色紅色 陰性陰性: :黃色黃色/ /棕色棕色（再置（再置350.5350.51 1小時(shí)后觀察）小時(shí)后觀察） 甲基紅試劑甲基紅試劑： 結(jié)果判定：加入甲基紅試劑結(jié)果

7、判定：加入甲基紅試劑1 1滴滴, , 陽性陽性: :紅色紅色 陰性陰性: :黃色黃色 - 3 3、硫化氫試驗(yàn)、硫化氫試驗(yàn) 原理：細(xì)菌分解含硫氨基原理：細(xì)菌分解含硫氨基 酸酸 (胱胱aa、半胱、半胱aa)生成生成 H2S，遇醋酸鉛或，遇醋酸鉛或Fe2+形形 成成黑色黑色PbS或或FeS沉淀沉淀 培養(yǎng)基：硫化氫培養(yǎng)基培養(yǎng)基：硫化氫培養(yǎng)基 結(jié)果判定：結(jié)果判定：培養(yǎng)基變黑培養(yǎng)基變黑 + - n原理：細(xì)菌分解培養(yǎng)基中的原理：細(xì)菌分解培養(yǎng)基中的 色氨酸色氨酸，生成吲哚，吲哚可，生成吲哚，吲哚可 與試劑中的對(duì)二甲氨基苯甲與試劑中的對(duì)二甲氨基苯甲 醛作用，生成醛作用，生成玫瑰吲哚玫瑰吲哚而呈而呈 紅色紅色 n

8、結(jié)果：反應(yīng)結(jié)束加試劑數(shù)滴，結(jié)果：反應(yīng)結(jié)束加試劑數(shù)滴， 兩兩液面接觸處液面接觸處出現(xiàn)出現(xiàn)紅色紅色為陽為陽 性，無色為陰性性，無色為陰性 - + n原理：原理：以枸櫞酸鈉為唯一碳源，磷酸銨為唯一氮源，若細(xì)以枸櫞酸鈉為唯一碳源，磷酸銨為唯一氮源，若細(xì) 菌能利用這些鹽作為碳源和氮源而生長(zhǎng)，則利用枸櫞酸鈉菌能利用這些鹽作為碳源和氮源而生長(zhǎng)，則利用枸櫞酸鈉 產(chǎn)生碳酸鹽，與利用銨鹽產(chǎn)生的產(chǎn)生碳酸鹽，與利用銨鹽產(chǎn)生的NHNH3 3反應(yīng)，形成反應(yīng)，形成 （NHNH4 4）2 2COCO3 3，使，使培養(yǎng)基變堿培養(yǎng)基變堿，pHpH升高，升高，指示劑溴麝香草酚藍(lán)指示劑溴麝香草酚藍(lán) 由草綠色變?yōu)樯钏{(lán)色由草綠色變?yōu)樯钏{(lán)

9、色 n結(jié)果結(jié)果: : 陽性陽性: :藍(lán)色藍(lán)色; ; 陰性陰性: :綠色綠色 n培養(yǎng)基：枸櫞酸鹽培養(yǎng)基培養(yǎng)基：枸櫞酸鹽培養(yǎng)基 - + 6.克氏雙糖鐵培養(yǎng)基克氏雙糖鐵培養(yǎng)基(Kligler Iron Agar,KIA) 分解葡萄糖分解葡萄糖+乳糖乳糖 產(chǎn)酸產(chǎn)酸(乳糖多，產(chǎn)酸多）乳糖多，產(chǎn)酸多） 上下層均變黃上下層均變黃 組成：無糖培養(yǎng)基組成：無糖培養(yǎng)基+1份葡萄糖份葡萄糖+10份乳糖份乳糖 + 鐵鹽鐵鹽 + 酚紅酚紅 營養(yǎng)營養(yǎng) 底物底物 底物底物 底物底物 指示劑指示劑 原理：原理： 只分解葡萄糖只分解葡萄糖 產(chǎn)酸（葡萄糖少，產(chǎn)酸量少）產(chǎn)酸（葡萄糖少，產(chǎn)酸量少） 上層上層酸氧化、中和酸氧化、中和

10、或揮發(fā)，或揮發(fā)，紅色紅色。下下 層缺氧，不氧化，層缺氧，不氧化， 黃色黃色 產(chǎn)生硫化氫產(chǎn)生硫化氫 + 鐵鹽鐵鹽 FeS 黑色沉淀黑色沉淀 應(yīng)用：應(yīng)用：檢測(cè)檢測(cè)腸桿菌科細(xì)菌腸桿菌科細(xì)菌對(duì)乳糖、葡萄糖的分解和對(duì)乳糖、葡萄糖的分解和 產(chǎn)產(chǎn)H2S能力。能力。 未接種菌未接種菌 的的KIA 乳（）乳（） 葡（）葡（） H2S(-) 乳（乳（-） 葡（葡（+） H2S(+) 乳（乳（+） 葡（產(chǎn)酸產(chǎn)氣）葡（產(chǎn)酸產(chǎn)氣） H2S(-) 各種生化培養(yǎng)基接種的細(xì)菌各種生化培養(yǎng)基接種的細(xì)菌 葡萄糖：葡萄糖： 大腸埃希菌大腸埃希菌 、 沙門菌或志賀菌沙門菌或志賀菌 乳糖：乳糖： 大腸埃希菌大腸埃希菌 、 沙門菌或志賀

11、菌沙門菌或志賀菌 硫化氫：硫化氫： 大腸埃希菌或志賀菌大腸埃希菌或志賀菌 、 沙門菌沙門菌 VPVP試驗(yàn)：試驗(yàn)： 大腸埃希菌、陰溝腸桿菌大腸埃希菌、陰溝腸桿菌 甲基紅甲基紅MRMR試驗(yàn)：試驗(yàn)： 大腸埃希菌、陰溝腸桿菌大腸埃希菌、陰溝腸桿菌 吲哚試驗(yàn)：吲哚試驗(yàn)： 大腸埃希菌、沙門菌或志賀菌大腸埃希菌、沙門菌或志賀菌 枸椽酸鹽：枸椽酸鹽： 大腸埃希菌或志賀菌或沙門菌、大腸埃希菌或志賀菌或沙門菌、 陰溝腸桿菌陰溝腸桿菌 KIAKIA： 大腸埃希菌大腸埃希菌 、沙門菌或志賀菌（、沙門菌或志賀菌（1 1支支/ /人人） 每種生化試驗(yàn)每人均做，每種生化試驗(yàn)每人均做，每個(gè)生化反應(yīng)每個(gè)生化反應(yīng) 兩個(gè)微量管分別

12、接種兩種不同的細(xì)菌！兩個(gè)微量管分別接種兩種不同的細(xì)菌！ 復(fù)習(xí)今天接種細(xì)菌的各種生化反應(yīng)原理與 結(jié)果 預(yù)習(xí)第二天的各種生化反應(yīng)原理及結(jié)果觀 察 第二天實(shí)驗(yàn)內(nèi)容第二天實(shí)驗(yàn)內(nèi)容 試劑：苯丙、尿素、（賴氨酸、鳥氨酸、氨對(duì)）、試劑：苯丙、尿素、（賴氨酸、鳥氨酸、氨對(duì)）、 DNADNA酶、硝還、酶、硝還、O/F O/F 以上各種生化微量管以上各種生化微量管 2 2支支/ /人人 O/FO/F管管 4 4支支/ /人人 氨基酸對(duì)照氨基酸對(duì)照1 1支支/ /人人 菌種：大腸、變形、沙門、志賀、金葡、銅綠菌種：大腸、變形、沙門、志賀、金葡、銅綠 其他：其他：砂輪、接種針、砂輪、接種針、酒精燈酒精燈 觀察昨天的生

13、化反應(yīng)結(jié)果并記錄觀察昨天的生化反應(yīng)結(jié)果并記錄 - MR和和VP加試劑后加試劑后 觀察觀察 VP試驗(yàn) 甲基紅試驗(yàn) 加試劑后觀察加試劑后觀察 乳（乳（+） 葡（產(chǎn)酸產(chǎn)氣）葡（產(chǎn)酸產(chǎn)氣） H2S(-) 大腸埃希菌在大腸埃希菌在KIAKIA中結(jié)果中結(jié)果 乳（乳（-） 葡（葡（+） H2S(+) 傷寒沙門菌在傷寒沙門菌在KIA中結(jié)果中結(jié)果 乳（）乳（） 葡（）葡（） H2S(-) 志賀菌在志賀菌在KIA中生長(zhǎng)結(jié)果中生長(zhǎng)結(jié)果 n原理：原理： 1、苯丙氨酸脫氨酶試驗(yàn)、苯丙氨酸脫氨酶試驗(yàn) A B + -+ - n原理：若細(xì)菌具有苯丙氨酸脫氨酶，原理：若細(xì)菌具有苯丙氨酸脫氨酶， 能將培養(yǎng)基中的苯丙氨酸脫氨變成能

14、將培養(yǎng)基中的苯丙氨酸脫氨變成 苯丙酮酸，苯丙酮酸能使三氯化鐵苯丙酮酸，苯丙酮酸能使三氯化鐵 指示劑變?yōu)榫G色指示劑變?yōu)榫G色 n加入苯丙氨酸脫氨酶試加入苯丙氨酸脫氨酶試 劑劑:10%FeCl3 n陽性陽性:培養(yǎng)基與試劑接觸處出現(xiàn)培養(yǎng)基與試劑接觸處出現(xiàn) 綠色綠色 n陰性陰性:不變色不變色 n培養(yǎng)基：苯丙氨酸培養(yǎng)基培養(yǎng)基：苯丙氨酸培養(yǎng)基 1、苯丙氨酸脫氨酶試驗(yàn)、苯丙氨酸脫氨酶試驗(yàn) A B + -+ - 2、尿素酶試驗(yàn)、尿素酶試驗(yàn) 原理：原理： 培養(yǎng)基：尿素培養(yǎng)基培養(yǎng)基：尿素培養(yǎng)基 A BA B 2、尿素酶試驗(yàn)、尿素酶試驗(yàn) 原理：細(xì)菌具有的尿素酶分原理：細(xì)菌具有的尿素酶分 解尿素產(chǎn)生氨解尿素產(chǎn)生氨(氨在

15、溶液中形氨在溶液中形 成碳酸銨成碳酸銨)，培養(yǎng)基，培養(yǎng)基pH 培養(yǎng)基：尿素培養(yǎng)基培養(yǎng)基：尿素培養(yǎng)基 指示劑：指示劑：酚紅酚紅 結(jié)果：結(jié)果： 培養(yǎng)基呈堿性培養(yǎng)基呈堿性 指示劑顯指示劑顯紅色紅色+ A BA B ：不同細(xì)菌對(duì)葡萄糖分解能力及代謝產(chǎn)物不同，：不同細(xì)菌對(duì)葡萄糖分解能力及代謝產(chǎn)物不同， 這種能力因是否有氧氣的存在而異，僅在有氧條件這種能力因是否有氧氣的存在而異，僅在有氧條件 下能分解稱為氧化型，在有氧無氧條件下均能分解下能分解稱為氧化型，在有氧無氧條件下均能分解 稱為發(fā)酵型，兩種條件下均不分解稱產(chǎn)堿型。稱為發(fā)酵型，兩種條件下均不分解稱產(chǎn)堿型。 :僅在沒有覆蓋石蠟油的一管分解糖產(chǎn)酸僅在沒有

16、覆蓋石蠟油的一管分解糖產(chǎn)酸 或產(chǎn)酸產(chǎn)氣者屬或產(chǎn)酸產(chǎn)氣者屬氧化型氧化型；兩管均分解糖產(chǎn)酸或產(chǎn)酸；兩管均分解糖產(chǎn)酸或產(chǎn)酸 產(chǎn)氣者為產(chǎn)氣者為發(fā)酵型發(fā)酵型；兩管都不生長(zhǎng)者為；兩管都不生長(zhǎng)者為產(chǎn)堿型。產(chǎn)堿型。 溴麝香草酚藍(lán)或溴甲酚紫溴麝香草酚藍(lán)或溴甲酚紫 3 3、氧化發(fā)酵試驗(yàn)（、氧化發(fā)酵試驗(yàn)（OFOF） 氧化發(fā)酵試驗(yàn)（氧化發(fā)酵試驗(yàn)（OFOF） 發(fā)酵型發(fā)酵型 A B C 氧化型氧化型 產(chǎn)堿型產(chǎn)堿型 4、氨基酸脫羧酶試驗(yàn)、氨基酸脫羧酶試驗(yàn) 接種細(xì)菌接種細(xì)菌 后，在培后，在培 養(yǎng)基中加養(yǎng)基中加 入石蠟油！入石蠟油！ n原理：原理： n原理：原理：細(xì)菌如果能使硝酸鹽還原為亞硝酸鹽，細(xì)菌如果能使硝酸鹽還原為亞硝酸

17、鹽，亞硝酸鹽亞硝酸鹽與試與試 劑中的劑中的對(duì)氨基苯磺酸對(duì)氨基苯磺酸生成對(duì)偶氮苯磺酸，對(duì)偶氮苯磺酸再與生成對(duì)偶氮苯磺酸，對(duì)偶氮苯磺酸再與 試劑中的試劑中的-萘胺萘胺反應(yīng)，生成可見的反應(yīng)，生成可見的紅色紅色N-萘胺偶氮苯磺酸。萘胺偶氮苯磺酸。 n硝酸鹽還原的過程可因細(xì)菌的不同而異，硝酸鹽還原的過程可因細(xì)菌的不同而異， 有的細(xì)菌可使其有的細(xì)菌可使其 還原為亞硝酸鹽和離子態(tài)的銨；還原為亞硝酸鹽和離子態(tài)的銨；有的細(xì)菌使硝酸鹽還原為有的細(xì)菌使硝酸鹽還原為 亞硝酸鹽后，進(jìn)一步將亞硝酸鹽分解成為氮，此時(shí)加入硝酸亞硝酸鹽后，進(jìn)一步將亞硝酸鹽分解成為氮，此時(shí)加入硝酸 鹽還原試劑鹽還原試劑不顯色不顯色，但可以在培養(yǎng)

18、基的小倒管中出現(xiàn)氣泡，但可以在培養(yǎng)基的小倒管中出現(xiàn)氣泡， 如假單胞菌等。硝酸鹽或亞硝酸鹽如果被還原成氣體的終未如假單胞菌等。硝酸鹽或亞硝酸鹽如果被還原成氣體的終未 產(chǎn)物如氮或氧化氮，就稱為脫產(chǎn)物如氮或氧化氮，就稱為脫硝化或脫氮化作用硝化或脫氮化作用。 硝酸鹽還原試驗(yàn)硝酸鹽還原試驗(yàn) A B A B -/-/+ + + + 加鋅粉加鋅粉 + + - - 加試劑后加試劑后 n甲液：甲基甲液：甲基-萘胺萘胺 n乙液：對(duì)氨基苯磺酸乙液：對(duì)氨基苯磺酸 n培養(yǎng)后加試劑：甲液、乙液各一滴培養(yǎng)后加試劑：甲液、乙液各一滴 n陽性陽性:紅色紅色 n陰性陰性:無色無色 在無色的培養(yǎng)基中再加入在無色的培養(yǎng)基中再加入鋅粉

19、鋅粉，變成紅色為變成紅色為 陰性陰性，不變色為陽性不變色為陽性。 6 6、DNADNA酶試驗(yàn)酶試驗(yàn) DNA酶 原理：原理： 長(zhǎng)鏈長(zhǎng)鏈DNA DNA 寡核苷酸鏈寡核苷酸鏈 （可被酸沉淀）（可被酸沉淀） （可溶于酸）（可溶于酸） 方法：點(diǎn)種方法：點(diǎn)種 - +- + DNA平板平板2塊塊/5人（組）人（組） 實(shí)驗(yàn)內(nèi)容：各種培養(yǎng)基接種細(xì)菌實(shí)驗(yàn)內(nèi)容：各種培養(yǎng)基接種細(xì)菌 苯丙：苯丙： 大腸埃希菌、變形桿菌大腸埃希菌、變形桿菌 尿素：尿素： 大腸埃希菌、變形桿菌大腸埃希菌、變形桿菌 賴氨酸：傷寒沙門菌、奇異變形桿菌賴氨酸：傷寒沙門菌、奇異變形桿菌 鳥氨酸：傷寒沙門菌、奇異變形桿菌鳥氨酸：傷寒沙門菌、奇異變形

20、桿菌 對(duì)照管：接種傷寒沙門菌或奇異變形桿菌對(duì)照管：接種傷寒沙門菌或奇異變形桿菌 DNADNA酶：酶： 金葡菌、大腸埃希菌或銅綠假單胞菌金葡菌、大腸埃希菌或銅綠假單胞菌 硝還：硝還： 大腸埃希菌或變形桿菌、銅綠假單胞菌大腸埃希菌或變形桿菌、銅綠假單胞菌 O/FO/F： 大腸埃希菌、銅綠假單胞菌大腸埃希菌、銅綠假單胞菌 每種生化反應(yīng)的兩個(gè)生化管每個(gè)同學(xué)均 做并分別接種兩種不同的細(xì)菌！ 第三天實(shí)驗(yàn)內(nèi)容第三天實(shí)驗(yàn)內(nèi)容 試劑：氧化酶、觸酶、試劑：氧化酶、觸酶、1%鹽酸鹽酸 菌種：大腸埃希菌、銅綠假單胞菌、菌種：大腸埃希菌、銅綠假單胞菌、 金黃色葡萄球菌、腸球菌金黃色葡萄球菌、腸球菌 其他：砂輪、接種針、

21、其他：砂輪、接種針、酒精燈酒精燈 觀察昨天的生化反應(yīng)結(jié)果觀察昨天的生化反應(yīng)結(jié)果 OF試驗(yàn)試驗(yàn) 發(fā)酵型發(fā)酵型 氧化型氧化型 苯丙氨酸脫胺酶試驗(yàn)苯丙氨酸脫胺酶試驗(yàn) 加入試劑后觀察 尿素酶試驗(yàn)?zāi)蛩孛冈囼?yàn) 為什么有些尿 素培養(yǎng)基剛接 種菌時(shí)接種處 會(huì)變成紅色？ 硝酸鹽還原試驗(yàn)硝酸鹽還原試驗(yàn) 在無色的培養(yǎng)基在無色的培養(yǎng)基 中再加入鋅粉中再加入鋅粉 紅色紅色 （）（） 不產(chǎn)氮?dú)獠划a(chǎn)氮?dú)?無色（）無色（） 產(chǎn)氮?dú)猱a(chǎn)氮?dú)?氨基酸脫羧酶氨基酸脫羧酶 顏色與對(duì)照管一致的為陰性，顏色與對(duì)照管一致的為陰性， 顏色不同的則為陽性顏色不同的則為陽性 為什么氨基酸脫羧酶試驗(yàn)管要加石蠟油？ 為什么氨基酸脫羧酶試驗(yàn)設(shè)對(duì)照管？

22、為什么氨基酸脫羧酶試驗(yàn)管要加石蠟油？ 氨基酸脫羧酶在厭氧環(huán)境下活性更好。 防止氨基酸脫羧后產(chǎn)生的胺揮發(fā)。 對(duì)照管主要成分：蛋白胨、葡萄糖和溴甲酚紫指示 劑（不含氨基酸） 為什么氨基酸脫羧酶試驗(yàn)設(shè)對(duì)照管？ 試驗(yàn)管主要成分：蛋白胨、葡萄糖、氨基酸和溴 甲酚紫指示劑。 腸桿菌科細(xì)菌均分解葡萄糖產(chǎn)酸，此酸可中和細(xì)菌 可能分解培養(yǎng)基中蛋白胨所產(chǎn)生的堿性物質(zhì)。保證 試驗(yàn)陽性管顯示的堿性反應(yīng)是細(xì)菌對(duì)氨基酸脫羧后 產(chǎn)生的胺所致而不是細(xì)菌分解蛋白胨所致。 DNADNA酶試驗(yàn)結(jié)果酶試驗(yàn)結(jié)果 加加1%鹽酸鹽酸 適量使其適量使其 覆蓋住覆蓋住 DNA平板平板 上的菌落上的菌落 1 1、氧化酶試驗(yàn)、氧化酶試驗(yàn) 原理：原理： 鹽酸二甲基對(duì)苯二胺（無色）鹽酸二甲基對(duì)苯二胺（無色） 紫紅色紫紅色的醌類化合物的醌類化合物 OR OR 鹽酸四甲基對(duì)苯二胺（無色）鹽酸四甲基對(duì)苯二胺（無色） 藍(lán)色藍(lán)色的醌類化合物的醌類化合物 方法：直接法、間接法（方法：直接法、間接法（濾紙法濾紙法、試劑紙片法）、試劑紙片法）