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1、果蔬維生素C含量測定及其分析摘要本次實(shí)驗(yàn)我們測定了橘子中的維生素c含量,試驗(yàn)中,通過2,6-二氯酚靛酚對維生素C的滴定從而測定了橘子所含的維生素C含量,我們測得橘子的維C的含量是20.46mg/100g,相對較低。經(jīng)查閱資料,討論后發(fā)現(xiàn)維生素C在空氣中易氧化,而且不同成熟程度、品種、新鮮程度、生長地、測定溫度等客觀因素也會對其有很大的影響。一、前言實(shí)驗(yàn)?zāi)康模簻y定橘子中的維生素c含量,從而進(jìn)行分析。實(shí)驗(yàn)原理: 維生素C是人類營養(yǎng)中最重要的維生素之一,缺少它時會產(chǎn)生壞血病,因此又稱為抗壞血酸(ascorbic acid)。它對物質(zhì)代謝的調(diào)節(jié)具有重要的作用。近年來,發(fā)現(xiàn)它還有增強(qiáng)機(jī)體對腫瘤的抵抗力,
2、并具有化學(xué)致癌物的阻斷作用。維生素C主要存在于新鮮水果及蔬菜中。水果中以獼猴桃含量最多,在檸檬、桔子和橙子中含量也非常豐富;蔬菜以辣椒中的含量最豐富,在番茄、甘藍(lán)、蘿卜、青菜中含量也十分豐富,野生植物以刺梨中的含量最豐富,每100克中含2800毫克,有“維生素C王”之稱。維生素C為無色晶體,味酸,溶于水及乙醇,不耐熱,在堿性溶液中極不穩(wěn)定,日光照射后易被氧化破壞,有微量銅、鐵等重金屬離子存在時更易氧化分解,干燥條件下較為穩(wěn)定。故維生素C制劑應(yīng)放在干燥、低溫和避光處保存;在烹調(diào)蔬菜時,不宜燒煮過度并應(yīng)避免接觸堿和銅器。維生素C具有很強(qiáng)的還原性。它可分為還原性和脫氫型。還原型抗壞血酸能還原染料2,
3、6-二氯酚靛酚(DCPIP),本身則氧化為脫氫型。在酸性溶液中,2,6-二氯酚靛酚呈紅色,還原后變?yōu)闊o色。因此,當(dāng)用此染料滴定含有維生素C的酸性溶液時,維生素C尚未全部被氧化前,則滴下的染料立即被還原成無色。一旦溶液中的維生素C已全部被氧化時,則滴下的染料立即使溶液變成粉紅色。所以,當(dāng)溶液從無色變成微紅色時即表示溶液中的維生素C剛剛?cè)勘谎趸藭r即為滴定終點(diǎn)。如無其它雜質(zhì)干擾,樣品提取液所還原的標(biāo)準(zhǔn)染料量與樣品中所含還原型抗壞血酸量成正比。試劑和器材試劑2%草酸溶液: 草酸2g溶于100mL蒸餾水中。1%草酸溶液: 草酸1g溶于100mL蒸餾水中。標(biāo)準(zhǔn)抗壞血酸溶液(1mg/mL): 準(zhǔn)確稱取
4、100mg純抗壞血酸(應(yīng)為潔白色,如變?yōu)辄S色則不能用)溶于1%草酸溶液中,并稀釋至100mL,貯于棕色瓶中,冷藏。最好臨用前配制。0.1% 2,6-二氯酚靛酚溶液: 250mg 2,6-二氯酚靛酚溶于150mL含有52mg NaHCO3的熱水中,冷卻后加水稀釋至250mL,貯于棕色瓶中冷藏(4)約可保存一周。每次臨用時,以標(biāo)準(zhǔn)抗壞血酸溶液標(biāo)定。材料橘子1只器材錐形瓶100mL(2);移液管10mL(2);容量瓶100mL(1);250mL(1);50mL(5);微量滴定管5mL(1);研缽;漏斗;紗布。操作方法提取水洗干凈整株新鮮蔬菜或整個新鮮水果,用紗布或吸水紙吸干表面水分。然后稱取20g,
5、加入20mL 2%草酸,根據(jù)實(shí)驗(yàn)設(shè)計需要處理樣品,然后用研缽研磨,四層紗布過濾,濾液備用。紗布可用少量2%草酸洗幾次,合并濾液,濾液總體積定容至50mL。標(biāo)準(zhǔn)液滴定準(zhǔn)確吸取標(biāo)準(zhǔn)抗壞血酸溶液1mL置100mL錐形瓶中,加9mL 1%草酸,用微量滴定管以0.1% 2,6-二氯酚靛酚溶液滴定至淡紅色,并保持15s不褪色,即達(dá)終點(diǎn)。由所用染料的體積計算出1mL染料相當(dāng)于多少毫克抗壞血酸(取10mL 1%草酸作空白對照,按以上方法滴定)。樣品滴定準(zhǔn)確吸取濾液兩份,每份10mL, 分別放入2個錐形瓶內(nèi),滴定方法同前。另取10mL 1%草酸作空白對照滴定。數(shù)據(jù)記錄與處理1、 標(biāo)準(zhǔn)滴定結(jié)果 用0.1%的2,6
6、-二氯酚靛酚溶液滴定抗壞血酸溶液,得到以下數(shù)據(jù)(表一):表一 0.1%2,6-二氯酚靛酚的標(biāo)準(zhǔn)滴定1ml標(biāo)準(zhǔn)抗壞血酸溶液+9ml1%草酸10ml1%草酸0.1%2,6-二氯酚靛酚溶液(ml)5.305.450.10 表二 多種蔬果的維生素C含量測定蔬果名稱蔬果質(zhì)量W(g)0.1%2,6-二氯酚靛酚溶液用量(ml)維生素C含量(mg/100g樣品)組別1組別2平均值10ml0.1%草酸橘子20.0124.344.484.410.1020.46 數(shù)據(jù)處理:由結(jié)果得1ml抗壞血酸需要的染料(0.1%的2,6-二氯酚靛酚溶液)的體積為V*=(5.30+5.45)/2-0.10=5.275ml1ml染料
7、能氧化抗壞血酸質(zhì)量為T=1*1/5.275=0.19mg2、多種水果蔬菜的維生素C含量測定結(jié)果本組試驗(yàn)我們選取了橘子作為材料,并對其進(jìn)行了維生素C含量測定。同標(biāo)準(zhǔn)滴定操作相似,用0.1%的2,6-二氯酚靛酚溶液對樣品進(jìn)行滴定,得到以下數(shù)據(jù)(表二,圖一),并由公式得樣品中維生素C的含量(100mg/100g樣品): 附公式:式中:VA為滴定樣品所耗用的染料的平均毫升數(shù);(VA=4.41mL) VB為滴定空白對照所耗用的染料的平均毫升數(shù);(VB=0.10mL) C為樣品提取液的總毫升數(shù);(C=50mL)D為滴定時所取的樣品提取液毫升數(shù);(D=10mL)T為1mL染料能氧化抗壞血酸毫克數(shù)(由操作二計
8、算出);(T=0.19mg)W為待測樣品的重量。(W=20.012g)注意事項(xiàng)(1) 某些水果、蔬菜(如橘子、西紅柿等)漿狀物泡沫太多,可加數(shù)滴丁醇或辛醇。(2) 整個操作過程要迅速,防止還原型抗壞血酸被氧化。滴定過程一般不超過2min。滴定所用的染料不應(yīng)小于1mL或多于4mL,如果樣品含維生素C太高或太低時,可酌情增減樣液用量或改變提取液稀釋度。(3)提取的漿狀物如不易過濾,亦可離心,留取上清液進(jìn)行滴定。5、 討論與誤差分析通過查閱資料,我們了解到,我組測得的桔肉維生素C含量為20.46mg/100g,相對偏低,分析其原因?yàn)椋?、 研磨時,研磨的不完全,過濾使得紗布上有殘余;2、 滴定時,滴
9、定管有微小漏液,導(dǎo)致結(jié)果數(shù)據(jù)有誤差;3、 可能受到橘子成熟程度、品種、新鮮程度、生長地、測定溫度等客觀因素;4、 由于操作不熟練,整個操作不夠迅速,滴定過程超過了2min,導(dǎo)致還原型抗壞血酸被氧化,從而測定的結(jié)果偏小。6、 思考題1 為了測得準(zhǔn)確的維生素C含量,實(shí)驗(yàn)過程中都應(yīng)注意哪些操作步驟?為什么?(1) 過濾后紗布盡量用少量2草酸多洗幾次以保證維生素c基本析出;若泡沫太多,可加數(shù)滴丁醇或辛醇。(2) 為了防止還原型抗壞血酸被氧化,滴定過程一般不超過2min。(3) 滴定所用的染料不應(yīng)小于1mL或多于4mL,如果樣品含維生素C太高或太低時,可酌情增減樣液用量或改變提取液稀釋度。2 試簡述維生素C的生理意義。維生素C參與體內(nèi)的眾多氧化還原反應(yīng)??纱龠M(jìn)細(xì)胞間質(zhì)的完整,保持細(xì)胞間質(zhì)的完整,增加毛細(xì)血管壁致密度,降低其通透性及脆性;具有抗炎抗過敏作用;具有還原性,有保護(hù)酶系的巰基以避免被毒物破壞的作用,可用于鉛、汞、砷、苯等的慢性中毒和放射線??;大量維生素C有中和細(xì)菌內(nèi)毒素,促進(jìn)抗體合成,增強(qiáng)白細(xì)胞吞噬功能;促進(jìn)鐵在腸內(nèi)吸收,對血紅蛋白的合成和紅細(xì)胞的成熟有影響;維生素C對增強(qiáng)魚的抗病力有重要作用。本品蛋白結(jié)合率低。少量貯藏于血漿和細(xì)胞,以腺體組織內(nèi)的濃度為最高。肝內(nèi)代謝。極少數(shù)以原形物或代謝物經(jīng)腎排泄,可經(jīng)血液透析清除。維生素C主要用于由維生素C缺乏引起的全身淤點(diǎn),齒齦、
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