臨床檢驗(yàn)方法評(píng)價(jià)

.,臨床檢驗(yàn)方法的評(píng)價(jià),王治國(guó)衛(wèi)生部臨床檢驗(yàn)中心,cncc.,新方法進(jìn)入常規(guī)應(yīng)用過程的流程圖,.,臨床實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)系統(tǒng),臨床檢驗(yàn)檢測(cè)系統(tǒng)包括產(chǎn)生結(jié)果所需要的試劑、校準(zhǔn)物、儀器、消耗品及具體操作程序。試劑是化學(xué)溶液，以可預(yù)測(cè)方式給出分析項(xiàng)目的反應(yīng)；可預(yù)測(cè)的反應(yīng)允許我們測(cè)量每一樣本中存在的分析物的量。校準(zhǔn)物是含有已知量分析物的物質(zhì)。儀器將樣本與試劑混合，并將參考已知的校準(zhǔn)物的值，來比較患者、室間質(zhì)量評(píng)價(jià)或質(zhì)控樣本的反應(yīng)，或分析物可預(yù)測(cè)的化學(xué)反應(yīng)產(chǎn)生每一樣本的結(jié)果。消耗品包括裝樣本、分配樣本和試劑和測(cè)量化學(xué)反應(yīng)所需要的物品。過程包括準(zhǔn)備檢驗(yàn)樣本、準(zhǔn)備試劑和校準(zhǔn)物、建立和維護(hù)儀器、將樣本與試劑結(jié)合、計(jì)算分析物的量、及報(bào)告結(jié)果的所必須的所有步驟。,.,臨床實(shí)驗(yàn)室試劑的選擇,SFDA批準(zhǔn);分析系統(tǒng)（試劑+校準(zhǔn)品+儀器）及檢測(cè)結(jié)果的計(jì)量學(xué)可溯源性；試劑的穩(wěn)定性：（有效期、待機(jī)穩(wěn)定期）及校準(zhǔn)周期；方法學(xué)性能：精密度、線性、可比性,.,分析方法分級(jí),決定性方法（definitivemethod）：經(jīng)詳盡研究尚未發(fā)現(xiàn)不準(zhǔn)確度或不確定性原因的方法。參考方法（referencemethod）：經(jīng)詳盡研究證實(shí)其不準(zhǔn)確度與不精密度可以忽略的方法。常規(guī)方法（routingmethod）：可滿足臨床或其他目的需要的日常使用的方法。,.,臨床檢驗(yàn)方法學(xué)分類,.,臨床檢驗(yàn)方法學(xué)分類,.,臨床檢驗(yàn)方法分類,.,常規(guī)方法,參考方法,決定性方法,準(zhǔn)確度,應(yīng)用范圍,不同方法間的關(guān)系,.,標(biāo)準(zhǔn)品分級(jí),標(biāo)準(zhǔn)品（referencematerial）：充分均勻并具有一個(gè)或多個(gè)良好確定的特性值的材料或物質(zhì)，用來校準(zhǔn)儀器設(shè)備、評(píng)估測(cè)定方法或給其它物質(zhì)賦值。一級(jí)標(biāo)準(zhǔn)品（原級(jí)參考物）：具有最高計(jì)量學(xué)特性，由一級(jí)參考測(cè)量程序定值；二級(jí)標(biāo)準(zhǔn)品：用一級(jí)標(biāo)準(zhǔn)品校準(zhǔn)，二級(jí)參考方法定值。校準(zhǔn)品（calibrator）：用二級(jí)標(biāo)準(zhǔn)品校準(zhǔn)，擬被用于校準(zhǔn)的常規(guī)方法定值。用于對(duì)常規(guī)方法和儀器的校準(zhǔn),.,一級(jí)標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì),人血清無機(jī)成分分析標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)GBW09135血清膽固醇標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)GBW09138,.,二級(jí)標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì),紅細(xì)胞微粒標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)GBW（E）090001膽紅素標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)GBW（E）090002氰化高鐵血紅蛋白溶液標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)GBW（E）090004純化血紅蛋白標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)GBW（E）090011,.,.,溯源鏈中的不確定度,真值,一級(jí)參考方法,二級(jí)參考方法,廠家標(biāo)準(zhǔn)方法,廠家常規(guī)方法,實(shí)驗(yàn)室常規(guī)方法,不確定度,.,方法選擇的要求,（一）實(shí)用性要求在決定是否將新的方法或儀器在某一實(shí)驗(yàn)室執(zhí)行前，一些實(shí)際的因素必須首先考慮。它們包括標(biāo)本類型、樣本量、分析能力、周轉(zhuǎn)時(shí)間、試驗(yàn)菜單、標(biāo)本處理、分析批的大小、人員技能要求、每一試驗(yàn)的成本、校準(zhǔn)方法、校準(zhǔn)頻率、隨機(jī)處理能力，質(zhì)控方法、空間需求（包括試劑貯存）、廢物處理要求、以及化學(xué)危險(xiǎn)物和安全的考慮。（二）性能參數(shù)與方法或儀器性能有關(guān)的特征包括其準(zhǔn)確度、分析范圍、分析回收、分析靈敏度、分析特異度、空白讀數(shù)、檢出限、干擾、精密度、試劑穩(wěn)定性、“穩(wěn)健性”，及樣本的交互作用等。,.,分析方法相關(guān)的基本概念,校準(zhǔn)（calibration）是指在規(guī)定條件下，為確定測(cè)量?jī)x器或測(cè)量系統(tǒng)所指示的量值，或?qū)嵨锪烤呋驑?biāo)準(zhǔn)物質(zhì)所代表的量值，與對(duì)應(yīng)的由標(biāo)準(zhǔn)所復(fù)現(xiàn)的量值之間關(guān)系的一組操作。（JIF1001-1998）,.,分析方法相關(guān)的基本概念,.,方法的評(píng)價(jià)的主要內(nèi)容,定量實(shí)驗(yàn)室方法的初步評(píng)價(jià)（CLSIEP10）臨床化學(xué)設(shè)備操作精密度評(píng)價(jià)（CLSIEP5）用患者標(biāo)本進(jìn)行方法學(xué)比較和偏倚評(píng)估（CLSIEP9）定量分析方法的線性（CLSIEP6）臨床化學(xué)干擾試驗(yàn)（CLSIEP7）定性測(cè)試性能評(píng)估(CLSIEP12)基質(zhì)效應(yīng)的評(píng)價(jià)（CLSIEP14）精密度和準(zhǔn)確度性能的用戶證實(shí)(EP15-A)臨床實(shí)驗(yàn)方法總分析誤差的估計(jì)（EP21-A)使用ROC曲線實(shí)驗(yàn)室試驗(yàn)臨床準(zhǔn)確度評(píng)價(jià)（CLSIGP10）臨床實(shí)驗(yàn)室如何定義和確定參照區(qū)間(C28-A2)NCCLSNationalCommitteeforClinicalLaboratoryStandardsCLSIClinicalandLaboratoryStandardsInstitute,.,.,.,臨床化學(xué)設(shè)備的精密度評(píng)價(jià),EvaluationofPrecisionPerformanceofClinicalChemistryDevices,ApprovedGuideline,1984,EP5,.,精密度的內(nèi)容,批內(nèi)不精密度批間不精密度日內(nèi)不精密度日間不精密度總不精密度,.,實(shí)驗(yàn)方法,試劑和校準(zhǔn)物：同一批號(hào)樣本：基質(zhì)與臨床樣本相似，2個(gè)以上濃度（參考醫(yī)學(xué)決定水平）。實(shí)驗(yàn)天數(shù)：20天以上實(shí)驗(yàn)次數(shù)：每天2批，每批2個(gè)樣本，每個(gè)樣本重復(fù)2次,.,精密度實(shí)驗(yàn),.,批內(nèi)不精密度,I=總實(shí)驗(yàn)天數(shù)（一般為20天）j=每天測(cè)定的批次（一般為2批）Xij1=第i天j批實(shí)驗(yàn)第一次結(jié)果Xij2=第i天j批實(shí)驗(yàn)第二次（重復(fù)）結(jié)果,.,批間不精密度,I=實(shí)驗(yàn)天數(shù)（通常為20天）Xi1=第i天第一批實(shí)驗(yàn)結(jié)果的平均值（通常重復(fù)2次）Xi2=第i天第二批實(shí)驗(yàn)結(jié)果的平均值（通常重復(fù)2次）,.,日間不精密度,I=實(shí)驗(yàn)天數(shù)X=所有結(jié)果的平均值Xi第I天所有結(jié)果的平均值,.,總不精密度,.,精密度性能的用戶核實(shí),實(shí)驗(yàn)至少要做5天，每批每個(gè)水平(要求2個(gè)濃度水平)作4次重復(fù)檢測(cè)。利用方差分析進(jìn)行數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)。計(jì)算批內(nèi)不精密度(CV或SD),并將與廠家批內(nèi)不精密度比較。計(jì)算總不精密度(CV或SD)，并將與廠家總不精密度比較?；蛘邔⒖偛痪芏扰c不精密度分析目標(biāo)進(jìn)行比較。,.,.,.,NCCLS文件EP9-A,用患者樣本進(jìn)行方法對(duì)比及偏倚評(píng)估,批準(zhǔn)指南,1995年12月,.,目的及用途,引進(jìn)新方法前或用一種方法替代另一種方法時(shí)進(jìn)行偏倚分析；評(píng)價(jià)同一分析項(xiàng)目的兩種分析方法間的偏倚。,.,評(píng)價(jià)操作要求,熟悉儀器操作熟悉評(píng)價(jià)方案質(zhì)量控制足夠的數(shù)據(jù),.,實(shí)驗(yàn)樣本要求,來源于健康人或患者，無干擾，盡量避免儲(chǔ)存；測(cè)定物濃度范圍應(yīng)在醫(yī)學(xué)決定水平范圍內(nèi)均勻分布；樣本數(shù)至少40例，增加數(shù)量能提高可信性,.,對(duì)比方法,廠家要求的實(shí)驗(yàn)室常規(guī)方法或公認(rèn)的參考方法。具有好的精密度沒有已知的干擾物相同單位相對(duì)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)或參考方法的偏倚是已知的,.,測(cè)定方法,每天分別用兩種方法進(jìn)行測(cè)定，測(cè)定順序：1、2、3、4、5、6、7、88、7、6、5、4、3、2、1測(cè)定次數(shù)：至少測(cè)定5天，共40個(gè)樣本,.,數(shù)據(jù)監(jiān)督,常規(guī)質(zhì)控：系統(tǒng)誤差人為誤差,.,實(shí)驗(yàn)步驟,熟悉儀器及方法收集數(shù)據(jù)檢查方法內(nèi)的離群點(diǎn)界限：（雙份測(cè)定）相對(duì)差值均值的4倍,.,繪圖,散點(diǎn)圖：均值散點(diǎn)圖（X，Y）所有值散點(diǎn)圖（Yij，Xi）偏倚圖：散點(diǎn)圖（Yij-Xij），Xi）,.,.,.,均值散點(diǎn)圖（X，Y）,.,偏差圖：每次測(cè)定的Y均值與X均值之差-相應(yīng)X均值圖,.,兩種方法間離群值目測(cè)檢查,界限：4倍兩種方法間絕對(duì)偏倚的均值絕對(duì)差值允許范圍:相對(duì)差值允許范圍:,.,適合范圍：計(jì)算r，r2=0.95范圍適合r20.95擴(kuò)大數(shù)據(jù)范圍線性回歸：計(jì)算均勻離散度的直觀檢查,.,.,.,預(yù)期偏倚及可信范圍線性回歸方程計(jì)算偏倚（高、中、低3組）解釋實(shí)驗(yàn)結(jié)果并與內(nèi)部標(biāo)準(zhǔn)比較,.,.,.,準(zhǔn)確度的用戶核實(shí),選擇20份患者的新鮮標(biāo)本，它們內(nèi)含的分析物濃度分布于實(shí)驗(yàn)方法的可報(bào)告范圍。不使用分析物濃度超出可報(bào)告范圍的樣品。兩個(gè)方法對(duì)標(biāo)本檢測(cè)應(yīng)在同1天的4小時(shí)內(nèi)完成。如果實(shí)驗(yàn)安排35天，每天進(jìn)行57份標(biāo)本檢測(cè)，這樣得到的結(jié)論是最可靠的。,.,.,.,評(píng)價(jià)方法可接受性,1通過試驗(yàn)確定的誤差估計(jì)與分析目標(biāo)建立的規(guī)范確定的界限進(jìn)行比較。2當(dāng)獲得的總誤差值小于方法允許的總誤差時(shí)，可認(rèn)為侯選方法的性能是可接受的。3當(dāng)一種或多種分析參數(shù)發(fā)現(xiàn)大于方法的允許誤差，可認(rèn)為侯選方法的性能是不可接受的。當(dāng)這種情況出現(xiàn)時(shí)，必須改進(jìn)方法的性能；如果不能改進(jìn)，則需要舍棄該方法。,.,.,允許不精密度制定,根據(jù)本國(guó)各實(shí)驗(yàn)室室內(nèi)變異系數(shù)水平確定。根據(jù)室間質(zhì)量評(píng)價(jià)允許總誤差（TEa)確定允許的CV%:1/4TEa,1/5TEa,1/6TEa根據(jù)生物學(xué)變異確定允許的CV%:,.,.,.,.,.,.,.,臨床檢驗(yàn)方法評(píng)價(jià)決定圖的制作及應(yīng)用,.,定量測(cè)量程序的線性評(píng)價(jià),EvaluationoftheLinearityofQuantitativeMeasurementProcedures:AStatisticalApproachEP6-A,.,目的,為實(shí)驗(yàn)室中采用定量分析方法的用戶提供評(píng)價(jià)儀器或方法是否滿足廠家線性指標(biāo)的評(píng)價(jià)方法。用戶可為分析方法設(shè)定線性范圍。,.,定義,實(shí)驗(yàn)范圍（AssayRange）：或者線性范圍（LinearRange)：分析系統(tǒng)最終輸出的、與被測(cè)物濃度或活性成比例的、濃度或活性值范圍,.,定義,線性（Linearity）:曲線接近直線的程度的量；與完整系統(tǒng)的反應(yīng)相關(guān)（是最后的分析結(jié)果或解釋，不僅是儀器的輸出結(jié)果）,.,ScopeandLimitations,線性是分析方法的一個(gè)特征，不同于準(zhǔn)確性和精密度。線性實(shí)驗(yàn)應(yīng)該使用與待分析物基質(zhì)相似的樣本。線性檢驗(yàn)“系統(tǒng)”反應(yīng)，包括校準(zhǔn)、線性化技術(shù)、系數(shù)和儀器反應(yīng)。,.,檢測(cè)系統(tǒng),TestingSystem全部檢測(cè)過程，包括儀器，樣品，人員，試劑，消耗品和程序；注：還有以下屬性（方法特征）：樣本類型，檢測(cè)溫度，濕度，等,.,使用者的需求,用簡(jiǎn)單的實(shí)驗(yàn)來檢驗(yàn)廠家標(biāo)示的線性范圍及定量分析方法的分析范圍；在實(shí)驗(yàn)室中作為方法學(xué)的信息（方法線性）；進(jìn)行線性評(píng)價(jià)實(shí)驗(yàn)。,.,儀器的熟悉過程,執(zhí)行分析過程的實(shí)驗(yàn)室人員必須掌握儀器操作和維護(hù)程序、樣本準(zhǔn)備方法和校準(zhǔn)。對(duì)較簡(jiǎn)單的設(shè)備需要5天或更少時(shí)間。對(duì)較復(fù)雜的多通道設(shè)備需要5天或更長(zhǎng)時(shí)間。,.,實(shí)驗(yàn)周期,在完成儀器熟悉過程后開始實(shí)驗(yàn)并收集數(shù)據(jù)。全部實(shí)驗(yàn)和數(shù)據(jù)采集應(yīng)在同一工作日內(nèi)完成。,.,線性評(píng)價(jià)實(shí)驗(yàn)樣本要求,樣本數(shù)量：驗(yàn)證線性：5-7個(gè)濃度水平，重復(fù)2次測(cè)定。建立線性：7-11個(gè)濃度水平，測(cè)定2-4次基質(zhì)：應(yīng)使用與病人樣本相似的樣本或注明基質(zhì)類型。,.,可以使用的樣本,病人混合血清（理想的樣本基質(zhì)）建立線性范圍：高值樣本：高于上限20-30%低值樣本：線性低限或更低。,.,可以使用的樣本,含添加物的混合病人血清：加入品在沒有干擾物存在時(shí)不需高純度。經(jīng)處理的材料稀釋的混合血清用于降低分析物濃度，材料處理：透析、熱處理、層析。,.,可以使用的樣本,生理鹽水稀釋的混合血清：在線性實(shí)驗(yàn)中使用此類樣本可掩蓋不同的基質(zhì)效應(yīng)。商品質(zhì)控或校準(zhǔn)品：此類樣本由于不是正常的生理形式，可掩蓋實(shí)際的線性結(jié)果。,.,可以使用的樣本,不同比例稀釋商品質(zhì)控物；水溶液：一般無基質(zhì)效應(yīng)其它溶液：基質(zhì)效應(yīng)與有機(jī)溶劑相似,.,推薦的樣本添加材料,ALB：白蛋白干粉、humanfractionV.乙醇：無水乙醇AMS：腮腺或胰腺提取物BIL：膽紅素純品Ca:CaCO3Cl:NaCl,.,推薦的樣本添加材料,CHOL：膽固醇純品或稀釋質(zhì)控品CO2：CaCO3CREA：標(biāo)準(zhǔn)液或高值血清-ALT：純酶GLU：右旋糖AST：純酶ALT：純酶,.,推薦的樣本添加材料,Lipase：胰腺提取物Mg：MgCl2P:K(H)2PO4或Na(H)PO4TP：白蛋白干粉、人或牛的成份VUA：在得不到高值病人樣本時(shí)，使用標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液或干燥尿酸。BUN：在得不到高值病人樣本時(shí)，使用標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液或干燥尿素。,.,樣本分析順序,分析序列應(yīng)為隨機(jī)排列。有顯著攜帶污染時(shí)，應(yīng)用空白隔開樣本。每個(gè)實(shí)驗(yàn)組內(nèi)應(yīng)至少分析5-7個(gè)不同濃度水平的樣本。,.,樣本濃度范圍,應(yīng)覆蓋待評(píng)線性范圍的上、下限。評(píng)價(jià)結(jié)果不滿意時(shí)應(yīng)重新設(shè)定濃度。線性范圍內(nèi)至少應(yīng)保留有5-7個(gè)濃度。,.,樣本的準(zhǔn)備,足量的混合血清。低濃度混合血清（No1）；高濃度混合血清（No5）血清（No2）：3份“No1”+1份“No5”血清（No3）：2份“No1”+2份“No5”血清（No4）：1份“No1”+3份“No5”,.,樣本濃度計(jì)算,C1V1+C5V5濃度=-V1+V5,.,數(shù)據(jù)收集,x1y1-1y1-2y1-3y1-4x2y2-1y2-2y2-3y2-4x3y3-1y3-2y3-3y3-4x4y4-1y4-2y4-3y4-4x5y5-1y5-2y5-3y5-4,.,數(shù)據(jù)評(píng)價(jià),觀察有無明顯的數(shù)據(jù)錯(cuò)誤；若有明顯異常時(shí)應(yīng)判斷是否為離群點(diǎn)；如離群點(diǎn)超出2點(diǎn)，則保留全部數(shù)據(jù)或重做全部實(shí)驗(yàn)。,.,離群點(diǎn)檢查,用于特定濃度Y值離群點(diǎn)的檢驗(yàn)。將4個(gè)重復(fù)值從大到小排列（Y1到Y(jié)4）。計(jì)算：D=Y1-Y4若Y1可能是離群點(diǎn)，計(jì)算：D1=（Y1-Y2）/D若Y4可能是離群點(diǎn)，計(jì)算：D4=（Y3-Y4）/D,.,離群點(diǎn)判斷,判斷值（Criticalvalue)(0.05)0.765(0.01)0.889,.,繪圖和評(píng)價(jià),線性X-Y圖，X軸為分析物濃度；反應(yīng)值或儀器輸出值為Y軸；目測(cè)離群值：(Y=aX+b)目測(cè)線性判斷是否符合要求；進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)判斷和評(píng)價(jià)。,.,多項(xiàng)式回歸分析,一次方程：y=b+b1x二次方程：y=b+b1x+b2x2三次方程：y=b+b1x+b2x2+b3x3,EP6-A指南的主旨是利用多項(xiàng)式回歸分析方法判定線性。多項(xiàng)式回歸分析是研究一個(gè)因變量與一個(gè)自變量間的多項(xiàng)式的方法,即比較一階(直線)、二階(拋物線)和三階(S形線)多項(xiàng)式的回歸分析方法。多項(xiàng)式回歸分析的最大優(yōu)點(diǎn)是可以通過增加X的高階項(xiàng)對(duì)實(shí)測(cè)點(diǎn)進(jìn)行逼近直至滿意為止,從而建立最優(yōu)的多項(xiàng)式回歸方程。,.,.,.,.,.,注意,統(tǒng)計(jì)學(xué)標(biāo)準(zhǔn)和臨床可接受限不同。慎用方法學(xué)線性范圍從0開始。有臨床意義的濃度應(yīng)在線性評(píng)價(jià)中：最小的線性濃度醫(yī)學(xué)決定水平最大的線性濃度,.,衛(wèi)生部臨床檢驗(yàn)中心組織的線性評(píng)價(jià)或校準(zhǔn)驗(yàn)證的室間質(zhì)量評(píng)價(jià)計(jì)劃的結(jié)果可用于實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)項(xiàng)目的線性評(píng)價(jià)：Beckman自動(dòng)生化分析儀器Roche或Hitachi自動(dòng)生化分析儀器Olympus自動(dòng)生化分析儀器,.,.,實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)的臨床準(zhǔn)確性評(píng)價(jià),NCCLGP10A,.,GP10-A,AssessmentofTheClinicalAccuracyofLaboratoryTestsUsingReceiverOperatingCharacteristic(ROC)Plots;ApprovedGuideline(1995)“用ROC曲線圖評(píng)價(jià)實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)的臨床準(zhǔn)確性”,.,定義,臨床檢驗(yàn)信息：準(zhǔn)確性：敏感性Sensitivity特異性Specificity有用性：,.,定義,臨床準(zhǔn)確性（ClinicalAccuracy）：衡量檢驗(yàn)項(xiàng)目對(duì)于不同健康狀況的區(qū)分能力。如：健康與疾?。涣夹耘c惡性疾??；對(duì)治療的反應(yīng)性與不反應(yīng)性；預(yù)測(cè)疾病的好轉(zhuǎn)與惡化,.,定義,臨床有用性（Usefulness）：檢驗(yàn)信息在病人管理中的實(shí)用價(jià)值，如：檢驗(yàn)成本；假陽（或假陰）性率；有損傷小、成本低的其他方法；檢驗(yàn)技術(shù)要求；檢驗(yàn)創(chuàng)傷和舒適性,.,定義,ROC：ReceiverOperatingCharacteristic受試者工作特征ROC曲線：描述實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)的敏感性和特異性關(guān)系的曲線。,.,ROC曲線,.,.,定義,陽性預(yù)測(cè)值（PPV）真陽性結(jié)果數(shù)真陽性結(jié)果數(shù)+假陽性結(jié)果數(shù),.,定義,陰性預(yù)測(cè)值（NPV）真陰性結(jié)果數(shù)真陰性結(jié)果數(shù)+假陰性結(jié)果數(shù),.,ROC曲線的意義,.,ROC曲線的意義,.,ROC曲線的意義,.,用ROC圖進(jìn)行方法比較,.,ROC曲線的繪制,.,ROC曲線的繪制,進(jìn)行臨床準(zhǔn)確性實(shí)驗(yàn)確定診斷的敏感性和特異性繪制ROC曲線圖ROC分析：敏感性/特異性的置信區(qū)間；ROC曲線下面積；多實(shí)驗(yàn)ROC曲線的比較；其他,.,ROC曲線的繪制,.,ROC曲線的繪制,.,ROC曲線制作及分析軟件,CLINROCMetzROCANALYZERROCLABRULEMAKERSIGNALTEP-UH,.,ROC曲線的優(yōu)點(diǎn),利用簡(jiǎn)單易于分辨的圖形反應(yīng)臨床準(zhǔn)確性指標(biāo)；不需要確定臨床決定水平；可直接用于不同檢驗(yàn)方法臨床準(zhǔn)確性的比較,.,ROC曲線的局限性,不能顯示實(shí)際的臨界值；不能提示樣本數(shù)量；ROC曲線分析參數(shù)計(jì)算復(fù)雜；缺少實(shí)用性強(qiáng)的計(jì)算機(jī)軟件。,.,定性實(shí)驗(yàn)性能評(píng)估(CLSIEP12),定性實(shí)驗(yàn)（qualitativetests）僅給出陽性或陰性（是或非）的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。在臨床實(shí)驗(yàn)室中使用一項(xiàng)新的定性檢驗(yàn)方法可以有許多理由，如使用簡(jiǎn)便、低成本、操作過程規(guī)范或能滿足使用者的特殊要求。但在使用新方法進(jìn)行患者樣本檢驗(yàn)前，使用者必須進(jìn)行相關(guān)的實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備工作，包括與其它方法的比較、使用培訓(xùn)、正確采集標(biāo)本和必要的室內(nèi)質(zhì)量控制過程等。對(duì)定性實(shí)驗(yàn)方法進(jìn)行評(píng)價(jià)時(shí)，使用患者樣品進(jìn)行重復(fù)性實(shí)驗(yàn)和方法比較是非常重要的內(nèi)容。,.,一、定性實(shí)驗(yàn)的臨床應(yīng)用,在臨床實(shí)驗(yàn)室中，定性試驗(yàn)可用于篩查、診斷、確認(rèn)、或監(jiān)測(cè)為目的的測(cè)定。試驗(yàn)的敏感性、特異性、預(yù)測(cè)值和效率等，決定了其在臨床應(yīng)用的范圍。從臨床應(yīng)用的角度講，定性實(shí)驗(yàn)可分為篩查實(shí)驗(yàn)、診斷實(shí)驗(yàn)和確證實(shí)驗(yàn)。,.,一、定性實(shí)驗(yàn)的臨床應(yīng)用,篩查實(shí)驗(yàn)（screeningtests）篩查實(shí)驗(yàn)通常用于對(duì)整個(gè)人群或特定人群中是否存在初測(cè)物的檢查，如大便潛血實(shí)驗(yàn)。作為篩查實(shí)驗(yàn)，通常要求檢驗(yàn)方法有較高的敏感性，以保證不漏掉真陽性結(jié)果。診斷實(shí)驗(yàn)（diagnostictests）定性實(shí)驗(yàn)用于特定疾病的診斷或臨床可疑指征的判斷，如微生物學(xué)培養(yǎng)與細(xì)菌鑒定。通常情況下，診斷性實(shí)驗(yàn)要求方法學(xué)同時(shí)具有較好的敏感性和特異性。但是，在有確證實(shí)驗(yàn)的條件下，可以適當(dāng)放寬對(duì)方法學(xué)特異性的要求。確認(rèn)實(shí)驗(yàn)（confirmatorytests）確認(rèn)實(shí)驗(yàn)通常在篩查實(shí)驗(yàn)和診斷實(shí)驗(yàn)之后進(jìn)行，對(duì)已做出的檢驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行驗(yàn)證和確認(rèn)，以幫助臨床醫(yī)生做出正確的臨床診斷。確認(rèn)實(shí)驗(yàn)一般設(shè)計(jì)為有較好的特異性和較高的陽性預(yù)測(cè)值。,.,一、定性實(shí)驗(yàn)的臨床應(yīng)用,臨界值（cutoff）實(shí)驗(yàn)結(jié)果處于（陰、陽性）分界點(diǎn)時(shí)的樣品中分析物濃度值，低于此值，定性實(shí)驗(yàn)的結(jié)果為陰性，高于此值，定性實(shí)驗(yàn)的結(jié)果為陽性。對(duì)定性實(shí)驗(yàn)來講，臨界值是唯一的醫(yī)學(xué)決定水平，當(dāng)樣品中被測(cè)物濃度處于臨界水平時(shí)，定性實(shí)驗(yàn)重復(fù)檢查同一樣品，將產(chǎn)生50%的陽性結(jié)果和50%的陰性結(jié)果。當(dāng)樣品濃度在臨界值以上增加時(shí)，陽性結(jié)果比率增加；而當(dāng)樣品濃度在臨界值以下減低時(shí)，陰性結(jié)果比率增加。臨床界值的95%區(qū)間在樣品濃度高于臨界值并重復(fù)實(shí)驗(yàn)產(chǎn)生95%陽性結(jié)果和濃度低于臨界值并產(chǎn)生95%陰性結(jié)果之間的樣品濃度范圍。,.,二、定性實(shí)驗(yàn)方法學(xué)評(píng)價(jià),評(píng)價(jià)準(zhǔn)備在開展定性實(shí)驗(yàn)方法的評(píng)價(jià)工作之前，操作人員應(yīng)有一個(gè)熟悉和培訓(xùn)的過程，使操作人員掌握樣本的處理和保存、試劑的處理和保存、正確的實(shí)驗(yàn)過程和結(jié)果解釋、及質(zhì)量控制（QC）操作。培訓(xùn)應(yīng)當(dāng)在不同工作日內(nèi)進(jìn)行，并能使工作人員的操作能力達(dá)到臨床應(yīng)用的要求。在使用生產(chǎn)商提供的質(zhì)控物時(shí)，應(yīng)按生產(chǎn)者的要求進(jìn)行，使用其他商業(yè)質(zhì)控物必須注意可能存在的基質(zhì)效應(yīng)問題?？赡軙r(shí)，在進(jìn)行方法學(xué)評(píng)價(jià)期間，應(yīng)使用相同的質(zhì)控物。對(duì)大多數(shù)定性實(shí)驗(yàn)，每日進(jìn)行陰性和陽性質(zhì)控物測(cè)定已經(jīng)足夠。用于評(píng)價(jià)實(shí)驗(yàn)的臨床標(biāo)本，應(yīng)按要求采取。必要時(shí)，應(yīng)新鮮采取，并盡快完成檢測(cè)，在熟悉方法和操作培訓(xùn)過程結(jié)束后，可以繼續(xù)方法學(xué)評(píng)價(jià)工作。,.,二、定性實(shí)驗(yàn)方法學(xué)評(píng)價(jià),重復(fù)性評(píng)價(jià)在評(píng)價(jià)實(shí)驗(yàn)期間，應(yīng)做好質(zhì)量控制工作，以保證實(shí)驗(yàn)在預(yù)期的質(zhì)量目標(biāo)下進(jìn)行和實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的有效性。質(zhì)控物可使用試劑生產(chǎn)者推薦的陰性和陽性質(zhì)控物。重復(fù)性評(píng)價(jià)實(shí)驗(yàn)可以與方法學(xué)比較實(shí)驗(yàn)同期進(jìn)行。重復(fù)性評(píng)價(jià)實(shí)驗(yàn)應(yīng)該提供樣品濃度接近臨界值時(shí)的精密度結(jié)果，而用遠(yuǎn)低于或高于臨界值濃度的樣品進(jìn)行定性實(shí)驗(yàn)的重復(fù)性評(píng)價(jià)是不適當(dāng)?shù)?。在臨界值95%區(qū)間之外，定性方法給出相同測(cè)定結(jié)果的能力（陰性或陽性）是評(píng)價(jià)其方法性能的重要指標(biāo)。定性實(shí)驗(yàn)方法的重復(fù)性評(píng)價(jià)目的是確立被評(píng)價(jià)方法的臨界值，進(jìn)一步確立臨界值20%的樣本濃度范圍是否在該方法臨界值95%區(qū)間內(nèi)。重復(fù)性評(píng)價(jià)實(shí)驗(yàn)可按以下步驟進(jìn)行：,.,二、定性實(shí)驗(yàn)方法學(xué)評(píng)價(jià),重復(fù)性評(píng)價(jià)1確立方法的臨界值參考試劑說明書或用陽性樣品進(jìn)行稀釋，直至重復(fù)實(shí)驗(yàn)給出的陽性和陰性結(jié)果各占50%，此時(shí)的樣品濃度即為實(shí)驗(yàn)方法的臨界值。2在臨界值基礎(chǔ)上準(zhǔn)備出-20%濃度的樣品和+20%濃度的樣品。3對(duì)以上低、高濃度樣品分別測(cè)定20次，記錄陰性及陽性結(jié)果數(shù)；重復(fù)次數(shù)低于20時(shí)，統(tǒng)計(jì)學(xué)意義可能降低。4當(dāng)實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明“臨界值”樣品的陰性結(jié)果和陽性結(jié)果不是各占50%時(shí)，原因可能是：被評(píng)估的臨界值濃度不準(zhǔn)確、或結(jié)果數(shù)據(jù)不充足、或方法學(xué)劑量反應(yīng)曲線在臨界值處是非線性的。5當(dāng)實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明+20%濃度的樣品產(chǎn)生陽性結(jié)果數(shù)95%，同時(shí)，-20%濃度的樣品產(chǎn)生陰性結(jié)果數(shù)95%，說明臨界值20%濃度范圍等于或超出臨界值的95%區(qū)間，對(duì)于被測(cè)物濃度在20%濃度范圍以外的樣品，實(shí)驗(yàn)方法將給出穩(wěn)定的結(jié)果。當(dāng)陽性和/或陰性結(jié)果數(shù)95%時(shí)，應(yīng)另外準(zhǔn)備不同濃度的實(shí)驗(yàn)樣品，重新進(jìn)行評(píng)價(jià)。,.,二、定性實(shí)驗(yàn)方法學(xué)評(píng)價(jià),方法學(xué)比較1樣品種類和數(shù)量進(jìn)行方法學(xué)研究時(shí)的樣品最好使用常規(guī)患者的新鮮標(biāo)本，樣品量應(yīng)保證評(píng)價(jià)實(shí)驗(yàn)方法和比較方法測(cè)定的需要。樣品中被測(cè)物應(yīng)穩(wěn)定，應(yīng)盡可能用評(píng)價(jià)方法和對(duì)比方法同時(shí)完成測(cè)定。作為最低要求，用對(duì)比方法測(cè)定的陰性和陽性樣品，應(yīng)分別在50例以上。常規(guī)檢測(cè)時(shí)，為保證陽性樣品達(dá)到50例，陰性樣品可能已大大超過50例，為保證正確評(píng)價(jià)陽性樣品中可能出現(xiàn)的假陰性問題，必須保證有足夠的樣品量。2實(shí)驗(yàn)過程使用臨床樣品進(jìn)行方法學(xué)對(duì)比研究應(yīng)在10到20天內(nèi)完成，一方面能保證足夠的樣品量，另一方面也確保對(duì)實(shí)驗(yàn)方法的評(píng)價(jià)在常規(guī)實(shí)驗(yàn)條件下進(jìn)行。全部實(shí)驗(yàn)樣品都應(yīng)妥善保存，以備再次檢測(cè)用?？梢酝ㄟ^對(duì)比方法再次測(cè)定，或使用另一種對(duì)比方法、或使用臨床診斷提供更多的信息以解釋實(shí)驗(yàn)中的問題。,.,二、定性實(shí)驗(yàn)方法學(xué)評(píng)價(jià),方法學(xué)比較3參考樣品盤由一組臨床樣品組成，測(cè)定結(jié)果可與指定的參考方法或臨床診斷相聯(lián)系，對(duì)評(píng)價(jià)定性實(shí)驗(yàn)方法是非常有效的。參考樣品盤通常包含不同濃度被測(cè)物的臨床樣品，可能時(shí)，還包括干擾物質(zhì)。雖然樣品盤有許多優(yōu)點(diǎn)，適用于評(píng)價(jià)實(shí)驗(yàn)，但是不易得到，也不能反映實(shí)驗(yàn)室條件下