藥品微生物實(shí)驗(yàn)室管理ppt課件

.,藥品微生物實(shí)驗(yàn)室,-質(zhì)量管理2018.06,.,微生物類別,.,特點(diǎn)：體積小、結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單、分布廣、種類(1020萬種)、繁殖快、易變異。,微生物概述,.,芽孢：,微生物所需的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),.,藥品中微生物的主要污染途徑,1.水系統(tǒng)（飲用水、純化水、注射用水、純蒸汽）：過濾凈化后檢測(cè)微生物、細(xì)菌內(nèi)毒素。2.原輔料：植物性、動(dòng)物性（風(fēng)險(xiǎn)最大）；2020版藥典中藥飲片增加耐熱菌、沙門菌。3.包裝材料：安瓿、PVC、PTP、塑料瓶。檢測(cè)微生物4.,.,藥品中微生物的主要污染途徑,4.生產(chǎn)人員（最不可控因素）：咳嗽、噴嚏、動(dòng)作幅度大、皮膚掉屑；測(cè)手指、潔凈服。5.氣體：壓縮空氣、惰性氣體；控制微生物或無菌。6.生產(chǎn)環(huán)境：潔凈區(qū)密封、空氣過濾、定期消毒；測(cè)沉降菌、浮游菌、懸浮粒子（A、B、C、D級(jí)）。驗(yàn)證和日常監(jiān)測(cè)7.設(shè)備及配件：清潔、消毒、滅菌；清潔驗(yàn)證,.,影響藥品微生物檢驗(yàn)結(jié)果的因素,1.樣品中的微生物可能分布不均勻。2.微生物檢驗(yàn)方法誤差大。3.檢驗(yàn)方法未經(jīng)過驗(yàn)證。4.實(shí)驗(yàn)室因素：人員、培養(yǎng)基、試劑、菌種、環(huán)境、設(shè)備、樣品。,.,人員要求,1.操作人員具備微生物學(xué)或相近專業(yè)知識(shí)的教育背景。2.培訓(xùn)：職責(zé)培訓(xùn)、崗位操作規(guī)程的培訓(xùn)、設(shè)備操作培訓(xùn)、檢驗(yàn)技術(shù)的培訓(xùn)（包括無菌操作、培養(yǎng)基制備、消毒、滅菌、注平板、菌落計(jì)數(shù)、菌種傳代、菌種保藏、微生物檢查方法、微生物鑒定基本技術(shù)）。3.實(shí)驗(yàn)室安全方面的培訓(xùn)（保證自身安全、防止實(shí)驗(yàn)室被污染）。4.對(duì)微生物管理人員的培訓(xùn)：實(shí)驗(yàn)室安全、實(shí)驗(yàn)室結(jié)果的評(píng)估、數(shù)據(jù)偏差的調(diào)查。,.,培養(yǎng)基管理,培養(yǎng)基影響微生物試驗(yàn)結(jié)果的因素1.供應(yīng)商：穩(wěn)定、資質(zhì)合格、業(yè)內(nèi)口碑好、供貨能力強(qiáng)。2.培養(yǎng)基的接收2.1查看培養(yǎng)基名稱、批號(hào)、廠家、生產(chǎn)日期、有效期、執(zhí)行標(biāo)準(zhǔn)是否符合要求。2.2在每瓶培養(yǎng)基瓶上貼標(biāo)簽、編號(hào)（唯一的標(biāo)識(shí)）、批號(hào)、接收日期、接收人、開瓶日期、開瓶后的有效期。2.3培養(yǎng)基接收記錄。3.培養(yǎng)基的儲(chǔ)存按照供應(yīng)商提供的方法保存，多數(shù)是避光，個(gè)別廠家要求陰涼干燥（低于20）。,.,培養(yǎng)基管理,4.培養(yǎng)基的適用性檢查（藥典要求）4.1如果培養(yǎng)基的配制和滅菌程序經(jīng)過驗(yàn)證，那么同一批脫水培養(yǎng)基適用性檢查可只做1次。4.2如果培養(yǎng)基的配制和滅菌程序未經(jīng)過驗(yàn)證，那么每一批滅菌培養(yǎng)基均要進(jìn)行適用性檢查。培養(yǎng)基的配制和滅菌方法的驗(yàn)證（存儲(chǔ)期）包括：滅菌前后PH值、外觀性狀；滅菌后的無菌性檢查、靈敏度檢查；保存幾周后的無菌、靈敏度檢查。,.,培養(yǎng)基管理,4.3適用性檢查購(gòu)買對(duì)照培養(yǎng)基購(gòu)買菌種枯草、白念、黑曲霉接種于計(jì)數(shù)用培養(yǎng)基金葡、銅綠、枯草、生孢、白念、黑曲霉接種于無菌檢查用培養(yǎng)基依據(jù)藥典附錄1105試驗(yàn)操作后判斷是否合格。以下是三種培養(yǎng)基適用性檢查要求（計(jì)數(shù)用培養(yǎng)基、無菌檢查用培養(yǎng)基、選擇性培養(yǎng)基）,.,計(jì)數(shù)用培養(yǎng)基適用性檢查要求,.,無菌檢查用培養(yǎng)基適用性檢查要求,.,選擇性培養(yǎng)基適用性檢查要求,.,用于環(huán)境監(jiān)控的培養(yǎng)基管理,市售：雙層包裝和終端滅菌如果不能采用終端滅菌的培養(yǎng)基，在使用前進(jìn)行100的預(yù)培養(yǎng)，防止出現(xiàn)假陽性。沉降菌碟暴露時(shí)間的驗(yàn)證選擇在換氣次數(shù)大的需要監(jiān)控的操作間，培養(yǎng)基加菌暴露若干小時(shí),培養(yǎng)后計(jì)算菌的回收率大于70。暴露多長(zhǎng)時(shí)間不干裂、促生長(zhǎng)能力良好）。包裝形式：試管、三角瓶（密封）貯存房間的條件取樣計(jì)劃：取樣時(shí)間點(diǎn)、測(cè)試項(xiàng)目（PH值、無菌、適用性）加菌液0.1ml，不能加1ml。,.,菌種的管理,菌種的來源CMCC中國(guó)復(fù)活標(biāo)準(zhǔn)貯備菌株（0代）解凍轉(zhuǎn)種工作菌株（低溫冷凍干燥）（不得重新冷凍）TACC美國(guó)1代：是指將活的培養(yǎng)物接種到微生物生長(zhǎng)的新鮮培養(yǎng)基中培養(yǎng)。工作菌株不可替代標(biāo)準(zhǔn)菌株,.,菌種的管理,涉及菌種管理的記錄標(biāo)準(zhǔn)菌種的申購(gòu)記錄。從標(biāo)準(zhǔn)菌株到工作菌株的操作SOP及記錄。菌種的傳代記錄。菌種的檢查記錄（確認(rèn)記錄）。菌種的滅活、銷毀記錄。,.,菌種的管理,菌種的接收1.檢查外觀是否完好。2.核對(duì)菌種名稱、編號(hào)。3.核對(duì)接收時(shí)是否在合適的環(huán)境中。4.核對(duì)菌種是否在有效期范圍內(nèi)。5.給每株菌一個(gè)獨(dú)立的編號(hào)，不能重復(fù)。,.,菌種的管理,菌種的保存1.標(biāo)準(zhǔn)菌株：超低溫冷凍（低于-30）有效期一年；（-70以下冷凍保藏）有效期三年。2.斜面菌種：28冷藏，有效期36個(gè)月。3.菌液：室溫下，2小時(shí)內(nèi)使用。28，24小時(shí)內(nèi)使用（黑曲霉孢子懸液28，貯存期要驗(yàn)證）,.,菌種的管理,菌種的使用-斜面菌種只允許一次使用菌種的傳代1.將微生物轉(zhuǎn)接到新的培養(yǎng)基，進(jìn)行培養(yǎng)獲得新鮮菌種的過程。2.購(gòu)買的標(biāo)準(zhǔn)菌株必須經(jīng)過傳代后使用（在5代以內(nèi)）。,.,環(huán)境的管理,硬件：陽性菌實(shí)驗(yàn)室、培養(yǎng)室、貯藏室（區(qū)）、試驗(yàn)結(jié)果觀察區(qū)、培養(yǎng)基及實(shí)驗(yàn)用具準(zhǔn)備區(qū)、滅菌區(qū)、樣品接收區(qū)、標(biāo)準(zhǔn)菌株貯藏室（區(qū)）、污染物處理區(qū)。以上區(qū)域要有標(biāo)識(shí)（降低交叉污染）。無菌檢查：B級(jí)背景下的A級(jí)單向流潔凈區(qū)域或隔離系統(tǒng)。微生物限度檢查：不低于D級(jí)背景下的B級(jí)單向流空氣區(qū)域。,.,環(huán)境監(jiān)測(cè),1.空調(diào)驗(yàn)證：高效過濾器完整性、氣流組織、空氣流速（平均風(fēng)速）、換氣次數(shù)、壓差、溫度和相對(duì)濕度（測(cè)試應(yīng)在模擬正常檢測(cè)條件下進(jìn)行）依據(jù)藥典附錄9205藥品潔凈實(shí)驗(yàn)室微生物監(jiān)測(cè)和控制指導(dǎo)原則2.日常監(jiān)測(cè)：異常情況要進(jìn)行分析，不僅僅是數(shù)數(shù)而已。,監(jiān)測(cè)項(xiàng)目,.,潔凈區(qū)滅菌和消毒,A/B級(jí)潔凈區(qū)使用無菌的或經(jīng)無菌處理的消毒劑或清潔劑。化學(xué)消毒劑應(yīng)驗(yàn)證消毒效果（不止一種）。清潔劑、消毒劑在規(guī)定的效期內(nèi)使用。常用滅菌法干熱滅菌法：火焰法（酒精燈）、烘箱2501h。濕熱滅菌法：12130min。,.,設(shè)備設(shè)施管理,1.設(shè)備的確認(rèn)、檢定（校準(zhǔn)）每年一次，注意連續(xù)性。2.設(shè)備使用日志（使用即填）3.設(shè)備定期清潔和消毒（水浴鍋、培養(yǎng)箱、冰箱、生物安全柜）。4.無菌器具要有明確的標(biāo)識(shí)（已滅菌、未滅菌）。5.溫度計(jì)的校準(zhǔn)。（注意量程、精度）6.天平、標(biāo)準(zhǔn)砝碼的校準(zhǔn)；移液管的校準(zhǔn)。7.懸浮粒子計(jì)數(shù)器、浮游菌采集器的校準(zhǔn)。8.紫外燈消毒效果的定期檢測(cè)。,.,操作方法注意,1.操