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學(xué)案40生物技術(shù)在其他方面的應(yīng)用 全能性 愈傷組織 再分化 ms培養(yǎng)基 細(xì)胞分裂素 生長(zhǎng)素 四分體 雙核 胚狀體 愈傷組織 3 植物芳香油的提取方法有蒸餾法 和等 根據(jù)蒸餾過(guò)程中原料放置的位置 可以將水蒸氣蒸餾法劃分為 和 其中 玫瑰精油的提取用法 橘皮精油的提取一般用法 胡蘿卜素的提取用法 用法進(jìn)行鑒定 4 dna的粗提取與鑒定實(shí)驗(yàn)用作為材料 利用血細(xì)胞的原理使細(xì)胞破碎 釋放dna dna在的條件下 與呈色 5 分離血紅蛋白的方法有和 6 pcr是反應(yīng)的簡(jiǎn)稱 是一種在體外迅速擴(kuò)增的技術(shù) 其一般要經(jīng)歷次循環(huán) 每次循環(huán)可分為 和三步 壓榨法 萃取法 水中蒸餾 水上蒸餾 水氣蒸餾 水蒸氣蒸餾 壓榨 萃取 紙層析 雞血細(xì)胞 吸水漲破 沸水浴 二苯胺 藍(lán) 凝膠色譜法 凝膠電泳法 多聚酶鏈?zhǔn)?dna片段 30 變性 復(fù)性 延伸 考點(diǎn)1植物的組織培養(yǎng)技術(shù) 考點(diǎn)精講 項(xiàng)目 內(nèi)容 項(xiàng)目 內(nèi)容 說(shuō)明 實(shí)驗(yàn)操作中幾個(gè)易錯(cuò)的問(wèn)題 1 材料的選取 菊花的組織培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)中 應(yīng)選擇未開花植株的莖上部新萌生的側(cè)枝 月季花藥的培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)中 應(yīng)選擇花粉發(fā)育過(guò)程中的單核靠邊期的花粉進(jìn)行培養(yǎng) 2 外植體消毒 所用消毒劑為體積分?jǐn)?shù)為70 的酒精和質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0 1 的氯化汞溶液 所使用的清洗液是無(wú)菌水 3 培養(yǎng)過(guò)程 在初期 菊花的組織培養(yǎng)需光照 月季的花藥培養(yǎng)不需光照 而在后期均需光照 典例剖析 例1 利用組織培養(yǎng)的方法將二倍體植物的珠被細(xì)胞 根尖細(xì)胞 受精極核 花粉粒 分別培養(yǎng)成完整植株 分別編號(hào)為 下列有關(guān)說(shuō)法不正確的是 a 自交不能產(chǎn)生后代的植株是 和 b 這四種植株的培育利用了植物組織培養(yǎng)技術(shù)c 這四種植株都不能保持親本的遺傳性狀d 組織培養(yǎng)所用的培養(yǎng)基中需要添加蔗糖 生長(zhǎng)素 細(xì)胞分裂素等物質(zhì) 解析 本題考查組織培養(yǎng)和生物變異的相關(guān)知識(shí) 意在考查學(xué)生的理解能力和綜合分析能力 由于珠被細(xì)胞和根尖細(xì)胞都是植物的體細(xì)胞 因此培養(yǎng)所得到的植株能夠保持親本的遺傳性狀 受精極核中含有三個(gè)染色體組 花粉粒中含有一個(gè)染色體組 它們?cè)谶M(jìn)行減數(shù)分裂形成配子時(shí)會(huì)出現(xiàn)聯(lián)會(huì)紊亂現(xiàn)象 不能產(chǎn)生配子 c 知識(shí)鏈接 植物激素在植物組織培養(yǎng)過(guò)程中的重要作用生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素是啟動(dòng)細(xì)胞分裂 脫分化和再分化的關(guān)鍵性激素 其作用及特點(diǎn)如下 1 使用順序不同 結(jié)果不同 如下表 2 用量的比例不同 結(jié)果也不同 如下表 對(duì)應(yīng)訓(xùn)練 1 如圖是將水稻的花藥通過(guò)無(wú)菌操作 培養(yǎng)產(chǎn)生花粉植株的兩種途徑 請(qǐng)據(jù)圖回答問(wèn)題 1 圖中的花粉選自的時(shí)期 花藥培養(yǎng)成功率最高 2 這兩種途徑之間沒有絕對(duì)的界限 主要取決于 3 配制培養(yǎng)基時(shí)加瓊脂的目的是 4 組織培養(yǎng)要求無(wú)菌操作的原因是 5 要促進(jìn)花粉細(xì)胞分裂和生長(zhǎng) 培養(yǎng)基中應(yīng)有和兩類植物激素 由花藥誘導(dǎo)成為愈傷組織的過(guò)程稱為 由愈傷組織重新長(zhǎng)出根或芽等器官的過(guò)程稱為 解析 1 圖中花粉應(yīng)選擇細(xì)胞核由中央移向一側(cè)的單核期 此時(shí)細(xì)胞培養(yǎng)成功率最高 2 圖示第一種途徑是分化形成叢芽 第二種途徑是再分化生根 這兩個(gè)途徑的主要區(qū)別是培養(yǎng)基中激素的種類及比例不同 3 植物培養(yǎng)基中加入瓊脂的目的是形成固體培養(yǎng)基 有利于植物的固定 生長(zhǎng) 4 雜菌污染會(huì)影響植物體的培養(yǎng) 使培養(yǎng)失敗 5 花粉的離體培養(yǎng)過(guò)程需添加細(xì)胞分裂素和生長(zhǎng)素 答案 1 單核期 細(xì)胞核由中央移向細(xì)胞一側(cè) 2 培養(yǎng)基中激素的種類及其濃度配比 3 使培養(yǎng)基呈固體狀態(tài) 有利于外植體生長(zhǎng) 4 如不無(wú)菌操作 微生物會(huì)在培養(yǎng)基上快速繁殖 與離體培養(yǎng)的植物組織競(jìng)爭(zhēng)營(yíng)養(yǎng) 5 細(xì)胞分裂素生長(zhǎng)素脫分化再分化 考點(diǎn)2植物有效成分的提取 考點(diǎn)精講 說(shuō)明 1 水蒸氣蒸餾可用明火加熱 萃取過(guò)程應(yīng)避免明火加熱 采取水浴加熱 這是因?yàn)橛袡C(jī)溶劑都是易燃物 直接用明火加熱容易引起燃燒 爆炸 2 用于萃取的有機(jī)溶劑必須事先精制 除去雜質(zhì) 否則會(huì)影響芳香油的質(zhì)量 3 在用水蒸氣蒸餾法制取玫瑰乳濁液提取過(guò)程中油水混合物中要加入氯化鈉的目的是增大鹽水的密度 有利于玫瑰油與水的分層 加入無(wú)水na2so4的目的是吸收精油中殘留的水分 4 橘皮精油的提取過(guò)程中 橘皮洗凈晾干后 要浸泡在ph大于12質(zhì)量分?jǐn)?shù)為7 8 的石灰水中16 24h 其目的是防止橘皮壓榨時(shí)滑脫 提高出油率 典例剖析 例2 下列植物芳香油的提取所選取的原料 相應(yīng)精油名稱及適宜的提取方法 不正確的是 a 玫瑰花 玫瑰精油 壓榨法b 橘皮 橘皮精油 壓榨法c 茉莉花 茉莉浸膏 萃取法d 薰衣草莖葉 薰衣草油 蒸餾法 解析 蒸餾法一般適用于提取玫瑰精油 薄荷油 薰衣草油等揮發(fā)性強(qiáng)的芳香油 壓榨法一般適用于柑橘 檸檬等易焦糊原料的提取 萃取法適用范圍較廣 a 知識(shí)鏈接 水蒸氣蒸餾法三種常用方法的原理相同 但原料位置不同 1 水中蒸餾 原料放于蒸餾容器的水中 水完全浸沒原料 2 水上蒸餾 容器中水的上方有篩板 原料置于篩板上 水量以沸騰時(shí)不浸濕原料為宜 3 水氣蒸餾 蒸餾容器下方有一排氣孔 連接外源水蒸氣 上方有篩板 上面放原料 三種方法中 水中蒸餾設(shè)備簡(jiǎn)單 成本低 易操作 而水上蒸餾和水氣蒸餾時(shí)間短 出油率高 對(duì)應(yīng)訓(xùn)練 2 如圖中甲為提取胡蘿卜素的裝置示意圖 請(qǐng)回答有關(guān)問(wèn)題 1 該裝置表示的方法為 要想效果好 必須保證原料顆粒小 2 操作過(guò)程中應(yīng)該避免明火加熱 采用加熱 其原因是 3 在加熱瓶口安裝冷凝回流裝置的目的是 4 圖乙是胡蘿卜素提取結(jié)果示意圖 請(qǐng)據(jù)圖回答 該色素分離的方法是 實(shí)驗(yàn)組是 對(duì)照組是 由實(shí)驗(yàn)得出的結(jié)論是 5 科學(xué)家通過(guò)現(xiàn)代生物技術(shù)獲得了一株品質(zhì)優(yōu)良的胡蘿卜植株 要想快速擴(kuò)大種植規(guī)模 通常采用技術(shù) 其原理是 解析 胡蘿卜素的化學(xué)性質(zhì)比較穩(wěn)定 不溶于水 易溶于石油醚等有機(jī)溶劑 可用有機(jī)溶劑進(jìn)行萃取 萃取時(shí) 如果原料顆粒小 萃取溫度高 時(shí)間長(zhǎng) 需要提取的物質(zhì)就能夠充分溶解 萃取效果就好 萃取過(guò)程中 由于有機(jī)溶劑都是易燃物 直接使用明火加熱容易引起燃燒 爆炸 要采用水浴加熱 紙層析法是根據(jù)不同物質(zhì)在同一種溶劑中溶解度不同而進(jìn)行分離的方法 從題圖可看出b c是實(shí)驗(yàn)組 a d是對(duì)照組 結(jié)論是萃取樣品中含有 胡蘿卜素 離體的植物組織細(xì)胞在一定的條件下能夠表現(xiàn)出全能性 可用植物組織培養(yǎng)技術(shù)進(jìn)行快速大規(guī)模的生產(chǎn) 答案 1 萃取法萃取溫度高 時(shí)間長(zhǎng) 2 水浴有機(jī)溶劑都是易燃物 直接使用明火加熱容易引起燃燒爆炸 3 防止加熱時(shí)有機(jī)溶劑揮發(fā) 4 紙層析法b ca d萃取樣品中含有 胡蘿卜素 5 植物組織培養(yǎng)細(xì)胞的全能性 考點(diǎn)3dna和蛋白質(zhì)技術(shù) 考點(diǎn)精講 1 dna與蛋白質(zhì)在不同nacl溶液中溶解度不同 說(shuō)明 dna與蛋白質(zhì)在nacl溶液中的溶解度不同 可以利用不同濃度的nacl溶液選擇析出或溶解dna 從而得到dna或蛋白質(zhì) 2 細(xì)胞內(nèi)dna復(fù)制與pcr擴(kuò)增的比較 3 血紅蛋白提取與分離過(guò)程中的注意事項(xiàng) 1 離心 轉(zhuǎn)速要低 時(shí)間要短 否則白細(xì)胞等會(huì)一同沉淀 達(dá)不到分離效果 重復(fù)洗滌三次 如上清液仍有黃色 可增加洗滌次數(shù) 否則無(wú)法除去血漿蛋白 2 血紅蛋白的釋放 蒸餾水的作用 漲破紅細(xì)胞 甲苯的作用 溶解細(xì)胞膜 3 為了加速干凝膠的膨脹 可將加入洗脫液的濕凝膠用沸水浴加熱 通常只需1 2h 這種方法不僅節(jié)約了時(shí)間 還可除去凝膠中可能帶有的微生物 排出膠粒內(nèi)的空氣 4 在色譜柱中填凝膠的時(shí)候要盡量緊密 以降低凝膠顆粒之間的空隙 在裝填凝膠柱時(shí) 不得有氣泡存在 因?yàn)闅馀輹?huì)攪亂洗脫液中蛋白質(zhì)的洗脫次序 降低分離效果 在凝膠色譜操作過(guò)程中 不能發(fā)生洗脫液流干 露出凝膠顆粒的現(xiàn)象 一旦發(fā)生上述兩種情況中的一種 凝膠色譜柱就需要重新裝填 5 滴加樣品時(shí) 吸管管口貼著管壁環(huán)繞移動(dòng)加樣 不要破壞凝膠面 6 根據(jù)紅色區(qū)帶的移動(dòng)狀況判斷收集流出液的時(shí)間 典例剖析 例3 下列有關(guān)蛋白質(zhì)提取和分離的說(shuō)法 錯(cuò)誤的是 a 離心后的血紅蛋白溶液可分為4層b 采用透析法使蛋白質(zhì)與其他小分子化合物分離開來(lái)c 離心沉降法通過(guò)控制離心速率使分子大小 密度不同的蛋白質(zhì)分離d 蛋白質(zhì)在電場(chǎng)中可以向與其自身所帶電荷相同的電極方向移動(dòng) 解析 電泳法分離物質(zhì)的原理是在電場(chǎng)中 帶電物質(zhì)能向與自身所帶電荷相反的方向移動(dòng) 移動(dòng)的速度和距離取決于物質(zhì)所帶電荷的量及相對(duì)分子質(zhì)量 d 知識(shí)鏈接 瓊脂糖凝膠電泳和sds 聚丙烯酰胺凝膠電泳的比較 1 從載體上看 利用瓊脂糖凝膠作為載體的是瓊脂糖凝膠電泳 利用sds 聚丙烯酰胺凝膠作為載體的是sds 聚丙烯酰胺凝膠電泳 2 從依據(jù)上看 利用了分子帶電性質(zhì)差異和分子大小的是瓊脂糖凝膠電泳 僅利用了分子大小的是sds 聚丙烯酰胺凝膠電泳 3 從優(yōu)點(diǎn)上看 瓊脂糖凝膠電泳操作簡(jiǎn)單 電泳速度快 樣品不需處理 電泳圖譜清晰 分辨率高 重復(fù)性好 sds 聚丙烯酰胺凝膠電泳消除了凈電荷對(duì)遷移率的影響 使電泳遷移率完全取決于分子的大小 對(duì)應(yīng)訓(xùn)練 3 下列關(guān)于 dna粗提取與鑒定實(shí)驗(yàn) 的敘述 正確的是 a 洗滌劑能瓦解細(xì)胞膜并增加dna在nacl溶液中的溶解度b 將dna絲狀物放入二苯胺試劑中沸水浴后冷卻變藍(lán)c 常溫下菜花勻漿中有些酶類會(huì)影響dna的提取d 用玻璃棒緩慢攪拌濾液會(huì)導(dǎo)致dna獲得量減少 解析 洗滌劑可以溶解細(xì)胞的細(xì)胞膜 去除脂質(zhì)和蛋白質(zhì) 但不能增加dna在nacl溶液中的溶解度 故a錯(cuò)誤 dna絲狀物在二苯胺試劑中沸水浴加熱過(guò)程中變藍(lán) 不需要冷卻 故b錯(cuò)誤 勻漿中含有多種酶 常溫下有些酶類可破壞dna而影響dna的提取 故c正確 用玻璃棒緩慢攪拌濾液 有利于提取并防止攪拌時(shí)dna斷裂 并不影響dna的含量 故d錯(cuò)誤 c 1 以下提取胡蘿卜素的方法中 最好使用 a 水蒸氣蒸餾b 手動(dòng)壓榨機(jī)壓榨c 有機(jī)溶劑萃取d 粉碎后加水蒸煮 然后過(guò)濾 提純 解析 胡蘿卜素不溶于水 微溶于乙醇 易溶于有機(jī)溶劑 為了減少水分的混入 最好用有機(jī)溶劑萃取 c 2 如圖表示血紅蛋白提取和分離實(shí)驗(yàn)的部分裝置或操作方法 請(qǐng)據(jù)圖回答下列問(wèn)題 1 為了提取和分離血紅蛋白 首先要對(duì)紅細(xì)胞進(jìn)行洗滌 以去除雜質(zhì)蛋白 洗滌時(shí)使用生理鹽水而不使用蒸餾水的原因是 2 圖甲表示過(guò)程 該操作的目的是去除樣品中的雜質(zhì) 現(xiàn)有一定量的血紅蛋白溶液 進(jìn)行上述操作時(shí)若要盡快達(dá)到理想的實(shí)驗(yàn)效果 可以 寫出一種方法 一段時(shí)間后 若向燒杯中加入雙縮脲試劑 透析袋內(nèi)的溶液是否出現(xiàn)紫色 說(shuō)明判斷的依據(jù) 3 觀察圖乙 向色譜柱中加樣的正確操作順序是 用序號(hào)表示 在進(jìn)行 操作前 應(yīng)該等樣品 且要 填 打開 或 關(guān)閉 下端出口 4 圖丙表示電泳法分離蛋白質(zhì)的結(jié)果 不同蛋白質(zhì)得以分離是因?yàn)?解析 1 生理鹽水與紅細(xì)胞內(nèi)溶液為等滲溶液 故用其洗滌而不用蒸餾水 主要是為了防止紅細(xì)胞吸水破裂 2 圖甲表示血紅蛋白粗提取過(guò)程 也為透析過(guò)程 透析可以去除樣品中相對(duì)分子質(zhì)量較小的雜質(zhì) 若要盡快達(dá)到理想的透析實(shí)驗(yàn)效果 則可采用增加緩沖液的量或及時(shí)更換緩沖液等方法 透析袋是一種半透膜 雙縮脲試劑可以透過(guò)這種半透膜 進(jìn)入袋內(nèi)與血紅蛋白反應(yīng) 生成紫色物質(zhì) 3 根據(jù)教材中向色譜柱中加樣的順序可知 正確的排序?yàn)?圖中 是
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