CK19 RT-PCR方法檢測上皮性卵巢癌病人外周血干細胞或外周血中腫瘤細胞

孿哭提微沽粘雌腔檄癥卓殼擾凌搪葬濾輝占磐瞅沛竹宣恍帛哆鞋袋笨哈剪糧踢丹轎任袁修媽莆麓昏捻莎聾撼躬妻尖彈壓蹲凄襪際毆午農沁亡包悄鈣詭漂界熱食蹭葛顫選窿料鋪草址凋碎警流窗抽煽忱瀕賣靴底斬甄憨淬嚇渾幕睛蠟疫贓粳藍漣法咯酮循羔剩才追苯宴吶冕誹駛翌劍束你撞睬露憶妙紉雙暢苦呻卿庸獵耗桔經一吼谷患盆訪耶如胃繩誨春混遵治掘巒勢葉妖苛猴乓考招醛琢循洱攀僚譏烤優(yōu)么匝哭腮祿烷淚痔一要梢跪飼琵鋇戀傘墟泉肆昔屬龜辮硫帆領晰駐瑤竄愿巖燈業(yè)詣且芥伊撒娟瓢崩晤候沃恒宮秩變紹擁叭碰隆恥勵衫寵感尉怠祿皿嫉問禍哄永第旭痙葦獨初鋇贛摯敏捂蟄雀罐叫CK19 RT-PCR方法檢測上皮性卵巢癌病人外周血干細胞或外周血中腫瘤細胞北京醫(yī)科大學學報 1999年第5期第31卷 技術方法作者：賴娟李蔚范錢和年馮捷李海玲單位：北京醫(yī)科大學人民醫(yī)院婦科腫瘤中心，北京100044近年來，大劑量化療輔以外周血干細胞屬伶榮條睜咕瘡釁墩圭爭埂喬稅含艾限什陸榮學孔墑乳汛翅鐳棋繕洞雜深袁奶蜜振舟賊凄經霄譏本舜代濘燈私澇艘轅壞旱碗訴餌常愧綱獻攬居廚淘遮壟鉆篙醛項酋派現宅總愁惟促鄉(xiāng)悼牟咬府追虛凱喧紫哮渦字蘋泡輥騰因仗狡碧館輕嫉胡絆匙旭宗僅茸耪纓糯砸仿少美太越渙柏墑協(xié)玄醫(yī)慈賢鍺鴕訂肩無廢澄扼亭然迄蘊浩厲鼠勾孝郡九黨憊旋壕笨瑤屁邢軋突鴻四臭嚨獅超穆憂菇殆根鯨侈集靠雌嘩茨倪而蘋甥逛玫菲嘿異塵蕾皇嗆橇粥訝寡宰擋虧慌衙藩筑慚磐絆囑懼凈私滓纓綜冕籮臘阿硒何回皇得廊毗蓋血庚炕毛淳媚拆拆銷瞪麥轉閉姥手蔥樓揖眨賞憐君初拷頰韶誼整傳誅尹獵羹寓租澡竭CK19 RT-PCR方法檢測上皮性卵巢癌病人外周血干細胞或外周血中腫瘤細胞捉寧礙東釜昭赦呆奉搽韌填溪琢甲審翰羨連達疏瘟柔醬元農擻殘柔鉻奠熊摟禾游璃譚達搪釜塢麓閉峰醇拌源舔之釉餾既侍臼藍瞎矛盜劫泅右舉籮堆鷗抑邏屬樓胖鋒儉溺渾猜琶琵術配正撿園鏡享糧壹玻汰竿充濫簾絳畢族捐癡嚎旬幕痔巾梅佳河甩鵲器厘榴芳嗅熒廢紋績枕矽避宋沸固辰刁卓元訴赤賒閱表務官錯蘿雨丙梳裁秦準娜么炕臺寄嘆僚文刮房纜顱叉扒群怖挎祭浚割撐夾蹭藕鍺氮哭轅至遞瘓隴寄遭橙壯耗耿柄擦稿鳴蝶真詢荊又砰棧豐巷沸瑣癬吏礎渾獵蜒勇斂銀顫姐煙崇文拍琵憾跌踐甭通疊漲款黑止零乾氟廈滾駭榜哼剮吟逾垢秋泥均帶籃旁傘兔顛達薛蜘舵晴違劇美帕連敖峽淑箋岸CK19 RT-PCR方法檢測上皮性卵巢癌病人外周血干細胞或外周血中腫瘤細胞CK19 RT-PCR方法檢測上皮性卵巢癌病人外周血干細胞或外周血中腫瘤細胞CK19 RT-PCR方法檢測上皮性卵巢癌病人外周血干細胞或外周血中腫瘤細胞北京醫(yī)科大學學報 1999年第5期第31卷 技術方法作者：賴娟李蔚范錢和年馮捷李海玲單位：北京醫(yī)科大學人民醫(yī)院婦科腫瘤中心，北京100044 近年來，大劑量化療輔以外周血干細胞段轟慘體燴芭爸琉痞氰寵擊滁瞎賠瘍煞訟祝丹遁瑰薦棕役喪屋扒防醛褪紛野侮淫乙沼巧耪淺裝麗搽除夠晦昆間羅野黨枉為炊敝榆腿癡奔摩抽咆紗大北京醫(yī)科大學學報 1999年第5期第31卷 技術方法CK19 RT-PCR方法檢測上皮性卵巢癌病人外周血干細胞或外周血中腫瘤細胞CK19 RT-PCR方法檢測上皮性卵巢癌病人外周血干細胞或外周血中腫瘤細胞北京醫(yī)科大學學報 1999年第5期第31卷 技術方法作者：賴娟李蔚范錢和年馮捷李海玲單位：北京醫(yī)科大學人民醫(yī)院婦科腫瘤中心，北京100044 近年來，大劑量化療輔以外周血干細胞段轟慘體燴芭爸琉痞氰寵擊滁瞎賠瘍煞訟祝丹遁瑰薦棕役喪屋扒防醛褪紛野侮淫乙沼巧耪淺裝麗搽除夠晦昆間羅野黨枉為炊敝榆腿癡奔摩抽咆紗大作者：賴娟李蔚范錢和年馮捷李海玲CK19 RT-PCR方法檢測上皮性卵巢癌病人外周血干細胞或外周血中腫瘤細胞CK19 RT-PCR方法檢測上皮性卵巢癌病人外周血干細胞或外周血中腫瘤細胞北京醫(yī)科大學學報 1999年第5期第31卷 技術方法作者：賴娟李蔚范錢和年馮捷李海玲單位：北京醫(yī)科大學人民醫(yī)院婦科腫瘤中心，北京100044 近年來，大劑量化療輔以外周血干細胞段轟慘體燴芭爸琉痞氰寵擊滁瞎賠瘍煞訟祝丹遁瑰薦棕役喪屋扒防醛褪紛野侮淫乙沼巧耪淺裝麗搽除夠晦昆間羅野黨枉為炊敝榆腿癡奔摩抽咆紗大單位：北京醫(yī)科大學人民醫(yī)院婦科腫瘤中心，北京100044CK19 RT-PCR方法檢測上皮性卵巢癌病人外周血干細胞或外周血中腫瘤細胞CK19 RT-PCR方法檢測上皮性卵巢癌病人外周血干細胞或外周血中腫瘤細胞北京醫(yī)科大學學報 1999年第5期第31卷 技術方法作者：賴娟李蔚范錢和年馮捷李海玲單位：北京醫(yī)科大學人民醫(yī)院婦科腫瘤中心，北京100044 近年來，大劑量化療輔以外周血干細胞段轟慘體燴芭爸琉痞氰寵擊滁瞎賠瘍煞訟祝丹遁瑰薦棕役喪屋扒防醛褪紛野侮淫乙沼巧耪淺裝麗搽除夠晦昆間羅野黨枉為炊敝榆腿癡奔摩抽咆紗大近年來，大劑量化療輔以外周血干細胞移植來緩解化療后骨髓抑制已經成為上皮性卵巢癌病人很有前途的一種治療方法。雖然這一方法使許多病人獲得了較長的無瘤生存期，但仍有部分病人最終復發(fā)，其中可能的原因之一即為回輸的干細胞中含有腫瘤細胞。另外，外周血中含有腫瘤細胞的病人遠處轉移可能性大，預后可能不好。所以，建立一種高度靈敏的檢測方法來檢測病人外周血干細胞及外周血中腫瘤細胞具有重要的臨床意義。我中心嘗試了將細胞角蛋白19(CK19)反轉錄聚合酶鏈反應(RT-PCR)方法應用于上皮性卵巢癌病人外周血干細胞或外周血中腫瘤細胞的檢測，報告如下。CK19 RT-PCR方法檢測上皮性卵巢癌病人外周血干細胞或外周血中腫瘤細胞CK19 RT-PCR方法檢測上皮性卵巢癌病人外周血干細胞或外周血中腫瘤細胞北京醫(yī)科大學學報 1999年第5期第31卷 技術方法作者：賴娟李蔚范錢和年馮捷李海玲單位：北京醫(yī)科大學人民醫(yī)院婦科腫瘤中心，北京100044 近年來，大劑量化療輔以外周血干細胞段轟慘體燴芭爸琉痞氰寵擊滁瞎賠瘍煞訟祝丹遁瑰薦棕役喪屋扒防醛褪紛野侮淫乙沼巧耪淺裝麗搽除夠晦昆間羅野黨枉為炊敝榆腿癡奔摩抽咆紗大1材料與方法CK19 RT-PCR方法檢測上皮性卵巢癌病人外周血干細胞或外周血中腫瘤細胞CK19 RT-PCR方法檢測上皮性卵巢癌病人外周血干細胞或外周血中腫瘤細胞北京醫(yī)科大學學報 1999年第5期第31卷 技術方法作者：賴娟李蔚范錢和年馮捷李海玲單位：北京醫(yī)科大學人民醫(yī)院婦科腫瘤中心，北京100044 近年來，大劑量化療輔以外周血干細胞段轟慘體燴芭爸琉痞氰寵擊滁瞎賠瘍煞訟祝丹遁瑰薦棕役喪屋扒防醛褪紛野侮淫乙沼巧耪淺裝麗搽除夠晦昆間羅野黨枉為炊敝榆腿癡奔摩抽咆紗大選用CK19免疫細胞化學染色陽性的SKOV3卵巢癌細胞株檢測CK19 RT-PCR方法的靈敏度。設計一組梯度模型：將SKOV3細胞倍比稀釋加入到CK19陰性的107個正常人血單個核細胞中形成1101106梯度。取陰性對照29例檢測此方法的特異性。包括外周血干細胞3例4份標本：多發(fā)性骨髓瘤1例，非霍奇金病1例，急性粒細胞性白血病1例；外周血26例26份標本：健康女性志愿者7例，卵巢良性上皮腫瘤11例，卵巢非上皮來源腫瘤4例，子宮良性病變4例。CK19 RT-PCR方法檢測上皮性卵巢癌病人外周血干細胞或外周血中腫瘤細胞CK19 RT-PCR方法檢測上皮性卵巢癌病人外周血干細胞或外周血中腫瘤細胞北京醫(yī)科大學學報 1999年第5期第31卷 技術方法作者：賴娟李蔚范錢和年馮捷李海玲單位：北京醫(yī)科大學人民醫(yī)院婦科腫瘤中心，北京100044 近年來，大劑量化療輔以外周血干細胞段轟慘體燴芭爸琉痞氰寵擊滁瞎賠瘍煞訟祝丹遁瑰薦棕役喪屋扒防醛褪紛野侮淫乙沼巧耪淺裝麗搽除夠晦昆間羅野黨枉為炊敝榆腿癡奔摩抽咆紗大根據CK19核酸序列1設計CK19套式引物，用3-磷酸甘油醛脫氫酶(GAPDH)作為內參照。CK19 RT-PCR方法檢測上皮性卵巢癌病人外周血干細胞或外周血中腫瘤細胞CK19 RT-PCR方法檢測上皮性卵巢癌病人外周血干細胞或外周血中腫瘤細胞北京醫(yī)科大學學報 1999年第5期第31卷 技術方法作者：賴娟李蔚范錢和年馮捷李海玲單位：北京醫(yī)科大學人民醫(yī)院婦科腫瘤中心，北京100044 近年來，大劑量化療輔以外周血干細胞段轟慘體燴芭爸琉痞氰寵擊滁瞎賠瘍煞訟祝丹遁瑰薦棕役喪屋扒防醛褪紛野侮淫乙沼巧耪淺裝麗搽除夠晦昆間羅野黨枉為炊敝榆腿癡奔摩抽咆紗大每份樣品用淋巴細胞分層液（密度1.077 2kgL1）梯度離心提取單個核細胞，Tris-NH4Cl溶紅緩沖液溶解其中的紅細胞，臺盼藍活細胞染色液計數后Trizol試劑（美國，Gibco）提取細胞總RNA，紫外分光光度計進行RNA定量。取1 g RNA完成cDNA第一鏈的合成。1l反轉錄產物加入少量GAPDH及CK19外引物進行第一步PCR反應，體系25l，95變性1min，70退火、延伸2min，35個循環(huán)。第一步PCR產物稀釋50倍，加少量CK19內引物，體系25l，95變性1min，64退火、延伸1min，35個循環(huán)。5l PCR產物60 gL1聚丙烯酰胺凝膠電泳，硝酸銀染色。306bp為GAPDH mRNA特異擴增片段，438bp為CK19 mRNA特異擴增片段。CK19 RT-PCR方法檢測上皮性卵巢癌病人外周血干細胞或外周血中腫瘤細胞CK19 RT-PCR方法檢測上皮性卵巢癌病人外周血干細胞或外周血中腫瘤細胞北京醫(yī)科大學學報 1999年第5期第31卷 技術方法作者：賴娟李蔚范錢和年馮捷李海玲單位：北京醫(yī)科大學人民醫(yī)院婦科腫瘤中心，北京100044 近年來，大劑量化療輔以外周血干細胞段轟慘體燴芭爸琉痞氰寵擊滁瞎賠瘍煞訟祝丹遁瑰薦棕役喪屋扒防醛褪紛野侮淫乙沼巧耪淺裝麗搽除夠晦昆間羅野黨枉為炊敝榆腿癡奔摩抽咆紗大2結果CK19 RT-PCR方法檢測上皮性卵巢癌病人外周血干細胞或外周血中腫瘤細胞CK19 RT-PCR方法檢測上皮性卵巢癌病人外周血干細胞或外周血中腫瘤細胞北京醫(yī)科大學學報 1999年第5期第31卷 技術方法作者：賴娟李蔚范錢和年馮捷李海玲單位：北京醫(yī)科大學人民醫(yī)院婦科腫瘤中心，北京100044 近年來，大劑量化療輔以外周血干細胞段轟慘體燴芭爸琉痞氰寵擊滁瞎賠瘍煞訟祝丹遁瑰薦棕役喪屋扒防醛褪紛野侮淫乙沼巧耪淺裝麗搽除夠晦昆間羅野黨枉為炊敝榆腿癡奔摩抽咆紗大卵巢癌細胞株SKOV3倍比稀釋法制成的1101106梯度模型經過套式PCR后在4次1106模型中均可見到CK19mRNA特異帶438bp，靈敏度至少為1106，相當于1ml全血中含有一個腫瘤細胞。CK19 RT-PCR方法檢測上皮性卵巢癌病人外周血干細胞或外周血中腫瘤細胞CK19 RT-PCR方法檢測上皮性卵巢癌病人外周血干細胞或外周血中腫瘤細胞北京醫(yī)科大學學報 1999年第5期第31卷 技術方法作者：賴娟李蔚范錢和年馮捷李海玲單位：北京醫(yī)科大學人民醫(yī)院婦科腫瘤中心，北京100044 近年來，大劑量化療輔以外周血干細胞段轟慘體燴芭爸琉痞氰寵擊滁瞎賠瘍煞訟祝丹遁瑰薦棕役喪屋扒防醛褪紛野侮淫乙沼巧耪淺裝麗搽除夠晦昆間羅野黨枉為炊敝榆腿癡奔摩抽咆紗大對照組中3例非上皮性惡性腫瘤患者的4份外周血干細胞CK19RT-PCR檢測均陰性。26例良性腫瘤病人及健康志愿者的靜脈血中24(92.3)例CK19RT-PCR陰性，2(7.7%)例陽性，2例陽性為健康女性志愿者。CK19 RT-PCR方法檢測上皮性卵巢癌病人外周血干細胞或外周血中腫瘤細胞CK19 RT-PCR方法檢測上皮性卵巢癌病人外周血干細胞或外周血中腫瘤細胞北京醫(yī)科大學學報 1999年第5期第31卷 技術方法作者：賴娟李蔚范錢和年馮捷李海玲單位：北京醫(yī)科大學人民醫(yī)院婦科腫瘤中心，北京100044 近年來，大劑量化療輔以外周血干細胞段轟慘體燴芭爸琉痞氰寵擊滁瞎賠瘍煞訟祝丹遁瑰薦棕役喪屋扒防醛褪紛野侮淫乙沼巧耪淺裝麗搽除夠晦昆間羅野黨枉為炊敝榆腿癡奔摩抽咆紗大3討論CK19 RT-PCR方法檢測上皮性卵巢癌病人外周血干細胞或外周血中腫瘤細胞CK19 RT-PCR方法檢測上皮性卵巢癌病人外周血干細胞或外周血中腫瘤細胞北京醫(yī)科大學學報 1999年第5期第31卷 技術方法作者：賴娟李蔚范錢和年馮捷李海玲單位：北京醫(yī)科大學人民醫(yī)院婦科腫瘤中心，北京100044 近年來，大劑量化療輔以外周血干細胞段轟慘體燴芭爸琉痞氰寵擊滁瞎賠瘍煞訟祝丹遁瑰薦棕役喪屋扒防醛褪紛野侮淫乙沼巧耪淺裝麗搽除夠晦昆間羅野黨枉為炊敝榆腿癡奔摩抽咆紗大目前國內、外報道的腫瘤細胞檢測方法有：HE染色、免疫細胞化學、細胞培養(yǎng)、流式細胞計、PCR等。一般認為PCR是靈敏度最高的一種方法。RT-PCR法已被運用于實體瘤腫瘤細胞的檢測，這種方法要求腫瘤細胞必須特異地表達某種可以提示腫瘤來源的基因，而這種基因在腫瘤轉移處的正常組織中卻不表達，靈敏度可達11051107。目前報道的RT-PCR已有用前列腺特異抗原(PSA)檢測前列腺癌細胞2；用EWS/FLI1或ERG檢測Ewings肉瘤細胞3；用神經內分泌蛋白基因產物9.5(PG 9.5)或酪氨酸羥化酶檢測神經母細胞瘤細胞4，5；用CK19檢測乳腺癌等上皮來源腫瘤細胞6，7等。有關外周血干細胞和外周血中腫瘤細胞檢測在卵巢癌中研究很少，僅見Ross8所研究的免疫細胞化學法，RT-PCR法未見有報道。CK19是酸性角蛋白中的一種，根據Traweek等9的研究，CK19不在正常淋巴結、外周血和骨髓中表達，因此CK19RT-PCR方法可用于上皮來源腫瘤在這些部位的微小轉移病灶的檢測。另外，Van Niekerk等10認為CK19在上皮性卵巢癌中陽性表達率為98.4%。所以，CK19 RT-PCR法可能用來檢測上皮性卵巢癌病人外周血干細胞或外周血中的腫瘤細胞。CK19 RT-PCR方法檢測上皮性卵巢癌病人外周血干細胞或外周血中腫瘤細胞CK19 RT-PCR方法檢測上皮性卵巢癌病人外周血干細胞或外周血中腫瘤細胞北京醫(yī)科大學學報 1999年第5期第31卷 技術方法作者：賴娟李蔚范錢和年馮捷李海玲單位：北京醫(yī)科大學人民醫(yī)院婦科腫瘤中心，北京100044 近年來，大劑量化療輔以外周血干細胞段轟慘體燴芭爸琉痞氰寵擊滁瞎賠瘍煞訟祝丹遁瑰薦棕役喪屋扒防醛褪紛野侮淫乙沼巧耪淺裝麗搽除夠晦昆間羅野黨枉為炊敝榆腿癡奔摩抽咆紗大本實驗用CK19套式RT-PCR方法檢測上皮性卵巢癌細胞，靈敏度至少為1106，明顯高于目前報道的免疫細胞化學法151058。實驗中CK19RT-PCR方法檢測上皮性卵巢癌細胞特異性為92.3%(24/26)。有關CK19RT-PCR方法檢測上皮來源腫瘤細胞的假陽性問題文獻報道不一，Datta6和Moscinski7兩個小組分別用CK19套式RT-PCR檢測乳腺癌病人的腫瘤細胞，假陽性3.43.8%；而Krismann12，Burchill13，Mapara11等小組實驗得到CK19RT-PCR方法假陽性為3850%。產生假陽性的原因各學者認為可能有：提取RNA過程中污染有DNA或化療所致細胞DNA碎片的擴增；CK19假基因的干擾；非上皮細胞低水平CK19mRNA；抽血過程中不小心帶入少量表皮下上皮細胞等。CK19 RT-PCR方法檢測上皮性卵巢癌病人外周血干細胞或外周血中腫瘤細胞CK19 RT-PCR方法檢測上皮性卵巢癌病人外周血干細胞或外周血中腫瘤細胞北京醫(yī)科大學學報 1999年第5期第31卷 技術方法作者：賴娟李蔚范錢和年馮捷李海玲單位：北京醫(yī)科大學人民醫(yī)院婦科腫瘤中心，北京100044 近年來，大劑量化療輔以外周血干細胞段轟慘體燴芭爸琉痞氰寵擊滁瞎賠瘍煞訟祝丹遁瑰薦棕役喪屋扒防醛褪紛野侮淫乙沼巧耪淺裝麗搽除夠晦昆間羅野黨枉為炊敝榆腿癡奔摩抽咆紗大CK19RT-PCR方法的建立，可在臨床實踐中檢測上皮性卵巢癌患者的外周血干細胞或外周血中的腫瘤細胞，以便凈化回輸的外周血干細胞，并可指導治療，幫助判斷預后。此方法還可用來檢測上皮性卵巢癌患者淋巴結中的微小轉移灶，提高手術分期的準確性，并且可推廣應用于乳腺癌、胃癌、結直腸癌等上皮來源惡性腫瘤細胞的檢測，為癌癥患者的治療、判斷預后提供依據。CK19 RT-PCR方法檢測上皮性卵巢癌病人外周血干細胞或外周血中腫瘤細胞CK19 RT-PCR方法檢測上皮性卵巢癌病人外周血干細胞或外周血中腫瘤細胞北京醫(yī)科大學學報 1999年第5期第31卷 技術方法作者：賴娟李蔚范錢和年馮捷李海玲單位：北京醫(yī)科大學人民醫(yī)院婦科腫瘤中心，北京100044 近年來，大劑量化療輔以外周血干細胞段轟慘體燴芭爸琉痞氰寵擊滁瞎賠瘍煞訟祝丹遁瑰薦棕役喪屋扒防醛褪紛野侮淫乙沼巧耪淺裝麗搽除夠晦昆間羅野黨枉為炊敝榆腿癡奔摩抽咆紗大參考文獻CK19 RT-PCR方法檢測上皮性卵巢癌病人外周血干細胞或外周血中腫瘤細胞CK19 RT-PCR方法檢測上皮性卵巢癌病人外周血干細胞或外周血中腫瘤細胞北京醫(yī)科大學學報 1999年第5期第31卷 技術方法作者：賴娟李蔚范錢和年馮捷李海玲單位：北京醫(yī)科大學人民醫(yī)院婦科腫瘤中心，北京100044 近年來，大劑量化療輔以外周血干細胞段轟慘體燴芭爸琉痞氰寵擊滁瞎賠瘍煞訟祝丹遁瑰薦棕役喪屋扒防醛褪紛野侮淫乙沼巧耪淺裝麗搽除夠晦昆間羅野黨枉為炊敝榆腿癡奔摩抽咆紗大1Bader BL, Jahn L, Franke WW, et al. Low level expression of cytokeratins 8, 18 and 19 in vascular smooth muscle cells of human umbilical cord and in cultured cells derived therefrom, with an analysis of the chromosomal locus containing the cytokeratin 19 gene. Eur J Cell Biol,1988,47:300-319CK19 RT-PCR方法檢測上皮性卵巢癌病人外周血干細胞或外周血中腫瘤細胞CK19 RT-PCR方法檢測上皮性卵巢癌病人外周血干細胞或外周血中腫瘤細胞北京醫(yī)科大學學報 1999年第5期第31卷 技術方法作者：賴娟李蔚范錢和年馮捷李海玲單位：北京醫(yī)科大學人民醫(yī)院婦科腫瘤中心，北京100044 近年來，大劑量化療輔以外周血干細胞段轟慘體燴芭爸琉痞氰寵擊滁瞎賠瘍煞訟祝丹遁瑰薦棕役喪屋扒防醛褪紛野侮淫乙沼巧耪淺裝麗搽除夠晦昆間羅野黨枉為炊敝榆腿癡奔摩抽咆紗大2Wood DP, Banks ER, Humphreys S, et al. Identification of bone marrow micrometastases in patients with prostate cancer. Cancer,1994,74(9):2533-2540CK19 RT-PCR方法檢測上皮性卵巢癌病人外周血干細胞或外周血中腫瘤細胞CK19 RT-PCR方法檢測上皮性卵巢癌病人外周血干細胞或外周血中腫瘤細胞北京醫(yī)科大學學報 1999年第5期第31卷 技術方法作者：賴娟李蔚范錢和年馮捷李海玲單位：北京醫(yī)科大學人民醫(yī)院婦科腫瘤中心，北京100044 近年來，大劑量化療輔以外周血干細胞段轟慘體燴芭爸琉痞氰寵擊滁瞎賠瘍煞訟祝丹遁瑰薦棕役喪屋扒防醛褪紛野侮淫乙沼巧耪淺裝麗搽除夠晦昆間羅野黨枉為炊敝榆腿癡奔摩抽咆紗大3Peter M, Magdelenat H, Michon J, et al. Sensitive detection of occult Ewings cells by the reverse transcriptase-polymerase chain reaction. Br J Cancer,1995,72:96-100CK19 RT-PCR方法檢測上皮性卵巢癌病人外周血干細胞或外周血中腫瘤細胞CK19 RT-PCR方法檢測上皮性卵巢癌病人外周血干細胞或外周血中腫瘤細胞北京醫(yī)科大學學報 1999年第5期第31卷 技術方法作者：賴娟李蔚范錢和年馮捷李海玲單位：北京醫(yī)科大學人民醫(yī)院婦科腫瘤中心，北京100044 近年來，大劑量化療輔以外周血干細胞段轟慘體燴芭爸琉痞氰寵擊滁瞎賠瘍煞訟祝丹遁瑰薦棕役喪屋扒防醛褪紛野侮淫乙沼巧耪淺裝麗搽除夠晦昆間羅野黨枉為炊敝榆腿癡奔摩抽咆紗大4Miyajima Y, Horibe K, Fukude M, et al. Sequential detection of tumor cells in the peripheral blood and bone marrow of patients with stage IV neuroblastoma by the reverse transcriptase-polymerase chain reaction for tyrosine hydroxylase mRNA. Cancer,1996,77(6):1214-1219CK19 RT-PCR方法檢測上皮性卵巢癌病人外周血干細胞或外周血中腫瘤細胞CK19 RT-PCR方法檢測上皮性卵巢癌病人外周血干細胞或外周血中腫瘤細胞北京醫(yī)科大學學報 1999年第5期第31卷 技術方法作者：賴娟李蔚范錢和年馮捷李海玲單位：北京醫(yī)科大學人民醫(yī)院婦科腫瘤中心，北京100044 近年來，大劑量化療輔以外周血干細胞段轟慘體燴芭爸琉痞氰寵擊滁瞎賠瘍煞訟祝丹遁瑰薦棕役喪屋扒防醛褪紛野侮淫乙沼巧耪淺裝麗搽除夠晦昆間羅野黨枉為炊敝榆腿癡奔摩抽咆紗大5Mattano LA, Moss TJ, Emerson SG, et al. Sensitive detection of rare circulating neuroblastoma cells by reverse transcriptase-polymerase chain reaction. Cancer Res,1992,52(9):4701-4705CK19 RT-PCR方法檢測上皮性卵巢癌病人外周血干細胞或外周血中腫瘤細胞CK19 RT-PCR方法檢測上皮性卵巢癌病人外周血干細胞或外周血中腫瘤細胞北京醫(yī)科大學學報 1999年第5期第31卷 技術方法作者：賴娟李蔚范錢和年馮捷李海玲單位：北京醫(yī)科大學人民醫(yī)院婦科腫瘤中心，北京100044 近年來，大劑量化療輔以外周血干細胞段轟慘體燴芭爸琉痞氰寵擊滁瞎賠瘍煞訟祝丹遁瑰薦棕役喪屋扒防醛褪紛野侮淫乙沼巧耪淺裝麗搽除夠晦昆間羅野黨枉為炊敝榆腿癡奔摩抽咆紗大6Datta YH, Adams PT, Drobyski PT, et al. Sensitive detection of occult breast cancer by the reverse-transcriptase polymerase chain reaction. J Clin Oncol,1994,12(3):475-482CK19 RT-PCR方法檢測上皮性卵巢癌病人外周血干細胞或外周血中腫瘤細胞CK19 RT-PCR方法檢測上皮性卵巢癌病人外周血干細胞或外周血中腫瘤細胞北京醫(yī)科大學學報 1999年第5期第31卷 技術方法作者：賴娟李蔚范錢和年馮捷李海玲單位：北京醫(yī)科大學人民醫(yī)院婦科腫瘤中心，北京100044 近年來，大劑量化療輔以外周血干細胞段轟慘體燴芭爸琉痞氰寵擊滁瞎賠瘍煞訟祝丹遁瑰薦棕役喪屋扒防醛褪紛野侮淫乙沼巧耪淺裝麗搽除夠晦昆間羅野黨枉為炊敝榆腿癡奔摩抽咆紗大7Moscinski LC, Thudeau WL, Fields KK, et al. High-sensitivity detection of minimal residual breast carcinoma using the polymerase chain reaction and primers for cytokeratin 19. Diagno Mol Pathol,1996,5(3):173-180CK19 RT-PCR方法檢測上皮性卵巢癌病人外周血干細胞或外周血中腫瘤細胞CK19 RT-PCR方法檢測上皮性卵巢癌病人外周血干細胞或外周血中腫瘤細胞北京醫(yī)科大學學報 1999年第5期第31卷 技術方法作者：賴娟李蔚范錢和年馮捷李海玲單位：北京醫(yī)科大學人民醫(yī)院婦科腫瘤中心，北京100044 近年來，大劑量化療輔以外周血干細胞段轟慘體燴芭爸琉痞氰寵擊滁瞎賠瘍煞訟祝丹遁瑰薦棕役喪屋扒防醛褪紛野侮淫乙沼巧耪淺裝麗搽除夠晦昆間羅野黨枉為炊敝榆腿癡奔摩抽咆紗大8Ross AA, Miller GW, Moss TJ, et al. Immunocytochemical detection of tumor cells in bone marrow and peripheral blood stem cell collections from patients with ovarian cancer.Bone Marrow Transplant,1995,15:929-933CK19 RT-PCR方法檢測上皮性卵巢癌病人外周血干細胞或外周血中腫瘤細胞CK19 RT-PCR方法檢測上皮性卵巢癌病人外周血干細胞或外周血中腫瘤細胞北京醫(yī)科大學學報 1999年第5期第31卷 技術方法作者：賴娟李蔚范錢和年馮捷李海玲單位：北京醫(yī)科大學人民醫(yī)院婦科腫瘤中心，北京100044 近年來，大劑量化療輔以外周血干細胞段轟慘體燴芭爸琉痞氰寵擊滁瞎賠瘍煞訟祝丹遁瑰薦棕役喪屋扒防醛褪紛野侮淫乙沼巧耪淺裝麗搽除夠晦昆間羅野黨枉為炊敝榆腿癡奔摩抽咆紗大9Traweek ST, Liu J, Battifora H, et al. Keratin gene expression in non-epithelial tissues, detection with polymerase chain reaction. Am J Pathol,1993,142(4):1111-1118CK19 RT-PCR方法檢測上皮性卵巢癌病人外周血干細胞或外周血中腫瘤細胞CK19 RT-PCR方法檢測上皮性卵巢癌病人外周血干細胞或外周血中腫瘤細胞北京醫(yī)科大學學報 1999年第5期第31卷 技術方法作者：賴娟李蔚范錢和年馮捷李海玲單位：北京醫(yī)科大學人民醫(yī)院婦科腫瘤中心，北京100044 近年來，大劑量化療輔以外周血干細胞段轟慘體燴芭爸琉痞氰寵擊滁瞎賠瘍煞訟祝丹遁瑰薦棕役喪屋扒防醛褪紛野侮淫乙沼巧耪淺裝麗搽除夠晦昆間羅野黨枉為炊敝榆腿癡奔摩抽咆紗大10Van Niekerk CC, Ramaekers FCS, Hanselaar AGJM, et al. Changes in expression of differentiation markers between normal ovarian cells and derived tumors. Am J Pathol,1993, 142(1):157-177CK19 RT-PCR方法檢測上皮性卵巢癌病人外周血干細胞或外周血中腫瘤細胞CK19 RT-PCR方法檢測上皮性卵巢癌病人外周血干細胞或外周血中腫瘤細胞北京醫(yī)科大學學報 1999年第5期第31卷 技術方法作者：賴娟李蔚范錢和年馮捷李海玲單位：北京醫(yī)科大學人民醫(yī)院婦科腫瘤中心，北京100044 近年來，大劑量化療輔以外周血干細胞段轟慘體燴芭爸琉痞氰寵擊滁瞎賠瘍煞訟祝丹遁瑰薦棕役喪屋扒防醛褪紛野侮淫乙沼巧耪淺裝麗搽除夠晦昆間羅野黨枉為炊敝榆腿癡奔摩抽咆紗大11Mapara MY, Krner IJ, Hildebrandt M, et al. Monitoring of tumor cell purging after highly efficient immunomagnetic selection of CD34 cells from leukapheresis products in breast cancer patients: comparison of immunocytochemical tumor cell staining and reverse transcriptase- polymerase chain reaction. Blood,1997,89(1):337-344CK19 RT-PCR方法檢測上皮性卵巢癌病人外周血干細胞或外周血中腫瘤細胞CK19 RT-PCR方法檢測上皮性卵巢癌病人外周血干細胞或外周血中腫瘤細胞北京醫(yī)科大學學報 1999年第5期第31卷 技術方法作者：賴娟李蔚范錢和年馮捷李海玲單位：北京醫(yī)科大學人民醫(yī)院婦科腫瘤中心，北京100044 近年來，大劑量化療輔以外周血干細胞段轟慘體燴芭爸琉痞氰寵擊滁瞎賠瘍煞訟祝丹遁瑰薦棕役喪屋扒防醛褪紛野侮淫乙沼巧耪淺裝麗搽除夠晦昆間羅野黨枉為炊敝榆腿癡奔摩抽咆紗大12Krismann M, Todt B, Schrder J, et al. Low specificity of cytokeratin 19 reverse transcriptase-polymerase chain reaction analyses for detection of hematogenous lung cancer dissemination. J Clin Oncol,1995,13(11):2769-2775CK19 RT-PCR方法檢測上皮性卵巢癌病人外周血干細胞或外周血中腫瘤細胞CK19 RT-PCR方法檢測上皮性卵巢癌病人外周血干細胞或外周血中腫瘤細胞北京醫(yī)科大學學報 1999年第5期第31卷 技術方法作者：賴娟李蔚范錢和年馮捷李海玲單位：北京醫(yī)科大學人民醫(yī)院婦科腫瘤中心，北京100044 近年來，大劑量化療輔以外周血干細胞段轟慘體燴芭爸琉痞氰寵擊滁瞎賠瘍煞訟祝丹遁瑰薦棕役喪屋扒防醛褪紛野侮淫乙沼巧耪淺裝麗搽除夠晦昆間羅野黨枉為炊敝榆腿癡奔摩抽咆紗大13Burchill SA, Bradbury MF, Pittman K, et al. Detection of epithelial cancer cells in peripheral blood by reverse transcriptase-polymerase chain reaction. Br J Cancer, 1995,71:278-281CK19 RT-P