新生兒溶血病血清學(xué)檢查操作規(guī)程.doc

遵醫(yī)附院輸血科主題：血清學(xué)技術(shù)操作規(guī)范編號：01-3 內(nèi)容：新生兒溶血病血清學(xué)檢查操作規(guī)程第1頁 共 3 頁 版本2008 修訂頒布日期：2008年8月修訂日期：2008年7月新生兒溶血病血清學(xué)檢查操作規(guī)程原理新生兒溶血病是由母嬰血型不合引起，可見于ABO、Rh及MN等血型系統(tǒng)。胎兒和新生兒紅細(xì)胞被來自母親的IgG抗體包被，并在嬰兒的單核-巨噬細(xì)胞系統(tǒng)（網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)）受到免疫性破壞，出現(xiàn)溶血，表現(xiàn)出相應(yīng)的癥狀。病情嚴(yán)重程度因個(gè)體差異、抗體類型、抗體效價(jià)等不同而異。目的規(guī)范新生兒溶血病血清學(xué)檢查操作；查找新生兒溶血病發(fā)生的原因，協(xié)助臨床進(jìn)行實(shí)驗(yàn)室診斷及治療；保證臨床用血的安全性和有效性。職責(zé)輸血科技術(shù)人員負(fù)責(zé)新生兒溶血病血清學(xué)檢查。適用范圍母嬰血型不合引起的新生兒溶血病的血標(biāo)本。支持文件中國輸血技術(shù)操作規(guī)程（血站部分）.天津：天津科學(xué)技術(shù)出版社1997輸血技術(shù)學(xué)第2版.北京：人民衛(wèi)生出版社，2002輸血科（血庫）工作手冊莞市中心血站2006材料或設(shè)備1、 材料 抗-A、抗-D定型試劑、抗球蛋白試劑、ABO反定型試劑紅細(xì)胞、篩選細(xì)胞、譜細(xì)胞、生理鹽水、新生兒靜脈血、產(chǎn)婦及患兒父親血標(biāo)本2、 設(shè)備 血清雪專用離心機(jī)、電熱恒溫水浴箱、水浴振蕩儀、顯微鏡、小試管、滴管、小玻棒操作步驟一、 血標(biāo)本采集及處理采集患兒及其父親與母親血標(biāo)本各3-5ml，分離出血清，配制3%-5%紅細(xì)胞鹽水懸液。如果患兒血標(biāo)本為不抗凝血，則在一小玻璃漏斗頸部置一適當(dāng)大小的棉球上，一邊加生理鹽水，一邊用玻棒擠壓血塊，收集漏斗下面的紅細(xì)胞懸液。二、 患兒血標(biāo)本具體操作執(zhí)行ABO和Rh血型鑒定操作規(guī)程。ABO血型測定只做正定型。1、 直接抗球蛋白試驗(yàn)具體操作執(zhí)行抗球蛋白操作試驗(yàn)規(guī)程中的直接抗球蛋白試驗(yàn)部分。2、 游離抗體檢測1、 取小試管3支，分別標(biāo)明A、B、O細(xì)胞，每管加患兒血清2滴，再分別加入3%-5%的A、B、O、反定型試劑紅細(xì)胞懸液1滴。2、 37致敏1h后取出，若發(fā)生凝集，不必繼續(xù)往下做。3、 若不凝集，用鹽水充分洗滌3次反應(yīng)物后加入抗球蛋白血清1滴。1300g離心15s，輕輕懸浮細(xì)胞，肉眼觀察凝集反應(yīng)，記錄結(jié)果。若肉眼不見凝集，以顯微鏡檢查。按表一析結(jié)果。3、放散實(shí)驗(yàn)依據(jù)結(jié)果，采用合適的放散方法進(jìn)行放散試驗(yàn)，具體操作執(zhí)行放散試驗(yàn)操作規(guī)程，放散試驗(yàn)結(jié)果判斷見表二三、 患兒母親血標(biāo)本1、 血型鑒定（執(zhí)行ABO和Rh（D）血型鑒定操作規(guī)程）2、 IgG抗-A（B）效價(jià)測定具體操作執(zhí)行IgG抗-A（B）效價(jià)測定規(guī)程3、 抗體篩選、鑒定試驗(yàn)具體操作執(zhí)行紅細(xì)胞血型抗體篩選、鑒定操作規(guī)程四、 患兒父親血標(biāo)本ABO和Rh（D）血型鑒定。具體操作執(zhí)行ABO和Rh（D）血型鑒定操作規(guī)程五、根據(jù)表三，分析結(jié)果表一患兒血清中游離抗體檢查結(jié)果意義指示紅細(xì)胞意義Ac Bc Oc+ - - + -+ + -+/- +/- +- - -游離的抗-A游離的抗-B游離的抗-A、抗-B或者抗-AB游離的ABO系統(tǒng)以外抗體無游離抗體表二患兒紅細(xì)胞抗體釋放試驗(yàn)意義指示紅細(xì)胞意義Ac Bc Oc+ - - + -+ + -+/- +/- +- - -放散出IgG抗-A放散出IgG抗-B放散出抗-AB，或同時(shí)放散出IgG抗-A或抗-B放散出ABO血型以外的抗體沒有放散抗體表三新生兒溶血病檢測結(jié)果判斷直抗試驗(yàn) 游離試驗(yàn) 釋放試驗(yàn) 結(jié)論 - - - 不能證實(shí)為血型免疫引起的新生兒溶血 + - - 可疑為新生兒溶血 - + - 可疑為新生兒溶血 - - + 能證實(shí)為血型免疫引起的新生兒溶血 + - + 能證實(shí)為血型免疫引起的新生兒溶血 + + - 能證實(shí)為血型免疫引起的新生兒溶血 - + + 能證實(shí)為血型免疫引起的新生兒溶血 + + + 能證實(shí)為血型免疫引起的新生兒溶血 注意事項(xiàng)1、 新生兒血標(biāo)本要求比較高，要求采集血液4-5ml，分為大約相等的兩份，一份不抗凝，另一份采用EDTA抗凝。2、 如果只有不抗凝血標(biāo)本，不宜在試管中用竹簽擠壓血塊。3、 臍血標(biāo)本不宜作為檢測標(biāo)本，尤其對ABO新生兒溶血病容易出現(xiàn)無臨床意義的陽性指標(biāo)。4、 一旦懷疑為新生兒溶血病時(shí)，應(yīng)立即盡送檢，5天后采集的血標(biāo)本檢出陽性率的機(jī)會很少。5、 母親IgG抗-A抗-B效價(jià)高低具有參考價(jià)值說法不一，劉達(dá)莊主編免疫血液學(xué)2002上?？茖W(xué)技術(shù)出版社P137 為64以上有參考意義。王培華主編輸血技術(shù)學(xué)P233效價(jià)