干式生化分析儀的臨床應(yīng)用體會(huì).doc

干式生化分析儀的臨床應(yīng)用體會(huì) 生化分析是臨床診斷常用的重要手段之一，根據(jù)樣品與試劑發(fā)生化學(xué)反應(yīng)是否為固相化學(xué)反應(yīng)，可以將生化分析分為濕化學(xué)式（普通）和干化學(xué)式生化分析。隨著臨床對(duì)急診生化檢驗(yàn)結(jié)果在報(bào)告時(shí)間上越來越高的要求以及臨床生化檢驗(yàn)技術(shù)的快速發(fā)展,急診生化檢驗(yàn)技術(shù)逐漸從傳統(tǒng)的濕化學(xué)向干式生化發(fā)展。 1干化學(xué)和濕化學(xué)的測(cè)定原理 干化學(xué)，采用多層薄膜的固相試劑技術(shù)，只要把液體樣品直接加到已固化于特殊結(jié)構(gòu)的試劑載體，即干式化的試劑中，以樣品中的水為溶劑，將固化在載體上的試劑溶解后，再與樣品中的待測(cè)成分進(jìn)行化學(xué)反應(yīng)，從而進(jìn)行分析測(cè)定。濕化學(xué)，即普通的化學(xué)反應(yīng)，則在反應(yīng)容器中加入液態(tài)試劑和樣品，混合后發(fā)生的化學(xué)反應(yīng)。干化學(xué)只是相對(duì)于濕化學(xué)而言，它實(shí)際上也是在潮濕條件下進(jìn)行的化學(xué)反應(yīng)。 2干式生化分析儀和普通濕式生化分析儀的結(jié)構(gòu)異同 生化分析儀中存在多種化學(xué)分析技術(shù)，其中包括顯色反應(yīng)、ISE（離子選擇性電極）、免疫比濁等。其中顯色反應(yīng)發(fā)生的方式和容器，則是干式生化分析儀和普通濕式生化分析儀最主要的不同點(diǎn)。與此相應(yīng)的，兩種生化分析儀的光路系統(tǒng)也有所不同。 普通濕式生化分析儀一般在比色杯或流動(dòng)池中發(fā)生顯色反應(yīng)，通常在采用比色杯的儀器還配有攪拌器，以保證充分快速的反應(yīng)。因此，普通濕式生化必須配有管路系統(tǒng)，實(shí)現(xiàn)樣品吸取、樣品稀釋、試劑分配等功能，流動(dòng)池式生化分析儀的管路系統(tǒng)還需要實(shí)現(xiàn)管路清洗和排出廢液等功能。此外，普通濕式生化分析儀通常采用光電比色法進(jìn)行分析，其吸光度與被測(cè)溶液濃度滿足朗伯-比爾定律。 干式生化分析儀則完全拋棄了傳統(tǒng)的管路系統(tǒng)，使用干試劑條作為固相試劑。干試劑條一般由多層薄膜組成。例如V350干式生化分析儀所使用的干試劑條為三層：第一層為分布擴(kuò)散層；能使標(biāo)本均勻分布，能過濾大分子，將溶血、高血脂血及膽紅素干擾減至最低，同時(shí)還提供反射測(cè)定的背景；第二層為試劑層：包含干性試劑，控制反應(yīng)順序；第三層為指示劑層：包含染料以產(chǎn)生顯色復(fù)合物。多層薄膜技術(shù)不僅能掩蓋待測(cè)物的有色物質(zhì)并提供背景、選擇性地阻留或去除干擾物質(zhì)；而且還將等同于濕化學(xué)法反應(yīng)原理的各種物質(zhì)分層中進(jìn)行，某一層中的反應(yīng)產(chǎn)物又可進(jìn)入另一層中進(jìn)行其它反應(yīng)，從而引導(dǎo)反應(yīng)序列；其各層可以給出一種特定的環(huán)境用以控制反應(yīng)序列和反應(yīng)時(shí)間。樣品中的待測(cè)組分濃度可以通過Kubelka-Munk理論來進(jìn)行計(jì)算。 3干式生化分析儀和普通濕式生化分析儀各自的操作維護(hù)方式 普通濕式生化分析儀每次使用時(shí)，需檢查試劑，試劑量不足時(shí)需及時(shí)添加，而且，試劑本身也有有效期，放置時(shí)間過長(zhǎng)也需及時(shí)更換。但普通濕式生化分析儀適用于大批量測(cè)試，每次檢測(cè)幾百幾千個(gè)樣品，在這種使用狀況下，使用方便。 由于普通濕式生化分析儀內(nèi)部含有管路系統(tǒng)，為了防止管路堵塞、漏水、漏氣等現(xiàn)象的發(fā)生，日常的維護(hù)保養(yǎng)工作尤為重要。每日開機(jī)前需檢查各清洗液、蒸餾水、稀釋液等是否足夠，檢查管路系統(tǒng)是否有漏水現(xiàn)象；開機(jī)后需檢查各試劑是否需要添加，機(jī)器沖洗管路，并作零點(diǎn)校準(zhǔn)；關(guān)機(jī)時(shí)需沖洗機(jī)器管路，倒空廢液桶，清洗加樣針及攪拌器。定期用專用清洗液沖洗管路系統(tǒng)、加樣針、攪拌器等部件，定期作光路檢查。其他的維護(hù)保養(yǎng)工作，可以根據(jù)實(shí)際工作需要進(jìn)行，如清洗空氣過濾網(wǎng)、使用專用清洗液浸泡沖洗管路系統(tǒng)，更換液路中的過濾器、更換密封墊等。 如果普通濕式生化分析儀因某種原因而長(zhǎng)期閑置，在放置期間最好能夠每周定期開機(jī)沖洗管路系統(tǒng)23次，以防止管路堵塞；否則，則需要在放置以前用蒸餾水反復(fù)沖洗管路，然后將管路中的水排盡，待管路中的水徹底晾干以后，才能裝箱保存。 干式生化分析儀使用時(shí)不需配制試劑，而是使用廠家已經(jīng)配置好的干試劑條。由于干式生化分析儀本身不存放試劑、不做管路清洗，因此，在使用中就顯得簡(jiǎn)單快捷的多。只需要將液體樣品加到干試劑條上，樣品就能夠滲透過層層薄膜，經(jīng)過顯色反應(yīng)后顯示出相應(yīng)的顏色，從而可以計(jì)算出樣品中待測(cè)組分的濃度。 干式生化分析儀由于已經(jīng)拋棄了管路系統(tǒng)，結(jié)構(gòu)較為簡(jiǎn)單，因此其保養(yǎng)維護(hù)工作也簡(jiǎn)單了很多。一般來說，只需要定期做光路檢查，根據(jù)需要做機(jī)器內(nèi)部清潔即可。 如果干式生化分析儀長(zhǎng)期不用，需長(zhǎng)時(shí)間放置，它不需要像普通濕式生化分析儀那樣經(jīng)常開機(jī)沖洗，只需要注意保存環(huán)境的防塵、防濕、防高溫等條件就行了。但兩種機(jī)器在長(zhǎng)時(shí)間放置后需投入使用時(shí)，必須先進(jìn)行質(zhì)控測(cè)試，質(zhì)控正常的才可以投入使用；不正常的則必須進(jìn)行校準(zhǔn)，校準(zhǔn)后，質(zhì)控正常的才可以正常使用。 4干式生化分析儀和普通濕式生化分析儀的測(cè)試結(jié)果比對(duì) 根據(jù)已有的研究，兩種方法所有分析項(xiàng)目的R （相關(guān)系數(shù)）均大于093，相關(guān)性檢驗(yàn)P 005。統(tǒng)計(jì)結(jié)果表明兩種儀器的分析結(jié)果相關(guān)性良好。兩種方法均能滿足臨床檢驗(yàn)的需要。 5干式生化分析儀和普通濕式生化分析儀的質(zhì)量控制與結(jié)果校準(zhǔn) 生化分析儀在長(zhǎng)期使用過程中必須經(jīng)常進(jìn)行質(zhì)量控制檢查，質(zhì)控正常的才可以投入使用；質(zhì)控不正常的則必須進(jìn)行校準(zhǔn)，校準(zhǔn)后，質(zhì)控正常的才可以正常使用。 兩種生化分析儀可以利用廠家提供的質(zhì)控品和校準(zhǔn)品進(jìn)行質(zhì)量控制或進(jìn)行校準(zhǔn)。但在實(shí)際工作中，由于干式生化分析儀的質(zhì)控品價(jià)格較高并且不能反復(fù)凍溶，因此，可以利用正常人血清在普通濕式生化分析儀上檢測(cè)定值后，再到干式生化分析儀上進(jìn)行質(zhì)控檢查。 6 臨床應(yīng)用體會(huì) VITROS350是美國強(qiáng)生公司推出的用于急診生化的全自動(dòng)分析系統(tǒng)之一。它采用獨(dú)特的多層膜干化學(xué)技術(shù),能滿足臨床快速、準(zhǔn)確和靈活的要求,通過我們的臨床應(yīng)用,有以下體會(huì)。 6.1智能化故障指示 （1）環(huán)境報(bào)警VITROS350對(duì)溫度、濕度、干燥度要求較高,當(dāng)溫度或濕度超過范圍,儀器會(huì)自動(dòng)報(bào)警提示用戶及時(shí)更換干燥劑或保濕劑。換下的干燥劑或保濕劑可烘烤好反復(fù)使用(干燥劑100度密封烘烤8h,在南方保濕劑可60度密封烘烤6h)。 （2）吸樣報(bào)警VITROS350可以通過壓力傳感器對(duì)樣本的凝塊、氣泡進(jìn)行探測(cè),還可以自動(dòng)進(jìn)行液面感應(yīng)、短缺標(biāo)本的探測(cè),檢測(cè)到符合條件的標(biāo)本才能進(jìn)行正常測(cè)試。若標(biāo)本中有凝塊、氣泡或標(biāo)本放錯(cuò)位子,儀器感應(yīng)不到液面就會(huì)自動(dòng)報(bào)警,提示用戶對(duì)樣本重新進(jìn)行處理或檢查是否放錯(cuò)位置。 （3）樣本吸頭報(bào)警如果吸頭架上無吸頭或者吸頭不合格,儀器會(huì)在ACTION里報(bào)警,這里可以打開儀器,拿出起頭架,加上吸頭或拿掉不合格的吸頭,蓋上儀器蓋子,點(diǎn)擊初始化鍵即可恢復(fù)正常運(yùn)行。 （4）試劑干片被卡如未及時(shí)清理廢干片盒,導(dǎo)致廢干片盒內(nèi)干片過多而使正常使用過的干片無法正常被丟棄,這時(shí)儀器會(huì)報(bào)警,處理辦法:如果卡的干片量少就從廢干片盒上方將卡住的干片輕輕掏出;若被卡住的干片比較多就需要打開比色盤,將廢干片取出,然后點(diǎn)擊初始化鍵即可恢復(fù)正常運(yùn)行。 6.2實(shí)際工作中的發(fā)現(xiàn) （1）TBIL與BU、BC結(jié)果的一不致 由于干化學(xué)法不同于濕化學(xué)測(cè)定TBIL與DBIL在計(jì)算得出IBIL。而干化學(xué)則是分別測(cè)定TBIL、BU、BC的值,因此其測(cè)定結(jié)果會(huì)有一定誤差。 （2）CK、CKMB結(jié)果倒置 在檢測(cè)一些新生兒標(biāo)本和溶血標(biāo)本時(shí)常常會(huì)出現(xiàn)CK、CKMB倒置的現(xiàn)象,但稀釋5倍后再做均可避免此現(xiàn)象結(jié)果回到正常與濕化學(xué)結(jié)果相近。 6.3日常注意事項(xiàng) 為保證同一科室檢驗(yàn)結(jié)果的可比性,臨床應(yīng)用前,應(yīng)作比對(duì)實(shí)驗(yàn)。為確保儀器正常運(yùn)行,除必須按要求進(jìn)行每日、每周、每月固定的維護(hù)保養(yǎng)程序外,還需要注意以下的問題;每日更換參比液;定期或需要時(shí)更換干燥劑和保濕劑;清潔終點(diǎn)法白參考片;讀取濾光片的電壓參考讀數(shù)發(fā)現(xiàn)低于3mV時(shí),及時(shí)清潔光路系統(tǒng)或更換反射光度計(jì)的燈泡;做速率法反射光度的白/黑參考系數(shù)的校正;做終點(diǎn)法反射光度計(jì)的白參考系數(shù)的校正;讀取23塊防蒸發(fā)白色壓片的變異范圍使其不大于0.04并定期清潔更換,則能有效降低儀器的故障率