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第三節(jié) 動(dòng)物的克隆1下列關(guān)于細(xì)胞株與細(xì)胞系的敘述,不正確的是()a在傳代培養(yǎng)時(shí),必須用胰蛋白酶處理附壁生長(zhǎng)的細(xì)胞,使之成為單細(xì)胞b傳代培養(yǎng)的原因是培養(yǎng)瓶中的細(xì)胞密度過大或代謝消耗引起營(yíng)養(yǎng)枯竭 c連續(xù)細(xì)胞系是指發(fā)生了轉(zhuǎn)化的細(xì)胞系,失去了接觸抑制的現(xiàn)象d細(xì)胞株一般具有恒定的染色體組型,同工酶類型、病毒敏感性和生化特性等。 【解析】細(xì)胞系可泛指一般可能傳代的細(xì)胞。其中能夠連續(xù)傳代的細(xì)胞叫做連續(xù)細(xì)胞系或無限細(xì)胞系,不能連續(xù)培養(yǎng)的稱為有限細(xì)胞系。連續(xù)細(xì)胞系有的仍保留接觸抑制的現(xiàn)象,不是癌細(xì)胞。【答案】c2英國(guó)紐卡斯?fàn)柕纳飳W(xué)家卡里姆調(diào)制出一種化學(xué)物質(zhì)和維生素構(gòu)成的“雞尾酒”,在這種“雞尾酒”的培養(yǎng)環(huán)境里,人體干細(xì)胞能轉(zhuǎn)變?yōu)槌墒斓木?,整個(gè)培養(yǎng)過程是在含有co2的培養(yǎng)箱中進(jìn)行的。下列有關(guān)“雞尾酒”的成分和培養(yǎng)過程的敘述不正確的是()a產(chǎn)生的精細(xì)胞是高度分化的細(xì)胞b該培養(yǎng)過程在含有co2的培養(yǎng)箱中進(jìn)行的主要目的是滿足細(xì)胞對(duì)co2的需求c該“雞尾酒”的化學(xué)成分中應(yīng)有氨基酸、葡萄糖等營(yíng)養(yǎng)成分和激素等生命活動(dòng)調(diào)節(jié)的物質(zhì)d該實(shí)驗(yàn)不能證明動(dòng)物細(xì)胞具有全能性【解析】精細(xì)胞不再具有分裂能力,屬于高度分化的細(xì)胞;該過程在含有co2的培養(yǎng)箱中進(jìn)行是為了維持培養(yǎng)液ph的相對(duì)穩(wěn)定;該“雞尾酒”中含有動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)所需要的各種化學(xué)成分;細(xì)胞具有全能性是指細(xì)胞可以發(fā)育成一個(gè)完整的個(gè)體,此實(shí)驗(yàn)并沒有證明細(xì)胞具有全能性。【答案】b3下列動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過程中屬于原代培養(yǎng)的是()a用胰蛋白酶使組織分散成單個(gè)細(xì)胞的過程b從機(jī)體取得細(xì)胞后立即進(jìn)行培養(yǎng)的過程c出現(xiàn)接觸抑制現(xiàn)象后取下的細(xì)胞的培養(yǎng)過程d哺乳動(dòng)物細(xì)胞在培養(yǎng)基中的懸浮生長(zhǎng)過程【解析】原代培養(yǎng)是最初的細(xì)胞培養(yǎng),即還沒分瓶培養(yǎng)前的細(xì)胞培養(yǎng)?!敬鸢浮縝4某同學(xué)在學(xué)習(xí)“細(xì)胞工程”時(shí),列表比較了動(dòng)物、植物細(xì)胞工程的有關(guān)內(nèi)容,你認(rèn)為錯(cuò)誤的是()比較內(nèi)容植物細(xì)胞工程動(dòng)物細(xì)胞工程a理論基礎(chǔ)細(xì)胞的全能性細(xì)胞增殖b融合方法物理方法、化學(xué)方法、生物方法化學(xué)方法、生物方法c典型應(yīng)用人工種子、種間雜種植物單克隆抗體的制備d培養(yǎng)基區(qū)別蔗糖是離體組織賴以生長(zhǎng)的成分動(dòng)物血清不可缺少【解析】植物細(xì)胞工程常用的融合方法有物理方法、化學(xué)方法;動(dòng)物細(xì)胞工程常用的融合方法有物理方法、化學(xué)方法、生物方法(滅活的病毒)。z【答案】b5如圖表示單克隆抗體的制備過程,下列敘述不正確的是()a圖中有一處明顯錯(cuò)誤b中培養(yǎng)基應(yīng)加入選擇性抑制骨髓瘤細(xì)胞dna復(fù)制的物質(zhì)c中的篩選是為了獲得能產(chǎn)生多種抗體的雜交瘤細(xì)胞d可以稱為一個(gè)細(xì)胞系【解析】題圖中的錯(cuò)誤是提取b淋巴細(xì)胞的小鼠沒有經(jīng)過免疫;中需選擇出b淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合的細(xì)胞,因?yàn)楣撬枇黾?xì)胞能無限增殖,所以需在培養(yǎng)基中加入抑制其增殖的物質(zhì),以選擇出雜交瘤細(xì)胞;中的篩選是為了獲得能產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細(xì)胞;是由單個(gè)細(xì)胞增殖形成的細(xì)胞群,也可以稱為一個(gè)細(xì)胞系?!敬鸢浮縞6.下列關(guān)于動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的敘述,正確的是()a培養(yǎng)保留接觸抑制的細(xì)胞在培養(yǎng)瓶壁上可形成多層細(xì)胞b克隆培養(yǎng)法培養(yǎng)過程中多數(shù)細(xì)胞的基因型會(huì)發(fā)生改變c二倍體細(xì)胞的傳代培養(yǎng)次數(shù)通常是無限的d惡性細(xì)胞系的細(xì)胞可進(jìn)行傳代培養(yǎng)【審題導(dǎo)析】解答此題的關(guān)鍵必須明確二倍體核型的體細(xì)胞為有限細(xì)胞系,而異倍體核型細(xì)胞如惡性細(xì)胞系的細(xì)胞屬連續(xù)細(xì)胞系?!揪v精析】有接觸抑制的細(xì)胞只能形成單層細(xì)胞;克隆培養(yǎng)法培養(yǎng)的細(xì)胞可以是細(xì)胞株(遺傳物質(zhì)并未改變);二倍體細(xì)胞形成的是有限細(xì)胞系,傳代次數(shù)有限;惡性細(xì)胞系為無限細(xì)胞系可以傳代培養(yǎng)?!敬鸢浮縟7.某研究小組進(jìn)行藥物試驗(yàn)時(shí),以動(dòng)物肝細(xì)胞為材料,測(cè)定藥物對(duì)體外培養(yǎng)細(xì)胞的毒性。供培養(yǎng)的細(xì)胞有甲、乙兩種,甲細(xì)胞為肝腫瘤細(xì)胞、乙細(xì)胞為正常肝細(xì)胞。請(qǐng)回答下列有關(guān)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的問題。(1)將數(shù)量相等的甲細(xì)胞和乙細(xì)胞分別置于培養(yǎng)瓶中培養(yǎng),培養(yǎng)液及其他培養(yǎng)條件均相同。一中華.資*源%庫(kù) 段時(shí)間后,觀察到甲細(xì)胞數(shù)量比乙細(xì)胞數(shù)量_。(2)在動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí),通常在合成培養(yǎng)基中加入適量血清,其原因是_。細(xì)胞培養(yǎng)應(yīng)在含5%co2的恒溫培養(yǎng)箱中進(jìn)行,co2的作用是_。(3)在兩種細(xì)胞生長(zhǎng)過程中,當(dāng)乙細(xì)胞鋪滿瓶壁時(shí),其生長(zhǎng)_。藥物試驗(yàn)需要大量細(xì)胞,兩種細(xì)胞頻繁傳代,甲細(xì)胞比乙細(xì)胞可以傳代的次數(shù)更_。若用動(dòng)物的肝臟組織塊制備肝細(xì)胞懸液,需要_處理。(4)為了防止細(xì)胞培養(yǎng)過程中細(xì)菌的污染;可向培養(yǎng)液中加入適量的_?!緦忣}導(dǎo)析】由題干可獲取的信息有:(1)試驗(yàn)材料是肝細(xì)胞。(2)肝細(xì)胞有兩種,一種是肝腫瘤細(xì)胞,一種是正常的肝細(xì)胞。解答本題時(shí)需明確動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的過程、條件及應(yīng)用,再結(jié)合每小題作答?!揪v精析】癌細(xì)胞具有無限增殖的特點(diǎn),故相同培養(yǎng)條件下,肝腫瘤細(xì)胞數(shù)量多于正常肝細(xì)胞數(shù)量。動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)需提供無菌環(huán)境,如向培養(yǎng)液中加入適量的抗生素可防止細(xì)菌的污染;需提供一定的營(yíng)養(yǎng),如向培養(yǎng)基中加入適量血清,以便補(bǔ)充合成培養(yǎng)基中缺乏的物質(zhì);需提供一定的氣體環(huán)境,如向恒溫培養(yǎng)箱中加入5%的co2,目的是維持培養(yǎng)液的ph?!敬鸢浮?1)多(2)血清可以補(bǔ)充合成培養(yǎng)基中缺乏的物質(zhì)維持培養(yǎng)液的ph(3)停止多胰蛋白酶 (4)抗生素8.“治療性克隆”將是人胚胎干細(xì)胞(簡(jiǎn)稱es細(xì)胞)造福于人類的一種非常重要的途徑。應(yīng)用人胚胎干細(xì)胞進(jìn)行“治療性克隆”研究的技術(shù)途徑包括以下幾個(gè)步驟:首先取病人的體細(xì)胞核,移植到去核的成熟受體卵母細(xì)胞中;在早期胚胎形成后,從中分離獲得es細(xì)胞;對(duì)es細(xì)胞進(jìn)行基因修飾和定向分化研究,將定向分化后的細(xì)胞移植給病人。進(jìn)行核移植的目的并不是用于克隆人,而是希望通過對(duì)es細(xì)胞進(jìn)行分離培養(yǎng)、定向分化等處理后,進(jìn)一步獲得再造的人體組織或器官。請(qǐng)根據(jù)材料回答下列問題。(1)人類“治療性克隆”屬于動(dòng)物細(xì)胞工程的_技術(shù)。(中華.資*源%庫(kù) 2)科學(xué)家為何要將患者的體細(xì)胞核植入去核的卵母細(xì)胞中,而不直接用體細(xì)胞進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)?_。(3)“治療性克隆”的結(jié)果說明高度分化的體細(xì)胞的細(xì)胞核仍然具有_。相同的胚胎干細(xì)胞,“克隆”的結(jié)果各種各樣,如有的是胰島細(xì)胞,有的是血細(xì)胞,有的是心肌細(xì)胞,究其本質(zhì)原因是基因_的結(jié)果。(4)克隆的器官在給自身移植方面的主要優(yōu)點(diǎn)是_?!舅季S導(dǎo)圖】解答此題的思維流程如下:【精講精析】(1)依據(jù)“治療性克隆”的步驟分析,可知此技術(shù)屬于動(dòng)物細(xì)胞工程的細(xì)胞核移植技術(shù)。(2)動(dòng)物體細(xì)胞全能性隨著分化程度的提高而受到限制,而卵母細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)中含有促使其全能性表達(dá)的物質(zhì)。(3)“治療性克隆”可利用基因選擇性表達(dá)這一特點(diǎn)分化出各種組織或器官,同時(shí)此技術(shù)體現(xiàn)了動(dòng)物細(xì)胞核具有全能性。(4)自身移植的最大優(yōu)點(diǎn)是沒有免疫排斥反應(yīng)。【答案】 (1)動(dòng)物細(xì)胞核移植(2)體細(xì)胞核在體細(xì)胞中不能表達(dá)全能性,而卵母細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)可以為其提供表達(dá)全能性的環(huán)境(3)全能性選擇性表達(dá)(4)沒有免疫排斥反應(yīng)9.下圖表示單克隆抗體的制備過程,請(qǐng)回答下列問題。(1)圖中小鼠需經(jīng)過_才能用于單克隆抗體生產(chǎn)。(2)細(xì)胞a具有產(chǎn)生_的功能。細(xì)胞b的突出特點(diǎn)是_。誘導(dǎo)a、b細(xì)胞融合的誘導(dǎo)劑通常是_或聚乙二醇。(3)若細(xì)胞a的基因型為hh,細(xì)胞b的基因型為ss,生產(chǎn)的目標(biāo)應(yīng)是基因型為_的細(xì)胞。在兩兩融合后的眾多細(xì)胞中,基因的組合類型還可能有_。是否有可能出現(xiàn)三個(gè)或四個(gè)細(xì)胞融合在一起的現(xiàn)象?_??赏ㄟ^特定的_培養(yǎng)基將所需的融合細(xì)胞篩選出來。(4)培養(yǎng)液的配方通常含有葡萄糖、氨基酸、無機(jī)鹽、維生素,與植物細(xì)胞培養(yǎng)基有所不同的是,還含有_。細(xì)胞在培養(yǎng)瓶中貼壁生長(zhǎng),隨著細(xì)胞的增多,需要定期地用_處理使細(xì)胞從瓶壁上脫離下來,以便于分裝到更多的培養(yǎng)瓶中繼續(xù)培養(yǎng)。(5)單克隆抗體與常規(guī)抗體相比,具有_等特點(diǎn)。單克隆抗體與抗癌藥物結(jié)合制成“生物導(dǎo)彈”,可明顯減少用藥劑量和毒副作用,原因是_?!舅季S導(dǎo)圖】解答此題的思維流程如下: 【精講精析】b淋巴細(xì)胞能夠產(chǎn)生特異性抗體,但不能在體外大量增殖,骨髓瘤細(xì)胞能夠無限增殖但不能產(chǎn)生抗體,如果將二者融合成雜交瘤細(xì)胞,則不僅能夠在體外大量增殖,也能產(chǎn)生與相應(yīng)的免疫抗原特異性結(jié)合的抗體。通過特定的選擇性培養(yǎng)基將所需的雜交瘤細(xì)胞篩選出來,進(jìn)行克隆化培養(yǎng),便可大量制備單克隆抗體。單抗具有特異性強(qiáng)、靈敏度高的優(yōu)點(diǎn),通過其良好的導(dǎo)航功能,可攜帶抗癌藥物準(zhǔn)確作用于癌細(xì)胞,不僅減少了用藥劑量,而且也可最大限度地降低藥物的毒副作用?!敬鸢浮?1)特定抗原免疫(2)抗體能夠無限增殖滅活的(仙臺(tái))病毒(3)hhsshhhh、ssss是選擇(4)動(dòng)物血清胰蛋白酶z(5)特異性強(qiáng),靈敏度高,并可大量生產(chǎn)經(jīng)過癌細(xì)胞抗原免疫產(chǎn)生的單克隆抗體能夠與癌細(xì)胞特異性結(jié)合10.如圖是制備分泌抗x(h1n1流感病毒)抗體的過程,根據(jù)圖解回答問題:(1)給小鼠注射抗原的目的是_。(2)在單克隆抗體制備過程中之所以選用b淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞,是因?yàn)樗鼈內(nèi)诤虾蟮碾s交瘤細(xì)胞具有_的特性。(3)由圖中可看出,單克隆抗體制備過程運(yùn)用了_和_的動(dòng)物細(xì)胞工程技術(shù)手段。(4)在動(dòng)物細(xì)胞融合過程中,需要將所選取的組織細(xì)胞離散開,以利于細(xì)胞融合,可用_處理離體組織細(xì)胞使之分散。(5)請(qǐng)根據(jù)以下信息,設(shè)計(jì)一方法(不考慮機(jī)械方法),從培養(yǎng)液中篩選出雜交瘤細(xì)胞。已知細(xì)胞合成dna有d和s兩條途徑,其中d途徑能被氨基嘌呤阻斷。人淋巴細(xì)胞中有這兩種dna的合成途徑,但一般不分裂增殖。鼠骨髓瘤細(xì)胞中盡管只有d途徑,但能不斷分裂增殖,將這兩種細(xì)胞在試管中混合,加入聚乙二醇促融,獲得雜種細(xì)胞。方法:_。原理:_?!緦忣}導(dǎo)析】解答此題應(yīng)從以下兩點(diǎn)入手考慮:(1)由圖示的“融合”,“培養(yǎng)雜交瘤細(xì)胞”可知制備單抗過程涉及的生物技術(shù)有動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)和動(dòng)物細(xì)胞融合等。(2)由于氨基嘌呤對(duì)d途徑的阻斷,使雜交瘤細(xì)胞沿s途徑進(jìn)行而得以篩選?!揪v精析】(1)根據(jù)抗原抗體特異性結(jié)合的原理,為獲得特定抗體,用特定抗原刺激,小鼠體內(nèi)便可產(chǎn)生能產(chǎn)生特定抗體的漿細(xì)胞,即可獲得相應(yīng)的b淋巴細(xì)胞。(2)雜交瘤細(xì)胞具有兩種細(xì)胞的遺傳物質(zhì),既能產(chǎn)生特定抗體,又能無限增殖。(3)從圖中看出,單克隆抗體技術(shù)實(shí)際是應(yīng)用了動(dòng)物細(xì)胞融合和動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)。(4)細(xì)胞融合時(shí)是單個(gè)細(xì)胞和單個(gè)細(xì)胞的融合,為將細(xì)胞從動(dòng)物組織中離散,可用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理。(5)據(jù)題干信息可知,可在培養(yǎng)液中加氨基嘌呤,使d合成途徑阻斷,僅有d合成途徑的骨髓瘤細(xì)胞及其彼此融合的細(xì)胞不能增殖,而b淋巴細(xì)胞一般不增殖,但b淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合后的雜種細(xì)胞可以利用淋巴細(xì)胞中的s途徑合成dna而增殖?!敬鸢浮?1)獲得能產(chǎn)生相應(yīng)抗體的b淋巴細(xì)胞(2)既能無限增殖,又能產(chǎn)生特定抗體(3)動(dòng)物細(xì)胞融合 動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)(4)胰蛋白酶或膠原蛋白酶(5)方法:培養(yǎng)液中加入氨基嘌呤,收集增殖的細(xì)胞原理:加入氨基嘌呤后,使d合成途徑阻斷,僅有d合成途徑的骨髓瘤細(xì)胞及其彼此融合的細(xì)胞就不能增殖,但人的淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合后的雜種細(xì)胞可以利用b淋巴細(xì)胞中的s途徑合成dna而增殖11運(yùn)用動(dòng)物體細(xì)胞雜交技術(shù)可實(shí)現(xiàn)基因定位。研究發(fā)現(xiàn):用人的細(xì)胞與小鼠體細(xì)胞進(jìn)行雜交得到的雜種細(xì)胞含有雙方的染色體。雜種細(xì)胞在持續(xù)分裂過程中僅保留鼠的染色體而人類染色體則逐漸丟失,只剩一條或幾條。如圖是人的缺乏hgprt酶突變細(xì)胞株(hgprt)和小鼠的缺乏tk酶細(xì)胞株(tk)融合后并在hat培養(yǎng)液中培養(yǎng)的過程,結(jié)果表明最終人的染色體在融合細(xì)胞中僅有3號(hào)染色體或17號(hào)染色體或兩者都有。已知只有同時(shí)具有hgprt酶和tk酶的融合細(xì)胞才可在hat培養(yǎng)液中長(zhǎng)期存活與繁殖。(1)體細(xì)胞雜交突破了_,過程常用的生物方法是_。(2)過程中,為了防止細(xì)菌的污染,所用培養(yǎng)液應(yīng)該添加一定量的_,此外還要定期用_處理細(xì)胞,使貼壁生長(zhǎng)的細(xì)胞脫落形成細(xì)胞懸液。(3)從培養(yǎng)過程看,hat培養(yǎng)液不僅能提供養(yǎng)料,還起_作用。(4)從圖示結(jié)果看,可以確定人的_基因位于_號(hào)染色體;該方法可以對(duì)鼠基因定位嗎?_。【解析】(1)體細(xì)胞雜交具有突破有性雜交方法局限的優(yōu)點(diǎn),過程是細(xì)胞融合的過程,對(duì)于動(dòng)物細(xì)胞常采用滅活的病毒誘導(dǎo)融合。(2)為防止雜菌污染,在培養(yǎng)液中可加入一定量的抗生素
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