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第三節(jié) 動物的克隆1下列關于細胞株與細胞系的敘述,不正確的是()a在傳代培養(yǎng)時,必須用胰蛋白酶處理附壁生長的細胞,使之成為單細胞b傳代培養(yǎng)的原因是培養(yǎng)瓶中的細胞密度過大或代謝消耗引起營養(yǎng)枯竭 c連續(xù)細胞系是指發(fā)生了轉化的細胞系,失去了接觸抑制的現(xiàn)象d細胞株一般具有恒定的染色體組型,同工酶類型、病毒敏感性和生化特性等。 【解析】細胞系可泛指一般可能傳代的細胞。其中能夠連續(xù)傳代的細胞叫做連續(xù)細胞系或無限細胞系,不能連續(xù)培養(yǎng)的稱為有限細胞系。連續(xù)細胞系有的仍保留接觸抑制的現(xiàn)象,不是癌細胞?!敬鸢浮縞2英國紐卡斯爾的生物學家卡里姆調制出一種化學物質和維生素構成的“雞尾酒”,在這種“雞尾酒”的培養(yǎng)環(huán)境里,人體干細胞能轉變?yōu)槌墒斓木樱麄€培養(yǎng)過程是在含有co2的培養(yǎng)箱中進行的。下列有關“雞尾酒”的成分和培養(yǎng)過程的敘述不正確的是()a產生的精細胞是高度分化的細胞b該培養(yǎng)過程在含有co2的培養(yǎng)箱中進行的主要目的是滿足細胞對co2的需求c該“雞尾酒”的化學成分中應有氨基酸、葡萄糖等營養(yǎng)成分和激素等生命活動調節(jié)的物質d該實驗不能證明動物細胞具有全能性【解析】精細胞不再具有分裂能力,屬于高度分化的細胞;該過程在含有co2的培養(yǎng)箱中進行是為了維持培養(yǎng)液ph的相對穩(wěn)定;該“雞尾酒”中含有動物細胞培養(yǎng)所需要的各種化學成分;細胞具有全能性是指細胞可以發(fā)育成一個完整的個體,此實驗并沒有證明細胞具有全能性。【答案】b3下列動物細胞培養(yǎng)過程中屬于原代培養(yǎng)的是()a用胰蛋白酶使組織分散成單個細胞的過程b從機體取得細胞后立即進行培養(yǎng)的過程c出現(xiàn)接觸抑制現(xiàn)象后取下的細胞的培養(yǎng)過程d哺乳動物細胞在培養(yǎng)基中的懸浮生長過程【解析】原代培養(yǎng)是最初的細胞培養(yǎng),即還沒分瓶培養(yǎng)前的細胞培養(yǎng)?!敬鸢浮縝4某同學在學習“細胞工程”時,列表比較了動物、植物細胞工程的有關內容,你認為錯誤的是()比較內容植物細胞工程動物細胞工程a理論基礎細胞的全能性細胞增殖b融合方法物理方法、化學方法、生物方法化學方法、生物方法c典型應用人工種子、種間雜種植物單克隆抗體的制備d培養(yǎng)基區(qū)別蔗糖是離體組織賴以生長的成分動物血清不可缺少【解析】植物細胞工程常用的融合方法有物理方法、化學方法;動物細胞工程常用的融合方法有物理方法、化學方法、生物方法(滅活的病毒)。z【答案】b5如圖表示單克隆抗體的制備過程,下列敘述不正確的是()a圖中有一處明顯錯誤b中培養(yǎng)基應加入選擇性抑制骨髓瘤細胞dna復制的物質c中的篩選是為了獲得能產生多種抗體的雜交瘤細胞d可以稱為一個細胞系【解析】題圖中的錯誤是提取b淋巴細胞的小鼠沒有經過免疫;中需選擇出b淋巴細胞與骨髓瘤細胞融合的細胞,因為骨髓瘤細胞能無限增殖,所以需在培養(yǎng)基中加入抑制其增殖的物質,以選擇出雜交瘤細胞;中的篩選是為了獲得能產生特定抗體的雜交瘤細胞;是由單個細胞增殖形成的細胞群,也可以稱為一個細胞系?!敬鸢浮縞6.下列關于動物細胞培養(yǎng)的敘述,正確的是()a培養(yǎng)保留接觸抑制的細胞在培養(yǎng)瓶壁上可形成多層細胞b克隆培養(yǎng)法培養(yǎng)過程中多數細胞的基因型會發(fā)生改變c二倍體細胞的傳代培養(yǎng)次數通常是無限的d惡性細胞系的細胞可進行傳代培養(yǎng)【審題導析】解答此題的關鍵必須明確二倍體核型的體細胞為有限細胞系,而異倍體核型細胞如惡性細胞系的細胞屬連續(xù)細胞系?!揪v精析】有接觸抑制的細胞只能形成單層細胞;克隆培養(yǎng)法培養(yǎng)的細胞可以是細胞株(遺傳物質并未改變);二倍體細胞形成的是有限細胞系,傳代次數有限;惡性細胞系為無限細胞系可以傳代培養(yǎng)?!敬鸢浮縟7.某研究小組進行藥物試驗時,以動物肝細胞為材料,測定藥物對體外培養(yǎng)細胞的毒性。供培養(yǎng)的細胞有甲、乙兩種,甲細胞為肝腫瘤細胞、乙細胞為正常肝細胞。請回答下列有關動物細胞培養(yǎng)的問題。(1)將數量相等的甲細胞和乙細胞分別置于培養(yǎng)瓶中培養(yǎng),培養(yǎng)液及其他培養(yǎng)條件均相同。一中華.資*源%庫 段時間后,觀察到甲細胞數量比乙細胞數量_。(2)在動物細胞培養(yǎng)時,通常在合成培養(yǎng)基中加入適量血清,其原因是_。細胞培養(yǎng)應在含5%co2的恒溫培養(yǎng)箱中進行,co2的作用是_。(3)在兩種細胞生長過程中,當乙細胞鋪滿瓶壁時,其生長_。藥物試驗需要大量細胞,兩種細胞頻繁傳代,甲細胞比乙細胞可以傳代的次數更_。若用動物的肝臟組織塊制備肝細胞懸液,需要_處理。(4)為了防止細胞培養(yǎng)過程中細菌的污染;可向培養(yǎng)液中加入適量的_?!緦忣}導析】由題干可獲取的信息有:(1)試驗材料是肝細胞。(2)肝細胞有兩種,一種是肝腫瘤細胞,一種是正常的肝細胞。解答本題時需明確動物細胞培養(yǎng)的過程、條件及應用,再結合每小題作答?!揪v精析】癌細胞具有無限增殖的特點,故相同培養(yǎng)條件下,肝腫瘤細胞數量多于正常肝細胞數量。動物細胞培養(yǎng)需提供無菌環(huán)境,如向培養(yǎng)液中加入適量的抗生素可防止細菌的污染;需提供一定的營養(yǎng),如向培養(yǎng)基中加入適量血清,以便補充合成培養(yǎng)基中缺乏的物質;需提供一定的氣體環(huán)境,如向恒溫培養(yǎng)箱中加入5%的co2,目的是維持培養(yǎng)液的ph。【答案】(1)多(2)血清可以補充合成培養(yǎng)基中缺乏的物質維持培養(yǎng)液的ph(3)停止多胰蛋白酶 (4)抗生素8.“治療性克隆”將是人胚胎干細胞(簡稱es細胞)造福于人類的一種非常重要的途徑。應用人胚胎干細胞進行“治療性克隆”研究的技術途徑包括以下幾個步驟:首先取病人的體細胞核,移植到去核的成熟受體卵母細胞中;在早期胚胎形成后,從中分離獲得es細胞;對es細胞進行基因修飾和定向分化研究,將定向分化后的細胞移植給病人。進行核移植的目的并不是用于克隆人,而是希望通過對es細胞進行分離培養(yǎng)、定向分化等處理后,進一步獲得再造的人體組織或器官。請根據材料回答下列問題。(1)人類“治療性克隆”屬于動物細胞工程的_技術。(中華.資*源%庫 2)科學家為何要將患者的體細胞核植入去核的卵母細胞中,而不直接用體細胞進行細胞培養(yǎng)?_。(3)“治療性克隆”的結果說明高度分化的體細胞的細胞核仍然具有_。相同的胚胎干細胞,“克隆”的結果各種各樣,如有的是胰島細胞,有的是血細胞,有的是心肌細胞,究其本質原因是基因_的結果。(4)克隆的器官在給自身移植方面的主要優(yōu)點是_?!舅季S導圖】解答此題的思維流程如下:【精講精析】(1)依據“治療性克隆”的步驟分析,可知此技術屬于動物細胞工程的細胞核移植技術。(2)動物體細胞全能性隨著分化程度的提高而受到限制,而卵母細胞的細胞質中含有促使其全能性表達的物質。(3)“治療性克隆”可利用基因選擇性表達這一特點分化出各種組織或器官,同時此技術體現(xiàn)了動物細胞核具有全能性。(4)自身移植的最大優(yōu)點是沒有免疫排斥反應?!敬鸢浮?(1)動物細胞核移植(2)體細胞核在體細胞中不能表達全能性,而卵母細胞的細胞質可以為其提供表達全能性的環(huán)境(3)全能性選擇性表達(4)沒有免疫排斥反應9.下圖表示單克隆抗體的制備過程,請回答下列問題。(1)圖中小鼠需經過_才能用于單克隆抗體生產。(2)細胞a具有產生_的功能。細胞b的突出特點是_。誘導a、b細胞融合的誘導劑通常是_或聚乙二醇。(3)若細胞a的基因型為hh,細胞b的基因型為ss,生產的目標應是基因型為_的細胞。在兩兩融合后的眾多細胞中,基因的組合類型還可能有_。是否有可能出現(xiàn)三個或四個細胞融合在一起的現(xiàn)象?_??赏ㄟ^特定的_培養(yǎng)基將所需的融合細胞篩選出來。(4)培養(yǎng)液的配方通常含有葡萄糖、氨基酸、無機鹽、維生素,與植物細胞培養(yǎng)基有所不同的是,還含有_。細胞在培養(yǎng)瓶中貼壁生長,隨著細胞的增多,需要定期地用_處理使細胞從瓶壁上脫離下來,以便于分裝到更多的培養(yǎng)瓶中繼續(xù)培養(yǎng)。(5)單克隆抗體與常規(guī)抗體相比,具有_等特點。單克隆抗體與抗癌藥物結合制成“生物導彈”,可明顯減少用藥劑量和毒副作用,原因是_?!舅季S導圖】解答此題的思維流程如下: 【精講精析】b淋巴細胞能夠產生特異性抗體,但不能在體外大量增殖,骨髓瘤細胞能夠無限增殖但不能產生抗體,如果將二者融合成雜交瘤細胞,則不僅能夠在體外大量增殖,也能產生與相應的免疫抗原特異性結合的抗體。通過特定的選擇性培養(yǎng)基將所需的雜交瘤細胞篩選出來,進行克隆化培養(yǎng),便可大量制備單克隆抗體。單抗具有特異性強、靈敏度高的優(yōu)點,通過其良好的導航功能,可攜帶抗癌藥物準確作用于癌細胞,不僅減少了用藥劑量,而且也可最大限度地降低藥物的毒副作用?!敬鸢浮?1)特定抗原免疫(2)抗體能夠無限增殖滅活的(仙臺)病毒(3)hhsshhhh、ssss是選擇(4)動物血清胰蛋白酶z(5)特異性強,靈敏度高,并可大量生產經過癌細胞抗原免疫產生的單克隆抗體能夠與癌細胞特異性結合10.如圖是制備分泌抗x(h1n1流感病毒)抗體的過程,根據圖解回答問題:(1)給小鼠注射抗原的目的是_。(2)在單克隆抗體制備過程中之所以選用b淋巴細胞和骨髓瘤細胞,是因為它們融合后的雜交瘤細胞具有_的特性。(3)由圖中可看出,單克隆抗體制備過程運用了_和_的動物細胞工程技術手段。(4)在動物細胞融合過程中,需要將所選取的組織細胞離散開,以利于細胞融合,可用_處理離體組織細胞使之分散。(5)請根據以下信息,設計一方法(不考慮機械方法),從培養(yǎng)液中篩選出雜交瘤細胞。已知細胞合成dna有d和s兩條途徑,其中d途徑能被氨基嘌呤阻斷。人淋巴細胞中有這兩種dna的合成途徑,但一般不分裂增殖。鼠骨髓瘤細胞中盡管只有d途徑,但能不斷分裂增殖,將這兩種細胞在試管中混合,加入聚乙二醇促融,獲得雜種細胞。方法:_。原理:_?!緦忣}導析】解答此題應從以下兩點入手考慮:(1)由圖示的“融合”,“培養(yǎng)雜交瘤細胞”可知制備單抗過程涉及的生物技術有動物細胞培養(yǎng)和動物細胞融合等。(2)由于氨基嘌呤對d途徑的阻斷,使雜交瘤細胞沿s途徑進行而得以篩選?!揪v精析】(1)根據抗原抗體特異性結合的原理,為獲得特定抗體,用特定抗原刺激,小鼠體內便可產生能產生特定抗體的漿細胞,即可獲得相應的b淋巴細胞。(2)雜交瘤細胞具有兩種細胞的遺傳物質,既能產生特定抗體,又能無限增殖。(3)從圖中看出,單克隆抗體技術實際是應用了動物細胞融合和動物細胞培養(yǎng)技術。(4)細胞融合時是單個細胞和單個細胞的融合,為將細胞從動物組織中離散,可用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理。(5)據題干信息可知,可在培養(yǎng)液中加氨基嘌呤,使d合成途徑阻斷,僅有d合成途徑的骨髓瘤細胞及其彼此融合的細胞不能增殖,而b淋巴細胞一般不增殖,但b淋巴細胞和骨髓瘤細胞融合后的雜種細胞可以利用淋巴細胞中的s途徑合成dna而增殖?!敬鸢浮?1)獲得能產生相應抗體的b淋巴細胞(2)既能無限增殖,又能產生特定抗體(3)動物細胞融合 動物細胞培養(yǎng)(4)胰蛋白酶或膠原蛋白酶(5)方法:培養(yǎng)液中加入氨基嘌呤,收集增殖的細胞原理:加入氨基嘌呤后,使d合成途徑阻斷,僅有d合成途徑的骨髓瘤細胞及其彼此融合的細胞就不能增殖,但人的淋巴細胞和骨髓瘤細胞融合后的雜種細胞可以利用b淋巴細胞中的s途徑合成dna而增殖11運用動物體細胞雜交技術可實現(xiàn)基因定位。研究發(fā)現(xiàn):用人的細胞與小鼠體細胞進行雜交得到的雜種細胞含有雙方的染色體。雜種細胞在持續(xù)分裂過程中僅保留鼠的染色體而人類染色體則逐漸丟失,只剩一條或幾條。如圖是人的缺乏hgprt酶突變細胞株(hgprt)和小鼠的缺乏tk酶細胞株(tk)融合后并在hat培養(yǎng)液中培養(yǎng)的過程,結果表明最終人的染色體在融合細胞中僅有3號染色體或17號染色體或兩者都有。已知只有同時具有hgprt酶和tk酶的融合細胞才可在hat培養(yǎng)液中長期存活與繁殖。(1)體細胞雜交突破了_,過程常用的生物方法是_。(2)過程中,為了防止細菌的污染,所用培養(yǎng)液應該添加一定量的_,此外還要定期用_處理細胞,使貼壁生長的細胞脫落形成細胞懸液。(3)從培養(yǎng)過程看,hat培養(yǎng)液不僅能提供養(yǎng)料,還起_作用。(4)從圖示結果看,可以確定人的_基因位于_號染色體;該方法可以對鼠基因定位嗎?_?!窘馕觥?1)體細胞雜交具有突破有性雜交方法局限的優(yōu)點,過程是細胞融合的過程,對于動物細胞常采用滅活的病毒誘導融合。(2)為防止雜菌污染,在培養(yǎng)液中可加入一定量的抗生素
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