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1以下關(guān)于豬血紅蛋白提純的描述,不正確的是()a洗滌紅細(xì)胞時(shí),使用生理鹽水可防止紅細(xì)胞破裂b豬成熟紅細(xì)胞中缺少細(xì)胞器和細(xì)胞核,提純時(shí)雜蛋白較少c血紅蛋白的顏色可用于凝膠色譜法分離過程的監(jiān)測d在凝膠色譜法分離過程中,血紅蛋白比相對分子質(zhì)量較小的雜蛋白移動慢解析大分子物質(zhì)由于分子直徑較大,不易進(jìn)入凝膠顆粒的微孔,而只能分布在顆粒之間,所以在洗脫時(shí)向下移動的速度較快,相反,分子質(zhì)量較小的物質(zhì)向下移動速度較慢。答案d2(2012寧夏銀川模擬)相對分子質(zhì)量不同的兩種蛋白質(zhì)在凝膠色譜柱中的行進(jìn)過程,可表示為如圖中的哪一個(gè)()解析相對分子質(zhì)量較大的蛋白質(zhì)只能從凝膠間隙通過,路程短,速度快,先到達(dá)色譜柱的下端;相對分子質(zhì)量較小的蛋白質(zhì)可進(jìn)入凝膠顆粒內(nèi)部的通道,路程遠(yuǎn),速度慢,后到達(dá)色譜柱的下端。答案b3下列關(guān)于pcr的描述中,正確的是()pcr是一種酶促反應(yīng)引物決定了擴(kuò)增的特異性擴(kuò)增dna利用了熱變性的原理擴(kuò)增的對象是氨基酸序列abc d解析pcr是一種體外迅速擴(kuò)增dna片段的技術(shù),在高溫條件下,把dna的雙鏈打開,緩慢冷卻后,又重新結(jié)合,需要耐高溫dna聚合酶,同時(shí),還需要引物,從引物的3端連接脫氧核苷酸。答案d4(2012南通聯(lián)考)多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(pcr技術(shù))是體外酶促合成特異dna片段的一種方法,由高溫變性、低溫退火及適溫延伸等幾步反應(yīng)組成一個(gè)周期,循環(huán)進(jìn)行,使目的dna得以迅速擴(kuò)增,其簡要過程如右圖所示。下列關(guān)于pcr技術(shù)敘述不正確的是()apcr技術(shù)是在實(shí)驗(yàn)室中以少量dna制備大量dna的技術(shù)b反應(yīng)中新合成的dna又可以作為下一輪反應(yīng)的模板cpcr技術(shù)中以核糖核苷酸為原料,以指數(shù)方式擴(kuò)增d應(yīng)用pcr技術(shù)與探針雜交技術(shù)可以檢測基因突變解析pcr技術(shù)是人工合成dna的方法,原料是脫氧核苷酸而不是核糖核苷酸。答案c5已知某樣品中存在甲、乙、丙、丁、戊五種蛋白質(zhì)分子,其分子大小、所帶電荷的性質(zhì)和數(shù)量情況如圖所示,下列有關(guān)該樣品中蛋白質(zhì)的分離的敘述正確的是()a將樣品裝入透析袋中透析12 h,若分子乙保留在袋內(nèi),則分子丙也保留在袋內(nèi)b若用凝膠色譜柱分離樣品中的蛋白質(zhì),則分子甲移動速度最快c若將樣品以2 000 r/min的速度離心10 min,分子戊存在于沉淀中,則分子甲也存在于沉淀中d若用sds聚丙烯酰胺凝膠電泳分離樣品中的蛋白質(zhì)分子,則分子甲和分子戊形成的電泳帶相距最遠(yuǎn)解析分子甲的分子量最小,進(jìn)入凝膠內(nèi)部通道而移動速度慢;分子乙留在透析袋內(nèi),說明其相對分子質(zhì)量比較大,分子丙比分子乙相對分子質(zhì)量大,所以分子丙也留在袋內(nèi);分子戊比分子甲的分子量大,分子甲可能不存在于沉淀物中;sds聚丙烯酰胺凝膠電泳中的樣品,其電泳遷移率完全取決于分子的大小,分子量相差越大,形成的電泳帶相距越遠(yuǎn)。答案a6生物產(chǎn)品的分離、純化是現(xiàn)代生物技術(shù)中一種常見的技術(shù)。下列關(guān)于物質(zhì)提取、純化原理的敘述中,不正確的是()a采用凝膠色譜法分離果膠酶的原理是蛋白質(zhì)分子的相對分子質(zhì)量不同,在色譜柱中的移動速度不同b使用透析法可以去除樣品中相對分子質(zhì)量較大的雜質(zhì)c電泳法是利用樣品中各種分子帶電性質(zhì)和數(shù)量以及樣品分子大小不同,產(chǎn)生的遷移速度不同而實(shí)現(xiàn)樣品中各種分子的分離d離心法分離蛋白質(zhì)的依據(jù)是不同大小的分子離心時(shí)沉降速度不同解析本題考查有關(guān)物質(zhì)提取、純化的原理,意在考查考生的理解能力。透析的原理是小分子能夠通過半透膜,利用透析法可以去除樣品中相對分子質(zhì)量較小的雜質(zhì)。答案b7(2012江蘇南通一模)下列有關(guān)“血紅蛋白提取和分離”的相關(guān)敘述中,正確的是()a用蒸餾水進(jìn)行紅細(xì)胞的洗滌,其目的是去除細(xì)胞表面雜蛋白b將血紅蛋白溶液進(jìn)行透析,其目的是去除相對分子質(zhì)量較大的雜質(zhì)c血紅蛋白釋放時(shí)加入有機(jī)溶劑,其目的是使血紅蛋白溶于有機(jī)溶劑 d整個(gè)過程不斷用磷酸緩沖液處理,是為了維持血紅蛋白的結(jié)構(gòu)解析紅細(xì)胞的洗滌用的是生理鹽水,其目的是去除血漿蛋白等雜質(zhì),有利于后續(xù)步驟的分離純化;而本實(shí)驗(yàn)中蒸餾水的作用是漲破紅細(xì)胞,使血紅蛋白釋放。將血紅蛋白溶液進(jìn)行透析,其目的是去除相對分子質(zhì)量較小的雜質(zhì)。血紅蛋白釋放時(shí)加入有機(jī)溶劑,其目的是溶解細(xì)胞膜。 整個(gè)過程不斷用磷酸緩沖液處理,是為了維持血紅蛋白的結(jié)構(gòu)。答案d8(2012惠州模擬)pcr(多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng))技術(shù)是一項(xiàng)在生物體外復(fù)制特定的dna片段的核酸合成技術(shù),如圖表示合成過程,請據(jù)圖分析回答:(1)a過程高溫使dna變性解旋,對該過程的原理敘述,正確的是_。a該過程用到耐高溫的解旋酶破壞氫鍵b該過程用到限制酶破壞磷酸二酯鍵c該過程不需要解旋酶的作用d該過程與人體細(xì)胞的過程完全相同(2)c過程要用到的酶是_。這種酶在高溫下仍保持活性,因此在pcr擴(kuò)增時(shí)可以_加入,_(需要/不需要)再添加。pcr反應(yīng)除提供酶外,還需要滿足的基本條件有:_。(3)如果把模板dna的兩條鏈用15n標(biāo)記,游離的脫氧核苷酸不做標(biāo)記,控制“94 55 72 ”溫度循環(huán)3次,則在形成的子代dna中含有15n標(biāo)記的dna占_。(4)如果模板dna分子共有a個(gè)堿基對,其中含有胞嘧啶m個(gè),則該dna復(fù)制10次,需要加入胸腺嘧啶脫氧核苷酸_個(gè)。(5)pcr中由堿基錯(cuò)配引起的變異屬于_。假設(shè)對一個(gè)dna進(jìn)行擴(kuò)增,第一次循環(huán)時(shí)某一條模板鏈上發(fā)生堿基錯(cuò)配,則擴(kuò)增若干次后檢測所有dna的擴(kuò)增片段,與原dna相應(yīng)片段相同的占_。解析(1)高溫所起的作用類似于解旋酶,使雙鏈dna變?yōu)閱捂湣?2)c過程為pcr技術(shù)的延伸階段,當(dāng)系統(tǒng)溫度上升至72 左右,溶液中的四種脫氧核苷酸在dna聚合酶的作用下合成新的dna鏈。dna聚合酶是耐熱的,高溫下不變性,所以一次性加入即可。(3)pcr技術(shù)遵循半保留復(fù)制的特點(diǎn)。經(jīng)過三次循環(huán),共產(chǎn)生23個(gè)dna分子,其中有2個(gè)dna分子含有15n標(biāo)記。(4)在一個(gè)雙鏈dna分子中,ct占堿基總數(shù)的一半,故t的數(shù)目為am,復(fù)制10次,相當(dāng)于新增加了2101個(gè)dna分子。故需補(bǔ)充t的數(shù)目為(2101)(am)。(5)基因中的堿基對改變屬于基因突變。對一個(gè)dna進(jìn)行擴(kuò)增,第一次循環(huán)時(shí)某一條模板鏈上發(fā)生堿基錯(cuò)配,以后按正常配對方式進(jìn)行擴(kuò)增,錯(cuò)配鏈作模板擴(kuò)增的都是錯(cuò)誤的dna分子,原正常鏈擴(kuò)增得到的dna分子都是正常的dna分子,故若干次后檢測所有dna的擴(kuò)增片段,與原dna相應(yīng)片段相同的占1/2。答案(1)c(2)dna聚合酶一次不需要dna模板,分別與兩條模板鏈相結(jié)合的兩種引物,四種脫氧核苷酸,同時(shí)通過控制溫度使dna復(fù)制在體外反復(fù)進(jìn)行(3)(4)(2101)(am)(5)基因突變9現(xiàn)代生物學(xué)已向兩個(gè)方向發(fā)展,宏觀研究的水平為生態(tài)系統(tǒng)水平,微觀研究的水平為分子水平,對于分子的研究,其物質(zhì)的提取和分離顯得尤為重要。下面是物質(zhì)提取和分離的相關(guān)問題,請回答:(一)dna分子的提取和分離(1)在提取菜花細(xì)胞中的dna時(shí),采用的研磨法,為什么不能像用雞血那樣,用蒸餾水使其破裂?_。(2)在提取實(shí)驗(yàn)過程中用到兩種濃度的nacl溶液,說明其作用:2 mol/lnacl溶液:_;0.14 mol/lnacl溶液:_。(3)在整個(gè)操作過程中,每100 ml血液中加入3 g檸檬酸鈉的作用是:_。(4)鑒定dna所用的試劑:_。(二)血紅蛋白的提取和分離(1)在血紅蛋白的提取和分離過程中:粗分離、純化和純度鑒定時(shí),都會用到緩沖溶液,其作用是_。(2)在洗脫過程中,對洗脫液的流速要求穩(wěn)定的目的是:_。(三)不同的化學(xué)物質(zhì),其理化特性不同,提取方法也有所差異,如胡蘿卜素不溶于水,易溶于_,因此可以用_方法進(jìn)行提取。解析(一)(1)dna分子提取中理想的材料為富含dna的細(xì)胞,動物中雞血紅細(xì)胞具有細(xì)胞核,放入蒸餾水中會使細(xì)胞漲破釋放出dna,而植物細(xì)胞含有細(xì)胞壁不能因吸水而漲破。(2)實(shí)驗(yàn)過程中兩次用到nacl溶液,初次為2 mol/l的nacl溶液,用于溶解dna,而0.14 mol/l的nacl溶液會使dna析出。(3)為了防止凝血現(xiàn)象的發(fā)生應(yīng)加入檸檬酸鈉。(4)鑒定dna所用的試劑為二苯胺試劑。(二)(1)為保持蛋白質(zhì)的生理活性,防止變性從而用緩沖液保持ph的恒定。(2)洗脫液的流速變化過快,使操作壓變化過大,從而使洗脫物質(zhì)的下降速率變化過大,導(dǎo)致分離純化不充分。(三)胡蘿卜素的化學(xué)性質(zhì)比較穩(wěn)定,不溶于水,易溶于有機(jī)溶劑。因此可以用有機(jī)溶劑作萃取劑,以萃取的方法來提取。答案(一)(1)植物細(xì)胞具有細(xì)胞壁,不會吸水漲破,只有通過研磨,才能釋放出dna(2)溶解dna分子,過濾并除去不溶于nacl溶液的雜質(zhì)使dna分子析出,過濾并除去溶于nacl溶液中的雜質(zhì)(3)防止出現(xiàn)凝血(4)二苯胺試劑(二)(1)維持血紅蛋白環(huán)境中的ph的穩(wěn)定(2)維持操作壓的穩(wěn)定(三)有機(jī)溶劑有機(jī)溶劑萃取10(2012山東理綜)辣椒素作為一種生物堿廣泛用于食品保健、醫(yī)藥工業(yè)等領(lǐng)域。辣椒素的獲得途徑如圖。(1)圖中和分別表示辣椒組織培養(yǎng)中細(xì)胞的_和_過程。(2)圖中培養(yǎng)外植體的培養(yǎng)基中常用的凝固劑是_。培養(yǎng)基中的生長素和細(xì)胞分裂素用量的比值_(填“高”或“低”)時(shí),有利于芽的分化。對培養(yǎng)基徹底滅菌時(shí),應(yīng)采取的滅菌方法是_。(3)圖中外植體的消毒所需酒精的體積分?jǐn)?shù)是_。用酶解法將愈傷組織分離成單細(xì)胞時(shí),常用的酶_和纖維素酶。(4)提取辣椒素過程中,萃取加熱時(shí)需安裝冷凝回流裝置,其目的是_。解析(1)由高度分化的植物組織或細(xì)胞產(chǎn)生愈傷組織的過程稱為脫分化,對脫分化產(chǎn)生的愈傷組織繼續(xù)進(jìn)行培養(yǎng),又可重新分化出根或芽等器官,這個(gè)過程叫做再分化。(2)培養(yǎng)基中常用的凝固劑是瓊脂。同時(shí)使用生長素和細(xì)胞分裂素時(shí),兩者用量的比值大小影響植物細(xì)胞的發(fā)育方向,生長素和細(xì)胞分裂素用量的比值低時(shí),有利于芽的分化;反之,有利于根的分化。培養(yǎng)基應(yīng)用高壓蒸汽滅菌法滅菌。(3)外植體消毒所用酒精的體積分?jǐn)?shù)是70%。酶解法將愈傷組織分離成單細(xì)胞所用的酶是果膠酶和纖維素酶。(4)用萃取法提取植物有效成分時(shí),應(yīng)在瓶口安裝冷凝回流裝置,目的是防止加熱時(shí)有機(jī)溶劑的揮發(fā)。答案(1)脫分化(或去分化)再分化(2)瓊脂低高壓蒸汽滅菌(3)70%果膠酶(4)防止有機(jī)溶劑的揮發(fā)11隨著人類基因組計(jì)劃的進(jìn)展和多種生物基因組測序工作的完成,人類跨入了后基因組和蛋白質(zhì)組時(shí)代。對蛋白質(zhì)進(jìn)行研究時(shí),首先要獲得純度較高的蛋白質(zhì)。下圖是某生物興趣小組在“蛋白質(zhì)的提取和分離”實(shí)驗(yàn)中,準(zhǔn)備從豬的血液中初步提取血紅蛋白,設(shè)計(jì)的“血紅蛋白提取、分離流程圖”:請回答下列有關(guān)問題:(1)樣品處理中紅細(xì)胞的洗滌要用_反復(fù)沖洗、離心。向紅細(xì)胞懸液中加入一定量的低濃度ph7.0的緩沖液并充分?jǐn)嚢?,可以破碎紅細(xì)胞,破碎細(xì)胞的原理是_。(2)血紅蛋白粗分離階段,透析的目的是_,若要盡快達(dá)到理想的透析效果,可以_(寫出一種方法)。(3)電泳利用了待分離樣品中各種分子的_等的差異,而產(chǎn)生不同遷移速度,實(shí)現(xiàn)各種分子的分離。(4)一同學(xué)通過血紅蛋白醋酸纖維薄膜電泳,觀察到正常人和鐮刀型細(xì)胞貧血癥患者的血紅蛋白電泳結(jié)果如上圖所示。由圖可知攜帶者有_種血紅蛋白,從分子遺傳學(xué)的角度作出的解釋是_。解析(1)洗滌紅細(xì)胞所用的溶液是生理鹽水,根據(jù)滲透作用原理,將紅細(xì)胞置于低滲溶液中,紅細(xì)胞會吸水漲破,釋放出血紅蛋白。(2)血紅蛋白粗分離階段,透析的目的是除去樣品中的小分子雜質(zhì);可通過增加緩沖液的量或及時(shí)更換緩沖液等方法縮短透析時(shí)間,能盡快達(dá)到理想的透析效果。(3)由于各種分子帶電性質(zhì)以及分子大小、形狀等的差異,在電泳過程中會產(chǎn)生不同的遷移速度,從而實(shí)現(xiàn)各種分子的分離。(4)根據(jù)圖示可知,鐮刀型細(xì)胞貧血癥的攜帶者含有兩種血紅蛋白,原因是攜帶者具有(控制血紅蛋白的)一對等位基因,分別控制合成兩種不同的蛋白質(zhì)。答案(1)生理鹽水滲透原理(當(dāng)外界溶液濃度低于動物細(xì)胞內(nèi)液濃度時(shí),細(xì)胞吸水漲破)(2)除去小分子雜質(zhì)增加緩沖液的量或及時(shí)更換緩沖液(3)帶電性質(zhì)以及分子大小、形狀(4)2攜帶者具有(控制血紅蛋白的)一對等位基因,可以控制合成兩種不同的蛋白質(zhì)12下圖是利用pcr技術(shù)和電泳技術(shù)進(jìn)行的某一次親子鑒定結(jié)果圖譜,請根據(jù)圖譜和所學(xué)知識回答問題。(1)pcr技術(shù)能把某一dna分子片段進(jìn)行擴(kuò)增。它是利用了dna的_原理,通過控制_來控制dna_與結(jié)合。(2)利用pcr技術(shù)擴(kuò)增dna的過程中還需要_酶的作用,但它必須在相應(yīng)的_的作用下才能完成對dna的復(fù)制。假若有一段dna序列為:5gttaaccttag33caattggaatc5所用引物為:5gttaoh,則引物為:_。(3)圖是把含有21個(gè)氨基酸的多肽進(jìn)行水解,得到的氨基酸混合物進(jìn)行電泳的結(jié)果,故可推知該多肽由_種氨基酸構(gòu)成。(4)圖為通過提取某小孩和其母親,以及待測定的四位男性的dna,分別由酶處理后,生成含有若干dna片段,并進(jìn)行擴(kuò)增得到的混合物,然后進(jìn)行電泳所得到的一組dna指紋圖譜,請分析:f1f4中,你認(rèn)為圖中_是該小孩真正生物學(xué)上的父親。為什么?_。解析pcr技術(shù)是在體外模擬體內(nèi)dna復(fù)制過程,利用dna的熱變性原理,替代原有的解旋酶的作用,增加了耐高溫的dna聚合酶,但是要提供現(xiàn)成的引物,引物序列和目的基因的兩端的堿基互補(bǔ)配對。氨基酸混合物進(jìn)行電泳時(shí),相同的氨基酸因?yàn)橄鄬Ψ肿淤|(zhì)量和所帶電荷數(shù)相同,所以在凝膠上只出現(xiàn)1條帶,圖所示圖譜出現(xiàn)6條帶,所以該多肽由6種氨基酸組成。從遺傳角度分析,兒子的dna一半來自父方,一半來自母方,仔細(xì)觀察圖不難發(fā)現(xiàn),f1f4中f1、f3、f4不可能是孩子的父親,c和f2兩者之間的dna指紋圖譜相同,所以f2最可能是其父親。答案(1)熱變性溫度解旋(2)dna聚合引物5ctaaoh(3)6(4)f2因?yàn)閏和f2兩者之間的dna指紋圖譜相同教 師 備 用 資 源1.下列有關(guān)生物技術(shù)在實(shí)踐中的應(yīng)用的敘述,正確的是()a制葡萄醋的溫度要比制葡萄酒的溫度高些b在任何條件下使用加酶洗衣粉洗衣效果都比普通的洗衣粉好c凝膠色譜法是一種根據(jù)不同蛋白質(zhì)對光的吸收率不同而分離蛋白質(zhì)的有效方法d固定化細(xì)胞比固定化酶的催化效率高,適用于所有生產(chǎn)過程解析酵母菌酒精發(fā)酵最適的溫度為1825 ,醋酸菌的最適溫度為3035 。加酶洗衣粉在酶催化的最適溫度時(shí),洗衣效果最好。凝膠色譜法是一種根據(jù)蛋白質(zhì)分子大小不同而分離蛋白質(zhì)的有效方法。固定化細(xì)胞固定的是一系列酶,固定化酶固定的是一種酶,兩者適用于不同的生產(chǎn)過程。答案a2關(guān)于影響花藥培養(yǎng)的因素的說法,不正確的是()a材料選取和消毒是花粉植株誘導(dǎo)成功的關(guān)鍵b選擇盛開的或略微開放的花作實(shí)驗(yàn)材料c親本植株的生長條件、材料的低溫預(yù)處理、接種密度都對實(shí)驗(yàn)有影響d應(yīng)選擇完全未開放的花蕾作實(shí)驗(yàn)材料解析選擇盛開的或略微開放的花作實(shí)驗(yàn)材料,花瓣有所松動,微生物有可能侵入到花藥,給材料消毒帶來困難,故b選項(xiàng)不正確。答案b3關(guān)于被子植物花粉的形成,下列說法正確的是()a花粉是由花粉母細(xì)胞經(jīng)有絲分裂形成的b花粉的發(fā)育要經(jīng)歷小孢子四分體時(shí)期、單核期和雙核期c花粉發(fā)育經(jīng)歷的小孢子四分體時(shí)期與減數(shù)第一次分裂的四分體時(shí)期含義相同d花粉母細(xì)胞形成花粉粒中的精子是經(jīng)一系列減數(shù)分裂形成的解析花粉是由花粉母細(xì)胞經(jīng)減數(shù)分裂形成的;花粉的發(fā)育經(jīng)歷了小孢子四分體時(shí)期、單核期和雙核期等階段,小孢子四分體時(shí)期指4個(gè)單倍體細(xì)胞連在一起的時(shí)期,而減數(shù)分裂的四分體時(shí)期是指同源染色體配對后,1個(gè)四分體含4條染色單體的時(shí)期;花粉粒內(nèi)的生殖細(xì)胞經(jīng)有絲分裂得到2個(gè)精子。答案b4下列關(guān)于凝膠色譜法的原理及操作不正確的是()a是利用凝膠把分子大小不同的物質(zhì)分離開的一種方法b在洗脫過程中,大分子不能進(jìn)入凝膠內(nèi)部而最先流出,而小分子可以進(jìn)入凝膠內(nèi)部而流速緩慢,最后流出c凝膠內(nèi)部有很微細(xì)的多孔網(wǎng)狀結(jié)構(gòu),其孔隙大小與被分離的物質(zhì)分子的大小無相應(yīng)關(guān)系d一般情況下,凝膠對要分離的物質(zhì)沒有吸附作用,因此所有要分離的物質(zhì)都應(yīng)該被洗脫出來解析本題考查凝膠色譜法分離蛋白質(zhì)的原理。凝膠色譜法是根據(jù)相對分子質(zhì)量大小分離蛋白質(zhì)的有效方法,凝膠是由多糖類化合物構(gòu)成的,其內(nèi)部有很微細(xì)的多孔網(wǎng)狀結(jié)構(gòu),小分子蛋白質(zhì)可以進(jìn)入凝膠內(nèi)部,路程較長,移動速度慢,而相對分子質(zhì)量較大的蛋白質(zhì)無法進(jìn)入凝膠內(nèi)部,路程較短,移動速度快,因此在洗脫中先分離出。選用不同種凝膠,其立體網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)不同,孔隙大小不同,因此可分離的分子大小也不同,故應(yīng)相關(guān)。凝膠一般對分離的物質(zhì)無吸附作用,所有要分離的物質(zhì)都應(yīng)該被洗脫出來,這是凝膠色譜法與一般層析法的不同。答案c5檸檬油是植物芳香油中的一種,它是一種廣譜
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