口腔生物學(xué)第六章練習(xí)題.doc

選擇題1. 關(guān)于細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)敘述錯誤的是（B）A可用來研究細(xì)胞生理和細(xì)胞各種功能B首先用胰蛋白酶將動物或植物組織進(jìn)行酶解，游離出單細(xì)胞后再進(jìn)行培養(yǎng)C用小牛血清配制的培養(yǎng)基進(jìn)行動物細(xì)胞培養(yǎng)D培養(yǎng)過程可用倒置顯微鏡進(jìn)行觀察2. 貼壁細(xì)胞的分裂方式屬于 ( B ) A.無絲分裂 B.有絲分裂 C.減數(shù)分裂 D.增殖調(diào)節(jié)唾液腺細(xì)胞增殖、分化和功能的因素，沒有以下哪一個：DA. 細(xì)胞因子B. 激素C. 細(xì)胞外基質(zhì)D. 白介素-8 E. 鈣離子以下哪句話是錯誤的：BA. 牙周膜是致密的結(jié)締組織構(gòu)成B. 頜面部軟骨細(xì)胞培養(yǎng)多見于上頜骨髁突軟骨培養(yǎng)C. 鱗狀細(xì)胞癌是口腔最常見的惡性腫瘤D. 成釉細(xì)胞是一種常見的良性上皮源性腫瘤，因其易復(fù)發(fā)、可能惡變等特性，而受到研究者的廣泛關(guān)注E. 體外培養(yǎng)的腺泡上皮細(xì)胞多成多角形，鋪路石樣排列 1. 牙周膜不具有以下哪種功能： （D）A. 分泌功能 B.礦化功能 C.收縮功能 D.防御功能2. 唾液腺細(xì)胞不包括以下哪種： （C）A.導(dǎo)管上皮細(xì)胞 B.,腺泡上皮細(xì)胞 C.唾液腺腫瘤細(xì)胞 D.肌上皮細(xì)胞1. 從體內(nèi)去除組織接種培養(yǎng)到第一次傳代的階段稱為（A）A.初代培養(yǎng) B.傳代期 C.衰退期 D.以上均不對2.在特定的時間和特定的空間研究一個完整生物體所表達(dá)的全體蛋白質(zhì)特征稱為（A） A蛋白質(zhì)組學(xué) B蛋白質(zhì)鑒定 C模式生物學(xué) D生物信息學(xué)1. 按照培養(yǎng)細(xì)胞的主要形態(tài)，可包括哪些類型:(E) A.上皮型細(xì)胞 B.成纖維型細(xì)胞 C.游走型細(xì)胞 D.多形型細(xì)胞. E.以上全是2復(fù)蘇是以一定的復(fù)溫速率將凍存的培養(yǎng)物恢復(fù)到常溫的過程。在冷凍復(fù)蘇中應(yīng)遵循什么原則：（C） A.速凍速溶 B.慢凍慢溶 C.慢凍速溶 D.速凍慢溶. E.以上都不是組織工程三要素E：A.種子細(xì)胞B.生物支架材料C.細(xì)胞活性因子 D.A和B E.A、B和C細(xì)胞培養(yǎng)一代中，進(jìn)行各項試驗最好的階段是D A.游離期B.貼壁期C.潛伏期D.指數(shù)生長期E.停滯期1、有關(guān)上皮型細(xì)胞說法錯誤的是（A）A 一定來源于外胚層 B 形態(tài)類似體內(nèi)的上皮細(xì)胞C 生長易相連成片 D 鋪路石狀2、那種細(xì)胞是懸浮型細(xì)胞（D）A 心肌細(xì)胞 B 平滑肌細(xì)胞 C 成骨細(xì)胞 D 白細(xì)胞1、以下哪項不是培養(yǎng)細(xì)胞的生長過程：（A）A、分裂期B、原代培養(yǎng)期C、傳代期D、衰退期 2、培養(yǎng)細(xì)胞的生存環(huán)境與條件不包括：（A）A、競爭菌群B、細(xì)胞的營養(yǎng)需要C、溫度條件D、液相環(huán)境下列哪項不是正常細(xì)胞體外培養(yǎng)調(diào)解下生存過程的階段D3. 原代培養(yǎng)期 B.傳代期 C.衰退期 D.潛伏期細(xì)胞培養(yǎng)常用的底物E2. 玻璃基質(zhì) B.塑料 C.飼養(yǎng)細(xì)胞 D.金屬 E.以上都是1.以下哪項是培養(yǎng)細(xì)胞生存的首要條件DA 基質(zhì) B 氣體環(huán)境和氫離子濃度 C 液相環(huán)境 D 培養(yǎng)環(huán)境無毒無菌2.以下哪項不是培養(yǎng)細(xì)胞一代生存期中的階段DA 潛伏期B 指數(shù)生長期C 停滯期D 傳代期1. 細(xì)胞凍存跟復(fù)蘇的基本原則是（B）A 快凍快融 B 慢凍快融 C快凍慢融 D慢凍慢融2. 大多數(shù)細(xì)胞培養(yǎng)適宜的pH是（B）A 6.97.1 B 7.27.4 C 7.47.6 D 7.88.0測藥物較好的實驗對象是（ ） DA.傳代期 B.原代培養(yǎng)期 C.衰退期 D.指數(shù)生長期1. 下列屬于貼壁型細(xì)胞的是（E）A.上皮型細(xì)胞B.成纖維細(xì)胞C.游走型細(xì)胞D.多形型細(xì)胞E.以上都是2. 下列說法關(guān)于細(xì)胞培養(yǎng)錯誤的是（D）A.貼附型和懸浮型細(xì)胞性質(zhì)可以相互轉(zhuǎn)化B.由于原代培養(yǎng)細(xì)胞和體內(nèi)細(xì)胞性狀相似性大，是檢測藥物較好的實驗對象C.衰退期時細(xì)胞可發(fā)生轉(zhuǎn)化D.惡性細(xì)胞也有接觸抑制現(xiàn)象2、以下對于培養(yǎng)細(xì)胞的生存環(huán)境與條件說法錯誤的是（B）A、體外培養(yǎng)動物細(xì)胞最常用的溫度是37B、氣相環(huán)境都是采用5% CO2與95%O2的混合氣體C、最適宜的pH值范圍是7.27.4D、體外培養(yǎng)的正常細(xì)胞耐酸能力要強(qiáng)于耐堿能力2 懸浮型細(xì)胞的特點有 DA于懸浮狀態(tài)下即可生長 B不需要貼附于支持物表面 C多見于血液淋巴細(xì)胞 D ABC以下關(guān)于體外細(xì)胞培養(yǎng)的說法錯誤的是（D）A 原代培養(yǎng)，也稱初代培養(yǎng)，即從體內(nèi)取出組織接種培養(yǎng)到第一次傳代階段，一般持續(xù)1-4周B 細(xì)胞轉(zhuǎn)化的標(biāo)志之一是細(xì)胞可能獲得永生性，也稱不死性C 指數(shù)生長期是細(xì)胞進(jìn)行各種實驗最好和最主要的階段D 停滯期細(xì)胞不增殖，也沒有代謝活動E 接觸抑制的存在與否可作為區(qū)別正常與腫瘤細(xì)胞的標(biāo)志之一1.以下關(guān)于培養(yǎng)細(xì)胞的體外生長環(huán)境的說法正確的是（D）A 培養(yǎng)環(huán)境無毒和無菌是保證培養(yǎng)細(xì)胞生存的首先條件B 開放培養(yǎng)時，一般要把細(xì)胞置于95%空氣加5%二氧化碳混合氣體環(huán)境中C 培養(yǎng)細(xì)胞主要利用的是左旋氨基酸，右旋氨基酸不能被利用D 體外培養(yǎng)細(xì)胞的用水沒特殊要求E 培養(yǎng)細(xì)胞的溫度和滲透壓標(biāo)準(zhǔn)分別為（36.50.5）和290-320mOsm/kg1.下列哪項不屬于口腔組織特有的干細(xì)胞（ B ）A、牙髓干細(xì)胞B、脫落恒牙牙髓干細(xì)胞C、牙周膜干細(xì)胞D、根尖牙乳頭干細(xì)胞1. 下列說法正確的是（C）、A貼壁型細(xì)胞中的成纖維型細(xì)胞即我們所說的成纖維細(xì)胞B細(xì)胞培養(yǎng)出來的細(xì)胞與人體的細(xì)胞相同C細(xì)胞凍存與復(fù)蘇的基本原則是慢凍快融D細(xì)胞培養(yǎng)的停滯期最適合進(jìn)行實驗研究E細(xì)胞轉(zhuǎn)化的標(biāo)志之一是細(xì)胞獲得永生性，體外人工誘導(dǎo)無法達(dá)成（2） 調(diào)節(jié)唾液腺細(xì)胞增殖分化和功能的因素有（E）A細(xì)胞因子 B激素 C細(xì)胞外基質(zhì) D鈣離子 E以上都有（3） 一下哪項屬于破骨細(xì)胞的區(qū)域（E）A皺褶緣 B清亮區(qū) C小泡及空泡區(qū) D細(xì)胞基底部 E以上都有1. 組織工程支架材料須符合以下哪項要求（E）A.具有良好的生物相容性 B.具有生物可降解性C.具有良好的表面活性 D.具有多孔性，具有可塑性E.以上都是2.有關(guān)天然培養(yǎng)基描述錯誤的是（B） A. 以天然成分作為培養(yǎng)液 B. 包括氨基酸、維生素、糖類、無機(jī)離子和一些其他輔助物質(zhì) C. 包括血清、組織提取液、水解乳白蛋白等 D. 營養(yǎng)成分豐富，培養(yǎng)效果良好 E. 成分復(fù)雜，來源受限1.下列不屬于粘附型細(xì)胞的是（D）A、上皮型細(xì)胞 B、成纖維型細(xì)胞 C、游走型細(xì)胞 D、血細(xì)胞2. 有關(guān)培養(yǎng)細(xì)胞下列說法錯誤的是（B）A. 細(xì)胞傳代經(jīng)過的順序為游離，貼壁，潛伏期，生長，停滯期B. 金屬不可做為基質(zhì)C. 細(xì)胞耐酸性比耐堿性強(qiáng)些D. 氧氣參與細(xì)胞能量代謝1體外培養(yǎng)包括（D）A.細(xì)胞培養(yǎng) B.組織培養(yǎng) C.器官培養(yǎng) D.以上全是2.粘附型細(xì)胞按照培養(yǎng)細(xì)胞的主要形態(tài)，可分為以下類型（E）A.上皮型細(xì)胞 B.成纖維型細(xì)胞C游走型細(xì)胞D.多形型細(xì)胞E.以上全是牙髓細(xì)胞體外培養(yǎng)時生長較為穩(wěn)定的是：DA 、第10-20代 B、 第1-5代C 、第5-10代 D、第5-15代E、第10-15代1、下列不屬于上皮型細(xì)胞生長特點的是（D）A、易相連成片 B、相靠緊密相連成薄層鋪路石狀 C生長時呈膜狀移動， 很少脫離細(xì)胞群而單個活動 D、排列成放射狀、漩渦1.體外細(xì)胞培養(yǎng)中培養(yǎng)細(xì)胞一代生存期不包括DA潛伏期 B指數(shù)生長期C停滯期D衰退期2.體外細(xì)胞培養(yǎng)成功的首要前提和關(guān)鍵是CA適宜的溫度B適宜的滲透壓C無污染環(huán)境D氣體環(huán)境2細(xì)胞培養(yǎng)成功的關(guān)鍵及首要條件是(A)A無菌操作 B溫度 C氣相環(huán)境 D液相環(huán)境 E培養(yǎng)液的酸堿度 1、根據(jù)細(xì)胞形態(tài)，體外培養(yǎng)的牙髓細(xì)胞屬于下列哪一種類型（ B ）。A.上皮樣細(xì)胞B.成纖維細(xì)胞C.游走型細(xì)胞D.多形型細(xì)胞2、下列說法中不屬于懸浮性細(xì)胞的特點的是（C ）。A.細(xì)胞生存空間大，易于大量獲得。B.傳代方便，無需胰酶消化。C.排列相對整齊，便于觀察。D.某些癌細(xì)胞和血液白細(xì)胞屬于懸浮型細(xì)胞。1.關(guān)于組織培養(yǎng)細(xì)胞生命期，以下論述錯誤的是：D A.原代培養(yǎng)期, 也稱初代培養(yǎng)， 即從體內(nèi)取出組織接種到第一次傳代階段B.原代培養(yǎng)， 一般持續(xù)1-4周。 此期可見細(xì)胞分裂，但不旺盛。C.傳代期：初代培養(yǎng)細(xì)胞一經(jīng)傳代后稱作細(xì)胞系。一般情況下當(dāng)傳代30-50次后D.衰退期：此期細(xì)胞仍然生存，但增殖很慢或不增殖；細(xì)胞形態(tài)輪廓變模糊，最后衰退凋亡。 2.關(guān)于天然培養(yǎng)基、合成培養(yǎng)基，以下論述錯誤的是 C A天然培養(yǎng)基：以天然成分作為培養(yǎng)液。包括血清、組織提取液、水解乳白蛋白等。B天然培養(yǎng)基優(yōu)點 是營養(yǎng)成分豐富，培養(yǎng)效果良好，缺點是成分復(fù)雜，來源受限。C合成培養(yǎng)基： 根據(jù)人和動物體內(nèi)細(xì)胞所需成分模擬合成的， 配方不恒定的一種較理想的培養(yǎng) 基。D合成培養(yǎng)基主要成分包括氨基酸、維生素、糖類、無機(jī)離子和一些其他輔助物質(zhì)。8. 粘附性細(xì)胞分類不包括下列哪一項（D）A上皮型細(xì)胞 B.成纖維細(xì)胞 C.游走型細(xì)胞 D.懸浮型細(xì)胞2. 有關(guān)培養(yǎng)細(xì)胞下列說法錯誤的是（B）A細(xì)胞傳代經(jīng)過的順序為游離，貼壁，潛伏期，生長，停滯期B金屬不可做為基質(zhì)C細(xì)胞耐酸性比耐堿性強(qiáng)些D氧氣參與細(xì)胞能量代謝1. 從基因水平看，細(xì)胞增殖分化異常實際上是CA.癌基因表達(dá)過度B.抑癌基因表達(dá)受抑C.細(xì)胞增殖分化基因的調(diào)控異常D.凋亡基因表達(dá)受抑E.與分化有關(guān)的基因表達(dá)異常2. 細(xì)胞增殖周期的順序依次是BA. G1MG2S B. G1SG2M C. MG1G2SD. SG1MG2 E. G1G2MS2. 關(guān)于元代培養(yǎng)法一下錯誤的是 D4. 原代培養(yǎng)細(xì)胞和體內(nèi)細(xì)胞性狀相似性大，是檢測藥物較好的實驗對象5. 原代培養(yǎng)期的細(xì)胞可見分裂，但不旺盛6. 原代培養(yǎng)的細(xì)胞具有二倍體遺傳性狀7. 原代培養(yǎng)的細(xì)胞成分單一，不具有異質(zhì)性8. 原代培養(yǎng)的主要培養(yǎng)手段是消化培養(yǎng)法和組織塊培養(yǎng)法的填空題1. 細(xì)胞工程包括 細(xì)胞融合細(xì)胞器移植染色體工程細(xì)胞和組織培養(yǎng)2. 細(xì)胞培養(yǎng)中常以40個或40個以上細(xì)胞組成的細(xì)胞團(tuán)稱為集落1.牙髓是位于_牙髓腔_內(nèi)的一種_疏松結(jié)締組織_，被堅硬的_牙本質(zhì)_所包繞2.體外培養(yǎng)的腺泡上皮細(xì)胞多成多角形 , 鋪路石樣排列.1. 細(xì)胞培養(yǎng)的基本培養(yǎng)操作技術(shù)包括：培養(yǎng)細(xì)胞的取材與分離，體外培養(yǎng)細(xì)胞的純化，細(xì)胞的凍存與復(fù)蘇。2. 常規(guī)的細(xì)胞培養(yǎng)法包括：原代培養(yǎng)法，傳代培養(yǎng)法。3. 細(xì)胞培養(yǎng)的體外生長環(huán)境：無污染環(huán)境、基質(zhì)、氣體環(huán)境和氫離子濃度、液相環(huán)境。4. 口腔組織特有的干細(xì)胞：牙髓干細(xì)胞、脫落乳牙牙髓干細(xì)胞、牙周膜干細(xì)胞、根尖牙乳頭干細(xì)胞、牙囊干細(xì)胞、唾液腺干細(xì)胞。5. 組織培養(yǎng)細(xì)胞生命期：原代培養(yǎng)期傳代期衰退期6. 培養(yǎng)細(xì)胞一代生存期：潛伏期指數(shù)生長期停滯期7. 每代貼附生長細(xì)胞的生長過程：游離期、貼壁期、潛伏期、對數(shù)生長期、停滯期。8. 細(xì)胞培養(yǎng)是指從活體內(nèi)取出細(xì)胞或者組織，模擬體內(nèi)的生理環(huán)境，在無菌、室溫和豐富的營養(yǎng)條件下，使離題細(xì)胞或者組織生存、生長并維持結(jié)構(gòu)和功能的一門技術(shù)。1、有絲分裂常分為4個時期，即G1期、S期、G2期、M期。2、細(xì)胞培養(yǎng)成功的關(guān)鍵：無菌操作1. 細(xì)胞凍存和復(fù)蘇的基本原則是慢凍快融以最大限度地保存細(xì)胞活性。培養(yǎng)環(huán)境無毒和無菌是保證培養(yǎng)細(xì)胞生存的首要條件1. 體外培養(yǎng)中，貼壁型細(xì)胞大致分為上皮型細(xì)胞、成纖維細(xì)胞、游走型細(xì)胞和多行型細(xì)胞。3. 蛋白質(zhì)組學(xué)的研究內(nèi)容包括：蛋白質(zhì)鑒定，翻譯后修飾，蛋白質(zhì)功能鑒定，服務(wù)與人類的健康 。4. 細(xì)胞培養(yǎng)的體外生長環(huán)境：無污染環(huán)境、基質(zhì)、氣體環(huán)境和氫離子濃度、液相環(huán)境。5. 蛋白質(zhì)組學(xué)的研究內(nèi)容 蛋白質(zhì)鑒定 、 翻譯后修飾 、 蛋白質(zhì)功能確定 、 尋找藥物的靶分子 。6. 組織工程三要素為 種子細(xì)胞 、 生物支架材料 、 生長刺激因子 。7. 動物細(xì)胞培養(yǎng)的氣相環(huán)境都是采用5% CO2與95%空氣（提供氧）的混合氣體，O2參與細(xì)胞的能量代謝過程，CO2用于維持培養(yǎng)液的酸堿度。8. 懸浮型細(xì)胞的優(yōu)點：生存空間大，能提供較大數(shù)量細(xì)胞、傳代方便(不需消化)、易于收獲。名詞解釋1.細(xì)胞培養(yǎng) 模擬體內(nèi)的生理環(huán)境，在適當(dāng)?shù)臈l件下，使活體組織細(xì)胞在體外無菌、適當(dāng)溫度、一定營養(yǎng)環(huán)境存活、生長增殖，并維持其結(jié)構(gòu)功能。是研究機(jī)體細(xì)胞形態(tài)及功能的重要手段2. 蛋白組學(xué) 在特定的時間和特定的空間研究一個完整的生物體（或細(xì)胞）所表達(dá)的全體蛋白質(zhì)的特征，包括蛋白質(zhì)的表達(dá)水平，翻譯后的修飾，蛋白質(zhì)與蛋白質(zhì)相互作用等，從而1.在蛋白質(zhì)水平上獲得對于有關(guān)生物體生理、病理等過程的全面認(rèn)識基因芯片技術(shù):又稱DNA微陣列技術(shù)，是將cDNA文庫中已知和未知的全長序列或寡核苷酸序列固定于玻片上，同時檢測比較生物樣品中多個已知或未知序列的表達(dá)狀況。它是高效地大規(guī)模獲取相關(guān)生物信息的重要手段。1.牙源性腫瘤：牙源性腫瘤是由成牙組織，即牙源性上皮、牙源性間充質(zhì)或牙源性上皮和間充質(zhì)共同發(fā)生的一組腫瘤。它們主要發(fā)生于頜骨內(nèi)，少數(shù)情況下也可發(fā)生與牙齦組織內(nèi)。這組病損包括發(fā)育異常、良性腫瘤和惡性腫瘤，其中最常見的為成釉細(xì)胞瘤。2.牙周膜:牙周膜是由致密的結(jié)締組織構(gòu)成，其細(xì)胞成分包括成纖維細(xì)胞、成牙骨質(zhì)細(xì)胞、Malassez上皮細(xì)胞、破骨細(xì)胞、成骨細(xì)胞、未分化的間充質(zhì)細(xì)胞以及血管、神經(jīng)、淋巴組織的多種細(xì)胞。牙周膜組織在體外培養(yǎng)中生長傳代的細(xì)胞主要是纖維樣細(xì)胞，其中可能包含成纖維細(xì)胞及未分化的間充質(zhì)細(xì)胞。2.懸浮型細(xì)胞：在培養(yǎng)時不貼附于支持物上，而呈懸浮狀態(tài)生長的細(xì)胞，如某些癌細(xì)胞和血液白細(xì)胞等6.指數(shù)生長期：這是細(xì)胞增殖最旺盛的階段，細(xì)胞分裂相增多。指數(shù)生長期細(xì)胞分裂相數(shù)量可作為判定細(xì)胞生長旺盛與否的一個重要標(biāo)志。組織培養(yǎng)細(xì)胞生命期：原代培養(yǎng)期傳代期衰退期培養(yǎng)細(xì)胞一代生存期：潛伏期指數(shù)生長期停滯期5. 干細(xì)胞：是來自胚胎、胎兒或成人的具有持久或者終身自我更新能力的細(xì)胞。6.細(xì)胞凍存：是將培養(yǎng)細(xì)胞在加或者不加冷凍保護(hù)劑的溶液中，以一定的冷凍速度將培養(yǎng)物降至某一溫度，并在此溫度下對其長期保存。2.細(xì)胞周期：指細(xì)胞從前一次分裂結(jié)束開始至本次分裂結(jié)束所經(jīng)歷的過程。2、冷凍保存(cryopreservation)：將體外培養(yǎng)物懸浮在加有冷凍保護(hù)劑的溶液中，以一定的冷凍速率降至零下某一溫度(一般是低于-70的超低溫條件)，并在此溫度下對其長期保存的過程。3.復(fù)蘇(thawing)：是以一定的復(fù)溫速率將凍存的培養(yǎng)物恢復(fù)到常溫的過程。簡答題簡述貼壁型細(xì)胞的分類及其特點。 絕大多數(shù)有機(jī)體細(xì)胞屬貼壁型細(xì)胞，只有少數(shù)細(xì)胞類型可在懸浮狀態(tài)下生長。 按細(xì)胞形態(tài)：成纖維型細(xì)胞，上皮型細(xì)胞，游走型細(xì)胞，多形細(xì)胞型 貼壁型細(xì)胞的生長特點：貼附和伸展；接觸抑制；生長的密度限制培養(yǎng)細(xì)胞的體外生長環(huán)境，可以作為基質(zhì)的物質(zhì)有哪些（1）：玻璃基質(zhì)：明礬-硅硼酸鈉玻璃石最常見的一種玻璃；（2）塑料：細(xì)胞培養(yǎng)最常用聚苯乙烯（3）飼養(yǎng)細(xì)胞：又稱滋養(yǎng)細(xì)胞（4）生物性基質(zhì)處理培養(yǎng)表面：細(xì)胞不直接貼壁或塑料表面，而是通過特殊細(xì)胞表面受體貼附蛋白質(zhì)后被這些表面吸附。血清通常提供某些貼壁因子，它們是細(xì)胞外基質(zhì)的基本成分，主要包括纖維連接蛋白、層黏蛋白、玻連蛋白及不同類型的膠原。（5）金屬：不銹鋼和鈦兩種金屬培養(yǎng)生長細(xì)胞是很合適的。B. 據(jù)你所知，什么是蛋白質(zhì)組學(xué)？其研究內(nèi)容有哪些？答：蛋白質(zhì)組學(xué)是指在特定的時間和特定的空間研究一個完整的生物體（或細(xì)胞）所表達(dá)的全體蛋白質(zhì)的特征，包括蛋白質(zhì)的表達(dá)水平、翻譯后修飾、蛋白質(zhì)與蛋白質(zhì)間的相互作用等，從而在蛋白質(zhì)水平獲得對生物體生理、病理等過程的全面認(rèn)識。其研究內(nèi)容有蛋白質(zhì)鑒定、翻譯后修飾、蛋白質(zhì)功能的確定、尋找藥物的靶分子。微生物污染途徑及預(yù)防A. 空氣：場所選擇無菌環(huán)境B. 器材：嚴(yán)格消毒C. 操作：無菌觀念D. 試劑：用前檢查E. 組織標(biāo)本：取材7、體外細(xì)胞的生長類型有哪些？答：按生長方式分為兩型，粘附型和懸浮型。其中，粘附型按照培養(yǎng)細(xì)胞的主要形態(tài)，又可以分為：上皮型細(xì)胞、成纖維型細(xì)胞、游走型細(xì)胞、多形型細(xì)胞簡述培養(yǎng)細(xì)胞的生存環(huán)境與條件細(xì)胞的營養(yǎng)需要： ）基本營養(yǎng)物質(zhì)： 氨基酸,維生素,葡萄糖、核糖、脫氧核糖等,無機(jī)離子等 ）促細(xì)胞生長因子：多由血清提供細(xì)胞的生存環(huán)境）溫度條件不同生物來源的組織細(xì)胞培養(yǎng)溫度不同；體外培養(yǎng)動物細(xì)胞最常用的溫度是37。 ）氣相環(huán)境用5% CO2與95%空氣（提供氧）的混合氣體。3）細(xì)胞生長的液相環(huán)境水及平衡鹽溶液,三蒸水,Hanks液、PBS、Earle液天然培養(yǎng)基:血清、組織提取液、水解乳白蛋白合成培養(yǎng)基4）培養(yǎng)液的酸堿度大多數(shù)的有機(jī)體細(xì)胞能在pH6.08.0的環(huán)境中生存。最適宜的pH值范圍是7.27.4。5）無污染、無毒 簡述組織工程支架材料須符合什么要求具有良好的生物相容性 具有生物可降解性具有良好的表面活性 具有多孔性具有可塑性簡述懸浮型細(xì)胞的優(yōu)缺點 優(yōu)點:生存空間大，能提供較大數(shù)量細(xì)胞 傳代方便(不需消化) 易于收獲 缺點: 觀察不方便 很多細(xì)胞不能懸浮生長(尤以正常細(xì)胞) 7.培養(yǎng)液的酸堿度對細(xì)胞生長的影響？答：大多數(shù)的有機(jī)體細(xì)胞能在pH6.08.0的環(huán)境中生存。最適宜的pH值范圍是7.27.4。體外培養(yǎng)的正常細(xì)胞耐酸能力要強(qiáng)于耐堿能力7.簡述細(xì)胞培養(yǎng)的優(yōu)缺點答：優(yōu)點：1. 活細(xì)胞：能長時間、直接觀察、研究活細(xì)胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動等2. 可控制：a.選擇對象：均一性、重復(fù)性 b.調(diào)節(jié)條件：物理、化學(xué)、生物等因素可控c.研究方法：可采用各種研究技術(shù)、記錄方法3. 應(yīng)用廣：學(xué)科多， 對象廣4. 較經(jīng)濟(jì)：可提供大量、同時、重復(fù)性好的、生物學(xué)性狀相似的實驗對象缺點： 人工所模擬的條件與體內(nèi)實際仍不完全相同。 當(dāng)細(xì)胞被置于體外培養(yǎng)后,生活在缺乏動態(tài)平衡的環(huán)境中久了，必然發(fā)生變化。論述題簡述培養(yǎng)細(xì)胞的體外生長環(huán)境無污染環(huán)境 2.基質(zhì)：細(xì)胞貼附在底物上生長的性質(zhì)為貼壁依賴性 3.氣體環(huán)境（氧氣和二氧化碳）和氫離子濃度 4.液相環(huán)境：培養(yǎng)液是維持細(xì)胞在體外生存和生長所需要的基本溶液，分為平衡鹽溶液、天然培養(yǎng)基、合成培養(yǎng)基 5.溫度維持：人和哺乳動物培養(yǎng)細(xì)胞標(biāo)準(zhǔn)溫度為36.5+-0.5 6.滲透壓：290-320mOsm/kg細(xì)述影響軟骨細(xì)胞功能、分化的因素：答：（1） 激素：甲狀旁腺激素、降鈣素、三碘甲狀腺氨酸等刺激軟骨細(xì)胞合成葡萄糖胺聚糖，地塞米松、維生素A對葡萄糖胺聚糖的合成有較強(qiáng)的抑制作用。 （2）細(xì)胞因子：促生長因子、多功能激活因子、胰島素樣生長因子、軟骨細(xì)胞自身分泌的一些因子對軟骨細(xì)胞有很強(qiáng)的刺激作用，增強(qiáng)DNA、RNA及蛋白質(zhì)的合成，對軟骨細(xì)胞有絲分裂有促進(jìn)作用（3）機(jī)械張力和壓力：在體外培養(yǎng)環(huán)境中，機(jī)械張力和壓力也會影響軟骨i型包的功能。 （4）體外培養(yǎng)環(huán)境：普通培養(yǎng)條件下，軟骨細(xì)胞周圍產(chǎn)生大量的軟骨基質(zhì)，并不發(fā)生鈣化，當(dāng)提高培養(yǎng)液中磷酸鹽濃度后，基質(zhì)可發(fā)生鈣化。 （5）軟骨細(xì)胞的分化受多種因素的影響。如磷脂酶D和維生素A酸對軟骨細(xì)胞的分化有抑制作用，前者抑制間質(zhì)細(xì)胞向軟骨細(xì)胞分化，后者主要抑制細(xì)胞形成軟骨基質(zhì)。2. 論述組織培養(yǎng)細(xì)胞的生命期？組織培養(yǎng)細(xì)胞生命期是指細(xì)胞在培養(yǎng)中持續(xù)增殖和生長的時間。從體內(nèi)獲得到體外培養(yǎng)到衰老死亡。正常細(xì)胞體外培養(yǎng)條件下，細(xì)胞全部生存過程大致分為以下三個步驟：1.原代培養(yǎng)期：從體內(nèi)取出組織接種培養(yǎng)到第一次傳代階段，1-4周。初代培養(yǎng)細(xì)胞多呈二倍體核型，是檢測藥物較好的實驗對象2.傳代期：初代培養(yǎng)細(xì)胞一經(jīng)傳代后稱作細(xì)胞系，持續(xù)時間最長3.衰退期：細(xì)胞增殖很慢或不增殖，細(xì)胞形態(tài)輪廓增強(qiáng)，最后衰退凋亡9. 組織工程的基本原理是什么？ 答：組織工程學(xué)的基本原理和方法是從機(jī)體獲得少量的活體組織，用特殊酶或其他方法將細(xì)胞從組織中分離出來并在體外進(jìn)行培養(yǎng)擴(kuò)增，然后將擴(kuò)增的細(xì)胞與具有良好生物相容性、可降解和可吸收的生物材料按一定的比例混合，使細(xì)胞粘附在生物材料上形成細(xì)胞-材料復(fù)合物，將該復(fù)合物植入機(jī)體的組織或器官的病損部位，隨著生物材料在體內(nèi)逐漸被降解和吸收，植入的細(xì)胞在體內(nèi)不斷增值并分泌細(xì)胞外基質(zhì)，最終形成相應(yīng)的組織或器官，從而達(dá)到修復(fù)創(chuàng)傷和重建功能的目的。傳代培養(yǎng)的過程？傳代培養(yǎng)：細(xì)胞在培養(yǎng)器皿中生長一定時間后，被分開接種到新的培養(yǎng)器皿中。初代培養(yǎng)細(xì)胞一經(jīng)傳代后便改稱做細(xì)胞系。在全生命期中此期的持續(xù)時間最長。在培養(yǎng)條件較好情況下，細(xì)胞增殖旺盛，并能維持二倍體核型，呈二倍體核型的細(xì)胞稱二倍體細(xì)胞系。為保持二倍體細(xì)胞性質(zhì)，細(xì)胞應(yīng)在初代培養(yǎng)期或傳代后早期凍存。反復(fù)傳代就有可能導(dǎo)致細(xì)胞失掉二倍體性質(zhì)或發(fā)生轉(zhuǎn)化。一般情況下當(dāng)傳代1050次左右，細(xì)胞增殖逐漸緩慢，以至完全停止，細(xì)胞進(jìn)入第三期。9. 簡述貼壁型細(xì)胞的分類和形態(tài)特點。（1）