（植物學專業(yè)論文）野生早櫻組織培養(yǎng)及扦插繁殖技術研究.pdf

摘要 野生早櫻 m 珊s 材6 砌飴砌v a r 儺c p 砒淞 隸屬薔薇科 r o s a c e a e 櫻屬 聊姍 為高大落葉喬木 花淡粉紅色 具有觀賞價值高 適應性強 抗性強的優(yōu)點 是極具開發(fā) 價值的野生櫻屬資源 本論文開展了野生早櫻組織培養(yǎng)和扦插繁殖技術研究 以期摸索出 提高野生早櫻繁殖數(shù)量和質(zhì)量的有效途徑 為苗木產(chǎn)業(yè)化生產(chǎn) 優(yōu)良種質(zhì)保存提供理論和 技術支撐 采用嫩枝扦插法 研究了不同生長調(diào)節(jié)物質(zhì) 不同扦插基質(zhì)等對嫩枝插穗生根的促進 效應 研究結(jié)果如下 以n a a l 0 0 0 m g l i b a 5 0 0 m g l b a l o o m g l 等比例組合處理插穗基部1 2 h 扦插于 蛭石上 平均生根率最高為7 8 2 平均根數(shù)為7 5 條 平均根長為5 6 c m 綜合以上技 術組合 野生早櫻嫩枝扦插生根率可達7 8 2 移栽成活率達5 0 本研究成果進一步完 善了野生早櫻扦插繁殖技術體系 在生產(chǎn)中具有較高的實用價值 采用組培技術手段 探討了從無菌體系的建立 啟動培養(yǎng) 增殖培養(yǎng) 壯苗培養(yǎng)到試 管苗生根移栽的整個過程 主要結(jié)論如下 1 以帶腋芽莖段為外植體 最佳消毒方式為 7 0 酒精浸泡3 0 s 2 5 n a c l o 消毒 1 5 m 證 o 1 h g c l 2 消毒6 m i n 污染率和死亡率最低 分別為1 6 5 和l o 4 最佳的取 材時間為4 月中旬 2 啟動培養(yǎng)采用l 9 3 4 正交試驗設計 培養(yǎng)基類型對啟動培養(yǎng)影響最大 其次是b a n a a 的影響作用最小 最佳啟動培養(yǎng)基為 m s b a l 2 m g l n a a 0 3 m g l 啟動率高達 8 4 5 3 增殖培養(yǎng)階段的最佳培養(yǎng)基為m s b a 0 5 m g l n a a o 1 m g l 3 5 9 l 蔗糖 增殖系 數(shù)為4 5 適宜濃度 1 m g l 多效唑具有促進增殖和抑制增高的效應 為了保持一定的 增殖系數(shù) 繼代次數(shù)以6 次為宜 4 壯苗培養(yǎng)采用l 9 3 4 正交試驗設計 大量元素對壯苗培養(yǎng)的影響最大 其次為n aa b a 的影響作用最小 最佳壯苗培養(yǎng)基為 3 4 m s b a o 2 m g l n a a0 o l m g l 大量元素 適當降低及低水平的細胞分裂素和生長素配比 有利于壯苗培養(yǎng) 5 生根培養(yǎng)階段 最適培養(yǎng)基為 1 2 m s n a a o 1 m g l i b a l o m g l 生根率達9 2 5 根條數(shù)達8 條 根長6 3 c m 黑暗處理1 4 d 有利于試管苗生根 6 選擇健壯的組培苗 先閉瓶煉苗3 d 然后開瓶煉苗5 d 移栽到蛭石 河沙 1 1 基質(zhì)中 移栽成活率高達9 0 試驗中各項指標已達到快速繁育苗木的要求 其技術措施可以滿足苗木組培生產(chǎn)的需 要 關鍵詞 野生早櫻 組織培養(yǎng) 增殖培養(yǎng) 扦插繁殖 植物生長調(diào)節(jié)物質(zhì) i i a b s t r a c t c p 膦淞s 甜6 鼬晚脅v a r 礎c p 船如淞s u b o r d i l l a t e s 也eg e n u so f 嬲淞 r o s a c e a e t h ec o l o r o fn o w e ri sp a l ep i i 墩a sat a l ld e c i d l l o u s 仃e e c p 陽哼z 岱j 甜6 辦f 紀砌v a r 伽c p 刀虎力sl l a sa d v 鋤 t a g e s o f1 1 i g ho m a m e n t a lv a l u e f l e x i b i l 時 s n d n gr e s i s t a n c e i ti so n eo f 析l dc p 陽s 淞r e s o u r c e sw i t l l e x t r e m e l yl l i g hv a l u e t h et l l e s i sl a u i l c h e dc u t t a g ea n dt i s s u ec u l t u r et e c l u l i q u eo fc p 铘淞s 6 辦一 訛砌v a r 卯刀如淞 s o 弱t 0f i l l dt h ee f i f e c t i v ew a yo f i i n p r o v m gm eq u a n t 毋a n dq u a h t o f 船姍s 甜砌f 咖砌v a r 儺c 陰如瑚a 1 1 dp r o v i d i r 曙t l l e o r i c a l 觚dt e c l l l l i c a ls u p p o r tf o rp r o d u c t i o n a n dg e r 玎叩l a s mc o l l s e r v a t i o n u s e ds o f tc u t t a g em e t l l o d t l l e 廿l e s i ss t u d i e d 廿l ep r o m o t i o no fd i 仃e r e mc u t t m gs u b s 仃a t e s p l 鋤tg r o w mr e g u l a t o r se t ci i lc u t t i r 培r o o 緬go fs o r o o d t h em a i l lc o n c u l u s i o n sw e r ed 1 a w n a sf o l l o w s r o o t i n gr a t ew a s 7 8 2 f o rs o l fc u 咖go fh a l fw o o d e ds 鈀m 仃e a t e d 嘶t 1 11o o o m g ln a a 5 0 0 m 蟣i b aa n d10 0 i n g lb af o r3 0m i n u t eo n 位s u b s 仃a t e 誦t l lv e m i c u l i t e r n l ea v e r a g e n u m b e ro fr o o tc o u l dr e a c h7 肌dt h ea v e r a g el e n g mo fr 0 0 tw a s5 6c en t j 血e t e r b a s e do nn l e a b o v et e c l l n o l o g y t l i er o o 衄gr a t eo fq 珊淞s 甜砌以p 砌v a r 儺c p 沈瑚c o u l dr e a c h7 8 2 s u r v i v a lr a t eo f 仃a n s p l a t i n gr e a c h e d5 0 1 kr e s e a r c hr e s u l t s 矗m h e r 呻r 0 v e dc 珊c a g e r e p r o d u c t i o nt e c l 蚵c a ls y s t e m 鋤dh a d1 1 i g hp r a c t i c a lv a l u ei nt h ep r o d u c t i o n u s e dt i s s u ec u l t u r et e c h l o l o g y t h j st l l e s i ss t u d i e dt h e h o l ep r o t o c o lo ft i s s u ec u l t l l r e 丘 o m t h ee s t a b l i s h n e n to fg e 皿丘 e es y s t e m i n 血i a t i o nc u l t u r e p r o l i f e 硎o na n ds 仃e n 酊h e m n g s e e d l m gc m n l r et om er a d i c a t i o na j l d 衄1 s p l a n t a t i o n t h ec o n c u l u s i o nw a sm a d ea sf 0 1 l o w s l t a k i n gt h es t e m 謝ma i l l a 哆b u da se x p l a n t m eb e s tw a yo fs t e r i l i z a t i o nw a s7 0 a l c o h o l 3 0 s 2 5 n a c l o 15 m i n 0 1 h g c 12 6 m i n t h ec o n t 鋤i n a t e dr a t ea n dd e a t hm t e w e r e1 0 w e 甌w m c hw e r e16 5 a n d10 4 r e s p e c t i v e l ya 船ri i l o c u l a t a t i o n 1 1 1 eb e s tt i i l l eo f e 缸a c t i o ni st h em i d d l et e n d a yo f a p r i l 2u s e dt l l el 9 3 耳o m l o g o m le x p e 血l e n td e s i g n0 nm ei 血i a t i o nc u l t l 聰 位g r e a t e s te 倍c t w a sm e d i u mt r p e s e c o i l d l yi t a sc y t o k i i l i l lc o i l c e n 仃a t o 瑪m es m a l l e s te f r e c t a sn a a t h e o p t i m 啪m e d i 眥 l 阻sm s b a l 2 m g l 時訂aa 0 3 m g lf o r 碰t i a t i o ni n d u c t i o n 1 ki i l i t i a t i o n r a t e v a s8 4 5 3o nm ep r o l i f e r a t i v eg r o w t hs t a g e t 1 1 e0 p t i n l 衄m e d i 哪內(nèi)rb u dp r o l i f 宅硎o nw a s m s e l a o 5 m g l n a a 0 1 m g l s u c r o s e 3 5 9 l p r o l i f e r a t i o nc o e m c i e n t 張s4 5 p a c l o b l l 仃a z 0 1 o fs u i t a b l ec o n c e 曲伽o n 1m g l p l a y e dp r o m o t i n gp r o l i f e r a t i o n 鋤di n l l i b i t i n gh e i g h tr o l e s f o rt h es a k eo fk e e p i n gp r o l i f e r a t i o nc o e 伍c i e m s u b c u l t u r et os i xt h l l e sw a ss u i t a b l e 4u s e dt l l e l 9 3 o m l o g o n a le x p e 曲e n td e s i g no ns t r e n g l e i l i n gs e e d l i n gc u l t u r e n l e g r e a t e s te 丘 e c tw a sm 懿se l e m e n to fp r o p o t i o 瑪s e c o n d l yi tw 硒n a a t h es m a l l e s te 丑 e c t v a s b a t h eo p t i m u mm e d i u mf o rs 仃e n g t l l e l l i n gs e e d l i n gc u l t u r ew 硒3 4 m s b a 0 2 m g l n a a 0 0 1 m g 幾 b o t ha d e q u a t em a s se l e m e n t 觚dt h el o wl e v e lo fc y t o k h l i na n da u 虹n p r o p o n i o n w e r ei 1 1f a v 0 ro fs t r e n 群h e l l i n gs e e d l i i l gc u l t u r e 5t ko p t i m u mm e d i u m v 嬲1 2 m s n a a o 1 m g l i b a1 0 m g lf o rr o o 血g t h er o o t i i l g t t t r a t ec o u l dr e a c h9 2 5 m er o o tn 啪b e rc o u l dr e a c h8 t l l er o o t l e n g t hc o u l dr e a c h6 3 c m f o u r t e e n 1 a y sd a r l 仃e 巾 n e mp r o m o t e dr o o t m go fv i t r os e e d l i n g 6s e l e c t e dh e a t h yv i t l o s e e d l i n g s c l o s m gt l l ec u l t u r eb o t t l ef o r3d a y s t l l e no p e n i n gt l l e c u l t u r eb o t t l ef o r5 d a y sd 謝n g s e e d l i n gt r a i n i n g s u b s t r a t e 州mv e m i c u l i t ea l l ds a n db v1t o1 w a st l l eo p t i m u m t h es u v i v a lr a t eo f 仃a n s p l a m sr e a c h e d9 0 e x p e r i m e n t a li i l d e x e sh a v er e a c h e dt h er e q u i r e m e n to fr a p i dp r o p a g a t i o ns e e d l i l l g t h e t e c l l l l i c a lm e a s u i e sc o m dm e e tp r o d u c t i o ni l e e d s k e yw o r d s 船螂占甜拍f 胞砌v a r 鯽c p 比珊 t i s s u ec u l t u r e p r o l i f e r a t i o nc u l t u r e c u n a g e p r o p a g a t i o n p l a mg r o v t l lr e g u l a t i n gs u b s 協(xié)n c e s r o n gd o n g q i n g b o t a i l y s u p e i s e db ya s s o c i a t ep r o f e s s o rw 抽gx i a n r o n g 英文縮寫英文名稱 m s 沖m b 5 b a k t z t n a a i b a i a a p p 3 3 3 p h l x 縮略詞表 l i s to fa b b r e v i a t i o n 中文名稱 m u m s k g e s k o o g 1 9 6 2m s 培養(yǎng)基 g a m b o 娼酏c 1 9 6 8 聊m 培養(yǎng)基 b 5 培養(yǎng)基 6 b e n z y l a d m i n o p 嘶n e 6 芐基腺嘌呤 k i n e t i n z e a t i l l 僅 m p h t i l a l e n e a c e t i ca c i d i 1 1 d 0 1 e 3 b u 夠r i ca c i d i i l d o l e 3 a c e t i ca c i d p a c l o b u 仃a z o l 激動素 玉米素 萘乙酸 吲哚丁酸 吲哚乙酸 多效唑 h y d y o g e m o nc o n c e n t r a t i o n 酸堿度 氫離子濃度 1 u x v 勒克司 照度單位 學位論文原創(chuàng)性聲明 本人鄭重聲明 所呈交的學位論文 是本人在導師的指導下進行的研究工作 所取得的成果 盡我所知 除文中已經(jīng)特別注明引用的內(nèi)容和致謝的地方外 本 論文不包含任何其他個人或集體已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的研究成果 對本文的研究做 出重要貢獻的個人和集體 均已在文中以明確方式注明并表示感謝 本人完全意 識到本聲明的法律結(jié)果由本人承擔 學位論文作者c 樅簽名 季夸素榭多月銣日 學位論文版權(quán)使用授權(quán)書 本學位論丈作者完全了解南京林業(yè)大學有關保留 使用學位論文的規(guī)定 同 意學校保留并向國家有關部門或機構(gòu)送交論文的復印件和電子版 中國科學技術 信息研究所 國家圖書館等 允許論文被查閱和借閱 本人授權(quán)南京林業(yè)大學 可以將本學位論文的全部或部分內(nèi)容編入有關數(shù)據(jù)庫進行檢索 可以匯編和綜合 為學校的科技成果 可以采用影印 縮印或掃描等復制手段保存和匯編本學位論 文全部或部分內(nèi)容 保密口 在 年解密后適用本授權(quán)書 本學位論文屬于不保密吐 請在以上方框內(nèi)打 學位論文作者 本人簽名 孝冬青 尊導教師 本人簽名 砂 郴年 漪每 石月 日 6 月矽日 致謝 本論文是在王賢榮副教授的悉心指導下完成的 從研究立題 試驗設計 試驗過程到 論文成稿 每一個環(huán)節(jié)都凝聚著導師的心血和汗水 導師嚴謹?shù)闹螌W態(tài)度 淵博的知識 對事業(yè)孜孜以求的精神 謙虛的態(tài)度和求實創(chuàng)新 精益求精的科研精神將使我受益終生 三年中 導師在生活和學習上給予了我無私的關心和幫助 值此論文完成之際 特向我的 導師致以崇高的敬意和衷心的感謝 在組培工作過程中 竹類所丁雨龍教授 張春霞副研究員 生理組謝寅峰副教授 陳穎老師給予了我寶貴的建議和指導 馬曉紅實驗員為試驗提供了幫助 在此 向他們表 示衷心的感謝 三年的碩士學習生活中 樹木組教研室向其柏教授 劉玉蓮教授 湯庚國教授 陳聽 副教授 袁發(fā)銀工程師 許曉崗博士 伊賢貴碩士也給予了多方面的幫助 感謝師兄閏道 良博士在收集資料與組培工作開展過程中給予了幫助 感謝師兄伊賢貴碩士 師兄謝春平 碩士在野外取材給予了幫助 感謝師姐時玉娣碩士在圖版處理中給予了耐心的指導 在學 習和生活中與樊英鑫碩士 董立格碩士 朱光敏碩士 曹珊珊碩士 徐文斌碩士 路飛碩 士 張琦碩士 張杰碩士 南程慧碩士 李海龍碩士 張紅星碩士 紀慶亮碩士及0 5 碩 9 班同學結(jié)下了深厚的友誼 對他們在平時給予的關懷與幫助 深表感謝 向參加本論文評閱 答辯的各位專家和教授表示我誠摯的謝意 特別感謝家人在三年的研究生學習生活中給予我的理解 關心與支持 最后 向所有關心和幫助過我的老師 同學 親人致以最誠摯的謝意和最美好的祝愿 作者 榮冬青 2 0 0 8 年6 月1 6 日于南京林業(yè)大學 畝f r吉 翮吾 櫻屬 c 臺 珊淞 植物隸屬于薔薇科 r o s a c e a e 李亞科 p n m o i d e a 為世界著名的 木本觀賞花卉 櫻屬植物有1 5 0 多種 陸玲娣等 2 0 0 3 分布北半球溫和地區(qū) 亞洲 歐洲至北美洲均有記錄 主要種類分布在我國西部和西南部以及日本和朝鮮 俞德浚等 1 9 8 6 吳征鎰等 2 0 0 3 是亞熱帶 溫帶屬 也是溫帶 亞熱帶的表征屬 本屬植物為經(jīng) 濟價值較高的果木和高雅的園林花木 具有廣闊的開發(fā)利用前景 中國擁有豐富的野生櫻花資源 國產(chǎn)櫻屬植物在4 8 種以上 包括變種及種下等級 遠遠超過日本等相鄰國家 王賢榮 2 0 0 1 但其聲譽卻遠遠落后于日本 作為世界著名 的觀賞花木 國產(chǎn)櫻屬資源的開發(fā)利用處于落后的狀態(tài) 野生櫻花由于長期自然選擇的結(jié) 果 其野生性狀比日本櫻花具有更強的抗病蟲能力和適應性 因此野生櫻屬植物資源具有 巨大的開發(fā)潛力 作為觀賞價值極高 發(fā)展前景良好的櫻花類植物 近年來在園林綠化中被頻頻引用 采用叢植或群植的方法 來構(gòu)建櫻花走廊或建立櫻花專類園 形成櫻花所特有的景觀 我 國作為 世界園林之母 有著豐富的野生資源 擁有世界櫻屬植物大部分野生種 但長 期以來由于沒有足夠地對其研究 許多極具觀賞價值的櫻屬植物在山野之中自生自滅 市 場上國內(nèi)品種單一 除了白瓣櫻花應用略廣之外 其他品種開發(fā)利用均處于相當落后的狀 態(tài) 園林綠化景區(qū)大都還是靠引進日本的櫻花品種造景 日本櫻花并不適宜我國南方各地 高溫高濕的氣候條件 即使在氣候條件適宜的地區(qū)種植病蟲害的發(fā)生也很嚴重 而且也不 能完全滿足市場的需求 野生早櫻 硼螂s 砌以p 砌v a r 礎卯胛如珊 為櫻屬 q 瑚姍 高大落葉喬木 其 花期早 先葉開放 具有傘形花序 花淡粉紅色 萼筒奇特 具有很高的綠化和觀賞價值 是極具開發(fā)應用前景的城市園林 風景區(qū)的優(yōu)良綠化樹種 野生早櫻是中國分布最廣的櫻 屬植物之一 可在四川及其以東的廣大地區(qū)生長 包括四川 重慶 湖北 貴州 云南 江西 湖南 福建 安徽 浙江 江蘇 山東等區(qū)域 對各地環(huán)境和氣候適應能力都非常 強 目前對野生旱櫻不同居群間的形態(tài)變異 形態(tài)地理分化以及群落特征方面作了一定研 究 王賢榮等 2 0 0 7 但關于其繁殖技術報道甚少 謝利鎖 2 0 0 2 因此 本試驗開展 了野生早櫻的組織培養(yǎng)和扦插繁殖技術的研究 以期摸索出提高野生早櫻繁殖數(shù)量和質(zhì)量 的有效途徑 為苗木產(chǎn)業(yè)化生產(chǎn) 優(yōu)良種質(zhì)保存提供技術支撐 這對于野生早櫻在生產(chǎn)中 迅速推廣應用具有重要的現(xiàn)實意義 同時也為其他木本植物的相關研究提供一些借鑒 第一章文獻綜述 1 櫻屬植物繁殖技術的研究進展 繁殖植物是人類從事的一項十分重要的工作 在古代 人類就學會種植各種植物以滿 足生活的需要 以及滿足飼養(yǎng)動物對食物的需要 特別是在野生植物的引種馴化過程中 繁殖栽培技術是必要的手段 這關系到引種馴化的成敗 植物繁殖主要包括有性繁殖和無 性繁殖 有性繁殖即播種繁殖 又稱種子繁殖 無性繁殖是指不通過種子而是利用植物的 部分營養(yǎng)器官 如根 莖 葉等 或組織 髓 皮層 葉肉等 乃至細胞和原生質(zhì)體 在適當 條件下再生形成一個完整植株 傳統(tǒng)的無性繁殖方法主要包括扦插 壓條 分株 嫁接等 現(xiàn)代的無性繁殖方法還包括組織培養(yǎng) 1 1 櫻屬植物的種子繁殖 在我國 櫻桃栽培已有2 0 0 0 多年的歷史 種子繁殖是最簡單的繁殖方法 野生類櫻 花種子主要以鳥播或自然散播為主要散布方式 來進行更新?lián)Q代 種子因受自然環(huán)境條件 的限制以及種子本身的生理特性 自然條件下發(fā)芽率很低 近年來 關于櫻屬種子休眠研 究有一些報道 劉用生等 1 9 9 5 綜述了櫻桃 船螂筇p 甜如c p m 淞 種子休眠的原因 及打破休眠的方法 韓明玉等 2 0 0 2 以山桃似明僖婦 淞咖f c 加門口 甘肅桃似聊增出 淞 施凇 p 以s 括 毛桃似噼如岱p p 坶f c 口v 盯 口g 口刀印p 坶 c 口 杏口朋p 行砌c 口v 甜乃弦 括 馬哈利櫻 桃 c p 陽s 淞聊口辦口彪6 為材料 分別用普洛馬林 赤霉素 細胞分裂素為處理激素 研究了 不同濃度激素對破除核果類種子休眠的效果 閏道良 2 0 0 5 在鐘花櫻 膦甜sc p 聊d 眈s v a r c 口垅胛刀甜腸幻 種子儲藏方式與發(fā)芽率關系的研究中認為 室內(nèi)貯藏種子風干對種子萌 發(fā)有不利影響 干藏4 個月后發(fā)芽率為3 9 3 6 個月后下降為1 7 低溫濕沙貯藏2 個月后種子發(fā)芽率顯著提高為9 1 7 可見采收的櫻花種子風干后應及時用濕沙低溫貯 藏 有助于解除休眠 且有利于保持種子生活力 王艷華等 2 0 0 5 采用聚丙烯酚胺凝膠 電泳技術 測定同工酶及種子內(nèi)貯存物質(zhì)的變化 探討了大山櫻 尸尸甜療甜ss 口孵刀f 翊種子的 休眠機理 得出外種皮機械障礙及種子中存在的發(fā)芽抑制物質(zhì)是導致其休眠的主要原因 在3 4 下層積6 個月處理 種胚中的可溶性糖和可溶性蛋白的含量有增加的趨勢 低溫 沙藏及激素處理是打破櫻屬種子休眠提高發(fā)芽率的有效途徑 這在生產(chǎn)實踐中提高種子育 苗成活率和節(jié)約成本具有重要意義 種子繁殖具有繁殖系數(shù)大 植株根系強健的優(yōu)點 但后代易出現(xiàn)性狀分離現(xiàn)象 丟失 原種的優(yōu)良性狀 不適合大面積播種 h t 哈特曼 1 9 8 1 但在果樹栽培和園藝育苗中 對于培育新品種和保護種質(zhì)資源的多樣性來說 種子繁殖是一種重要的繁殖手段 關于野 生早櫻的種子繁殖方面的研究還未見報道 1 2 櫻屬植物的嫁接繁殖 嫁接是一門古老而又新興的技藝 見諸文字記載的歷史就有3 0 0 0 年以上 嫁接是將 兩個植株部分結(jié)合起來 使兩部分形成一個整體 2 個植株成為1 棵植株的生物技術 高 新一等 2 0 0 3 嫁接的優(yōu)點是容易成功 開花 結(jié)實較早 易保持砧木的抗旱 抗病等 特性 桃樹似嘲z sp e 坶f 陽 櫻桃 r 嬲淞筇p 面c p 邪 s 圓葉櫻 船淞聊口辦口彪6 毛櫻桃 邪淞幻聊p 刀向陽 山櫻花 船螂s p 廠 砌口 草原櫻 c p r 船淞痧 f f c 咖 等都可 2 以作為觀賞櫻花的砧木 嫁接方法可采用切接 芽接法 切接宜在春季 其步驟是 在平 地面處截斷砧木 選砧木樹皮光滑 紋理順的部分 在皮層內(nèi)略帶木質(zhì)部垂直下切2 c m 左右 將接穗插入砧木的切口中 使接穗的長斜面至少有一邊形成層和砧木的形成層對準 靠緊 然后再用塑料薄膜帶自下而上扎緊 芽接宜于夏季進行 新群 2 0 0 1 這樣能大 大提高嫁接的成活率 孫敦琴 1 9 9 5 研究認為 櫻花以雙舌插接最佳 接穗取一年生帶 2 3 個芽的枝 最佳嫁接時間為早春砧木剛萌動前后2 3 天內(nèi) 徐玲娜等 2 0 0 1 對重瓣 櫻花的繁育進行了試驗 用單瓣櫻花和櫻桃作對比試驗用來選擇重瓣櫻花的砧木 采用了 芽接法 嫁接時期選在7 8 月份 砧木要和所用接穗枝條粗度基本一致 選擇晴天的早 上或下午進行 經(jīng)觀察記錄得出 單瓣櫻花作砧木嫁接重瓣櫻花更為適宜 可見 早春和 夏季均可進行櫻花的嫁接 嫁接后能否成活取決于嫁接技術 接穗和砧木的愈合情況以及兩種植物之間的親合關 系 兩種植物間的代謝類型越近似 或兩者之間的親緣關系愈近 嫁接成活率就愈大 反 之愈小 1 3 櫻屬植物的扦插繁殖 扦插法是一項傳統(tǒng)的植物無性繁殖技術 遠在三 四千年前 我們的祖先就發(fā)明了扦 插技術 并不斷地加以發(fā)展 早在公元前六世紀 詩經(jīng) 齊風 中即有 折柳樊圃 之 句 說明我國古代早就用柳枝作為菜圃的籬笆 扦插具有簡單易行 育苗周期短 繁殖速 度快 不受樹種限制 繁殖系數(shù)較高 成本低 可以保持母樹的優(yōu)良特性等優(yōu)點 是傳統(tǒng) 的無性繁殖中應用前景最廣的一種方法 隨著人工合成生長素的研制成功以及對插穗生根 機理的認識 人工噴霧裝置和自控溫度 濕度 光照等設備的出現(xiàn) 許多難生根樹種的扦 插繁殖獲得了很大成功 據(jù)相關文獻 呂明霞 2 0 0 0 曹德韋等 2 0 0 2 付紅祥 2 0 0 4 陸小清等 2 0 0 5 王 兆存 2 0 0 5 薔薇科中有較多植物采用扦插的繁殖方式 在櫻屬植物中 大多是用扦插 法來繁殖櫻桃的優(yōu)良砧木 如吉塞拉系列 梁會敏 2 0 0 5 考特砧木 左秀霞 2 0 0 6 的扦插繁殖 其目的是獲得優(yōu)良的無性系 這對于結(jié)實期長的木本植物來說 有著重要的 意義 優(yōu)良無性系的遺傳增益能超過實生良種的增益 因此 有的林學家預言 將來的林 業(yè)是無性系林業(yè) 而無性系繁殖的方法 扦插是主要的 近年來 隨著櫻花在園林中的廣泛應用 關于櫻花扦插繁殖的報道較多 王賢榮 1 9 9 7 通過試驗證實 于秋末冬初采枝 貯藏在濕沙中 來年扦插 有利于提高早櫻生根率 這 可能與枝條經(jīng)冬貯藏后內(nèi)源抑制物質(zhì)的減少有關 王永清等 1 9 9 7 在塑料袋內(nèi)扦插山櫻花取得良好效果 田興旺 2 0 0 2 在山櫻花 扦插試驗中 采用a b t 生根粉1 號濃度為5 0 m g l 的溶液中浸泡5 8 h 或在濃度為l o o m g l 的溶液中浸泡2 4 h 在扦插后的2 5 d 內(nèi) 平均生根率在9 5 以上 單株生根最多可達2 0 條 且多數(shù)屬于皮層生根型 也有愈傷生根型 其移栽成活率在9 0 以上 陸貴巧 1 9 9 8 等人進行櫻花蔭棚嫩枝扦插試驗 采用速蘸法 得出最適宜插穗生 根的n a a 濃度為8 0 0 m g l 生根率達9 8 王小蓉 2 0 0 0 通過對日本晚櫻 船淞 s p m 厶砌v a l 腸門療船c p 船 綠枝扦插生根解剖特性的研究 按王濤 1 9 8 9 對生根類型的 劃分 指出 日本晚櫻的生根屬于誘導生根原始體型 插穗不定根起源于形成層 謝利鎖 2 0 0 2 在野生早櫻嫩枝扦插的研究中 表明野生早櫻6 1 2 d 形成愈傷組織 7 1 5 d 可以形成幼根 生根率可達3 6 4 9 因此 提高和改進野生早櫻的扦插技術仍 大有文章可做 段曉梅 2 0 0 3 在塑料小拱棚下進行冬櫻花 腳淞c p 膦d 砘s 嫩枝扦插 分別用 不同濃度的i b a n a a a b t l 號處理 促進生根的能力i b a n a a a b t l 號 其中以 i b a5 0 0 0 m g 瓜g 效果最好 生根率達9 7 7 7 而對照組僅為2 7 7 7 通過對珍珠巖 蛭 石 泥炭 素紅壤 河砂及珍珠巖 蛭石 素紅壤 1 1 2 的混合基質(zhì)等6 種扦插基質(zhì) 及苗床扦插和育苗盤扦插的比較 得出扦插繁殖的最佳組合是泥炭或素紅壤作扦插基質(zhì)苗 床扦插 閏道良 2 0 0 3 研究了鐘花櫻嫩枝扦插繁殖技術 段曉梅 2 0 0 3 對紅花高盆櫻桃 鯽螂c p 娜d f c 加v 札 幻p 口 進行扦插試驗 于4 9 月在塑料小拱棚內(nèi)軟枝扦插 i b a 5 0 0 0m g 瓜g 處理效果最好 生根率達9 5 6 7 通過苗床扦插和育苗盤扦插的比較 認為 前者較好 王振師 2 0 0 5 等人采用鐘花櫻的組培苗嫩枝 一年生組培苗枝條和大樹木質(zhì) 化的枝條為插穗進行扦插育苗試驗 以鐘花櫻組培苗的嫩枝以及一年生組培苗枝條為插 穗 用i b a 粉劑5 0 0 m g l 處理 扦插在黃心泥基質(zhì)上 其生根率為9 3 和8 7 以大樹 枝萌發(fā)的枝條為插穗 生根率也達到5 2 因此 利用鐘花櫻的組培苗嫩枝 一年生組 培苗枝條和大樹枝的嫩枝都可以進行扦插育苗 綜上所述 影響櫻花扦插生根率的因素很多 如櫻花種類 母樹年齡 選取插穗的部 位 以及扦插時間 扦插基質(zhì) 生長素種類 濃度 處理時間 空氣濕度等都影響櫻花插 穗的生根率 關于植物扦插生根的理論研究 雖然取得了不少進展 但因起步較晚 其與研究植物 光合作用與呼吸作用相比 仍然落后很多 截至目前為止 國內(nèi)外學者除在解決某些樹種 扦插成活方面做了一些試驗外 已逐步把研究工作深入到生根的生理方面及解剖方面 在 揭示扦插生根機制上作了不少工作 但從總的方面看 闡明植物扦插生根完整的理論尚未 具備 研究者從扦插生根的解剖學方面的研究 扦插生根的生理生化指標的研究及植物生 長調(diào)節(jié)物質(zhì)與生根輔助因子研究三個方面來研究扦插生根難易的影響因子及其相應的物 質(zhì)基礎 1 4 櫻屬植物的組織培養(yǎng)研究進展 植物組織培養(yǎng)是2 0 世紀初 以植物生理學為基礎發(fā)展起來的一門新興技術 1 9 0 2 年 德國著名的植物家g h a b e r l a n d t 提出植物細胞全能性的概念 為植物組織培養(yǎng)技術奠定了 理論基礎 1 9 5 8 年r e i n e r t 和s t e w a r d 分別報道 在胡蘿卜 d 口材c 5 陽加幻v a l 陽f f 陽 愈 傷組織培養(yǎng)中形成了體細胞胚 這是一種不同于通過芽和根的分化而形成植株的再生方 式 這對植物細胞的全能性給予了科學的證明 也為以后組織培養(yǎng)的迅速發(fā)展 奠定了理 論基礎 李浚明等 2 0 0 5 經(jīng)過近半個世紀的發(fā)展 組培技術在均一化苗木快速繁殖 無病毒苗培養(yǎng) 遺傳育種 突變體的選擇和利用 細胞融合和d n a 的重組上顯示了突出地位 促進了農(nóng)林業(yè)的跨越 式發(fā)展 薔薇科其他屬的觀賞植物已有大量離體培養(yǎng)的研究報道 對櫻屬植物而言 多集中在 4 食用櫻桃組織培養(yǎng)及其砧木樹種上 d u r h a mr e 1 9 9 2 g a 血d 1 9 9 7 沈惠娟先生 1 9 9 2 在 木本植物組織培養(yǎng)技術 中對部分食用櫻桃的組織培養(yǎng)研究作了小結(jié) 并以列表形式 列出了部分研究者摸索出的分化和生根培養(yǎng)基配方及外植體再生方式 之后 相繼有人對 甜櫻桃 刪螂伽f 聊 及其矮化砧木的組織培養(yǎng)進行試驗 韓文璞 1 9 9 3 李文金等 2 0 0 4 1 但對野生觀賞櫻花的組織培養(yǎng)技術研究較少 櫻屬植物組織培養(yǎng)目前包括 芽外 植體的誘導增殖培養(yǎng) 種子外植體的萌發(fā) 擴繁 對子葉 葉片等外植體的體細胞胚的誘 導 因此 系統(tǒng)研究觀賞櫻花類離體培養(yǎng)技術 為充分開發(fā) 利用我國櫻屬野生植物資源 擴大其繁殖系數(shù) 應用于生產(chǎn)以及為今后的良種選育提供理論和現(xiàn)實依據(jù) 以下概述近年 來櫻屬組織培養(yǎng)的研究進展 1 4 1 外植體滅菌 外植體的選擇是組織培養(yǎng)中一個非常重要的問題 理論上講植物細胞具有全能性 無 論選用植物的哪一部分作外植體都能誘導成植株 但研究表明不同的植物器官和組織其形 態(tài)發(fā)生能力不同 d e b e r g hp 1 9 9 2 木本觀賞植物組織培養(yǎng)的外植體初分化率一般較低 需要選擇生理活性旺盛的春季進行培養(yǎng) 外植體選取的種類要以污染少易啟動為原則 通 常選擇樹木幼年組織 如胚 子葉 實生苗嫩莖 腋芽 幼嫩葉片 根等作為外植體 周 志堅等 1 9 9 4 以大島櫻 c p 砸螂s p 舢腸幻v 札正冊療p s f 口門口 s p e c i o s a 的幼嫩莖段為外 植體 建立了高效消毒的新方法即升汞二次消毒法 成功率達7 7 8 并獲得完整植株 王永清等 1 9 9 7 在櫻花 船淞s p 甜腸砌 芽外植體的建立中 以帶葉原基的芽心作 為外植體 采用低濃度營養(yǎng)鹽的培養(yǎng)基 減少了褐化的發(fā)生 并獲得了再生植株 周素平 等 1 9 9 8 在毛櫻桃快繁中 用一年生和二年生母樹休眠芽為外植體 發(fā)現(xiàn)一年生的休眠 芽的污染率和褐化率均低于二年生母樹休眠芽 且生長分化良好 在外植體選擇方面做了 有益的嘗試 外植體選取的季節(jié) 時間 部位不同 污染率相差較大 一般認為在春季 芽即將萌 動時效果最佳 取材的時間 多在晴天中午 因枝條暴露在強烈陽光下 有利于殺菌 而 外植體取材部位在材料中上部的莖段或直接用莖尖較為有利 1 4 2 啟動培養(yǎng) 櫻屬植物莖段培養(yǎng)一般選用當年生幼嫩枝條作外植體 這是因為其分化能力強 分化 苗生長健壯 黃守印等 2 0 0 1 以河北霧靈櫻花 船淞s p 甜腸紀 當年生帶葉柄莖段 為試材取得了較好的效果 短時間內(nèi)得到櫻花莖段外植體快繁無性系 王光萍等 2 0 0 2 以春季萌發(fā)的福建山櫻花 儺淞c p 琊d f 把sv a lc 口肌冊玎 腸幻 嫩枝為外植體誘導叢生芽 在1 4 m s b a l 0 m g l i b a o 0 1 m g l 的培養(yǎng)基上 其叢生芽的誘導率達8 7 5 櫻屬植物離體培養(yǎng)的基本培養(yǎng)基 大多采用m s 培養(yǎng)基或改良的m s 培養(yǎng)基 也有少 數(shù)種及品種采用其他培養(yǎng)基 生長調(diào)節(jié)物質(zhì)在啟動培養(yǎng)中起著關鍵作用 主要表現(xiàn)在生長 調(diào)節(jié)物質(zhì)的種類 濃度和激素之間的配比等方面 櫻屬植物組織培養(yǎng)常用到生長素和細胞 分裂素 生長素的種類主要有i b a i a a n a a 2 4 d 濃度范圍一般在0 1 1 o m g l 細胞分裂素多采用b a 0 1 2 om g l k t o 1 2 0m g l 等 植物生長調(diào)節(jié)物質(zhì)配比是調(diào)控 器官發(fā)生的主要方法之一 櫻屬莖段的啟動培養(yǎng)中細胞分裂素和生長素比值過高時 雖可 提高芽的分化率 但生長較差 并易產(chǎn)生畸形葉和節(jié)間短的小枝條 當比值過低時 葉 芽的長勢雖然較好 但分化率低 閆道良等 2 0 0 6 在鐘花櫻組織培養(yǎng)再生體系進行研究 中 認為b a n a a 約為1 0 時 對芽的誘導有較好的效果 培養(yǎng)基組合為m s b a1 o m g l n 從0 1m g l 1 4 3 增殖培養(yǎng) 在增殖培養(yǎng)中 影響增殖系數(shù)的因素主要有以下幾個方面 基本培養(yǎng)基 糖 p h 值 和生長調(diào)節(jié)物質(zhì)等 在木本植物組織培養(yǎng)中 常使用m s b 5 和聊m 培養(yǎng)基 根據(jù)不同 的材料選用合適的培養(yǎng)基 一般來說m s 培養(yǎng)基含的營養(yǎng)元素均衡適合大部分的植物生 長 大量試驗已證明 m s 培養(yǎng)基是最常用的培養(yǎng)基 韓文璞等 2 0 0 0 侯修勝 2 0 0 2 但不同種或品種可能適應的培養(yǎng)基不盡相同 在其他培養(yǎng)基上也有成功的報道 周麗華等 2 0 0 4 蔗糖能支持大多數(shù)植物離體培養(yǎng)物生長 一直被作為植物離體培養(yǎng)的碳源而被廣 泛應用 但在大規(guī)模生產(chǎn)中 也可采用砂糖代替蔗糖 以降低成本 一般認為 組織培養(yǎng) 中蔗糖的適宜濃度為2 4 濃度過高會導致培養(yǎng)滲透壓的升高 使生長受阻 p h 值作為一項重要的化學環(huán)境因子 其高低反映了培養(yǎng)基的酸堿度 對櫻屬植物增 殖培養(yǎng)有一定的影響 增殖培養(yǎng)中生長素和細胞分裂素的濃度和配比起著關鍵性的作用 生長素的濃度一般比啟動階段低 為了縮短繼代時間 在非洲菊 g p 柏p 陽脅m p s d 刀f f 席 夢利 2 0 0 0 增殖培養(yǎng)基中交替添加多效唑o 和0 2 m g l 可使芽體增殖系數(shù)高且增殖芽 健壯 在鐘花櫻芽增殖階段加入一定濃度的g a 3 以促進叢生芽的增殖和伸長 王光萍 等 2 0 0 2 閏道良等 2 0 0 6 1 4 4 壯苗培養(yǎng) 壯苗培養(yǎng)是提高移栽成活率的一項重要措施 此階段關鍵在于嚴格篩選植物生長調(diào)節(jié) 物質(zhì)的種類和濃度 一般需降低培養(yǎng)基的生長調(diào)節(jié)物質(zhì)含量 以便形成健壯苗 常用的生 長素有i b a n a a 細胞分裂素有b a k t 姚連芳等 2 0 0 1 認為 0 0 4 m g l 的n a a 處理和2 5 0 m g l 的n a h 2 p 0 4 處理均對櫻花試管苗的植株生長高度有明顯的促進作用 而 唐曉杰等 2 0 0 4 在酸櫻桃 尸 甜刀甜sc p 船螂 壯苗培養(yǎng)中 采用不加生長調(diào)節(jié)物質(zhì)的m s 培養(yǎng)基 組培苗生長粗壯 葉片增大 濃綠 植株健壯 長勢好 因此 壯苗培養(yǎng)一般是 通過低水平生長調(diào)節(jié)物質(zhì) 來調(diào)控植物體內(nèi)源激素水平的平衡 從而達到壯苗的目的 壯 苗培養(yǎng)有利于后續(xù)階段的生根和移栽 1 4 5 生根培養(yǎng) 基本培養(yǎng)基中化學物質(zhì)元素種類與含量的改變 對不定根的發(fā)生具有一定的調(diào)控作 用 生根培養(yǎng)基大多采用1 2 m s 如大島櫻 p 胛甜s 如即口 f 朋v a l 印d 行幻力p 口 王永清 1 9 9 7 福建山櫻花 王光萍 2 0 0 2 紫葉矮櫻 尸聊 s c 西把門口 朱志國 2 0 0 5 等 但 在其他培養(yǎng)基也有成功獲得不定根的研究 黃守印等 2 0 0 2 以霧靈山野生櫻花為材料 在改良m s 培養(yǎng)基上誘導不定根獲得成功 蔗糖濃度是生根培養(yǎng)中一個不可忽視的因素 一般在1 3 之間 當濃度在1 5 2 時最適合生根培養(yǎng) 過高或過低均在不同程度上降低生根率 且根長勢弱 生根培養(yǎng)的關 鍵還在于生長素的種類和濃度 i b a n a a 均可用于櫻屬植物的生根培養(yǎng) 他們的最適 濃度在不同種及品種上顯示了不同的結(jié)果 周麗華等 2 0 0 4 以緋寒櫻 尸廠 刀姍陽歷p 口 甜腸幻 6 為試材 在生根培養(yǎng)基1 2 m s i b a 0 5 m g l 蔗糖1 5 9 l 上 生根率達1 0 0 閏道良等 2 0 0 6 經(jīng)試驗得出1 2 m s n a a 0 2 m g l i b ao 6 0 8 m g l 是適宜鐘花櫻的生根培養(yǎng)基 而呂月良等 2 0 0 6 則認為轉(zhuǎn)入l 2 m s n a a l o m g l i b a 0 2m g l 對福建山櫻花生根 效果好 1 4 6 煉苗移栽 試管苗生長在無菌環(huán)境下 經(jīng)煉苗這一階段才能適應自然環(huán)境條件 為提高移栽后試 管苗的成活率 必須縮小試管環(huán)境與自然環(huán)境之間的差距 盡可能創(chuàng)造適宜試管苗生存的 環(huán)境 這就需要在移栽基質(zhì) 溫濕度控制 移栽時間上加以探討 張繼東等 2 0 0 3 研究 了萊陽矮櫻桃試管苗的煉苗移栽技術 先閉瓶光培5 7 天 然后開瓶煉苗3 5 天 用3 步 移栽法 成活率達9 5 以上 因此要采取逐步過渡的措施 或者采用逐漸提高輔助光照 的強度的方法 提高試管苗適應外界環(huán)境的能力 2 櫻屬植物的應用價值及目前存在的問題 2 1 櫻屬植物的應用價值 櫻屬 船甜s 植物隸屬薔薇科 r o s a c e a e 李亞科 p 姍o i d e a 本屬共有1 5 0 多種 分布于北半球溫暖地區(qū) 亞洲 歐洲至北美洲均有記載 櫻屬可分為典型櫻亞屬 p r u n u ss u b g e n c e r a s u s 和矮生櫻亞屬 p r u n u ss u b g e n m i c r o c e r a s u s 前者為高雅的 木本觀賞花卉 櫻花類植物樹姿灑脫開展 花形美麗 盛開時如玉樹瓊花 堆云疊雪 甚 是壯觀 是優(yōu)良的園林觀賞植物 因此人們常將她種植在建筑物前 草地旁 山坡上 水 池邊 孤植 對植 群植都很適宜 后者為經(jīng)濟價值較高的果木 其果實 櫻桃 是落葉 樹種中成熟最早的一種 被譽為 春果第一枝 其果實中含有大量的營養(yǎng)成分 如蛋白 質(zhì) 糖 磷 鐵 胡蘿卜素維生素c 等都比蘋果為多 營養(yǎng)價值很高 除供生食外 宜 于加工 制作果醬 果酒 果汁以及罐頭等 其花果美麗也適宜作園林綠化觀賞樹種 櫻屬植物的木材紋理平滑 具有良好的木材彎曲性能 較低的剛性 中等的強度及抗 震動能力 心材具有抗腐能力 木材供作家具 雕刻 美術工藝品 印刷木版 鋼琴及風 琴機件 包裝箱等 謝?；莸?1 9 9 0 中國具有豐富的野生櫻花資源 其種類遠遠超過日本等相鄰的國家 其分布范圍很廣 從西南到東北 都有櫻花的生長 廣大的西南高山地區(qū)是中國櫻屬植物的分布中心 蘊藏 著近3 0 種野生櫻花類群 其中很多具有較高的觀賞價值 具有較大的開發(fā)潛力 王賢榮 等 2 0 0 1 2 2 櫻屬植物資源利用目前存在的問題 據(jù)調(diào)查 國內(nèi)栽培的櫻花大多是日本的櫻花品種 我國在櫻花品種的繁殖技術 培育 技術上仍有許多問題尚未解決 對一些國產(chǎn)優(yōu)質(zhì)野生櫻花資源缺乏系統(tǒng)的調(diào)查及開發(fā)利用 研究 目前中國在利用櫻屬植物資源方面存在以下幾個問題 1 鄉(xiāng)土資源開發(fā)利用方面 在櫻屬植物資源開發(fā)利用中 主要集中在