血栓性疾病分子標(biāo)志物的臨床應(yīng)用PPT課件.pptx

血栓性疾病分子標(biāo)志物的 臨床應(yīng)用,.,目前實驗室凝血常規(guī)檢測項目： 血凝儀檢測的PT、APTT、TT、Fbg、D-二聚體、FDP、抗凝血酶、凝血因子等已涵蓋凝固、纖溶等系統(tǒng)，都屬于血栓形成后的被動檢測、晚期篩查項目，對血栓前狀態(tài)、Pre-DIC等不敏感，同時對溶栓治療監(jiān)測未能第一時間反饋效果。 血栓分子標(biāo)志物 血栓調(diào)節(jié)蛋白(TM)、凝血酶抗凝血酶（TAT）、組織纖溶酶原激活物/纖溶酶原激活物抑制劑-1復(fù)合物（t-PAI.C)、纖溶酶-2PI復(fù)合物（PIC）與D-二聚體、FDP聯(lián)合檢測，可第一時間、更加敏感、可靠的向臨床反饋血栓的發(fā)生與形成、術(shù)后血栓與出血情況的監(jiān)控、Pre-DIC的狀態(tài)、溶栓療效、血管內(nèi)皮系統(tǒng)損傷等情況。,纖溶酶原激活物 抑制劑-1（PAI-1),組織型纖溶酶原 激活t物(t-PA),2纖溶酶抑制劑(2-PI),t-PAPAI-1 復(fù)合體（t-PAIC),PIC,尿激酶型纖溶酶原 激活物 (u-PA),纖維蛋白原、纖維蛋白降解產(chǎn)物（FDP),D-dimer,纖溶酶原,纖溶酶,凝血酶,PC,APC,（內(nèi)源性機(jī)制）接觸反應(yīng),凝血系統(tǒng),APC-PCI,XI,IX,XIa,IXa,VIIIa,VII,VIIa,X,V,Va,Xa,凝血酶原,凝血酶,纖維蛋白原,纖維蛋白單體,纖維蛋白 聚合物 （可溶性）,穩(wěn)定性 纖維蛋白,XIIIa,TAT,F1+2,fpA,SFMC,fpB1-42,fpB15-42,纖溶系統(tǒng),蛋白C抑制劑 (PCI),磷脂 Ca2+,Ca2+,磷脂 Ca2+,Ca2+,Ca2+,（內(nèi)源性機(jī)制）,(外源性機(jī)制）,組織因子(TF),凝血抑制,（外源性機(jī)制）,血 管 內(nèi) 皮 細(xì) 胞,PS,XIII,AT,正常凝血機(jī)制圖,檢測方法,HISCL高敏化學(xué)發(fā)光檢測止血/血栓分子標(biāo)記物,血栓調(diào)節(jié)蛋白（TM）,TM存在于所有血管內(nèi)皮細(xì)胞中，一種具有抗凝作用的糖蛋白。 分為膜型TM和溶解型 sTM兩種存在形式。 膜型TM存在于細(xì)胞表面 sTM是膜型TM經(jīng)蛋白酶裂解脫落形成的一種可溶形式,1000-2000倍,TM作臨床應(yīng)用,內(nèi)皮損傷，游離到血液中，半衰期20小時，最早期的指標(biāo),1.調(diào)節(jié)血管內(nèi)凝血:TM-凝血酶復(fù)合物 (1)阻止FgFn (2)PCAPC 滅活FVa及。 (3)可活化TAFI(活化凝血酶激活纖溶抑制劑)，TAFIa在體內(nèi)和體外均可抑制纖維蛋白溶解 2.內(nèi)皮細(xì)胞損害的分子標(biāo)志物之一:TM的水平與血管內(nèi)皮損傷程度呈正相關(guān)。與全身性血管障礙相關(guān)。腎臟疾病、腫瘤、冠心病升高。 3.滅活補(bǔ)體:TM可使補(bǔ)體C3b 級聯(lián)反應(yīng)的關(guān)鍵酶失活，通過提高補(bǔ)體因子介導(dǎo)的補(bǔ)體因子或4b結(jié)合蛋白滅活3b，干擾補(bǔ)體活化,北京社區(qū)健康老年人群eGFR水平與sTM呈負(fù)相關(guān)，在校正了年齡、血壓、GLU、CRP、血脂、UA等因素后相關(guān)性仍有意義，高齡老年組（80歲）相關(guān)性更強(qiáng)。 提示sTM可作為判斷老年人群腎功能下降的一項指標(biāo)。,健康老年人群血漿可溶性血栓調(diào)節(jié)蛋白和腎小球濾過率的關(guān)系,中華老年多器官疾病雜志，2014.13（2）,TM是動脈粥樣硬化進(jìn)展的敏感標(biāo)志,高血壓組可溶性TM血壓正常組。血清TM和動脈粥樣硬化風(fēng)險正相關(guān)。TM /Cr與高血壓視網(wǎng)膜病變(眼底血管硬化)正相關(guān). TM/Cr比值可能為動脈粥樣硬化進(jìn)展的敏感標(biāo)志。,重度子癇前期患者凝血功能分子標(biāo)志物檢測及臨床意義,20例重度子癇前期患者及20例正常晚期妊娠孕婦分為兩組,檢測兩組孕婦血清凝血因子片段(F1+2)和血栓調(diào)節(jié)蛋白(TM),結(jié)果： TM：重度子癇前期組(43.58.5)g/L,正常晚妊組 (15.49.8)g/L,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.01) F1+2：重度子癇前期組為(2.020.23)nmol/L正常晚妊組 (0.860.47)nmol/L, 差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.01) 結(jié)論 TM和F1+2反映了重度子癇前期患者處于早期DIC的凝血狀態(tài),可作為重度子癇前期患者血栓前狀態(tài)的監(jiān)測指標(biāo) 中國現(xiàn)代藥物應(yīng)用，2014:98-98,近年研究發(fā)現(xiàn)TM具有獨特的抗血栓及抗炎特性。 TM能改善內(nèi)皮功能紊亂，可作為血管內(nèi)皮功能受損的標(biāo)志物。 TM水平與冠心病及急性冠脈綜合征發(fā)生有密切關(guān)系，是目前心血管疾病領(lǐng)域研究關(guān)注點之一。 急性心肌梗死TM水平顯著高于正常健康志愿者(P0.001)。 國內(nèi)也有研究發(fā)現(xiàn)就診時急性sT段抬高心肌梗死(sTEMI)組血漿TM水平與非sT段抬高心肌梗死(NSTEM I)組比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.105)；,血栓調(diào)節(jié)蛋白與冠心病的關(guān)系,血栓與止血雜志，2014.20（6）,凝血酶在血液中半衰期極短，只有幾秒鐘，并且很快被抗凝物質(zhì)（AT）中和，故無法直接準(zhǔn)確測定凝血酶。檢測凝血酶-抗凝血酶復(fù)合物(TAT)。 反映采血前1h內(nèi)的機(jī)體狀態(tài) TAT檢測代表凝血酶的生成量，是凝血活化的重要標(biāo)記 凝血酶抗凝血酶按11比例結(jié)合形成的復(fù)合物，并且因為TAT在凝血啟動早期就產(chǎn)生，因此TAT的檢測可以早期預(yù)測血栓的形成。 TAT升高，提示凝血酶生成增多，用于評估凝血激活狀態(tài),凝血酶-抗凝血酶復(fù)合物（TAT）,TAT(凝血酶抗凝血酶復(fù)合物),在血栓前產(chǎn)生，半衰期3-15分鐘，最能反映當(dāng)下的病人狀態(tài),TAT的臨床應(yīng)用,1.DIC早期診斷（90%升高）, TAT正?？膳懦鼶IC 2.部分房顫、二尖瓣狹窄合并房顫，血栓前狀態(tài)TAT增高 3.血栓性疾病（深靜脈血栓形成、肺栓塞、急性白血病及一些惡性腫瘤如肺癌時），TAT可顯著增高 抗凝治療效果判定 溶栓治療的再栓監(jiān)測。 溶栓治療后2小時，若TAT6ng/mL,表示冠狀動脈可能出現(xiàn)再梗死。,術(shù)后VTE病人TAT變化明顯早于D-Dimer,TAT是血栓前狀態(tài)/前DIC的標(biāo)志物,.,凝血功能和纖溶活性指標(biāo)在預(yù)測創(chuàng)傷性骨折患者 術(shù)后發(fā)生深靜脈血栓形成中的應(yīng)用價值,1.術(shù)前,對照組A（術(shù)后未發(fā)生DVT）和觀察組患者（術(shù)后發(fā)生DVT）的FIB明顯比對照組B（健康體檢者）高,差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.01)； 2.對照組A（術(shù)后未發(fā)生DVT）和觀察組患者（術(shù)后發(fā)生DVT）的 TAT、D-dimer 明顯高于對照組B（健康體檢者），差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.01); 3.對照組A（術(shù)后未發(fā)生DVT）和觀察組（術(shù)后發(fā)生DVT）比較,差異也有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05); 4.術(shù)后 1d 和術(shù)后 3d,對照組A的FIB、TAT、D-dimer 明顯比觀察組低,差異均具有計學(xué)意義(P0.05)。 結(jié)論 D-dimer陽性和TAT陽性是創(chuàng)傷性骨折患者術(shù)后 DVT 發(fā)生的高危因素。,臨床軍醫(yī)雜志，2015，43（6）,組織型纖溶酶原激活劑-纖溶酶原激活物抑制劑-1復(fù)合物 （t-PAI-C）,纖溶激活前產(chǎn)生，主要反映內(nèi)皮系統(tǒng)受到損傷。 PAI-1的濃度是t-PA的5倍，所以釋放到血液中的t-PA幾乎都與PAI-1形成了復(fù)合物,t-PAI-C既是纖溶系統(tǒng)分子標(biāo)志物也是血管內(nèi)皮細(xì)胞受損的分子標(biāo)志物 t-PAI-C增高: 1.DIC、DIC前狀態(tài) 2.動靜脈血栓（DVT，急性心肌梗塞） 3.血管內(nèi)皮細(xì)胞損傷 檢測注意事項 PAI在早上8點左右呈峰值，傍晚呈低值，建議采血時間固定，同時避免凍融。t-PA劇烈運動、溶血、年齡增加會升高,t-PAI-C臨床應(yīng)用,tPAI-C-VTE最佳診斷指標(biāo)之一,檢測102例VTE和113健康對照TAFI、PAI-1:Ag，tPAI-C與VTE相關(guān)性 結(jié)論：VTE發(fā)生，PAI-1:Ag，PAI-1-tPA值均增高， t-PAIC正常對照2倍,2246例首次診斷急性心梗患者。1267例幸存患者心梗3個月后檢查，并與對照組比較。 結(jié)果： 1.tPAI-C水平與心梗風(fēng)險明顯相關(guān)。 2.男性血漿高水平tPAI-C與吸煙或糖尿病協(xié)同作用，心梗風(fēng)險更大,tPAI-C-心梗風(fēng)險指標(biāo),纖溶酶和抗纖溶酶復(fù)合物（PIC）,纖溶前產(chǎn)生，PIC半衰期6小時,纖溶系統(tǒng)啟動后，機(jī)體合成纖溶酶原，被內(nèi)皮細(xì)胞合成的t-PA激活后轉(zhuǎn)變成為纖溶酶，水解纖維蛋白及纖維蛋白原，其降解產(chǎn)物（FDP和D-二聚體）可在血液中被檢測到。 肝臟同時產(chǎn)生纖溶酶抑制因子，即2纖溶酶抑制物（2PI），2PI與血液中存在的纖溶酶以1:1迅速結(jié)合，形成纖溶酶-2纖溶酶抑制物復(fù)合物（PIC、PAP）抑制纖溶。PIC反映纖溶系統(tǒng)最終階段的纖溶酶的分子標(biāo)志物，也是溶栓治療和防止再栓的重要指標(biāo)之一 纖溶系統(tǒng)激活的分子標(biāo)志物：反映采血前數(shù)小時的纖溶激活狀態(tài) 纖溶酶半衰期極短，不能直接測定,纖溶酶-2PI復(fù)合物 (PIC),PIC的臨床應(yīng)用,PIC升高，提示纖溶酶生成增多。PIC特異地反映評估纖溶激活狀態(tài)優(yōu)于2PI 1.DIC時，繼發(fā)性纖溶亢進(jìn)，PIC明顯增高，TAT也必然增高; 2.原發(fā)性纖溶亢進(jìn)，PIC增高，TAT不增高。 研究發(fā)現(xiàn)，DIC發(fā)作前7天，PAP與TAT、D-二聚體聯(lián)合測定，可以確定前DIC(pre-DIC)的存在。 3.溶栓治療監(jiān)測（t-PA、尿激酶、鏈激酶)PIC增高。 4.腫瘤（尤其是轉(zhuǎn)移性腫瘤）可誘發(fā)DIC，急性早幼粒細(xì)胞白血病也容易誘發(fā)DIC，PIC增高。 5.風(fēng)濕病、系統(tǒng)性紅斑狼瘡時PIC增高,DIC基礎(chǔ)疾病不同，纖溶激活程度也不同,PIC與DIC基礎(chǔ)疾病,J Intensive Care ,2014,2:20,PIC-預(yù)測心梗,前瞻性研究18個止血和纖溶指標(biāo)與急性心梗后再次梗死風(fēng)險的關(guān)系。 200例心梗幸存者2年隨訪，37例再發(fā)心血管事件。 血漿PIC下降與心梗后再發(fā)心血管事件明顯相關(guān)。,PAP即PIC,（術(shù)后發(fā)生DVT）,.,小結(jié),凝血系統(tǒng)標(biāo)志物 TAT(凝血酶-抗凝血酶復(fù)合物) TM(血栓調(diào)節(jié)蛋白) 纖溶系統(tǒng)標(biāo)志物 PIC(纖溶酶-2PI 復(fù)合物) t-PAIC(組織纖溶酶原激活物/纖溶酶原激活物抑制劑-1 復(fù)合物) 血管系統(tǒng)標(biāo)志物 TM t-PAIC,比現(xiàn)有項目更早期、更直接的反映凝血、纖溶的發(fā)生與進(jìn)程早期DIC、早期血栓的發(fā)現(xiàn),DIC 診斷和治療的關(guān)鍵在于“早”，TAT、PIC的聯(lián)合檢測可用于DIC早期診斷 TAT最早證實凝血酶生成的項目，也是診斷和治療的關(guān)鍵時期，即在DIC第1期時即可提