實(shí)驗(yàn)一普通光學(xué)顯微鏡的使用及細(xì)菌三形觀察.ppt

實(shí)驗(yàn)一 普通光學(xué)顯微鏡的使用及細(xì)菌三形觀察,一、目的要求,了解顯微鏡的構(gòu)造和各部分的作用，掌握顯微鏡的使用方法 學(xué)習(xí)并掌握油鏡的原理和使用方法 了解細(xì)菌的三種基本形態(tài),普通光學(xué)顯微鏡的基本結(jié)構(gòu),普通光學(xué)顯微鏡的構(gòu)造可分為兩部分：一為機(jī)械裝置，二為光學(xué)系統(tǒng) 。 機(jī)械裝置由鏡座、鏡筒、物鏡轉(zhuǎn)換器、載物臺(tái)、推動(dòng)器、粗動(dòng)螺旋和微動(dòng)螺旋等部件組成。 光學(xué)系統(tǒng)由目鏡、物鏡、聚光器、光源、濾光片、虹彩光圈等組成,二、基本原理,普通光學(xué)顯微鏡基本構(gòu)造,油鏡的工作原理,滴加鏡油的作用 （1） 增加照明亮度 （2） 增加顯微鏡的分辨率 分辨率（最大可分辨距離）=/2NA 式中=光波波長(zhǎng) ； NA=物鏡的數(shù)值孔徑值 NA= nsin(/2 ) n: 物鏡和被檢標(biāo)本間介質(zhì)的折射率 ：鏡口角（即入射角）,油鏡，即油浸接物鏡。當(dāng)光線通過(guò)玻片與鏡頭之間的空氣時(shí)，由于空氣與玻片的密度不同，使光線受到曲折，發(fā)生散射，降低了視野的照明度。若中間的介質(zhì)是一層油（其折射率與玻片的相近），則幾乎不發(fā)生折射，增加了視野的進(jìn)光量，從而使物象更加清晰。,三、實(shí)驗(yàn)器材,顯微鏡、擦鏡紙、雙層瓶（香柏油、二甲苯）等。 細(xì)菌三型標(biāo)本片（球菌、桿菌、螺旋菌）,四、操作步驟,（一）觀察前的準(zhǔn)備 1.取鏡和安放 置顯微鏡于平穩(wěn)的實(shí)驗(yàn)臺(tái)上，鏡座距實(shí)驗(yàn)臺(tái)邊沿約為34cm。鏡檢者姿勢(shì)要端正。 2.光源調(diào)節(jié) 安裝在鏡座內(nèi)的光源燈可通過(guò)調(diào)節(jié)電流或電壓來(lái)獲得適當(dāng)?shù)恼彰髁炼?，使視野?nèi)的光線均勻，亮度適宜。 3.根據(jù)使用者個(gè)人情況，調(diào)節(jié)雙目顯微鏡的目鏡 雙目顯微鏡的目鏡間距可以適當(dāng)調(diào)節(jié)，使其與觀察者兩個(gè)眼睛瞳孔的距離相符。,（二）顯微觀察 1.低倍鏡觀察 將標(biāo)本片放在載物臺(tái)上，用標(biāo)本夾夾住，調(diào)節(jié)標(biāo)本移動(dòng)螺旋，使目的物處于物鏡的正下方。 調(diào)節(jié)粗調(diào)螺旋，使物鏡（10）與標(biāo)本靠近，眼睛在側(cè)向注視物鏡，防止物鏡和載玻片相碰。 張開(kāi)雙眼向物鏡里觀察，如果見(jiàn)到目的物，但不十分清楚，可用細(xì)調(diào)螺旋，至目的物清晰為止。,2.高倍鏡觀察 使用高倍鏡前，必須先用低倍鏡觀察，發(fā)現(xiàn)目的物后將它移至視野正中處。 旋動(dòng)轉(zhuǎn)換器換高倍鏡。如果高倍鏡觸及載玻片立即停止旋動(dòng)，這說(shuō)明原來(lái)低倍鏡并沒(méi)有調(diào)準(zhǔn)，目的物并沒(méi)有真正找到，必須用低倍鏡重新調(diào)節(jié)。（物鏡的同焦現(xiàn)象） 如果高倍鏡下觀察目的物有點(diǎn)模糊，調(diào)節(jié)細(xì)調(diào)螺旋，直到視野清晰。,3.油鏡觀察 先用低倍鏡和高倍鏡檢查標(biāo)本片，將目的物移到視野正中。用粗調(diào)螺旋下降載物臺(tái)。 在載玻片上滴一滴香柏油，將油鏡移至正中，緩慢調(diào)節(jié)粗調(diào)螺旋使油鏡頭浸沒(méi)在油中，盡量貼近載玻片。然后再用細(xì)調(diào)螺旋微微向上調(diào)（切忌用粗調(diào)螺旋）。 油鏡觀察完畢，用油鏡紙將鏡頭上的油揩凈，另用擦鏡紙蘸少許二甲苯揩拭鏡頭，再用擦鏡紙揩干。 （應(yīng)特別注意不要因在下降鏡頭時(shí)用力過(guò)猛，或者調(diào)焦時(shí)誤將粗調(diào)節(jié)螺旋向反方向轉(zhuǎn)動(dòng)而損壞鏡頭及載玻片）,實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí) 請(qǐng)確保油鏡頭擦拭干凈！,1.不準(zhǔn)擅自拆卸顯微鏡的任何部件,以免損壞。 2.鏡面只能用擦鏡紙擦，不能用手指或粗布，以保證光潔度 3.觀察標(biāo)本時(shí)，必須依次用低、高倍鏡，最后用油鏡。當(dāng)目視接目鏡時(shí)，特別在使用油鏡時(shí)，切不可使用粗調(diào)節(jié)器，以免壓碎玻片或損傷鏡面。 4.觀察時(shí)，兩眼睜開(kāi)，養(yǎng)成兩眼能夠輪換觀察的習(xí)慣，以免眼睛疲勞，并且能夠在左眼觀察時(shí)，右眼注視繪圖。 5.拿顯微鏡時(shí)，一定要右手拿鏡臂，左手托鏡座，不可單手拿，更不可傾斜拿。,顯微鏡保養(yǎng)和使用中的注意事項(xiàng),五、實(shí)驗(yàn)結(jié)果,繪圖，記錄所觀察到的細(xì)菌三種基本形態(tài)。,六、問(wèn)題與討論,1、