實驗一普通光學(xué)顯微鏡的使用及細菌三形觀察.ppt

實驗一 普通光學(xué)顯微鏡的使用及細菌三形觀察,一、目的要求,了解顯微鏡的構(gòu)造和各部分的作用，掌握顯微鏡的使用方法 學(xué)習并掌握油鏡的原理和使用方法 了解細菌的三種基本形態(tài),普通光學(xué)顯微鏡的基本結(jié)構(gòu),普通光學(xué)顯微鏡的構(gòu)造可分為兩部分：一為機械裝置，二為光學(xué)系統(tǒng) 。 機械裝置由鏡座、鏡筒、物鏡轉(zhuǎn)換器、載物臺、推動器、粗動螺旋和微動螺旋等部件組成。 光學(xué)系統(tǒng)由目鏡、物鏡、聚光器、光源、濾光片、虹彩光圈等組成,二、基本原理,普通光學(xué)顯微鏡基本構(gòu)造,油鏡的工作原理,滴加鏡油的作用 （1） 增加照明亮度 （2） 增加顯微鏡的分辨率 分辨率（最大可分辨距離）=/2NA 式中=光波波長 ； NA=物鏡的數(shù)值孔徑值 NA= nsin(/2 ) n: 物鏡和被檢標本間介質(zhì)的折射率 ：鏡口角（即入射角）,油鏡，即油浸接物鏡。當光線通過玻片與鏡頭之間的空氣時，由于空氣與玻片的密度不同，使光線受到曲折，發(fā)生散射，降低了視野的照明度。若中間的介質(zhì)是一層油（其折射率與玻片的相近），則幾乎不發(fā)生折射，增加了視野的進光量，從而使物象更加清晰。,三、實驗器材,顯微鏡、擦鏡紙、雙層瓶（香柏油、二甲苯）等。 細菌三型標本片（球菌、桿菌、螺旋菌）,四、操作步驟,（一）觀察前的準備 1.取鏡和安放 置顯微鏡于平穩(wěn)的實驗臺上，鏡座距實驗臺邊沿約為34cm。鏡檢者姿勢要端正。 2.光源調(diào)節(jié) 安裝在鏡座內(nèi)的光源燈可通過調(diào)節(jié)電流或電壓來獲得適當?shù)恼彰髁炼?，使視野?nèi)的光線均勻，亮度適宜。 3.根據(jù)使用者個人情況，調(diào)節(jié)雙目顯微鏡的目鏡 雙目顯微鏡的目鏡間距可以適當調(diào)節(jié)，使其與觀察者兩個眼睛瞳孔的距離相符。,（二）顯微觀察 1.低倍鏡觀察 將標本片放在載物臺上，用標本夾夾住，調(diào)節(jié)標本移動螺旋，使目的物處于物鏡的正下方。 調(diào)節(jié)粗調(diào)螺旋，使物鏡（10）與標本靠近，眼睛在側(cè)向注視物鏡，防止物鏡和載玻片相碰。 張開雙眼向物鏡里觀察，如果見到目的物，但不十分清楚，可用細調(diào)螺旋，至目的物清晰為止。,2.高倍鏡觀察 使用高倍鏡前，必須先用低倍鏡觀察，發(fā)現(xiàn)目的物后將它移至視野正中處。 旋動轉(zhuǎn)換器換高倍鏡。如果高倍鏡觸及載玻片立即停止旋動，這說明原來低倍鏡并沒有調(diào)準，目的物并沒有真正找到，必須用低倍鏡重新調(diào)節(jié)。（物鏡的同焦現(xiàn)象） 如果高倍鏡下觀察目的物有點模糊，調(diào)節(jié)細調(diào)螺旋，直到視野清晰。,3.油鏡觀察 先用低倍鏡和高倍鏡檢查標本片，將目的物移到視野正中。用粗調(diào)螺旋下降載物臺。 在載玻片上滴一滴香柏油，將油鏡移至正中，緩慢調(diào)節(jié)粗調(diào)螺旋使油鏡頭浸沒在油中，盡量貼近載玻片。然后再用細調(diào)螺旋微微向上調(diào)（切忌用粗調(diào)螺旋）。 油鏡觀察完畢，用油鏡紙將鏡頭上的油揩凈，另用擦鏡紙蘸少許二甲苯揩拭鏡頭，再用擦鏡紙揩干。 （應(yīng)特別注意不要因在下降鏡頭時用力過猛，或者調(diào)焦時誤將粗調(diào)節(jié)螺旋向反方向轉(zhuǎn)動而損壞鏡頭及載玻片）,實驗結(jié)束時 請確保油鏡頭擦拭干凈！,1.不準擅自拆卸顯微鏡的任何部件,以免損壞。 2.鏡面只能用擦鏡紙擦，不能用手指或粗布，以保證光潔度 3.觀察標本時，必須依次用低、高倍鏡，最后用油鏡。當目視接目鏡時，特別在使用油鏡時，切不可使用粗調(diào)節(jié)器，以免壓碎玻片或損傷鏡面。 4.觀察時，兩眼睜開，養(yǎng)成兩眼能夠輪換觀察的習慣，以免眼睛疲勞，并且能夠在左眼觀察時，右眼注視繪圖。 5.拿顯微鏡時，一定要右手拿鏡臂，左手托鏡座，不可單手拿，更不可傾斜拿。,顯微鏡保養(yǎng)和使用中的注意事項,五、實驗結(jié)果,繪圖，記錄所觀察到的細菌三種基本形態(tài)。,六、問題與討論,1、