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如何開展醫(yī)學(xué)免疫學(xué)設(shè)計(jì)性實(shí)驗(yàn),微生物學(xué)免疫學(xué)教研室 劉輝,講座內(nèi)容,免疫學(xué)設(shè)計(jì)性實(shí)驗(yàn)方案簡介 設(shè)計(jì)性實(shí)驗(yàn)開題報(bào)告的撰寫,一、免疫學(xué)設(shè)計(jì)性實(shí)驗(yàn)方案簡介,設(shè)計(jì)性實(shí)驗(yàn)的含義和意義 免疫學(xué)設(shè)計(jì)性實(shí)驗(yàn)方案,(一)設(shè)計(jì)性實(shí)驗(yàn)的含義和意義,什么是設(shè)計(jì)性實(shí)驗(yàn)? 設(shè)計(jì)性實(shí)驗(yàn)是指給定實(shí)驗(yàn)?zāi)康囊蠛蛯?shí)驗(yàn)條件,由學(xué)生自行設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)方案并加以實(shí)現(xiàn)的實(shí)驗(yàn)。 設(shè)計(jì)性實(shí)驗(yàn)的意義:培養(yǎng) 科研意識(shí) 創(chuàng)新能力 團(tuán)隊(duì)精神,(二)免疫學(xué)設(shè)計(jì)性實(shí)驗(yàn)方案,選題范圍 具體實(shí)施計(jì)劃 考核辦法,1.選題范圍,自然流產(chǎn)與自身抗體的關(guān)系 自然流產(chǎn)的發(fā)生機(jī)制之一:免疫學(xué)因素 自身抗體: 抗心磷脂抗體、抗精子抗體、 抗核抗體、抗子宮內(nèi)膜抗體、 抗甲狀腺抗體等等,2.具體實(shí)施計(jì)劃,分工合作 每4人一組,明確分工 時(shí)間安排 第4周:查閱文獻(xiàn) 第5周:整理資料、立題、撰寫立題報(bào)告 第6周:交立題報(bào)告 第7周:開始實(shí)驗(yàn) 第8周:總結(jié)、評(píng)選優(yōu)秀、PPT演示,3.考核辦法,實(shí)驗(yàn)報(bào)告:5分(平均分) 實(shí)驗(yàn)原理、方法、結(jié)果及分析、結(jié)論 立題報(bào)告:10分 評(píng)選優(yōu)秀: 每班選一份 發(fā)證書,實(shí)用性 科學(xué)性 合理性 創(chuàng)新性 可行性,二、設(shè)計(jì)性實(shí)驗(yàn)開題報(bào)告的撰寫,開題報(bào)告的含義與作用 開題報(bào)告的內(nèi)容,(一)開題報(bào)告的含義與作用,開題報(bào)告含義 當(dāng)課題方向確定之后,課題負(fù)責(zé)人在調(diào)查研究的基礎(chǔ)上撰寫的報(bào)請(qǐng)上級(jí)批準(zhǔn)的選題計(jì)劃。 它說明課題應(yīng)該進(jìn)行研究、自己有條件進(jìn)行研究以及準(zhǔn)備如何開展研究等問題,也可以說是對(duì)課題的論證和設(shè)計(jì)。,開題報(bào)告作用 是提高選題質(zhì)量和水平的重要環(huán)節(jié)。 是科研能否得到批準(zhǔn)資助和順利開展的關(guān)鍵。 設(shè)計(jì)好比一項(xiàng)工程的藍(lán)圖,沒有優(yōu)良的工程藍(lán)圖,絕不可能建設(shè)質(zhì)量良好的工程。 “制定好一份質(zhì)量優(yōu)良的設(shè)計(jì)方案,科研工作就已完成了一半?!?(一)開題報(bào)告的含義與作用,(二)開題報(bào)告的內(nèi)容,題目 簡表 立論依據(jù) 研究方案,1.題目,立題步驟 給出選題范圍 查閱文獻(xiàn) * 整理分析,形成假說 立題 題目要求 與內(nèi)容統(tǒng)一、明確具體、科學(xué)規(guī)范、 醒目簡潔(一般不超過20字),正確發(fā)現(xiàn)、提出 問題的過程,1.題目,愛因斯坦: 提出一個(gè)問題往往比解決一個(gè)問題更重要,因?yàn)榻鉀Q問題也許只是一個(gè)實(shí)驗(yàn)上的技巧而已,而提出新問題是需要?jiǎng)?chuàng)造性的想象力,而且標(biāo)志著科學(xué)的真正進(jìn)步。 Behring:德國藥學(xué)家 提出細(xì)菌毒素假說 研究出白喉毒素是致死的原因 并進(jìn)一步提出應(yīng)用白喉抗血清治療白喉,2、簡表,認(rèn)真填寫:第一印象 真實(shí)介紹:便于聯(lián)系 明確分工,3.立論依據(jù),國內(nèi)外研究概況和發(fā)展趨勢 研究目的 研究意義 參考文獻(xiàn),(1)國內(nèi)外研究概況和發(fā)展趨勢,研究現(xiàn)狀及現(xiàn)狀分析 針對(duì)性 先進(jìn)性 提出尚未解決的問題 你的研究與現(xiàn)狀的聯(lián)系,(2)研究目的,你研究什么? 表明你在哪一方面研究 課題的焦點(diǎn) 具體,(3)研究意義,你為什么研究? 簡明扼要 應(yīng)用基礎(chǔ)研究:科學(xué)意義和應(yīng)用前景,(4)參考文獻(xiàn),采用并列出近五年的5-10篇 注意正確的書寫格式 序號(hào) 作者 題目 期刊 時(shí)間 卷 期 頁 例:18 王妍婷.FAS/FASL與妊娠.山西醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào),2002,33(2):181-184 序號(hào)18在文中內(nèi)容的右上角標(biāo)出 例:-細(xì)胞凋亡可能參與妊娠免疫耐受的形成18 -,-Fas/FasL相互作用引起的細(xì)胞凋亡可能參與妊娠免疫耐受的形成18。那么Fas/FasL系統(tǒng)介導(dǎo)的AICD的異常就會(huì)打破妊娠免疫耐受而致RSA,sFas/sFasL作為影響AICD的因素,是否與RSA有關(guān)呢?又是何種關(guān)系? 本研究旨在通過檢測RSA患者血清中sFas/sFasL蛋白和mRNA的變化;sFas/sFasL與ACA、ATA、EmAb有無相關(guān)性;丈夫淋巴細(xì)胞免疫治療前后RSA患者血清中sFas/sFasL蛋白和mRNA的變化,來研究sFas/sFasL與RSA的關(guān)系,探討sFas/sFasL在RSA發(fā)生中的作用及RSA的免疫異常的機(jī)制,尋找RSA的發(fā)病因素,為診斷、干預(yù)、治療RSA提供新指標(biāo)、新思路。 參考文獻(xiàn) 18 王妍婷等,F(xiàn)as/FasL與妊娠,山西醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào),2002;33(2):181-184,立論依據(jù) 舉例,4.研究方案,研究方案 課題確定之后,在正式開展研究之前制訂的整個(gè)課題研究的工作計(jì)劃,它初步規(guī)定了課題研究各方面的具體內(nèi)容和步驟。 研究方案對(duì)整個(gè)研究工作的順利開展起著關(guān)鍵的作用,研究方案水平的高低,是一個(gè)課題質(zhì)量與水平的重要反映。,4.研究方案,研究內(nèi)容 研究方法 技術(shù)路線及實(shí)驗(yàn)方案 所需實(shí)驗(yàn)材料與儀器,(1)研究內(nèi)容,“具體做哪些?” 研究的對(duì)象、研究的問題 研究哪幾個(gè)方面?有哪幾個(gè)層次?檢測哪幾個(gè)指標(biāo)?等,研究內(nèi)容 舉例,研究內(nèi)容 采用ELISA法及RT-PCR半定量法檢測以下指標(biāo): 比較RSA患者與正常孕婦血清sFas/sFasL蛋白和mRNA的變化; 檢測丈夫淋巴細(xì)胞免疫治療前后RSA患者血清sFas/sFasL蛋白和mRNA的變化;,(2)研究方法,通過參考文獻(xiàn),調(diào)查實(shí)驗(yàn)條件選定適當(dāng)?shù)脑O(shè)計(jì)方案回答“怎樣做?” 原則:既具有較高的論證強(qiáng)度,又要切實(shí)可行 選擇恰當(dāng)?shù)难芯繉?duì)象 設(shè)置合理的對(duì)照(對(duì)比研究),分組,研究方法 舉例,研究方法: 酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)(ELISA)間接法、RT-PCR半定量法。 分組: 正常育齡婦女組 正常早孕婦女組 RSA婦女組 例數(shù):每組約5080例 RSA診斷標(biāo)準(zhǔn):排除遺傳、解剖、內(nèi)分泌、感染性因素以外的URSA自然流產(chǎn)次數(shù)2次 標(biāo)本:血清,標(biāo)本源于皖南醫(yī)學(xué)院優(yōu)生優(yōu)育研究所不孕門診 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理:2檢驗(yàn)、t檢驗(yàn) 直線相關(guān)分析,(3)技術(shù)路線及實(shí)驗(yàn)方案,具體操作程序 按時(shí)間和實(shí)驗(yàn)順序來安排 可用流程圖、示意圖,技術(shù)路線及實(shí)驗(yàn)方案 舉例,技術(shù)路線實(shí)驗(yàn)方案: 采血,分離血清,-20保存?zhèn)溆?ELISA間接法檢測ACA、ATA、EmAb ELISA雙抗體夾心法檢測sFas/sFasL獲得OD值 RT-PCR半定量法檢測sFas/sFasL mRNA水平 數(shù)據(jù)處理,全部數(shù)據(jù)輸入計(jì)算機(jī),用相關(guān)統(tǒng)計(jì)軟件分析數(shù)據(jù),尋找差異性、相關(guān)性。,(4)所需實(shí)驗(yàn)材料與儀器,查閱文獻(xiàn) 調(diào)查實(shí)驗(yàn)室條件,所需實(shí)驗(yàn)材料與儀器 舉例,材料試劑: 血清、ELISA檢測試劑及聚苯乙烯反應(yīng)板(購于深圳晶美生物有限公司、MBI Fermentas公司) 儀器: 試管、吸管、50微量移液器、37恒溫箱、化學(xué)發(fā)光-酶標(biāo)儀、熒光顯微鏡等,文獻(xiàn): 記錄保存?zhèn)鞑ブR(shí)的載體 文字、圖形、聲頻、視頻等 醫(yī)學(xué)文獻(xiàn)種類 教科書(教材、實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)) 參考書、專著及專題論著 雜志(期刊、???、學(xué)報(bào)文摘、進(jìn)展) 學(xué)術(shù)會(huì)議論文摘要匯編 簡報(bào),查閱文獻(xiàn),查閱文獻(xiàn),文獻(xiàn)檢索方法: 手工檢索 計(jì)算機(jī)檢索* 閱讀醫(yī)學(xué)文獻(xiàn)的方法 瀏覽性閱讀 選擇性閱讀 精讀,文獻(xiàn)獲取途徑,利用綜述,專著,工具書查找 如細(xì)菌學(xué)評(píng)論免疫學(xué)進(jìn)展中華醫(yī)學(xué)雜志 利用檢索工具及數(shù)據(jù)庫查找 檢索工具:目錄、索引、
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