GB29943-2013食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)食品添加劑棕櫚酸視黃酯(棕櫚酸維生素A).pdf

中華人民共和國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)中華人民共和國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) GB 299432013 2013-11-29 發(fā)布 2014-06-01 實(shí)施 食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 食品添加劑 棕櫚酸視黃酯 （棕櫚酸維生素A） GB 299432013 1 CH3CH3CH3OCH3CH3OC15H31食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 食品添加劑 棕櫚酸視黃酯（棕櫚酸維生素 A） 1 范圍 本標(biāo)準(zhǔn)適用于以醋酸維生素 A（或 -紫羅蘭酮）和棕櫚酸為主要原料，經(jīng)加工制得的食品添加劑棕櫚酸視黃酯（棕櫚酸維生素 A 或維生素 A 棕櫚酸酯） 。 2 化學(xué)名稱、分子式、結(jié)構(gòu)式和相對(duì)分子質(zhì)量 2.1 化學(xué)名稱 3,7-二甲基-9-(2,6,6-三甲基-1-環(huán)己烯-1-基)-2,4,6,8-壬四烯-1-棕櫚酸酯 2.2 分子式 C36H60O2 2.3 結(jié)構(gòu)式 2.4 相對(duì)分子質(zhì)量 525.09（按2007年國(guó)際相對(duì)原子質(zhì)量） 3 技術(shù)要求 3.1 感官要求 感官要求應(yīng)符合表 1 的規(guī)定。 表 1 感官要求 項(xiàng) 目 要 求 檢驗(yàn)方法 色澤 淡黃色至黃棕色 取適量試樣置于白瓷點(diǎn)滴板上，在自然光線下，觀察其色澤和狀態(tài) 狀態(tài) 油狀液體（低溫時(shí)可固化） 3.2 理化指標(biāo) 理化指標(biāo)應(yīng)符合表 2 的規(guī)定。 GB 299432013 2 表2 理化指標(biāo) 項(xiàng) 目 指 標(biāo) 檢驗(yàn)方法 棕櫚酸視黃酯（棕櫚酸維生素 A）含量a/（IU/g） 5105 附錄 A 中 A.4 酸值（以 KOH 計(jì)）/（mg/g） 2.0 附錄 A 中 A.5 過(guò)氧化值/（meq/kg） 10.0 GB/T 5538 鉛（Pb）/（mg/kg） 2 GB 5009.12 注：商品化的棕櫚酸視黃酯（棕櫚酸維生素 A）產(chǎn)品應(yīng)以符合本標(biāo)準(zhǔn)的棕櫚酸視黃酯（棕櫚酸維生素 A）為原料，可添加符合相關(guān)食品質(zhì)量規(guī)格要求的食用植物油、淀粉、糊精、蔗糖、抗氧化劑、抗結(jié)劑、增稠劑等輔料而制成。 a維生素 A 以維生素 A 醇當(dāng)量或國(guó)際單位（IU）表示，1g 維生素 A 醇當(dāng)量=3.33 IU。棕櫚酸視黃酯（棕櫚酸維生素 A）實(shí)際含量為標(biāo)示量的 95.0%110.0%。 GB 299432013 3 附錄 A 檢驗(yàn)方法 A.1 操作提示 試樣應(yīng)在密閉、避光和不超過(guò)25條件下貯存。配制的試樣溶液應(yīng)盡快使用，建議在2 h內(nèi)使用。試樣中如出現(xiàn)結(jié)晶，可在65條件下混勻，但加熱時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng)。含量測(cè)定過(guò)程中，應(yīng)最小程度地接觸光和空氣中的氧及其他氧化劑，使用低光化玻璃儀器。 A.2 一般規(guī)定 本標(biāo)準(zhǔn)除另有規(guī)定外，所用試劑的純度應(yīng)在分析純以上，所用標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液、雜質(zhì)測(cè)定用標(biāo)準(zhǔn)溶液、制劑及制品，應(yīng)按GB/T 601、GB/T 602、GB/T 603的規(guī)定制備，實(shí)驗(yàn)用水應(yīng)符合GB/T 6682-2008中三級(jí)水的規(guī)定。試驗(yàn)中所用溶液在未注明用何種溶劑配制時(shí)，均指水溶液。 A.3 鑒別試驗(yàn) A.3.1 試劑和材料 A.3.1.1 棕櫚酸視黃酯（棕櫚酸維生素A）對(duì)照品。 A.3.1.2 環(huán)己烷溶液：每升環(huán)己烷中含1 g二丁基羥基甲苯。 A.3.1.3 展開(kāi)劑：環(huán)己烷+乙醚（4+1）。 A.3.1.4 色譜用硅膠板。 A.3.2 分析步驟 A.3.2.1 試樣溶液的制備 稱取適量試樣， 用環(huán)己烷溶液配制成每毫升中約含3.3 IU棕櫚酸視黃酯 （棕櫚酸維生素A） 的試樣溶液。 A.3.2.2 對(duì)照溶液的制備 稱取適量棕櫚酸視黃酯（棕櫚酸維生素A）對(duì)照品，用環(huán)己烷溶液配制成每毫升中約含3.3 IU棕櫚酸視黃酯（棕櫚酸維生素A）的對(duì)照溶液。 A.3.2.3 薄層色譜分析 分別量取試樣溶液和對(duì)照溶液各3 L，于色譜用硅膠板上分別點(diǎn)樣后置于盛有展開(kāi)劑的層析缸中，展開(kāi)至溶劑前沿距原點(diǎn)超過(guò)15 cm，取出硅膠板，晾干，在紫外燈下（波長(zhǎng)254 nm處）觀察。試樣溶液顯示的主斑點(diǎn)應(yīng)與對(duì)照溶液所顯示主斑點(diǎn)的位置一致。 A.4 棕櫚酸視黃酯（棕櫚酸維生素A）含量的測(cè)定 A.4.1 試劑和材料 A.4.1.1 戊烷。 A.4.1.2 異丙醇：色譜純。 GB 299432013 4 A.4.1.3 甲醇：色譜純。 A.4.1.4 水：GB/T 6682-2008中的一級(jí)水。 A.4.1.5 異丙醇溶液：每升異丙醇中含1 g二丁基羥基甲苯。 A.4.1.6 四丁基氫氧化銨溶液：0.1 mol/L，以異丙醇為溶劑配制。 A.4.1.7 全反式醋酸維生素A標(biāo)準(zhǔn)品：按A.4.3.1紫外分光光度法測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)品中醋酸維生素A的含量。在測(cè)定過(guò)程中，用全反式醋酸維生素A標(biāo)準(zhǔn)品作為試樣，試樣溶液的最大吸收峰應(yīng)在326 nm附近，且吸光度比值A(chǔ)/ A326符合表A.1的要求。 A.4.2 儀器和設(shè)備 A.4.2.1 紫外分光光度計(jì)。 A.4.2.2 高效液相色譜儀，配紫外檢測(cè)器（檢測(cè)波長(zhǎng)326 nm） 。 A.4.3 分析步驟 A.4.3.1 紫外分光光度法 A.4.3.1.1 方法提要 維生素A分子中含有5個(gè)共軛雙鍵，在波長(zhǎng)326 nm附近具有最大吸收峰，其最大吸收峰的位置隨溶劑不同而異，因而可用于含量測(cè)定。 A.4.3.1.2 試樣溶液的制備 稱取試樣25 mg100 mg， 精確至0.001 g， 加入5 mL戊烷， 并用異丙醇稀釋配制成每毫升含10 IU 15 IU棕櫚酸視黃酯（棕櫚酸維生素A）或醋酸維生素A的試樣溶液。 A.4.3.1.3 測(cè)定 取適量試樣溶液，采用紫外分光光度法驗(yàn)證試樣溶液的最大吸收峰是否在326 nm附近。如果試樣溶液的最大吸收峰在326 nm附近，則測(cè)定試樣溶液在波長(zhǎng)300 nm、326 nm、350 nm和370 nm處的吸光度，并計(jì)算不同波長(zhǎng)下的吸光度A與326 nm處吸光度A326之比A/ A326。 如果不同波長(zhǎng)的吸光度比值符合表A.1的要求，則按A.4.4結(jié)果計(jì)算中的公式（A.1）計(jì)算試樣中棕櫚酸視黃酯（棕櫚酸維生素A）或醋酸維生素A的含量。 如果試樣溶液的最大吸收峰不在326 nm附近，或者吸光度比值有一項(xiàng)或多項(xiàng)不符合表A.1的要求，則應(yīng)按A.4.3.2液相色譜法測(cè)定含量。 表A.1 不同波長(zhǎng)的吸光度比值 吸光度之比 指標(biāo) A300/A326 0.60 A350/A326 0.54 A370/A326 0.14 A.4.3.2 液相色譜法 A.4.3.2.1 方法提要 棕櫚酸視黃酯（棕櫚酸維生素A）在四丁基氫氧化銨的作用下，水解為維生素A醇，注入反相色譜柱上，用流動(dòng)相洗脫分離，紫外檢測(cè)器測(cè)定，外標(biāo)法計(jì)算棕櫚酸視黃酯（棕櫚酸維生素A）含量。 A.4.3.2.2 參考色譜條件 GB 299432013 5 A.4.3.2.2.1 色譜柱：18液相色譜柱，125 mm 4 mm，粒徑5 m，或同等性能的色譜柱。 A.4.3.2.2.2 流動(dòng)相：甲醇水955（體積比）。 A.4.3.2.2.3 流速：1 mL/min。 A.4.3.2.2.4 檢測(cè)波長(zhǎng)：325 nm。 A.4.3.2.2.5 進(jìn)樣量：10 L。 A.4.3.2.2.6 保留時(shí)間：維生素A醇的保留時(shí)間約為3 min。 A.4.3.2.3 試樣溶液的制備 稱取約0.1 g試樣，精確至0.0001 g，置于100mL容量瓶中，用5 mL戊烷迅速溶解。加入40 mL四丁基氫氧化銨溶液。輕輕振搖，讓混合液在6065下水解反應(yīng)10 min（可采用水浴超聲處理）。冷卻至室溫，用異丙醇溶液稀釋至100 mL，輕搖混勻防止產(chǎn)生氣泡，得到試樣儲(chǔ)備液。移取適量試樣儲(chǔ)備液，用異丙醇稀釋配制成每毫升約含100 IU棕櫚酸視黃酯（棕櫚酸維生素A）的試樣溶液。 A.4.3.2.4 標(biāo)準(zhǔn)溶液的制備 稱取適量全反式醋酸維生素A標(biāo)準(zhǔn)品（稱樣量約含1105 IU全反式醋酸維生素A），精確至0.000 1 g，置于100 mL容量瓶中， 用5 mL戊烷迅速溶解。 加入40 mL四丁基氫氧化銨溶液。 輕搖混勻， 讓混合液在6065下水解反應(yīng)10 min（可采用水浴超聲處理）。冷卻至室溫，用異丙醇溶液稀釋至100 mL，輕搖混勻防止產(chǎn)生氣泡，得到標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液。 移取5.0 mL標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液，置于50 mL容量瓶中，用異丙醇稀釋定容至刻度，得到標(biāo)準(zhǔn)溶液。 A.4.3.2.5 測(cè)定 在A.4.3.2.2參考色譜條件下，分別對(duì)試樣溶液和標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)行測(cè)定，重復(fù)進(jìn)樣兩次，分別記錄相應(yīng)色譜圖中維生素A醇的峰面積值。按A.4.4結(jié)果計(jì)算中的公式（A.2）計(jì)算試樣中棕櫚酸視黃酯（棕櫚酸維生素A）的含量。 A.4.4 結(jié)果計(jì)算 A.4.4.1 紫外分光光度法 棕櫚酸視黃酯（棕櫚酸維生素A）或醋酸維生素A含量w1以國(guó)際單位每克（IU/g）計(jì)，按公式（A.1）計(jì)算： 10019003261mVAw（A.1） 式中： A326試樣溶液在326 nm處的吸光度； 1900棕櫚酸視黃酯（棕櫚酸維生素A）或醋酸維生素A的吸光度與含量之間的換算系數(shù)； V試樣溶液的稀釋體積，單位為毫升（mL）； m試樣的質(zhì)量，單位為克（g）； 100換算系數(shù)。 實(shí)驗(yàn)結(jié)果以平行測(cè)定結(jié)果的算術(shù)平均值為準(zhǔn)。在重復(fù)性條件下獲得的兩次獨(dú)立測(cè)定結(jié)果的絕對(duì)差值不大于算術(shù)平均值的2 %。 A.4.4.2 液相色譜法 GB 299432013 6 棕櫚酸視黃酯（棕櫚酸維生素A）含量w2以國(guó)際單位每克（IU/g）計(jì)，按公式（A.2）計(jì)算： 12212mAmcAw（A.2） 式中： A1試樣溶液色譜圖中維生素A醇的平均峰面積值； c用A.4.3.1紫外分光光度法測(cè)得的全反式醋酸維生素A標(biāo)準(zhǔn)品的含量，單位為國(guó)際單位每克（IU/g）； m2全反式醋酸維生素A標(biāo)準(zhǔn)品的稱樣量，單位為毫克（mg）； A2標(biāo)準(zhǔn)溶液色譜圖中維生素A醇的平均峰面積值； m1試樣的質(zhì)量，單位為毫克（mg）。 實(shí)驗(yàn)結(jié)果以平行測(cè)定結(jié)果的算術(shù)平均值為準(zhǔn)。在重復(fù)性條件下獲得的兩次獨(dú)立測(cè)定結(jié)果的絕對(duì)差值不大于算術(shù)平均值的10 %。 A.5 酸值的測(cè)定 A.5.1 試劑和材料 A.5.1.1 無(wú)水乙醇。 A.5.1.2 石油醚。 A.5.1.3 氫氧化鉀-乙醇標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液：c（KOH）=0.1 mol/L。 A.5.1.4 酚酞指示液：10 g/L。 A.5.2 分析步驟 準(zhǔn)確稱取約2 g試樣，精確到0.001 g，溶于50 mL由等體積無(wú)水乙醇和石油醚組成的混合溶劑中（該混合溶劑預(yù)先用氫氧化鉀-乙醇標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液滴定至中性），若試樣不能完全溶解，則加熱到約90以確保試樣完全溶解。加入0.5 mL酚酞指示液，立即用氫氧化鉀-乙醇標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液滴定，滴定至溶液呈淡粉色并維持30 s不褪色即為滴定終點(diǎn)。 A.5.3 結(jié)果計(jì)算 酸值（以KOH計(jì)