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文檔簡介
1、3.2體外受精和早期胚胎培養(yǎng),1,應用課堂,學習目標,簡述哺乳動物體外受精技術的主要操作步驟。 簡述哺乳動物胚胎的早期培養(yǎng)方法。 認同體外受精在家畜快速繁殖中的重要意義。,2,應用課堂,1978年7月25日世界首例試管嬰兒,第一個試管嬰兒于1978年7月25日在英國的奧爾德姆市醫(yī)院誕生,她的名字叫路易絲.布朗。路易絲.布朗的母親梅.布朗因輸卵管阻塞而不能生育。,醫(yī)生從梅.布朗(時年31歲)體內提取卵子,再取她丈夫(時年38歲)的精液,經處理在體外使卵子受精,受精卵分裂形成16細胞胚后重新植入梅.布朗的子宮內。9個多月后就生下了路易絲.布朗。,3,應用課堂,根據(jù)資料回答下列問題: 1.試管嬰兒技
2、術包括哪些操作步驟? (體外受精、早期胚胎培養(yǎng)和胚胎移植) 2.試管嬰兒培育和母親正常懷孕的過程有何異同? 相同之處:都通過有性生殖產生;都要在母體子宮內發(fā)育形成胎兒。 不同之處:受精作用在體外,并在體外發(fā)育成早期胚胎進行胚胎移植。,4,應用課堂,試管動物技術,是指通過人工操作使卵子和精子在體外條件下成熟和受精,并通過培養(yǎng)發(fā)育成早期胚胎后,再經移植產生后代的技術。,精子,卵子,受精卵,早期胚胎,移植,子宮,個體,5,應用課堂,試管動物技術過程:,第一步:體外受精,第二步:胚胎的早期培養(yǎng),第三步:胚胎移植,快速繁殖動物優(yōu)良品種,目的:,試管動物技術,6,應用課堂,主要包括 、 和 等幾個主要步驟
3、 。,概念:采取雌性動物的 和雄性動物的 ,使其在 受精。,二、體外受精,卵母細胞,精子,體外,卵母細胞的采集,精子的獲取,受精,7,應用課堂,a.如何使雌性動物排出更多的卵子? b.對實驗動物小鼠、兔和小家畜豬、羊如何采集卵子? c.對于大家畜或大型動物如何采集卵子? d.采集的卵子是否馬上可以受精?,閱讀P69、70思考以下問題:,1.卵母細胞的采集和培養(yǎng),8,應用課堂,采用的主要方法是給供體注射 ,使其排出更多的卵子,之后從 中沖取卵子,直接與獲能的精子在體外受精。,促性腺激素,輸卵管,a.如何使雌性動物排出更多的卵子?,超數(shù)排卵處理,b.對實驗動物小鼠、兔和小家畜豬、羊如何采集卵子?,
4、對不同動物,采集卵母細胞的方法不同。,1.卵母細胞的采集和培養(yǎng),9,應用課堂,大家畜或大型動物,如牛,卵細胞的采集: 從屠宰場已屠宰母畜的 中采集卵母細胞,也可以借助 、 或 等工具,直接從活體動物的卵巢中吸取卵母細胞。,卵巢,超聲波(B超)探測儀,內窺鏡,腹腔鏡,1.卵母細胞的采集和培養(yǎng),c.對于大家畜或大型動物如何采集卵子?,d.采集的卵子是否馬上可以受精?,采集的卵母細胞,都要在體外經 后,才能與 精子結合完成受精。,人工培養(yǎng)成熟,獲能,10,應用課堂,閱讀P70、71思考以下問題:,a.精子的采集有哪些方法? b.體外受精需要哪些前處理?,2、精子細胞的采集和獲能,11,應用課堂,2、
5、精子細胞的采集和獲能,(1)采集方法:,假陰道法 手握法 電刺激法,a.精子的采集有哪些方法?,大家畜或大型動物 豬、犬等體型較小,易于控制的動物,野生或經濟動物,12,應用課堂,2、精子細胞的采集和獲能,(2)體外精子獲能的方法:,培養(yǎng)法:,化學誘導法:,如:嚙齒動物、家兔和豬等,如:牛、羊等,放入人工配制的獲能液中,放在一定濃度的肝素或鈣離子載體A23187溶液中,b.體外受精需要哪些前處理?,13,應用課堂,3.受精,獲能溶液,專用受精溶液,14,應用課堂,CO2培養(yǎng)箱,三、胚胎的早期培養(yǎng),復習:動物細胞培養(yǎng)的條件是什么?,糖、氨基酸、促生長因子、無機鹽、微量元素、血清等,動物細胞培養(yǎng)液
6、成分?,15,應用課堂,精子和卵子在體外受精后,應將受精卵移入發(fā)育培養(yǎng)液中繼續(xù)培養(yǎng),以檢查受精狀況和受精卵的發(fā)育能力。,培養(yǎng)液成分:,有機鹽、無機鹽、維生素、激素、氨基酸、核苷酸、血清等,三、胚胎的早期培養(yǎng),16,應用課堂,動物胚胎培養(yǎng)液成分與動物細胞培養(yǎng)液成分比較,無機鹽和有機鹽,氨基酸、核苷酸,維生素、激素,血清,無機鹽、微量元素,促生長因子,糖、氨基酸,血清、血漿,三、胚胎的早期培養(yǎng),17,應用課堂,培養(yǎng)發(fā)育到適宜階段時,可將其取出向受體移植或冷動保存,三、胚胎的早期培養(yǎng),不同動物胚胎移植時間不同,牛、羊: 小鼠、家兔: 試管嬰兒:,桑椹胚或囊胚階段 可在更早的階段移植 816個細胞階段
7、,注:胚胎發(fā)育的主要場所是母體,18,應用課堂,為充分利用屠宰母畜卵巢上的卵母細胞,不妨將屠宰場和“胚胎工廠”合建。這樣屠宰場的產品就不僅是鮮肉,還會生產出大量的胚胎和胚胎工程所需的原材料,你看這個想法可行嗎?,奇思妙想,目前,從屠宰場廢棄的卵巢中,每個卵巢平均可采集10枚左右可用卵母細胞,經體外培養(yǎng)成熟和受精后約可獲4枚可用的胚胎,經過移植給受體母牛,最終可得到12頭犢牛。牛體外受精胚胎的工廠化生產已經成為可能。,19,應用課堂,采集良種母牛的卵母細胞,卵母細胞的體外培養(yǎng),采集良種公牛精子,精子體外獲能,體外受精,良種牛體外受精胚胎,胚胎移植,受體牛,良種犢牛,成熟期牛,屠宰加工廠,市場,采
8、集卵巢中的卵母細胞,“試管?!惫S化生產的技術流程圖,思考:試管牛的產生屬于克隆嗎?,20,應用課堂,早期胚胎,胚胎移植,C代孕母體,D新個體 (與B遺傳物質相同),克隆動物的培育過程,21,應用課堂,有性生殖 無性生殖,核移植技術、 胚胎移植,遵循 不遵循,體外受精 胚胎移植,比較試管動物和克隆動物,來自2個個體 主要來自核供體,受精卵,重組細胞,22,應用課堂,胚胎移植,采集卵母細胞,體外培養(yǎng),采集精子,體外獲能,體外受精,早期胚胎培養(yǎng),受體牛,小 結,(時期: ),1)超數(shù)排卵(試劑) 2)活體取卵(儀器) 3)從屠宰的卵巢取卵,方法,(方法,試劑),(試劑),(培養(yǎng)條件、目的階段),成
9、熟的卵子,獲能的精子,MII中期,方法,23,應用課堂,1、關于牛體外受精及胚胎的工廠化生產的敘述,正確的是 A. 精子和卵細胞受精形成受精卵后即可移入母牛子宮 B. 采集的卵母細胞應立即與精子共同放入培養(yǎng)液才能形成受精卵 C. 成熟的卵細胞與收集來的精子相遇形成受精卵,需培養(yǎng)到一定 階段才可移植 D. 體外受精胚胎的工廠化生產即胚胎發(fā)育和受精過程只需在體外 進行,2、下列現(xiàn)代生物技術成果獲得必須通過胚胎移植的是 A. 轉基因良種雞 B. 重組酵母乙肝疫苗 C. 單克隆抗體 D. 試管嬰兒,C,D,鞏固練習,24,應用課堂,3、采集的卵母細胞,在體外經人工培養(yǎng)成熟后,才能與獲能的精子受精,以下
10、原因不正確的是 A. 卵子從輸卵管中沖出也要經歷類似精子獲能的過程 B. 動物排出的卵子成熟程度不同 C. 體外人工培養(yǎng)至減數(shù)分裂第二次分裂中期時才成熟 D. 沖出的卵子還需要培養(yǎng)一段時間由小變大,D,4、下列關于滋養(yǎng)層細胞的敘述,不正確的是 A. 囊胚滋養(yǎng)層細胞將來發(fā)育成胎盤和胎膜 B. 可以用滋養(yǎng)層細胞做DNA分析性別鑒定 C. 囊胚滋養(yǎng)層細胞就是將來原腸胚的外胚層 D. 滋養(yǎng)層細胞沿透明帶內壁擴展和排列,C,25,應用課堂,5、下列有關胚胎工程的敘述,正確的是 A. “試管動物”的生殖方式屬于無性生殖 B. 卵裂球時期每一個細胞的體積比受精卵大 C. 通過胚胎移植技術可充分發(fā)揮良種母畜的
11、繁殖潛力 D. 對某一胚胎的干細胞移植,產生的動物中雄性和 雌性的概率各占1/2,C,6、下列關于胚胎工程的敘述,正確的是() A. 通過胚胎體外培養(yǎng)可直接獲得新生兒 B. 超數(shù)排卵技術要使用一定的激素 C. 胚胎移植中的受體與供體必須都為優(yōu)良品種 D. 受體母畜需要遺傳性狀優(yōu)良的品種,供體母畜可用 遺傳性 狀一般的品種,B,26,應用課堂,7、“試管嬰兒”技術是通過將不孕夫婦的精子和卵細胞取出在試管中完成受精,并在試管中培養(yǎng)受精卵使其發(fā)育到桑椹胚或囊胚階段,再將胚胎移入女性子宮內發(fā)育成胎兒。它不僅使一部分不能生育的男女重新獲得了生育的機會,也為人類的優(yōu)生開辟了新的途徑。據(jù)此回答: (1)“試
12、管嬰兒”技術在生物學上所依據(jù)的原理是 A.有性生殖B.組織培養(yǎng) C.克隆技術D.基因工程 (2)“試管嬰兒”的形成用到下列哪些技術? (填序號) 體外培養(yǎng) 人工授精 胚胎移植 核移植,A,27,應用課堂,8、下圖是培育能產生凝血因子牛的過程示意圖,回答相關問題: (1)為能從良種母牛體內一次取得多枚卵子,可以采用 的方法。據(jù)報道,這種技術已經被濫用于人類生育中,從而出現(xiàn)許多人工“多胞胎”,這種技術帶來的危害之一是 。 (2)在過程中,當一個精子進入卵細胞后會激發(fā)卵子發(fā)生反應,如透明帶反應等,其意義是 。過程涉及的技術是 。,注射促性腺激素,影響胎兒的健康發(fā)育、對孕婦的身體不利等,防止多精入卵,胚胎移植,28,應用課堂,1)進行小鼠胚胎工程時,首先在光控周期下飼養(yǎng)成年雌鼠,并注射促性腺激素,目的是 。然后從雌鼠輸卵管中取出卵子,在一定條件下培養(yǎng)成熟;并從雄鼠附睪中取出精子,在一定條件下培養(yǎng)一段時間,目的是 。再在37,5%CO2條件下,精卵共同作用4h,沖洗后繼續(xù)培養(yǎng)。定時在顯微鏡下觀察胚胎的變化,第5天可以看到胚胎發(fā)生收縮,細胞間隙擴大,接著胚胎內部出現(xiàn)裂隙,這時胚胎已經進入_ _期。,促進超數(shù)排卵,使精子獲能,囊胚,9.回答下列問題,29,應用課堂
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