藥物分析03第三章 藥物的雜質(zhì)檢查.ppt

1、第三章藥物的雜質(zhì)檢查,Test for purity,基本要求,一、掌握一般雜質(zhì)檢查的原理、方法和計(jì)算。 二、熟悉特殊雜質(zhì)檢查的方法和原理。 三、了解熱分析在藥物分析中的應(yīng)用。,返 回,第三章 藥物的雜質(zhì)檢查 Test for purity,概 述,一般雜質(zhì)檢查,特殊雜質(zhì)檢查,有效性針對某些藥效進(jìn)行檢查的項(xiàng)目 如Al(OH)3的制酸力，反映主要質(zhì)量； 明膠的凝凍度，控制物理性能； 利福平的結(jié)晶度，影響生物利用度 均一性含量均一性 如“含量均勻度”試驗(yàn),一、 概 述,藥物純度：藥物的純度是指藥物的純潔程度。 安全性 進(jìn)行異常毒性、熱原、降壓物質(zhì)和無菌等項(xiàng)目 純度要求 對雜質(zhì)限量進(jìn)行檢查 藥物純度

2、的評價(jià) 把藥物的性狀、理化常數(shù)、雜質(zhì)檢查、含量測定等作為一個(gè)有聯(lián)系的整體來評價(jià)藥物的純度。,一、 概 述,例：純度要求 Pethidine Hydrochloride鹽酸哌替啶,無效異構(gòu)體I 無效異構(gòu)體 II,化學(xué)試劑純度與藥物純度區(qū)別,化學(xué)試劑純度 不考慮生理作用，雜質(zhì)限量只是從可能引起化學(xué)變化對使用影響來限定。 藥物純度 從用藥安全、有效和藥物穩(wěn)定性的影響考慮。 比如：BaSO4 （可溶性鋇鹽檢項(xiàng)）,二、雜質(zhì)來源與種類 source and sorts of impurities,1. 制備過程中產(chǎn)生,酸度：水解試劑帶入 乙醇中不溶物：水解中間體(糊精) SO32-：產(chǎn)品用H2SO3漂白

3、可溶性淀粉：水解不完全,2.貯藏過程中產(chǎn)生,外界條件影響：日光、空氣、溫度、濕度、 微生物等引起藥物產(chǎn)生,例如： 麻醉乙醚 醛及有毒的 過氧化物,(1)一般雜質(zhì)： 在多種藥物中普遍存在的雜質(zhì)。 (Cl- SO42- Pb As Fe) 有害雜質(zhì) ( Pb As ) 信號雜質(zhì) （Cl- SO42-）：考察生產(chǎn)工藝，反映藥物的純度水平 (2)特殊雜質(zhì)： 個(gè)別藥物的生產(chǎn)及貯藏中引入的雜質(zhì)。,雜質(zhì)的種類,雜質(zhì)的限量：藥物中所含雜質(zhì)的最大允許量。 限量表示(g/g) ：百分之幾（%） 百萬分之幾（10-6） 限量檢查： 檢查所含雜質(zhì)是否超過雜質(zhì)限量的規(guī)定，通常不要求測定其準(zhǔn)確含量。,3、雜質(zhì)的限量檢查（

4、limit test）,雜質(zhì)限量檢查方法,取一定量 (CV) 與被檢雜質(zhì)相同的純品或?qū)φ掌放涑蓪φ掌啡芤?，與一定量(S)藥物供試溶液在相同條件下處理后，比較反應(yīng)結(jié)果，以確定雜質(zhì)含量是否超過規(guī)定。,要求：對照液濁度 供試液濁度,雜質(zhì)限量的計(jì)算：,式中： L 雜質(zhì)的限度（%） C 對照液濃度 （g/ml） V 對照液的加入體積（ml) S 供試品的量(g) 注意: 單位統(tǒng)一,例 1 ： 對乙酰氨基酚中氯化物的檢查： 樣 2.0g 溶于100ml水中，取25ml檢查Cl-，與標(biāo)準(zhǔn)NaCl溶液(10g/ml) 5ml對照液相比，不得更深。 C= 10g/ml V=5.0ml S= 25 2.0 100

5、=0.5g,第二節(jié) 一般雜質(zhì)檢查方法,條件：硝酸酸性條件（稀硝酸10ml） 反應(yīng)試劑：硝酸銀試液 1.0ml 雜質(zhì)對照：NaCl (10g/ml) 靈敏度范圍： 5080 g / 50ml 討論：選擇稀硝酸反應(yīng)條件的意義。,一 、氯化物（Chloride ）檢查 原理：,比濁方法：同置于黑色背景上，自上向下觀察。 平行操作原則。 3. 若供試品有色，需經(jīng)處理后方可檢查。,注 意：,）干擾及排除,（1）外消色法：如高錳酸鉀中氯化物的檢查， 可先加乙醇適量，使其還原褪色后再依法檢查。,（2）內(nèi)消色法：倍量法,供試品有色處理方法,二 、重金屬（Heavy Metals ）的檢查,1、第一法 硫代乙酰

6、胺法 適用對象：溶于水、稀酸和乙醇的藥物 原 理： Pb2+ + 醋酸鹽緩沖液 + 硫代乙酰胺(CH3CSNH2) PbS (黃棕黑) 條件： 介質(zhì)：醋酸鹽緩沖液 (pH 3.5) 2ml 試劑：硫代乙酰胺 (CH3CSNH2) 2ml 雜質(zhì)對照液： PbNO3 (10g/ml) 靈敏度范圍： 1020 g / 27ml,葡萄糖中重金屬的檢查：樣4.0g溶于23ml水，加入2ml緩沖鹽，依法檢查，其重金屬不得超過 百萬分之五，取標(biāo)準(zhǔn)鉛（ 10g/ml），v=? C= 10g/ml L= 5 10-6 S=4.0g,V = 2.0 ml,例 2：,注意：供試品如有色，需經(jīng)處理后方可檢查。,1.

7、外消色法：在對照管中加稀焦糖溶液或其他無干擾的有色溶液。 2. 內(nèi)消色法。 3. 改用第四法，微孔濾膜過濾法。,第二法：灼燒后的硫代乙酰胺法 適用于含芳環(huán)或雜環(huán)有機(jī)藥物，如苯佐卡因、甲硝唑 第三法: 硫化鈉法 適用于溶于堿的藥物或在稀酸產(chǎn)生沉淀的藥物，如磺胺類、巴比妥類 第四法：微孔濾膜法 適用于重金屬限量低（25 g）的藥物。,C 墊圈(外徑10mm,內(nèi)徑6mm) D 濾膜(直徑10mm,孔徑3.0m) E 輔助濾板,CD,A,B,F,E,濾器下部,濾器上蓋,連接頭,微孔濾膜過濾法檢查重金屬裝置,三、砷鹽檢查法,第一法 古蔡氏法 Gutzeit 第二法 Ag-DDC法 白田道夫法 Bette

8、ndorff,國內(nèi)外常用方法：,古 蔡 氏 法 ：,Zn+HCl,白田道夫法,檢查砷鹽儀器裝置,8cm,18cm,有孔玻璃旋塞,導(dǎo)氣管,AsH3發(fā)生瓶,醋酸鉛棉花,溴化汞試紙,二乙基二硫代氨基甲酸銀法 Ag-diethyldithiocarbamate Ag-DDC法,原理：是利用砷化氫與Ag-DDC吡啶溶液作用，使Ag-DDC中的 銀還原為紅色膠態(tài)銀，以Ag-DDC溶液為空白，于510nm的波長處，測定吸收度，供試品溶液的吸收度不得大于標(biāo)準(zhǔn)砷溶液的吸收度。,四、干燥失重 （ loss on drying）,恒溫干燥 干燥劑干燥 減壓干燥 熱分析法 thermal analysis,TA,干燥

9、失重物主要指水分 (結(jié)晶水或吸附水) 或揮發(fā)性物質(zhì),在程序控制溫度下,測量物質(zhì)的質(zhì)量與溫度關(guān)系的方法,熱重分析法 thermal gravimetric analysis,TGA :,差示熱分析法,在程序控制溫度下,測定供試品與參比物質(zhì)之間的溫差(T)隨溫度變化的函數(shù)關(guān)系,differential thermal analysis,DTA:,草酸鈣(CaC2O4H2O)的熱重曲線,熱差曲線的直線,吸熱峰,放熱峰,熱差曲線示意圖,差示熱分析儀主要結(jié)構(gòu)簡圖,載氣？,鹽酸多巴酚丁胺的DTA-TGA曲線,15/min Program,1、純雙氯青霉素轉(zhuǎn)變成液態(tài)并降解 2、加入乳糖 3、加入硬脂酸鎂 4

10、、加入硬脂酸，主成分峰消失 5、單加入硬脂酸，主峰亦消失,DTA掃描圖,甲磺酸二氫麥角毒堿的DSC-TGA曲線,不同純度苯甲酸的DSC曲線,溫度(),50 80 110 140 170 200 230 260 290,15.00,0.00,7.50,鹽酸舍曲林晶型的DSC曲線,mcal/sec,溫度(),50 80 110 140 170 200 230 260 290,5.00,0.00,2.50,mcal/sec,鹽酸舍曲林晶型的DSC曲線,有機(jī)溶劑殘留量測定法,有機(jī)溶劑 限度,% 限度,% 苯 0.01 0.0002 氯仿 0.005 0.006 二氧六環(huán) 0.01 0.038 二氯甲烷

11、 0.01 0.06 吡啶 0.01 0.02 甲苯 0.01 0.089 環(huán)氧乙烷 0.001 0.001 Ch.P(95) Ch.P(2000),六、有機(jī)溶劑殘留量測定,色譜系統(tǒng)與系統(tǒng)適用性試驗(yàn) System Suitability Tests; SSTs 以直徑為0.250.18mm的二乙烯苯-乙基乙烯苯型高分子多孔小球作為固定相，柱溫為80170；并符合下列條件： 用待測物的色譜峰計(jì)算的N應(yīng)大于1000； 內(nèi)標(biāo)物與待測物的兩個(gè)色譜峰的R1.5； 每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)樣5次，所得待測物與內(nèi)標(biāo)物峰面積之比的RSD5%； 若以外標(biāo)法測定，所得待測物峰面積的RSD10%,嗅味及揮發(fā)性的差異顏色的差異

12、溶解行為的差異旋光性質(zhì)的差異吸附或分配性質(zhì)的差異對光選擇吸收性質(zhì)的差異,第三節(jié) 特殊雜質(zhì)檢查,物理性質(zhì)上差異：,酸、堿性質(zhì)的差異氧化還原性的差異雜質(zhì)與一定試劑產(chǎn)生沉淀雜質(zhì)與一定試劑產(chǎn)生顏色反應(yīng)雜質(zhì)與一定試劑反應(yīng)產(chǎn)生氣體,化學(xué)性質(zhì)上差異：,旋光性質(zhì)的差異,Ch.P規(guī)定黃體酮在乙醇中的比旋度為：186198 黃體酮及其中間體的比旋度（溶劑：乙醇） 化合物 濃度% 溫度 D 黃體酮 11.4 2025 +1934 醋酸雙烯醇酮 0.9 20 -312 醋酸妊娠烯醇酮 1 常溫 +202,220 260 300 nm,腎上腺酮及腎上腺素的紫外吸收曲線,max310nm,薄層色譜原理圖,最常用的薄層色譜

13、也屬于液-固吸附色譜。同柱色譜不同的是吸附劑被涂布在玻璃板上，形成薄薄的平面涂層。干燥后在涂層的一端點(diǎn)樣，豎直放入一個(gè)盛有少量展開劑的的有蓋容器中。展開劑接觸到吸附劑涂層，借毛細(xì)作用向上移動。與柱色譜過程相同，經(jīng)過在吸附劑和展開劑之間的多次吸附-溶解作用，將混合物中各組分分離成孤立的樣點(diǎn)，實(shí)現(xiàn)混合物的分離。,吸附或分配性質(zhì)的差異薄層色譜法 TLC,比移值,常 用 方 法：,雜質(zhì)對照品法 供試品自身對照法 對照藥物法,供試品10l N-甲基哌嗪10l 50mg/ml 50g/ml,枸櫞酸乙胺嗪 I2蒸氣顯色,規(guī)定： 如顯雜質(zhì)斑點(diǎn)，不得多于2個(gè)，其顏色與對照品主斑點(diǎn)相比較，不得更深。,地塞米松磷酸鈉 地塞米松 20mg/ml 0.20mg/ml,如有12個(gè)雜質(zhì)點(diǎn)超過時(shí)，應(yīng)不得深于0.01%對照液的主斑點(diǎn)。 其中有1個(gè)雜質(zhì)點(diǎn)應(yīng)不深于0.002%供試品的主斑點(diǎn)。,氨苯砜中檢查“有關(guān)物質(zhì)”規(guī)定：,0.01%供試品,1