2025年華師大版選擇性必修3生物上冊階段測試試卷含答案

…………○…………內(nèi)…………○…………裝…………○…………內(nèi)…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………※※請※※不※※要※※在※※裝※※訂※※線※※內(nèi)※※答※※題※※…………○…………外…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………第=page22頁，總=sectionpages22頁第=page11頁，總=sectionpages11頁2025年華師大版選擇性必修3生物上冊階段測試試卷含答案考試試卷考試范圍：全部知識點；考試時間：120分鐘學(xué)校：______姓名：______班級：______考號：______總分欄題號一二三四五總分得分評卷人得分一、選擇題(共9題，共18分)1、下列與果酒、果醋和泡菜制作有關(guān)的敘述，正確的是（）A.制作果醋的前提是制作果酒，因為醋酸菌可將酒精氧化為醋酸B.通常情況下，泡菜制作1~2天即可食用，并需偶爾進行排氣操作C.使用的菌種通常取自于自然環(huán)境，若要提高產(chǎn)品品質(zhì)，可接種優(yōu)良菌種D.所用制作原料和器具都需要進行嚴(yán)格滅菌，且發(fā)酵全過程都需在無菌環(huán)境2、如圖表示果酒；果醋和泡菜生產(chǎn)過程中的物質(zhì)變化情況；下列敘述錯誤的是（）

A.參與果醋、泡菜發(fā)酵的生物為原核生物B.酶的種類不同導(dǎo)致過程②⑥的差異C.導(dǎo)致過程④⑤差異的原因是糖源是否充足D.過程②④⑥所需要的最適溫度相同3、下列有關(guān)細(xì)胞工程的說法正確的是A.在愈傷組織形成過程中，除適宜的溫度、pH和無菌條件外，還需要有植物激素進行調(diào)節(jié)B.植物體細(xì)胞雜交前需要用酶去除細(xì)胞壁獲得原生質(zhì)體，然后再用滅活的病毒促進融合C.動物細(xì)胞核移植技術(shù)可以使生物多樣性大大增加D.動物細(xì)胞培養(yǎng)應(yīng)在含5%CO2的恒溫箱中培養(yǎng),CO2的作用是為細(xì)胞提供碳源4、用酵母菌使葡萄汁產(chǎn)葡萄酒，當(dāng)酒精含量達(dá)到12%~16%時，發(fā)酵就停止了。有關(guān)解釋錯誤的是（）A.酒精對酵母菌有毒害作用B.營養(yǎng)物質(zhì)因消耗而不足C.產(chǎn)物積累使pH值發(fā)生改變D.氧氣過少導(dǎo)致其無法呼吸5、長時間浸泡的木耳可能滋生椰毒假單胞桿菌，其代謝產(chǎn)生的米酵菌酸是一種可以引起人食物中毒的毒素。米酵菌酸分子量較小不能單獨引起免疫反應(yīng)，為了高效檢測米酵菌酸，科研人員在制備米酵菌酸單克隆抗體時，要將米酵菌酸經(jīng)過處理后再將其多次注射小鼠，經(jīng)檢測合格后，才從小鼠脾臟中提取相應(yīng)細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞進行融合，相關(guān)敘述正確的是（）A.米酵菌酸分子經(jīng)過特殊處理的目的是制備供免疫細(xì)胞識別的抗原B.經(jīng)特殊處理的米酵菌酸分子多次注入小鼠是為了促進記憶T細(xì)胞的產(chǎn)生C.處理后的米酵菌酸分子注入小鼠的次數(shù)是由血液中米酵菌酸分子的濃度決定的D.從小鼠脾臟中提取的B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞兩兩融合形成3種能增殖的雜交瘤細(xì)胞6、下列關(guān)于微生物的培養(yǎng)相關(guān)敘述中，正確的是（）A.擴大培養(yǎng)酵母菌應(yīng)該使用液體培養(yǎng)基并使用搖床振蕩培養(yǎng)B.瓊脂在培養(yǎng)基中不僅可以作為凝固劑，還可以作為碳源C.劃線分離操作過程，若劃線4次，則接種環(huán)需要灼燒4次D.待培養(yǎng)基冷卻至室溫后，在酒精燈火焰附近倒平板7、泡菜在我國具有悠久的歷史，《詩經(jīng)》中曾記載“中田有廬，疆場有瓜，是剝是菹，獻(xiàn)之皇祖”，漢代的《說文解字》中對此解釋“菹菜者，酸菜也”。下列關(guān)于泡菜制作的敘述錯誤的是（）A.泡菜壇中蔬菜裝量不能超過2/3，以防發(fā)酵液溢出B.泡菜的制作過程中可能有多種微生物參與發(fā)酵C.適量的食鹽水和酸性條件可以抑制雜菌的生長D.腌制泡菜時如果加入一些陳泡菜汁，可以縮短腌制時間8、研究人員將大麥細(xì)胞的LTP1基因?qū)虢湍钢?，讓酵母產(chǎn)生LTP1蛋白。下圖為該實驗過程的部分流程。下列說法正確的是（）

A.運用PCR擴增LTP1基因時，應(yīng)選擇左圖的A和D作為引物B.為方便構(gòu)建重組質(zhì)粒，可在引物5’端添加限制酶的識別序列C.如圖中為了篩選導(dǎo)入重組質(zhì)粒的啤酒酵母，只需配制含青霉素的培養(yǎng)基D.為了讓大麥的基因在酵母中表達(dá)，需要在目的基因兩側(cè)添加大麥的啟動子和終止子9、鹽害是全球水稻減產(chǎn)的重要原因之一，中國水稻研究所等單位的專家通過農(nóng)桿菌中的質(zhì)粒將CMO基因、BADH基因、mtld基因、gutD基因和SAMDC基因5個耐鹽基因?qū)胨?，獲得了一批耐鹽轉(zhuǎn)基因植株。有關(guān)耐鹽轉(zhuǎn)基因水稻培育的分析正確的是（）A.該轉(zhuǎn)基因水稻與原野生型水稻存在生殖隔離B.該基因工程所需的限制性核酸內(nèi)切酶可能有多種C.只要目的基因進入水稻細(xì)胞，水稻就會表現(xiàn)出抗鹽性狀D.可通過將水稻種植到有農(nóng)桿菌的土壤中觀察目的基因是否表達(dá)評卷人得分二、多選題(共8題，共16分)10、下圖是一種“生物導(dǎo)彈”的作用原理示意圖；沒有與腫瘤細(xì)胞結(jié)合的“生物導(dǎo)彈”一段時間后被機體清除。阿霉素是一種抗腫瘤藥，可抑制DNA和RNA的合成，對正常細(xì)胞也有一定毒性。下列相關(guān)說法正確的是（）

A.單克隆抗體是由雜交瘤細(xì)胞合成和分泌的B.活化阿霉素能抑制細(xì)胞中的DNA復(fù)制和轉(zhuǎn)錄過程C.在治療中，應(yīng)先注射非活化的磷酸酶，再注射生物導(dǎo)彈D.單克隆抗體特異性強，能減輕阿霉素對正常細(xì)胞的傷害11、下列有關(guān)動物細(xì)胞培養(yǎng)和植物組織培養(yǎng)的敘述，正確的是（）A.動物細(xì)胞培養(yǎng)和植物組織培養(yǎng)所用培養(yǎng)基中的成分不同B.動物細(xì)胞培養(yǎng)和植物組織培養(yǎng)過程中都要用到胰蛋白酶C.動物細(xì)胞培養(yǎng)可用于檢測有毒物質(zhì)，莖尖組織培養(yǎng)可獲得脫毒植株D.煙草葉片離體培養(yǎng)能產(chǎn)生新個體，小鼠雜交瘤細(xì)胞培養(yǎng)能得到細(xì)胞代謝產(chǎn)物12、某種病毒的主要表面抗原為S蛋白，用S蛋白制備的單克隆抗體可用于該種病毒的檢測。下列說法正確的是（）

A.B淋巴細(xì)胞分離自經(jīng)S蛋白免疫過的小鼠B.稀釋培養(yǎng)后多孔玻璃板中的雜交瘤細(xì)胞數(shù)目可能不到細(xì)胞總數(shù)的一半C.集落①的細(xì)胞既能無限增殖又能產(chǎn)生單克隆抗體D.集落②～④的細(xì)胞可用于擴大化培養(yǎng)生產(chǎn)單克隆抗體13、下圖是將人的生長激素基因?qū)爰?xì)菌B細(xì)胞內(nèi)制造“工程菌”的示意圖。已知細(xì)菌B細(xì)胞內(nèi)不含質(zhì)粒A，也不含質(zhì)粒A上的基因。下列說法正確的是（）

A.若能在細(xì)菌B中檢測到人的生長激素基因，則說明該基因工程項目獲得成功B.將完成導(dǎo)入過程后的細(xì)菌涂布在含有氨芐青霉素的培養(yǎng)基上，能生長的就是導(dǎo)入了重組質(zhì)粒的細(xì)菌C.將人的生長激素基因與質(zhì)粒A結(jié)合的過程共形成了4個磷酸二酯鍵D.將重組質(zhì)粒導(dǎo)入細(xì)菌B之前，可以用Ca2+處理細(xì)菌B14、下列關(guān)于用剛果紅培養(yǎng)基篩選纖維素分解菌的敘述，正確的有（）A.剛建成的落葉植物公園土壤，可作為獲取菌種的最佳樣本B.剛果紅可抑制其他微生物的生長，篩選出纖維素分解菌C.與細(xì)菌產(chǎn)生的胞內(nèi)酶相比，真菌分泌的纖維素酶更易從培養(yǎng)液中獲取D.纖維素酶的開發(fā)和利用，能促進人類對環(huán)境中一些廢棄物的循環(huán)利用15、欲探究1g土壤中有多少能分解尿素的細(xì)菌，需要用科學(xué)的方法測定微生物數(shù)量。下列相關(guān)敘述不正確的是（）A.利用以尿素作為唯一氮源的培養(yǎng)基，可從土壤中分離出分解尿素的細(xì)菌B.平板劃線法可以分離得到單菌落，也可用來測定樣品中的活菌數(shù)C.樣品的稀釋度直接影響平板上的菌落數(shù)目，因此稀釋度越大越好D.利用顯微鏡進行直接計數(shù)，可快速直觀地測定樣品中的活菌數(shù)16、下列有關(guān)生物技術(shù)安全性和倫理問題的觀點，合理的是（）A.對轉(zhuǎn)基因技術(shù)，我們應(yīng)該趨利避害，理性看待B.我國禁止生殖性克隆和治療性克隆C.我國不發(fā)展、不生產(chǎn)、不儲存生物武器，并反對其擴散D.對基因檢測應(yīng)該保護個人遺傳信息的隱私權(quán)17、下圖是利用牛的乳腺細(xì)胞生產(chǎn)人體血清白蛋白的操作流程；其中細(xì)胞①已導(dǎo)入人血清白蛋白基因。相關(guān)敘述正確的是（）

A.細(xì)胞①的培養(yǎng)液中需要加入胃蛋白酶B.“卵母細(xì)胞”應(yīng)在體外培養(yǎng)成熟C.圖示“細(xì)胞②→早期胚胎”發(fā)生輸卵管中D.該技術(shù)與試管牛培育的主要原理不同評卷人得分三、填空題(共9題，共18分)18、在課題1中，我們學(xué)習(xí)了稀釋涂布平板法。這一方法常用來統(tǒng)計樣品中_________________的數(shù)目。當(dāng)樣品的稀釋度足夠高時，____________________。19、基因工程操作一般經(jīng)歷如下四個步驟：_____。20、目的：使目的基因在受體細(xì)胞中_____，并且可以______，使目的基因能夠______作用。21、結(jié)果：經(jīng)限制酶切割產(chǎn)生的DNA片段末端通常有兩種形式：______和______。22、___________（簡稱PCR）是一種____________迅速_______________的技術(shù)，它能以極少數(shù)的DNA為模板，在幾個小時內(nèi)復(fù)制出上百萬份的DNA拷貝。23、毛霉等微生物產(chǎn)生的蛋白酶可以將豆腐中的_____________分解成小分子的____________和______________；脂肪酶可以將_____________水解成_________________和________________。24、植物誘導(dǎo)融合的方法：物理法包括______等?；瘜W(xué)法一般是用_____作為誘導(dǎo)劑。25、近年來，克隆技術(shù)的發(fā)展取得了巨大突破?在日常生活中，我們遇到過與克隆技術(shù)有關(guān)的問題嗎？_____。26、最后檢測目的基因是否翻譯成______，方法是從轉(zhuǎn)基因生物中提取______，用相應(yīng)的______進行______。評卷人得分四、實驗題(共4題，共40分)27、德陽中江盛產(chǎn)蜜柚；汁多肉脆，口感香甜。但是近年各地大面積種植該類產(chǎn)品，導(dǎo)致大量果品積壓。為了解決果農(nóng)的燃眉之急，有一定生物學(xué)知識的村干部想到了多渠道開發(fā)產(chǎn)品的方法，幫助果農(nóng)辦起了加工廠。請回答下列相關(guān)問題；

（1）利用蜜柚果肉可以生產(chǎn)果汁，為提高出汁率和澄清度，可向蜜柚汁中加入果膠酶將果膠分解為________；生產(chǎn)果汁剩下的柚皮可用________法提取精油；作為工業(yè)原料。

（2）在利用蜜柚汁制作果酒的過程中；為了提高酵母菌的發(fā)酵效率，工作人員對酵母菌進行了固定化，過程如下：酵母細(xì)胞活化→①→配制海藻酸鈉溶液→海藻酸鈉溶液與酵母細(xì)胞混合→固定化酵母細(xì)胞。

上述流程中，①為配制________溶液；溶化海藻酸鈉時，要用________加熱；直至其完全溶化。

（3）上述固定酵母細(xì)胞的方法稱為法________，而制備固定化淀粉酶則不用此法進行固定，原因是________________________________

（4）在利用蜜抽果酒制作果醋的過程中，一工作人員又向發(fā)酵裝置中添加一定量的蜜柚汁（不影響菌種的活性），檢測發(fā)現(xiàn)乙醇的利用速率迅速下降，原因是________________________________________________。28、氧化硫硫桿菌（T．t）通過將單質(zhì)硫與還原態(tài)硫氧化為硫酸以獲得能量進行化能合成作用?？茖W(xué)家欲通過實驗探究硫酸鋅對T．t產(chǎn)酸量的影響。

實驗材料：氧化硫硫桿菌（T．t）菌液；蒸餾水；100mg/L和1000mg/L的硫酸鋅溶液，配制好的氧化硫硫桿菌（T．t）液體培養(yǎng)基(含單質(zhì)硫)，恒溫?fù)u床等。

請分析并回答以下問題：

（1）氧化硫硫桿菌的代謝類型為______________，培養(yǎng)氧化硫硫桿菌（T．t）的液體培養(yǎng)基中的碳源是___________，該培養(yǎng)基從功能上屬于______________培養(yǎng)基。

（2）實驗前，科學(xué)家發(fā)現(xiàn)氧化硫硫桿菌（T．t）菌液已被雜菌污染，于是在配制好的氧化硫硫桿菌（T．t）液體培養(yǎng)基中加入____________，用______________法接種并進行純化培養(yǎng)；得到了氧化硫硫桿菌菌落。

（3）實驗步驟：

第一步：對配制好的培養(yǎng)基再次進行______________滅菌處理；以防止雜菌污染影響實驗結(jié)果。

第二步：取三個錐形瓶（編號A、B、C）分別加入等量培養(yǎng)基后，再依次分別加入____________________________；

第三步：往A、B、C三組中接種______________后放入恒溫?fù)u床中培養(yǎng)7天。

第四步：每天測定并記錄各組的硫酸含量。

（4）實驗結(jié)果：如圖所示；據(jù)圖分析實驗結(jié)論：

實驗結(jié)論：________________________________________________________。29、某化工廠的污水池中含有一種有害的難以降解的有機化合物A。研究人員用化合物A；磷酸鹽、鎂鹽以及微量元素配制的培養(yǎng)基；成功篩選到能高效降解化合物A的細(xì)菌（目的菌）。實驗的主要步驟如圖所示。請分析回答下列問題。

（1）培養(yǎng)基中加入化合物A的目的是__________，這種培養(yǎng)基屬于__________培養(yǎng)基。

（2）“目的菌”生長所需的氮源和碳源是來自培養(yǎng)基中的__________。實驗需要振蕩培養(yǎng)，由此推測“目的菌”呼吸作用的類型是__________。

（3）在上述實驗操作過程中，獲得純凈“目的菌”的關(guān)鍵是__________。

（4）轉(zhuǎn)為固體培養(yǎng)基時，常采用平板劃線的方法進行接種，此過程中所用的接種工具是__________，操作時采用__________滅菌的方法。

（5）實驗結(jié)束后，使用過的培養(yǎng)基應(yīng)該進行滅菌處理后才能倒掉，這樣做的目的是____________________。

（6）某同學(xué)計劃統(tǒng)計污水池中“目的菌”的總數(shù)，他選用104、105、106倍稀釋液進行平板劃線，每種稀釋液都設(shè)置了3個培養(yǎng)皿。從設(shè)計實驗的角度看，還應(yīng)設(shè)置的一組對照實驗是__________，此對照實驗的目的是____________________。30、被稱為“水中小白鼠”的斑馬魚是一種體長4厘米左右的熱帶淡水魚；與人類基因同源性高達(dá)87%，并有相似的器官；生理功能和信號通路。由于發(fā)育周期短、費用低、體外受精、透明等優(yōu)點，斑馬魚現(xiàn)在越來越廣泛地應(yīng)用于毒性檢測、疾病模型創(chuàng)制、藥物篩選等領(lǐng)域中。

研究人員欲通過使胰島素基因表達(dá)受阻從而構(gòu)建糖尿病模型斑馬魚。嗎啉反義寡核苷酸是一種RNA剪接抑制劑；通過將其注入斑馬魚受精卵可阻礙相關(guān)基因的表達(dá)。針對其作用原理，現(xiàn)有兩種假說：

假說1：嗎啉反義寡核苷酸導(dǎo)致RNA前體上內(nèi)含子2的對應(yīng)序列不能被剪切。

假說2：嗎啉反義寡核苷酸導(dǎo)致RNA前體上內(nèi)含子2和外顯子3的對應(yīng)序列同時被剪切。

為了驗證上述假說；研究人員進行了如下實驗：

(1)從受精卵發(fā)育了3天的實驗組和對照組的細(xì)胞中提取總RNA，再通過逆轉(zhuǎn)錄獲得cDNA。若假說1成立，選擇上圖所示引物2和引物3進行PCR后的結(jié)果為______（填字母）。A．實驗組有雜交帶B．實驗組無雜交帶C．對照組有雜交帶D．對照組無雜交帶(2)若要證明假說2成立，進行PCR時，需要選擇上圖所示引物有____________。

(3)采用PCR技術(shù)擴增DNA需要引物的原因是__________________。

(4)為了獲取大量斑馬魚胚胎干細(xì)胞用于藥物篩選，可加入__________________，用于分散斑馬魚囊胚中的__________________。再取分散細(xì)胞作為初始材料進行______培養(yǎng)，然后分瓶繼續(xù)培養(yǎng)。培養(yǎng)瓶中添加輸卵管上皮細(xì)胞作為______細(xì)胞，以提高斑馬魚胚胎干細(xì)胞的數(shù)量。評卷人得分五、綜合題(共3題，共15分)31、圖1是某基因工程中構(gòu)建重組質(zhì)粒的過程示意圖，載體質(zhì)粒P0具有四環(huán)素抗性基因（tetr)和氨芐青霉素抗性基因（ampr）。請回答下列問題：

（1）EcoRV酶切位點為EcoRV酶切出來的線性載體P1為___________末端。

（2）用TaqDNA聚合酶進行PCR擴增獲得的目的基因片段；其兩端各自帶有一個腺嘌呤脫氧核苷酸。載體P1用酶處理，在兩端各添加了一個堿基為___________的脫氧核苷酸，形成P2；P2和目的基因片段在__________酶作用下，形成重組質(zhì)粒P3。

（3）為篩選出含有重組質(zhì)粒P3的菌落；采用含有不同抗生素的平板進行篩選，得到A；B、C三類菌落，其生長情況如下表（“+”代表生長，“﹣”代表不生長）。根據(jù)表中結(jié)果判斷，應(yīng)選擇的菌落是__________（填表中字母）類，另外兩類菌落質(zhì)粒導(dǎo)入情況分別是_____、________________。

（4）為鑒定篩選出的菌落中是否含有正確插入目的基因的重組質(zhì)粒，擬設(shè)計引物進行PCR鑒定。圖2所示為甲、乙、丙3條引物在正確重組質(zhì)粒中的相應(yīng)位置，PCR鑒定時應(yīng)選擇的一對引物是__________。某學(xué)生嘗試用圖中另外一對引物從某一菌落的質(zhì)粒中擴增出了400bp片段，原因是_______________。32、小鼠癌癥模型是目前最為常用；先進和公認(rèn)的臨床前抗腫瘤藥物效應(yīng)評價體系；該模型隨著腫瘤治療策略的革新而不斷發(fā)展，并為癌癥的治療手段提供重要的理論及實踐指導(dǎo)。下圖表示利用小鼠胚胎干細(xì)胞（ES細(xì)胞）做的小鼠癌癥模型，據(jù)圖分析回答下列問題：

（1）a過程表示基因工程，則其核心步驟是_____，該過程的目的_______________。

（2）b過程可增加ES細(xì)胞的數(shù)量，若想從早期胚胎中獲得更多的ES細(xì)胞，可將早期胚胎培養(yǎng)至_______（時）期。d過程移入的胚胎能夠存活，從免疫學(xué)上來說，是因為代孕子宮不會對其發(fā)生____________反應(yīng)。d過程進行前，要對代孕小鼠進行_______________處理。用肝癌細(xì)胞作抗原刺激B淋巴細(xì)胞，再將此淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合后獲得細(xì)胞代謝產(chǎn)物______________；該產(chǎn)物與抗癌藥物結(jié)合制成“生物導(dǎo)彈”，從而定向殺死小鼠體內(nèi)的肝癌細(xì)胞。

（3）早期胚胎發(fā)育過程中，細(xì)胞逐漸開始分化，形成將來發(fā)育成各種組織的_______和滋養(yǎng)層細(xì)胞進一步擴大，會導(dǎo)致透明帶破裂，胚胎從其中伸展出來，這一過程稱為_______。

（4）圖示研究過程中使用的技術(shù)有_____________________________（至少答出2個）。33、圖為某生物興趣小組設(shè)計的果酒發(fā)酵實驗裝置；請據(jù)圖分析回答相關(guān)問題。

(1)用此裝置制作葡萄酒，在酒精發(fā)酵的過程中，需對氣閥______進行關(guān)閉。若繼續(xù)用此裝置制作葡萄醋，需改變的條件是：①_______②_______。

(2)實驗表明，醋酸菌對氧氣的含量特別敏感，當(dāng)進行深層發(fā)酵時，即使只是短時間中斷通入氧氣，也會引起醋酸菌的死亡，請寫出當(dāng)缺少糖源時醋酸菌產(chǎn)生醋酸的反應(yīng)簡式：____________________________________。

(3)將豆腐塊放在自然條件下發(fā)酵時，多種微生物參與了發(fā)酵，其中起主要作用的是__________。傳統(tǒng)發(fā)酵以混合菌種的______________及____________為主，通常是家庭式或作坊式的。參考答案一、選擇題(共9題，共18分)1、C【分析】【分析】

果酒制作菌種是酵母菌；代謝類型是兼性厭氧型真菌，屬于真核細(xì)胞，條件是18～25℃；前期需氧，后期不需氧；果醋制作的菌種是醋酸菌，代謝類型是需氧型細(xì)菌，屬于原核細(xì)胞，條件是30～35℃、一直需氧；腐乳的制作原理：參與豆腐發(fā)酵的微生物有青霉、酵母、曲霉、毛霉等多種，其中起主要作用的是毛霉，其代謝類型為異養(yǎng)需氧型，適宜溫度為15℃～18℃；毛霉能夠產(chǎn)生蛋白酶和脂肪酶，將蛋白質(zhì)和脂肪分別水解成小分子的肽和氨基酸、甘油和脂肪酸。

【詳解】

A；當(dāng)氧氣和糖原充足時醋酸菌將糖分解成醋酸；因此，制作果醋的前未必需要制作果酒，A錯誤；

B；通常情況下；泡菜制作一般10天后即可食用，不需進行排氣操作，因為泡菜制作過程所需的菌種乳酸菌無氧呼吸的產(chǎn)物是乳酸，沒有氣體生成，B錯誤；

C；果酒、果醋和泡菜制作使用的菌種通常取自于自然環(huán)境；也可接種優(yōu)良菌種，以提高產(chǎn)品品質(zhì)，C正確；

D；所用制作原料和器具不需要進行嚴(yán)格滅菌；發(fā)酵全過程無需在無菌環(huán)境，D錯誤。

故選C。

【點睛】2、D【分析】【分析】

分析題圖：圖示是果酒和果醋生產(chǎn)過程中的物質(zhì)變化情況；其中①是細(xì)胞呼吸的第一階段，發(fā)生在細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)中；②是無氧呼吸的第二階段，為酒精發(fā)酵，發(fā)生在細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)中；③為有氧呼吸的第二；三階段，發(fā)生在線粒體中；④⑤均為醋酸發(fā)酵，發(fā)生在細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)中。

【詳解】

A；參與果醋、泡菜發(fā)酵的微生物分別為醋酸菌、乳酸菌；它們均為原核生物，A正確；

B；酶的催化具有特異性；酶的種類不同導(dǎo)致過程②⑥的差異，B正確；

C；過程④是醋酸菌在缺少糖源時；將酒精變成乙醛，再將乙醛變成醋酸，過程⑤是醋酸菌在氧氣、糖源充足時，將葡萄糖轉(zhuǎn)變成醋酸，C正確；

D；過程②酒精發(fā)酵所需要的最適溫度是18～25℃；④醋酸發(fā)酵所需要的最適溫度是30～35℃，⑥過程發(fā)酵的適宜溫度是20～30℃，D錯誤。

故選D。3、A【分析】【分析】

【詳解】

A；在脫分化形成愈傷組織的過程中；除適宜的溫度、pH和無菌條件外，還需要生長激素和細(xì)胞分裂素進行調(diào)節(jié)，A正確；

B；植物原生質(zhì)體融合不能用滅活的病毒；該方法用于動物細(xì)胞融合，B錯誤；

C；動物細(xì)胞核移植技術(shù)屬于無性繁殖；不能使生物多樣性增加，C錯誤；

D、動物細(xì)胞培養(yǎng)應(yīng)在含5%CO2的恒溫箱中培養(yǎng),CO2的作用是調(diào)節(jié)pH；D錯誤。

故選A

【點睛】4、D【分析】【分析】

參與果酒制作的微生物是酵母菌；其新陳代謝類型為異養(yǎng)兼性厭氧型。果酒制作的原理：

（1）在有氧條件下，反應(yīng)式如下：

（2）在無氧條件下，反應(yīng)式如下：

【詳解】

A；酒精對酵母菌有毒害作用；A正確；

B；酵母菌無氧呼吸時需要消耗葡萄糖等營養(yǎng)物質(zhì)；使?fàn)I養(yǎng)物質(zhì)減少，很難維持大量酵母菌的代謝需要，B正確；

C；酒精發(fā)酵過程中會產(chǎn)生酒精和二氧化碳；導(dǎo)致pH值發(fā)生改變，不適宜酵母菌生存，C正確；

D；酒精發(fā)酵時進行的是無氧呼吸；不需要氧氣，D錯誤。

故選D。

【點睛】5、A【分析】【分析】

單克隆抗體制備流程：先給小鼠注射特定抗原使之發(fā)生免疫反應(yīng)；之后從小鼠脾臟中獲取已經(jīng)免疫的B淋巴細(xì)胞；誘導(dǎo)B細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合，利用選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細(xì)胞；進行抗體檢測，篩選出能產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細(xì)胞；進行克隆化培養(yǎng)，即用培養(yǎng)基培養(yǎng)和注入小鼠腹腔中培養(yǎng)；最后從培養(yǎng)液或小鼠腹水中獲取單克隆抗體。

【詳解】

A；根據(jù)題干信息；米酵菌酸分子量較小不能單獨引起免疫反應(yīng)，在制備米酵菌酸單克隆抗體時，要將米酵菌酸經(jīng)過處理后再將其多次注射小鼠，經(jīng)檢測合格后，才從小鼠脾臟中提取相應(yīng)細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞進行融合，因此米酵菌酸分子經(jīng)過特殊處理的目的是制備供免疫細(xì)胞識別的抗原，進而產(chǎn)生能產(chǎn)生抗體的漿細(xì)胞，A正確；

B；經(jīng)特殊處理的米酵菌酸分子多次注入小鼠是為了促進記憶B細(xì)胞的產(chǎn)生；進而使得二次免疫反應(yīng)產(chǎn)生更多的漿細(xì)胞，B錯誤；

C；處理后的米酵菌酸分子注入小鼠的次數(shù)由機體內(nèi)漿細(xì)胞的數(shù)量決定；C錯誤；

D；從小鼠脾臟中提取的B淋巴細(xì)胞與腫瘤細(xì)胞兩兩融合形成3種雜交細(xì)胞（B淋巴細(xì)胞自身融合的細(xì)胞、骨髓瘤細(xì)胞自身融合的細(xì)胞、雜交瘤細(xì)胞）；但只有骨髓瘤細(xì)胞自身融合的細(xì)胞和雜交瘤細(xì)胞能增殖，D錯誤。

故選A。

【點睛】6、A【分析】【分析】

1；瓊脂是一種從紅藻中提取的多糖；常作為固體培養(yǎng)基中的凝固劑。

2；平板劃線法每次接種前和接種后均需要對接種環(huán)灼燒滅菌。

【詳解】

A；酵母菌是異養(yǎng)兼性厭氧微生物；在有氧條件下能大量繁殖，液體培養(yǎng)基能增大菌體與營養(yǎng)物質(zhì)的接觸，使用搖床振蕩培養(yǎng)能增加溶氧量，故擴大培養(yǎng)酵母菌應(yīng)該使用液體培養(yǎng)基并使用搖床振蕩培養(yǎng)，A正確；

B；瓊脂不能提供碳源；只能作為凝固劑，B錯誤；

C；每次劃線前后均需要對接種環(huán)灼燒；所以若劃線4次，則接種環(huán)需要灼燒5次，C錯誤；

D；待培養(yǎng)基冷卻至50℃左右時；在酒精燈火焰附近倒平板，D錯誤。

故選A。7、A【分析】【分析】

泡菜（酸菜）的制作原理：在無氧條件下；乳酸菌將葡萄糖分解成乳酸。發(fā)酵過程中，亞硝酸鹽先增加，后下降至相對穩(wěn)定。

【詳解】

A；泡菜壇中蔬菜裝至半壇；再加入香辛料和酒至八成滿，鹽水沒過蔬菜，A錯誤；

B；泡菜的制作過程中利用的菌種主要是乳酸菌；泡菜壇中還可能有其他微生物，B正確；

C；食鹽水能增大環(huán)境溶液的濃度、酸性條件會抑制細(xì)胞代謝；適量的食鹽水和酸性條件在腌制過程中可以抑制雜菌生長，C正確；

D；陳泡菜汁中含有乳酸菌；壇中加一些陳泡菜汁的目的是加入乳酸菌菌種，縮短腌制時間，D正確。

故選A。8、B【分析】【分析】

圖示表示將使啤酒產(chǎn)生豐富泡沫的LTPI基因植入啤酒酵母菌中；使其產(chǎn)生LTP1蛋白，酸出泡沫豐富的啤酒的過程，圖中A為獲取目的基因的過程，B為質(zhì)粒，C為基因表達(dá)體。

【詳解】

A；結(jié)合題意可知；DNA復(fù)制只能從5’到3’，而DNA聚合酶只能從引物的3’端延伸DNA鏈，因此構(gòu)建前利用PCR技術(shù)擴增目的基因時，A、B、C、D四種單鏈DNA片段中應(yīng)選取B和C作為引物，A錯誤；

B；為構(gòu)建重組質(zhì)粒(即將目的基因和質(zhì)粒整合到一起)；在引物5’端需要適當(dāng)增加限制酶識別序列B正確；

C；由圖可知；構(gòu)建基因表達(dá)載體時，四環(huán)素抗性基因被破壞，而青霉素抗性基因沒有被破壞，因此將導(dǎo)入C的酵母菌分別在含有青霉素和四壞素的兩種選擇培養(yǎng)基上培養(yǎng)，則在含有青霉素的培養(yǎng)基上能存活，但在含有四環(huán)素的培養(yǎng)基上不能存活，才能篩選導(dǎo)入重組質(zhì)粒的啤酒酵母，C錯誤；

D；為了讓大麥的基因在酵母中表達(dá)；需要在目的基因兩側(cè)添加酵母的啟動子和終止子，D錯誤。

故選B。9、B【分析】【詳解】

該轉(zhuǎn)基因水稻與原野生型水稻屬于同一個物種，不存在生殖隔離，A錯誤；該基因工程涉及多個目的基因，所以該基因工程所需的限制性核酸內(nèi)切酶可能有多種，B正確；基因是選擇性表達(dá)的，目的基因進入水稻細(xì)胞，還要檢測水稻是否表現(xiàn)出抗鹽性狀，C錯誤；可通過將水稻種植到鹽堿含量高的土壤中觀察目的基因是否表達(dá)，D錯誤。二、多選題(共8題，共16分)10、A:B:D【分析】【分析】

單克隆抗體的制備。

（1）制備產(chǎn)生特異性抗體的B淋巴細(xì)胞：向免疫小鼠體內(nèi)注射特定的抗原；然后從小鼠脾內(nèi)獲得相應(yīng)的B淋巴細(xì)胞。

（2）獲得雜交瘤細(xì)胞：

①將鼠的骨髓瘤細(xì)胞與脾細(xì)胞中形成的B淋巴細(xì)胞融合；

②用特定的選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細(xì)胞；該雜種細(xì)胞既能夠增殖又能產(chǎn)生抗體。

（3）克隆化培養(yǎng)和抗體檢測；

（4）將雜交瘤細(xì)胞在體外培養(yǎng)或注射到小鼠腹腔內(nèi)增殖；

（5）提取單克隆抗體：從細(xì)胞培養(yǎng)液或小鼠的腹水中提取。

【詳解】

A；單克隆抗體是由雜交瘤細(xì)胞合成和分泌的；A正確；

B；根據(jù)題意可知；“阿霉素可抑制DNA和RNA的合成”，因此活化阿霉素能抑制細(xì)胞中的DNA復(fù)制和轉(zhuǎn)錄過程，B正確；

C；在治療中；應(yīng)將非活化磷酸阿霉素和生物導(dǎo)彈同時注射，C錯誤；

D；單克隆抗體特異性強；能減輕阿霉素對正常細(xì)胞的傷害，D正確。

故選ABD。11、A:C:D【分析】【分析】

植物組織培養(yǎng)和動物細(xì)胞培養(yǎng)的比較。比較項目植物組織培養(yǎng)動物細(xì)胞培養(yǎng)原理細(xì)胞的全能性細(xì)胞增殖培養(yǎng)基性質(zhì)固體培養(yǎng)基液體培養(yǎng)基培養(yǎng)基成分營養(yǎng)物質(zhì)（蔗糖）、植物激素等營養(yǎng)物質(zhì)（葡萄糖）、動物血清等培養(yǎng)結(jié)果植物體細(xì)胞株、細(xì)胞系培養(yǎng)目的快速繁殖、培育無毒苗等獲得細(xì)胞或細(xì)胞產(chǎn)物分散處理無有脫分化有無

【詳解】

A；動物細(xì)胞培養(yǎng)和植物組織培養(yǎng)所用培養(yǎng)基中的成分不同；如動物細(xì)胞培養(yǎng)需要加血清，植物細(xì)胞培養(yǎng)不需要添加血清，A正確；

B；植物組織培養(yǎng)不需要胰蛋白酶；B錯誤；

C；動物細(xì)胞培養(yǎng)可用于檢測有毒物質(zhì)；莖尖組織培養(yǎng)可獲得脫毒植株，C正確；

D；煙草葉片離體培養(yǎng)能產(chǎn)生新個體；小鼠雜交瘤細(xì)胞培養(yǎng)能得到細(xì)胞代謝產(chǎn)物，D正確。

故選ACD。12、A:B:C【分析】【分析】

13、C:D【分析】【分析】

基因工程技術(shù)的基本步驟：

（1）目的基因的獲?。悍椒ㄓ袕幕蛭膸熘蝎@??；利用PCR技術(shù)擴增和人工合成；

（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟；基因表達(dá)載體包括目的基因；啟動子、終止子和標(biāo)記基因等；

（3）將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同；導(dǎo)入的方法也不一樣．將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法；基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)雱游锛?xì)胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法；

（4）目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù)；②檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù)；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)．個體水平上的鑒定：抗蟲鑒定；抗病鑒定、活性鑒定等。

【詳解】

A；檢測到細(xì)菌B合成人的生長激素才能說明獲得成功；A錯誤；

B；根據(jù)題意；細(xì)菌B不含有質(zhì)粒A及其上的基因，即沒有抗氨芐青霉素基因；質(zhì)粒含抗四環(huán)素基因和抗氨芐青霉素基因，基因發(fā)生重組時抗四環(huán)素基因被破壞，抗氨芐青霉素基因被保留，故在含氨芐青霉素的培養(yǎng)基上能生長的是導(dǎo)入了普通質(zhì)?；蛘咧亟M質(zhì)粒的細(xì)菌，B錯誤；

C；將人的生長激素基因與質(zhì)粒A結(jié)合的過程連接兩個切口；該過程共形成4個磷酸二酯鍵，C正確；

D、將目的基因?qū)爰?xì)菌時，需要用Ca2+處理細(xì)菌；使其處于易于吸收周圍環(huán)境中DNA分子的生理狀態(tài)，D正確。

故選CD。

【點睛】14、C:D【分析】【分析】

在篩選纖維素分解菌的過程中；剛果紅可與培養(yǎng)基中纖維素形成紅色復(fù)合物，當(dāng)纖維素被分解后，紅色復(fù)合物不能形成，培養(yǎng)基中會出現(xiàn)以纖維素分解菌為中心的透明圈，從而可篩選纖維素分解菌。

【詳解】

A；剛建成公園落葉少；土壤中的纖維素分解菌少，不利于獲得菌種，A錯誤；

B；剛果紅不能抑制其它微生物的生長；剛果紅可鑒別出纖維素分解菌，B錯誤；

C；與細(xì)菌產(chǎn)生的胞內(nèi)酶相比；真菌分泌的纖維素酶更易從培養(yǎng)液中獲取，因為纖維素酶可以分泌出來，C正確；

D；纖維素酶的開發(fā)和利用；可用于分解秸稈、棉質(zhì)衣物等，能促進人類對環(huán)境中一些廢棄物的循環(huán)利用，D正確。

故選CD。15、B:C:D【分析】【分析】

選擇培養(yǎng)基是用來將某種或某類微生物從混雜的微生物群體中分離出來的培養(yǎng)基。設(shè)計選擇培養(yǎng)基時；主要考慮某些微生物的特殊營養(yǎng)需求或它們對某些化學(xué)物質(zhì)具有的抗性。

【詳解】

A；以尿素作為唯一氮源的培養(yǎng)基為選擇培養(yǎng)基；可從土壤中分離出分解尿素的細(xì)菌，A正確；

B；平板劃線法能將單個微生物分散到培養(yǎng)基上；從而分離得到單菌落，但是不可以用來測定樣品中的活菌數(shù)，稀釋涂布平板法可以計數(shù)，B錯誤；

C；樣品的稀釋度太大；會導(dǎo)致微生物數(shù)量太少，一般要求稀釋后平板上的菌落數(shù)在30到300之間比較合適，C錯誤；

D；利用顯微鏡進行直接計數(shù)；可快速直觀地測定樣品中的活菌數(shù)和死菌數(shù)，D錯誤。

故選BCD。16、A:C:D【分析】【分析】

1；轉(zhuǎn)基因生物的安全性問題：食物安全（滯后效應(yīng)、過敏源、營養(yǎng)成分改變）、生物安全（對生物多樣性的影響）、環(huán)境安全（對生態(tài)系統(tǒng)穩(wěn)定性的影響）。

2；治療性克?。褐咐每寺〖夹g(shù)產(chǎn)生特定細(xì)胞和組織（皮膚、神經(jīng)或肌肉等）用于治療性移植。

3；生殖性克?。褐笇⒖寺〖夹g(shù)用于生育目的；即用于產(chǎn)生人類個體。

4；中國政府：禁止生殖性克隆人；堅持四不原則（不贊成、不允許、不支持、不接受任何生殖性克隆人實驗），不反對治療性克隆。

【詳解】

A；對轉(zhuǎn)基因技術(shù)；我們應(yīng)該趨利避害，理性看待，A正確；

B；中國政府的態(tài)度是禁止生殖性克隆人；堅持四不原則（不贊成、不允許、不支持、不接受任何生殖性克隆人實驗），不反對治療性克隆，B錯誤；

C；中國在任何情況下不發(fā)展、不生產(chǎn)、不儲存生物武器；并反對生物武器及其技術(shù)和設(shè)備的擴散，C正確；

D；對基因檢測應(yīng)該保護個人遺傳信息的隱私權(quán)；D正確。

故選ACD。17、B:D【分析】【分析】

題圖分析：圖示操作流程為“利用牛的乳腺細(xì)胞生產(chǎn)人體血清白蛋白”；因此首先需要將人體血清白蛋白基因?qū)氪菩阅膛Ｈ橄偌?xì)胞，形成細(xì)胞①；取出細(xì)胞①的細(xì)胞核，注入去核牛卵母細(xì)胞中，形成細(xì)胞②，該過程采用了核移植技術(shù)，其原理是動物細(xì)胞的細(xì)胞核具有全能性；要形成轉(zhuǎn)基因克隆奶牛還需要采用早期胚胎培養(yǎng)技術(shù)和胚胎移植技術(shù)。

【詳解】

A；為了得到單個細(xì)胞；在細(xì)胞①的培養(yǎng)液中需要加入胰蛋白酶，不能使用胃蛋白酶，A錯誤；

B；圖中卵母細(xì)胞應(yīng)該在體外培養(yǎng)到減數(shù)第二次分裂中期；此時的次級卵母細(xì)胞具有受精能力，B正確；

C；圖示“細(xì)胞②→早期胚胎”為體外培養(yǎng)胚胎的過程；該過程在體外完成，C錯誤；

D；圖示克隆牛的培育主要采用了核移植技術(shù)和胚胎移植技術(shù)；屬于無性生殖；試管牛的培育主要采用了體外受精和胚胎移植技術(shù)，屬于有性生殖，因此兩者產(chǎn)生犢牛的生殖方式不相同，D正確。

故選BD。三、填空題(共9題，共18分)18、略

【解析】①.活菌②.培養(yǎng)基表面生長的一個菌落，來源于樣品稀釋液中的一個活菌19、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】提取目的基因、目的基因與運載體結(jié)合、將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞、目的基因的檢測與鑒定。20、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】穩(wěn)定存在遺傳至下一代表達(dá)和發(fā)揮21、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】黏性末端平末端。22、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)體外擴增DNA片段23、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】蛋白質(zhì)肽氨基酸脂肪甘油脂肪酸24、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】離心、振動、電刺激聚乙二醇25、略

【分析】【詳解】

在日常生活中；我們遇到過的與克隆技術(shù)有關(guān)的問題有：

①瀕臨滅絕動物的克?。嚎寺】梢哉葹l危的國家保護動物以及植物；我們可運用克隆，復(fù)制瀕臨滅絕的生物，讓其不至于在我們的生活中消失；

②農(nóng)業(yè)克?。簯?yīng)用于農(nóng)業(yè)等領(lǐng)域；通過轉(zhuǎn)基因的方式，增加糧食的畝產(chǎn)量，提高土地的單位出產(chǎn)量；

③細(xì)胞克隆替代或者修復(fù)人體細(xì)胞問題；比如胚胎干細(xì)胞；

④畜牧業(yè)克?。簯?yīng)用于畜牧業(yè)，提升優(yōu)良品種群體基數(shù)，縮短畜牧育種年限?！窘馕觥坑校热纾孩贋l臨滅絕動物的克?。虎谵r(nóng)業(yè)克?。簯?yīng)用于農(nóng)業(yè)等領(lǐng)域，通過轉(zhuǎn)基因的方式，增加糧食的畝產(chǎn)量，提高土地的單位出產(chǎn)量；③細(xì)胞克隆替代或者修復(fù)人體細(xì)胞問題，比如胚胎干細(xì)胞；④畜牧業(yè)克隆：應(yīng)用于畜牧業(yè)，提升優(yōu)良品種群體基數(shù)，縮短畜牧育種年限。26、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】蛋白質(zhì)蛋白質(zhì)抗體抗原－抗體雜交四、實驗題(共4題，共40分)27、略

【分析】【分析】

1；果膠酶能夠分解果膠；瓦解植物的細(xì)胞壁及胞間層，使榨取果汁變得容易，而果膠分解成可溶性的半乳糖醛酸，也使得渾濁的果汁變得澄清。果膠酶并不特指某一種酶，而是分解果膠的一類酶的總稱，包括多聚半乳糖醛酸酶、果膠分解酶和果膠酯酶。

2；參與果酒制作的微生物是酵母菌；其新陳代謝類型為異養(yǎng)兼性厭氧型。

3；參與果醋制作的微生物是醋酸菌；其新陳代謝類型是異養(yǎng)需氧型。果醋制作的原理：當(dāng)氧氣、糖源都充足時，醋酸菌將葡萄汁中的果糖分解成醋酸。當(dāng)缺少糖源時，醋酸菌將乙醇變?yōu)橐胰?，再將乙醛變?yōu)榇姿帷?/p>

【詳解】

（1）為了提高出汁率和澄清度；需要用果膠酶和纖維素酶處理，果膠酶可將果膠分解成半乳糖醛酸（和半乳糖醛酸甲酯）；考慮到成本和技術(shù)難度問題，通常采用壓榨法提取精油；

（2）固定化酵母菌的流程是：酵母細(xì)胞活化→配制CaCl2溶液→配制海藻酸鈉溶液→海藻酸鈉溶液與酵母細(xì)胞混合→固定化酵母細(xì)胞，故①為配制CaCl2溶液；海藻酸鈉溶化時；最好采用小火間斷加熱的方法，避免海藻酸鈉焦糊；

（3上述過程將酵母菌包埋在海藻酸鈉制成的凝膠中；其固定酵母細(xì)胞的方法稱為包埋法；酶分子較小，容易從包埋材料中漏出，所以制備固定化淀粉酶則不用此法進行固定；

（4）結(jié)合分析可知；當(dāng)缺少糖源時，醋酸菌將乙醇變?yōu)橐胰?，再將乙醛變?yōu)榇姿?，加入蜜柚汁后，發(fā)酵裝置中糖源充足，醋酸菌直接將葡萄汁中的果糖分解成醋酸，故對乙醇的利用率迅速下降。

【點睛】

本題以利用蜜柚開發(fā)產(chǎn)品為情景，考查固定化酶和固定化細(xì)胞技術(shù)及果醋的制作，學(xué)生的理解能力和綜合分析能力是解答本題的關(guān)鍵?！窘馕觥堪肴樘侨┧釅赫aCl2小火間斷包埋酶分子較小，容易從包埋材料中漏出當(dāng)缺少糖源時，醋酸菌將乙醇變?yōu)橐胰賹⒁胰┳優(yōu)榇姿?；?dāng)氧氣、糖源都充足時，醋酸菌將蜜柚汁中的果糖分解成醋酸28、略

【分析】【分析】

微生物接種常用的兩種方法：①平板劃線法：將已經(jīng)熔化的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿制成平板；接種，劃線，在恒溫箱里培養(yǎng)。在線的開始部分，微生物往往連在一起生長，隨著線的延伸，菌數(shù)逐漸減少，最后可能形成單個菌落。②稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經(jīng)過大量稀釋后，均勻涂布在培養(yǎng)皿表面，經(jīng)培養(yǎng)后可形成單個菌落。

（1）

結(jié)合題意“氧化硫硫桿菌通過將單質(zhì)硫與還原態(tài)硫氧化為硫酸以獲得能量進行化能合成作用”可知，氧化硫硫桿菌的代謝類型為自養(yǎng)需氧型；由于該菌可以進行化能合成作用，可以利用液體培養(yǎng)基中的無機碳或CO2；可以其作為液體培養(yǎng)基中的碳源；該培養(yǎng)基中含有單質(zhì)硫，對生長的菌類具有選擇作用，在功能上屬于選擇培養(yǎng)基。

（2）

培養(yǎng)微生物應(yīng)用固體培養(yǎng)基進行培養(yǎng)；故應(yīng)在配置好的液體培養(yǎng)基中加入瓊脂；對微生物進行純化培養(yǎng)的方法有平板劃線法或稀釋涂布平板法。

（3）

第一步；對培養(yǎng)基的滅菌方法為高壓蒸汽滅菌；

第二步；由于本實驗的目的是通過實驗探究硫酸鋅對T．t產(chǎn)酸量的影響，則實驗的自變量為硫酸鋅的有無及其含量，實驗應(yīng)遵循對照與單一變量原則，故本步驟應(yīng)在三個錐形瓶中分別加入等量的蒸餾水；100mg/L和1000mg/L的硫酸鋅溶液；

第三步；遵循無關(guān)變量一致原則，故往A；B、C三組中接種等量的氧化硫硫桿菌（T．t）后放入恒溫?fù)u床中培養(yǎng)7天。

（4）

據(jù)圖分析；與對照（蒸餾水組）相比，低濃度硫酸鋅對氧化硫硫桿菌（T．t）產(chǎn)酸無明顯作用，高濃度硫酸鋅對氧化硫硫桿菌（T．t）產(chǎn)酸起抑制作用。

【點睛】

本題主要考查培養(yǎng)基的制作和微生物的接種方法，意在強化學(xué)生對實驗室的微生物的培養(yǎng)的相關(guān)知識的理解與掌握。熟記相關(guān)知識并能結(jié)合術(shù)語分析作答是解題關(guān)鍵。【解析】（1）自養(yǎng)需氧型無機碳或CO2選擇培養(yǎng)基。

（2）瓊脂平板劃線法或稀釋涂布平板法。

（3）高壓蒸汽等量的蒸餾水；100mg/L和1000mg/L的硫酸鋅溶液等量的氧化硫硫桿菌（T．t）

（4）低濃度硫酸鋅對氧化硫硫桿菌（T．t）產(chǎn)酸無明顯作用，高濃度硫酸鋅對氧化硫硫桿菌（T．t）產(chǎn)酸起抑制作用29、略

【分析】【分析】

微生物的培養(yǎng)；培養(yǎng)基的成分必須含有碳源；氮源、水和無機鹽。獲取純凈微生物的關(guān)鍵是防止外來雜菌入侵。實驗室中目的菌株的篩選的原理：人為提供有利于目的菌株生長的條件（包括營養(yǎng)、溫度、pH等），同時抑制或阻止其他微生物生長。

【詳解】

（1）本實驗是分離出降解的有機化合物A的菌種；所以培養(yǎng)基中加入化合物A的目的是篩選降解的有機化合物A的菌種，這種培養(yǎng)基屬于選擇培養(yǎng)基。

（2）分析培養(yǎng)基的配方可知；該培養(yǎng)基由化合物A；磷酸鹽、鎂鹽以及微量元素配制而成，其他成分中為體現(xiàn)出提供碳源和氮源，因此化合物A為目的菌提供了碳源和氮源；在培養(yǎng)過程中應(yīng)該振蕩培養(yǎng)，增加培養(yǎng)液中的溶氧量，故目的菌是需氧微生物，呼吸作用的類型是有氧呼吸。

（3）獲得純凈“目的菌”的關(guān)鍵是無菌技術(shù)；防止外來雜菌入侵。

（4）平板劃線操作的工具是接種環(huán)；對于接種環(huán)的滅菌方法應(yīng)該是灼燒滅菌。

（5））實驗結(jié)束后；使用過的培養(yǎng)基應(yīng)該進行滅菌處理后，才能倒掉，以殺死培養(yǎng)基上殘留的菌種，避免細(xì)菌污染環(huán)境和感染操作者。

（6）實驗設(shè)計過程應(yīng)遵循對照原則；該實驗還應(yīng)增設(shè)一組不接種的空白培養(yǎng)基作為對照，以證明培養(yǎng)基制備是否被雜菌污染，檢驗培養(yǎng)基是否滅菌合格。

【點睛】

本題考查微生物的分離和培養(yǎng)，要求考生識記無菌技術(shù)操作方法及接種微生物接種常用的兩種方法，能結(jié)合所學(xué)的知識準(zhǔn)確答題?！窘馕觥亢Y選目的菌選擇化合物A有氧呼吸防止外來雜菌入侵接種環(huán)灼燒防止造成環(huán)境污染不接種的空白培養(yǎng)基檢驗培養(yǎng)基是否滅菌合格30、略

【分析】【分析】

根據(jù)題干信息分析；糖尿病模型斑馬魚的構(gòu)建的原理是使胰島素基因表達(dá)受阻，而使胰島素基因表達(dá)受阻是通過給斑馬魚受精卵注射嗎啉反義寡核苷酸實線的；嗎啉反義寡核苷酸是一種RNA剪接抑制劑，其作用的機理有兩種假說：可能是導(dǎo)致RNA前體上內(nèi)含子2的對應(yīng)序列不能被剪切，也可能是導(dǎo)致RNA前體上內(nèi)含子2和外顯子3的對應(yīng)序列同時被剪切。

(1)

根據(jù)引物2和引物3在胰島素基因片段上的位置；通過PCR擴增能得到內(nèi)含子2的序列，若假說1成立，即嗎啉反義寡核苷酸導(dǎo)致RNA前體上內(nèi)含子2的對應(yīng)序列不能被剪切，故實驗組中應(yīng)含有內(nèi)含子2的序列，而對照組的該片段被切除了，因此用引物2和引|物3進行PCR反應(yīng)，其結(jié)果為實驗組中有雜交帶，而對照組中無雜交帶。

故選AD。

(2)

若要證明假說2成立；即RNA前體上內(nèi)含子2和外顯子3的對應(yīng)序列同時被剪切下去，則可以選擇圖示引物5和引物2；引物5和引物6進行PCR，觀察是否有雜交帶出現(xiàn)。

(3)

由于DNA聚合酶不能從頭合成DNA；而只能從引物3′端延伸DNA鏈，因此DNA復(fù)制需要引物。

(4)

用胰蛋白酶處理斑馬魚囊胚中的內(nèi)細(xì)胞團；可以獲得分散的斑馬魚胚胎干細(xì)胞，然后對其進行原代培養(yǎng)，接著分瓶繼續(xù)培養(yǎng)。培養(yǎng)瓶中添加輸卵管上皮細(xì)胞作為飼養(yǎng)層細(xì)胞，以提高斑馬魚胚胎干細(xì)胞的數(shù)量。

【點睛】

解答本題的關(guān)鍵是掌握基因的表達(dá)的相關(guān)知識點，明確基因轉(zhuǎn)錄出來的mRNA是要經(jīng)過加工成為成熟的mRNA才能作為翻譯的模板的，并能夠根據(jù)題干提取有效信息進行答題?！窘馕觥?1)AD

(2)5、65；2

(3)DNA聚合酶不能從頭合成DNA；只能從3′端延伸DNA鏈，因此DNA復(fù)制需要引物。（得分點：“只能從3′端延伸DNA鏈”）

(4)胰蛋白酶內(nèi)細(xì)胞團原代飼養(yǎng)層五、綜合題(共3題，共15分)31、略

【分析】【分析】

基因表達(dá)載體的基本結(jié)構(gòu)包括復(fù)制原點、目的基因、標(biāo)記基因、啟動子、終止子等。根據(jù)題干信息和圖形分析，P0是載體質(zhì)粒，其含有的氨芐青霉素抗性基因（ampr