2025年新科版選擇性必修3生物下冊(cè)月考試卷含答案

…………○…………內(nèi)…………○…………裝…………○…………內(nèi)…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………※※請(qǐng)※※不※※要※※在※※裝※※訂※※線※※內(nèi)※※答※※題※※…………○…………外…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………第=page22頁(yè)，總=sectionpages22頁(yè)第=page11頁(yè)，總=sectionpages11頁(yè)2025年新科版選擇性必修3生物下冊(cè)月考試卷含答案考試試卷考試范圍：全部知識(shí)點(diǎn)；考試時(shí)間：120分鐘學(xué)校：______姓名：______班級(jí)：______考號(hào)：______總分欄題號(hào)一二三四五六總分得分評(píng)卷人得分一、選擇題(共5題，共10分)1、啤酒發(fā)酵依賴于發(fā)醇工程，產(chǎn)品質(zhì)檢可應(yīng)用“電子舌”，電子舌可根據(jù)不同滋味信號(hào)傳感器呈現(xiàn)的響應(yīng)值對(duì)啤酒風(fēng)味進(jìn)行評(píng)價(jià)，結(jié)果如下圖。下列相關(guān)敘述，不正確的是（）

A.啤酒主要經(jīng)酵母菌和乳酸菌發(fā)酵制成B.發(fā)酵原料應(yīng)含有糖類作為發(fā)醇菌種的碳源C.發(fā)酵液L1和L2口味相似，而L3澀味較強(qiáng)D.菌種選育可依賴于突變篩選或轉(zhuǎn)基因技術(shù)等2、利用酵母菌、醋酸菌和毛霉進(jìn)行發(fā)酵的適合溫度分別是（）A.30~35℃、18~35℃、15~18℃B.18~25℃、30~35℃、15~18℃C.18~35℃、20~35℃、15~18℃D.30~35℃、20~35℃、15~18℃3、下圖表示利用細(xì)胞融合技術(shù)進(jìn)行基因定位的過(guò)程；在人-鼠雜種細(xì)胞中人的染色體會(huì)以隨機(jī)方式丟失，通過(guò)分析基因產(chǎn)物進(jìn)行基因定位。現(xiàn)檢測(cè)細(xì)胞Ⅰ；Ⅱ、Ⅲ中人的4種酶活性，只有Ⅱ具有芳烴羥化酶活性，只有Ⅲ具有胸苷激酶活性，Ⅰ、Ⅲ都有磷酸甘油酸激酶活性，Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ均有乳酸脫氫酶活性。下列相關(guān)敘述正確的有（）

A.加入滅活仙臺(tái)病毒的作用是促進(jìn)細(xì)胞融合，原理是細(xì)胞膜具有選擇透過(guò)性B.細(xì)胞Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ分別為人-人、人-鼠、鼠-鼠融合細(xì)胞C.芳烴羥化酶基因位于2號(hào)染色體上，乳酸脫氫酶基因位于11號(hào)染色上D.胸苷激酶基因位于11號(hào)染色體上，磷酸甘油酸激酶基因位于X染色體上4、治療白化病、苯丙酮尿癥等人類遺傳病的根本途徑是（）A.口服化學(xué)藥物或攝食特殊食物B.注射化學(xué)藥物或利用射線照射C.誘發(fā)致病基因發(fā)生突變D.用基因治療糾正或彌補(bǔ)有缺陷的基因5、下列關(guān)于蛋白質(zhì)工程應(yīng)用的敘述，不正確的是（）A.通過(guò)蛋白質(zhì)工程生產(chǎn)更符合人類需要的產(chǎn)品B.通過(guò)蛋白質(zhì)工程可以改變蛋白質(zhì)的活性C.通過(guò)蛋白質(zhì)工程制成體積小、耗電少、效率高的電子元件D.利用蛋白質(zhì)工程可以在大腸桿菌細(xì)胞中得到人干擾素評(píng)卷人得分二、多選題(共7題，共14分)6、下列關(guān)于人早期胚胎發(fā)育過(guò)程中桑椹胚和囊胚的敘述中，正確的是（）A.囊胚與桑椹胚相比，每個(gè)細(xì)胞內(nèi)DNA總量增加B.囊胚期出現(xiàn)了細(xì)胞分化，但遺傳物質(zhì)未發(fā)生改變C.囊胚期內(nèi)細(xì)胞團(tuán)和滋養(yǎng)層細(xì)胞差異不是復(fù)制水平上的差異，而是轉(zhuǎn)錄水平上的差異引起D.卵裂期細(xì)胞進(jìn)行有絲分裂，數(shù)量增加，胚胎總體積增加7、小鼠胚胎干細(xì)胞經(jīng)定向誘導(dǎo)可獲得多種功能細(xì)胞、制備流程如圖所示。下列敘述錯(cuò)誤的是（）

A.為獲得更多的囊胚，采用激素注射促進(jìn)雄鼠產(chǎn)生更多的精子B.細(xì)胞a和細(xì)胞b內(nèi)含有的核基因不同，所以全能性高低不同C.用胰蛋白酶將細(xì)胞a的膜蛋白消化后可獲得分散的胚胎干細(xì)胞D.胚胎干細(xì)胞和誘導(dǎo)出的各種細(xì)胞都需在CO2培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)8、我國(guó)的釀酒技術(shù)歷史悠久，古人在實(shí)際生產(chǎn)中積累了很多經(jīng)驗(yàn)?！洱R民要術(shù)》記載：“酒冷沸止，米有不消者，便是曲勢(shì)盡?！币馑际钱Y中酒液涼了不再起泡，米有未消耗完的，就是酒曲的力量用盡了。下列敘述正確的是（）A.用酒曲釀酒過(guò)程中，為加快微生物代謝需不斷通入O2B.酒液溫度的變化與酒曲中微生物呼吸作用釋放熱量有關(guān)C.起泡是由微生物進(jìn)行呼吸作用產(chǎn)生的CO2釋放形成的D.“曲勢(shì)盡”可能是甕中液體pH降低、酒精濃度過(guò)高導(dǎo)致9、下圖表示利用細(xì)胞融合技術(shù)進(jìn)行基因定位的過(guò)程，在人-鼠雜種細(xì)胞中人的染色體會(huì)以隨機(jī)方式丟失，通過(guò)分析基因產(chǎn)物進(jìn)行基因定位?，F(xiàn)檢測(cè)細(xì)胞Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ中人的4種酶活性，只有Ⅱ具有芳烴羥化酶活性，只有Ⅲ具有胸苷激酶活性，Ⅰ、Ⅲ都有磷酸甘油酸激酶活性，Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ均有乳酸脫氫酶活性。下列相關(guān)敘述正確的有（）

A.加入滅活仙臺(tái)病毒的作用是促進(jìn)細(xì)胞融合B.細(xì)胞Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ分別為人-人、人-鼠、鼠-鼠融合細(xì)胞C.芳烴羥化酶基因位于2號(hào)染色體上，乳酸脫氫酶基因位于11號(hào)染色上D.胸苷激酶基因位于17號(hào)染色體上，磷酸甘油酸激酶基因位于X染色體上10、如圖是科研人員構(gòu)建的類精子單倍體胚胎干細(xì)胞，以及利用該種細(xì)胞獲得半克隆小鼠的過(guò)程（圖中序號(hào)表示過(guò)程）。下列敘述正確的是（）

A.過(guò)程①使受精卵中的遺傳物質(zhì)減少一半B.過(guò)程②需在培養(yǎng)液中添加抗生素和血清C.過(guò)程③獲得的干細(xì)胞只有一條性染色體D.半克隆小鼠為雌性且與受體遺傳特性不同11、細(xì)菌X合成的tcel蛋白和tcil蛋白使其在與其他細(xì)菌的競(jìng)爭(zhēng)中占優(yōu)勢(shì)，其中tcel蛋白是一種有毒性的分泌蛋白。研究人員利用野生型細(xì)菌X及其不同突變體進(jìn)行了實(shí)驗(yàn)：在固體培養(yǎng)基表面放置一張能隔離細(xì)菌的濾膜，將一種菌（下層菌）滴加在濾膜上后再放置第二張濾膜，滴加等量的另一種菌（上層菌），共同培養(yǎng)后，對(duì)上、下層菌計(jì)數(shù)得到如圖結(jié)果。下列分析正確的是（）

A.實(shí)驗(yàn)中的培養(yǎng)皿、固體培養(yǎng)基和濾膜均需要進(jìn)行滅菌處理B.對(duì)上、下層菌計(jì)數(shù)時(shí)應(yīng)采用稀釋涂布平板法而不能用顯微鏡直接計(jì)數(shù)C.由甲、乙、丙三組結(jié)果可推測(cè)tcil蛋白能夠中和tcel蛋白的毒性D.野生型細(xì)菌X在與tcel-tcil雙突變體和tcel突變體的競(jìng)爭(zhēng)中均占優(yōu)勢(shì)12、淀粉經(jīng)淀粉酶水解后得到的產(chǎn)物是重要的工業(yè)原料；但工業(yè)化生產(chǎn)常需在高溫條件下進(jìn)行，而現(xiàn)有的淀粉酶耐熱性不強(qiáng)，科研人員發(fā)現(xiàn)將淀粉酶（AmyS1）第27位的亮氨酸替換為天冬氨酸能產(chǎn)生耐熱性高的淀粉酶（AmyS2），由此科研人員根據(jù)AmyS2的氨基酸序列設(shè)計(jì)并人工合成了AmyS2基因，將其導(dǎo)入芽孢桿菌內(nèi)，具體過(guò)程如下圖所示。最終結(jié)果表明，與導(dǎo)入質(zhì)粒B相比，導(dǎo)入質(zhì)粒C的芽孢桿菌培養(yǎng)液中更易獲得并提純AmyS2．下列說(shuō)法錯(cuò)誤的是（）

A.獲得AmyS2基因并將其導(dǎo)入芽孢桿菌得到AmyS2的過(guò)程是通過(guò)基因工程實(shí)現(xiàn)的B.構(gòu)建質(zhì)粒C時(shí)需用限制酶Eco52I和BamHI同時(shí)切割質(zhì)粒B和信號(hào)肽基因C.信號(hào)肽基因表達(dá)的產(chǎn)物可幫助核糖體上合成的AmyS2進(jìn)入內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體D.可用PCR技術(shù)檢測(cè)芽孢桿菌的DNA上是否插入了AmyS2基因評(píng)卷人得分三、填空題(共7題，共14分)13、統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)往往比活菌的實(shí)際數(shù)目_____________。這是因?yàn)開(kāi)_____________________。因此，統(tǒng)計(jì)結(jié)果一般用而不是用活菌數(shù)來(lái)表示。除了上述的活菌計(jì)數(shù)法外，______________也是測(cè)定微生物數(shù)量的常用方法。14、基因工程操作一般經(jīng)歷如下四個(gè)步驟：_____。15、原核基因采取______獲得，真核基因是______。人工合成目的基因的常用方法有______和______。16、___________（簡(jiǎn)稱PCR）是一種____________迅速_______________的技術(shù)，它能以極少數(shù)的DNA為模板，在幾個(gè)小時(shí)內(nèi)復(fù)制出上百萬(wàn)份的DNA拷貝。17、95%的______________以使DNA析出，用玻璃棒沿一個(gè)方向攪拌，卷起的絲狀物的顏色是____________。獲取的絲狀物后加入到質(zhì)量濃度為_(kāi)_____________mol/L濃度的NaCL溶液的試管中，使絲狀物重新溶解。18、細(xì)胞貼壁和接觸抑制：懸液中分散的細(xì)胞很快就______，稱為_(kāi)_____。細(xì)胞數(shù)目不斷增多，當(dāng)貼壁細(xì)胞分裂生長(zhǎng)到表面______時(shí)，細(xì)胞就會(huì)_____，這種現(xiàn)象稱為_(kāi)_____。19、細(xì)胞產(chǎn)物的工廠化生產(chǎn)。

組織培養(yǎng)技術(shù)除了在農(nóng)業(yè)上的應(yīng)用外，還廣泛應(yīng)用于另一個(gè)重要的領(lǐng)域，即______。評(píng)卷人得分四、判斷題(共1題，共4分)20、動(dòng)物細(xì)胞核移植技術(shù)是將動(dòng)物一個(gè)細(xì)胞的細(xì)胞核移入去核的卵母細(xì)胞中，使這個(gè)重新組合的細(xì)胞發(fā)育成新胚胎，繼而發(fā)育成動(dòng)物個(gè)體的技術(shù)，體現(xiàn)了動(dòng)物細(xì)胞的全能性。（選擇性必修3P52）()A.正確B.錯(cuò)誤評(píng)卷人得分五、實(shí)驗(yàn)題(共4題，共28分)21、（1）在大腸桿菌培養(yǎng)過(guò)程中，除考慮營(yíng)養(yǎng)條件外，還要考慮______、______和滲透壓等條件。由于該細(xì)菌具有體積小、結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單、變異類型容易選擇、______、______等優(yōu)點(diǎn)；因此常作為遺傳學(xué)研究的實(shí)驗(yàn)材料。

（2）在微生物培養(yǎng)操作過(guò)程中，為防止雜菌污染，需對(duì)培養(yǎng)基和培養(yǎng)皿進(jìn)行________（消毒、滅菌）；操作者的雙手需要進(jìn)行清洗和______；靜止空氣中的細(xì)菌可用紫外線殺滅，其原因是紫外線能使蛋白質(zhì)變性，還能__________。

（3）若用稀釋涂布平板法計(jì)數(shù)大腸桿菌活菌的個(gè)數(shù)，要想使所得估計(jì)值更接近實(shí)際值，除應(yīng)嚴(yán)格操作、多次重復(fù)外，還應(yīng)保證待測(cè)樣品稀釋的_______。

（4）通常，對(duì)獲得的純菌種還可以依據(jù)菌落的形狀、大小等菌落特征對(duì)細(xì)菌進(jìn)行初步的____________。

（5）培養(yǎng)大腸桿菌時(shí)，在接種前需要檢測(cè)培養(yǎng)基是否被污染。對(duì)于固體培養(yǎng)基應(yīng)采用的檢測(cè)方法是_________。

（6）若用大腸桿菌進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，使用過(guò)的培養(yǎng)基及其培養(yǎng)物必須經(jīng)過(guò)_______處理后才能丟棄，以防止培養(yǎng)物的擴(kuò)散。22、下圖是某同學(xué)設(shè)計(jì)的傳統(tǒng)發(fā)酵裝置示意圖。比較傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)與現(xiàn)代發(fā)酵工程；回答下列問(wèn)題：

(1)傳統(tǒng)發(fā)酵釀酒與現(xiàn)代工業(yè)發(fā)酵釀酒的原理是______。請(qǐng)?jiān)O(shè)計(jì)簡(jiǎn)單的實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證發(fā)酵過(guò)程中產(chǎn)生了酒精（不考慮發(fā)酵液中葡萄糖的影響），寫(xiě)出實(shí)驗(yàn)思路并預(yù)期實(shí)驗(yàn)結(jié)果與結(jié)論______。

(2)傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)一般以天然存在的______發(fā)酵，品質(zhì)不一，現(xiàn)代工業(yè)發(fā)酵一般為單一菌種發(fā)酵，品質(zhì)較高。自制的果酒并非商品意義上的產(chǎn)品，在實(shí)際生產(chǎn)中還需要經(jīng)過(guò)______裝瓶等過(guò)程才能獲得成品酒。

(3)若要測(cè)定發(fā)酵罐中酵母菌的種群密度，取10mL發(fā)酵液稀釋1000倍，利用25×16的血細(xì)胞計(jì)數(shù)板，觀察并統(tǒng)計(jì)到中方格中的酵母菌平均數(shù)為9個(gè)，則每毫升發(fā)酵液中酵母菌數(shù)量約是______個(gè)。

(4)利用上圖中裝置釀酒與釀醋時(shí)，操作上的最主要的區(qū)別是______。23、T-2毒素是一種由霉菌分泌的脂溶性小分子；可通過(guò)污染飼料引起畜禽中毒反應(yīng)。CYP3A是豬體內(nèi)降解T-2毒素的關(guān)鍵酶，T-2毒素可誘導(dǎo)CYP3A基因表達(dá)水平升高。

(1)T-2毒素是霉菌的_____（選填“初級(jí)”或“次級(jí)”）代謝產(chǎn)物，主要以_____方式進(jìn)入豬細(xì)胞。

(2)B1和B2是CYP3A基因啟動(dòng)子上游的兩個(gè)調(diào)控序列，為研究T-2毒素誘導(dǎo)CYP3A基因表達(dá)的機(jī)理，研究者首先將不同調(diào)控序列分別和CYP3A基因啟動(dòng)子及熒光素酶基因（LUC基因）連接構(gòu)建表達(dá)載體，再分別導(dǎo)入豬肝細(xì)胞，然后向各組豬肝細(xì)胞培養(yǎng)液中加入_____，適宜條件下進(jìn)行培養(yǎng)；24h后檢測(cè)LUC酶活性，計(jì)算啟動(dòng)子活性相對(duì)值，結(jié)果如圖1所示。據(jù)圖可知，B1和B2調(diào)控序列是CYP3A基因響應(yīng)T-2毒素的核心元件，理由是_____。

(3)研究表明NF-Y和Sp1兩種蛋白均參與T-2毒素對(duì)CYP3A的誘導(dǎo)；B2是Spl的結(jié)合位點(diǎn)。研究者推測(cè)，NF-Y通過(guò)與B1結(jié)合，與Sp1共同調(diào)控CYP3A基因的表達(dá)。

①為證明Bl是NF-Y的結(jié)合位點(diǎn)，研究者依據(jù)B1序列制備了野生型和突變型探針，分別與豬肝細(xì)胞核蛋白提取物混合，實(shí)驗(yàn)分組及結(jié)果如圖2．據(jù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果推測(cè)，第4組出現(xiàn)阻滯帶的原因是_____，進(jìn)而推測(cè)第5組結(jié)果產(chǎn)生的原因是_____。

②研究者設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)進(jìn)一步證明了NF-Y和Spl通過(guò)互作共同發(fā)揮調(diào)控功能，實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)思路是：增大或縮小B1和B2兩者之間的距離，檢測(cè)CYP3A基因的啟動(dòng)子活性。據(jù)此分析，實(shí)驗(yàn)假設(shè)是_____。24、新冠病毒竟然是友軍？近日有媒體報(bào)道稱感染新冠病毒可以治療肺癌；該報(bào)道中的結(jié)論是基于美國(guó)科學(xué)家發(fā)表的一篇論文《鼻部吸入新冠刺突蛋白S1可緩解肺癌發(fā)展》。該研究使用新冠病毒的刺突蛋白S1進(jìn)行了體內(nèi)和體外實(shí)驗(yàn)，分析回答下列問(wèn)題：

(1)體外實(shí)驗(yàn)：首先培養(yǎng)肺癌細(xì)胞，在細(xì)胞培養(yǎng)液中除了加入必要的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)外，還加了一定濃度的________以防止雜菌污染，細(xì)胞瓶放在37℃的________中培養(yǎng)。隨后用刺突蛋白S1處理肺癌細(xì)胞并檢測(cè)細(xì)胞的凋亡率，結(jié)果如圖1。結(jié)果表明________。

(2)小鼠體內(nèi)實(shí)驗(yàn)：流程如圖2，實(shí)驗(yàn)結(jié)果如圖3。其中NNK是尼古丁的衍生物亞硝胺酮，長(zhǎng)時(shí)間對(duì)小鼠進(jìn)行NNK處理的目的是________。

(3)對(duì)比體內(nèi)實(shí)驗(yàn)和體外實(shí)驗(yàn)的結(jié)果發(fā)現(xiàn)刺突蛋白S1在體內(nèi)抑癌的效果比體外的效果好得多，推測(cè)原因可能是刺突蛋白S1引起了免疫系統(tǒng)的________功能激活。為了進(jìn)一步確認(rèn)肺部腫瘤比例的減少到底是不是因?yàn)樾鹿诓《敬掏坏鞍譙1的作用，還應(yīng)增加一組對(duì)照為NNK+________。

(4)上述研究成果是否足以證明感染新冠病毒可以治療肺癌？請(qǐng)做出判斷并說(shuō)明理由________________。評(píng)卷人得分六、綜合題(共3題，共12分)25、葡萄酒生產(chǎn)過(guò)程中會(huì)產(chǎn)生大量的釀酒殘?jiān)ㄆぴ?。目前這些皮渣主要用作飼料或肥料；同時(shí)研究者也采取多種措施拓展其利用價(jià)值。

回答下列問(wèn)題：

（1）皮渣中含有較多的天然食用色素花色苷，可用萃取法提取。萃取前將原料干燥、粉碎的目的分別是__________，萃取效率主要取決于萃取劑的__________。萃取過(guò)程需要在適宜溫度下進(jìn)行，溫度過(guò)高會(huì)導(dǎo)致花色苷__________。研究發(fā)現(xiàn)，萃取時(shí)輔以纖維素酶、果膠酶處理可提高花色苷的提取率，原因是____________________。

（2）為了解皮渣中微生物的數(shù)量，取10g皮渣加入90mL無(wú)菌水，混勻、靜置后取上清液，用稀釋涂布平板法將0.1mL稀釋液接種于培養(yǎng)基上。104倍稀釋對(duì)應(yīng)的三個(gè)平板中菌落數(shù)量分別為78、91和95，則每克皮渣中微生物數(shù)量為_(kāi)_________個(gè)。

（3）皮渣堆積會(huì)積累醋酸菌，可從中篩選優(yōu)良菌株。制備醋酸菌初篩平板時(shí)，需要將培養(yǎng)基的pH調(diào)至__________性，滅菌后須在未凝固的培養(yǎng)基中加入無(wú)菌碳酸鈣粉末、充分混勻后倒平板，加入碳酸鈣的目的是______________________________。培養(yǎng)篩選得到的醋酸菌時(shí)，在缺少糖源的液體培養(yǎng)基中可加入乙醇作為_(kāi)_________。

（4）皮渣堆積過(guò)程中也會(huì)積累某些兼性厭氧型乳酸菌。初篩醋酸菌時(shí)，乳酸菌有可能混入其中，且兩者菌落形態(tài)相似。請(qǐng)?jiān)O(shè)計(jì)一個(gè)簡(jiǎn)單實(shí)驗(yàn)，區(qū)分篩選平板上的醋酸菌和乳酸菌_________。（簡(jiǎn)要寫(xiě)出實(shí)驗(yàn)步驟和預(yù)期結(jié)果）26、傳毒性物質(zhì)常存在于被化學(xué)物質(zhì)污染的水體；可損傷生物的DNA，嚴(yán)重威脅人類健康。研究人員通過(guò)基因工程改造大腸桿菌，以期篩選對(duì)遺傳毒性物質(zhì)反應(yīng)靈敏的工程菌株，用于水質(zhì)檢測(cè)。

（1）大腸桿菌DNA中存在可被遺傳毒性物質(zhì)激活的毒性響應(yīng)啟動(dòng)子序列。將毒性響應(yīng)啟動(dòng)子插入圖1所示表達(dá)載體的P區(qū)，獲得基因工程改造的大腸桿菌。當(dāng)改造后的大腸桿菌遇到遺傳毒性物質(zhì)時(shí)，RNA聚合酶識(shí)別并與______結(jié)合；驅(qū)動(dòng)噬菌體裂解基因（SRR）轉(zhuǎn)錄，表達(dá)產(chǎn)物可使大腸桿菌裂解。

（2）研究人員選取啟動(dòng)子sul準(zhǔn)備與圖1表達(dá)載體連接。圖2顯示了啟動(dòng)子sul內(nèi)部存在的酶切位點(diǎn)；箭頭表示轉(zhuǎn)錄方向。

①據(jù)圖1、2信息，克隆啟動(dòng)子sul時(shí)，在其A端和B端應(yīng)分別添加限制性內(nèi)切酶______的酶切位點(diǎn)；從而確保啟動(dòng)子sul可與已被酶切的表達(dá)載體正確連接。

②將重組表達(dá)載體導(dǎo)入大腸桿菌，置于含有______的選擇培養(yǎng)基中進(jìn)行篩選；鑒定及擴(kuò)大培養(yǎng)；獲得工程菌sul。

（3）研究人員陸續(xù)克隆了其他4種啟動(dòng)子（rec、imu、qnr；cda）；分別連入表達(dá)載體，用同樣的方法獲得導(dǎo)入重組載體的工程菌，以篩選最靈敏的檢測(cè)菌株。

①將5種工程菌和對(duì)照菌在LB培養(yǎng)基中培養(yǎng)一段時(shí)間后，檢測(cè)菌體密度，結(jié)果如圖3。圖中結(jié)果顯示________________________；說(shuō)明工程菌在自然生長(zhǎng)狀態(tài)下不會(huì)產(chǎn)生自裂解現(xiàn)象。

②上述菌株在LB培養(yǎng)基中生長(zhǎng)2h時(shí)加入遺傳毒性物質(zhì)，檢測(cè)結(jié)果如圖4。據(jù)圖可知，5種工程菌均啟動(dòng)了對(duì)遺傳毒性物質(zhì)的響應(yīng)，應(yīng)選擇工程菌____________作為最優(yōu)檢測(cè)菌株。

（4）下列關(guān)于該工程菌的敘述，正確的包括______________

A．該工程菌可能用于檢測(cè)土壤；蔬菜中的農(nóng)藥殘留量。

B．該毒性響應(yīng)啟動(dòng)子序列廣泛存在于自然界所有物種中。

C．其表達(dá)產(chǎn)物可裂解大腸桿菌；檢測(cè)后的剩余菌液可直接倒掉。

D．為長(zhǎng)期保存該工程菌，應(yīng)加入一定濃度的甘油凍存于-20℃27、α1一抗胰蛋白酶（α1-AT）是下呼吸道中最主要的蛋白酶抑制劑，其在血清中含量越低，肺氣腫越易發(fā)生。α1-AT補(bǔ)充治療不僅是先天性α1-AT缺乏癥的主要治療方法，而且也為其他炎癥性肺疾病的治療開(kāi)辟了新的途徑。我國(guó)科研人員通過(guò)基因工程的方法生產(chǎn)α1-AT并用于臨床，下圖是科研人員選用的載體（圖中bp表示堿基對(duì)，α1-AT基因?yàn)?182bp）?；卮鹣铝袉?wèn)題。

注：質(zhì)粒除圖示部位外以及目的基因內(nèi)部和外部均無(wú)XbaI；SacI、HindIII三種限制酶的識(shí)別位點(diǎn)。

(1)基因表達(dá)載體的作用是____________（答出2點(diǎn)即可）。質(zhì)粒中與該作用相關(guān)的結(jié)構(gòu)除圖中所示外，還有_____。

(2)科研人員在構(gòu)建基因表達(dá)載體時(shí)選用的限制酶是XbaI和HindIII，操作成功后的基因表達(dá)載體長(zhǎng)_____bp。沒(méi)有選擇限制酶XbaI和SacI的理由是_____。

(3)從人體獲得α1-AT基因后，通過(guò)PCR技術(shù)快速擴(kuò)增。PCR反應(yīng)需在一定的緩沖溶液中才能進(jìn)行，理由是_____。在引物設(shè)計(jì)上，科研人員在兩種引物上分別添加了限制XbaI、HindIII的序列，理由是_____，添加位置應(yīng)位于引物的_____（填“5'”或“3'”）端。參考答案一、選擇題(共5題，共10分)1、A【分析】【分析】

參與果酒制作的微生物是酵母菌；其生存的適宜溫度是18～25℃，新陳代謝類型為異養(yǎng)兼性厭氧型。

【詳解】

A；啤酒是以大麥為主要原料經(jīng)酵母菌無(wú)氧呼吸將糖類分解為酒精而制成的；A錯(cuò)誤；

B；酒精發(fā)酵的原材料是糖類；B正確；

C；由題圖可知；發(fā)酵液L1和L2口味相似，而L3澀味較強(qiáng)，C正確；

D；菌種選育可依賴于突變篩選（誘變育種）或轉(zhuǎn)基因技術(shù)（基因工程）等；D正確。

故選A。2、B【分析】【分析】

果酒和果醋發(fā)酵：①將葡萄汁裝入發(fā)酵瓶；要留要大約13的空間，并封閉充氣口。②制葡萄酒的過(guò)程中，將溫度嚴(yán)格控制在18℃~25℃，時(shí)間控制在10~12d左右，可通過(guò)出料口對(duì)發(fā)酵的情況進(jìn)行。及時(shí)的監(jiān)測(cè)。③制葡萄醋的過(guò)程中，將溫度嚴(yán)格控制在30℃~35℃，時(shí)間控制在前7~8d左右，并注意適時(shí)通過(guò)充氣口充氣。

【詳解】

利用酵母菌進(jìn)行果酒制作的適宜溫度是18~25℃；利用醋酸菌進(jìn)行醋酸發(fā)酵的適宜溫度是30～35℃；利用毛霉進(jìn)行腐乳制作的適宜溫度是15~18℃；B正確。

故選B。3、C【分析】【分析】

分析題干信息：Ⅰ保留X；11號(hào)染色體；Ⅱ保留2、11號(hào)染色體，具有芳烴羥化酶活性，Ⅲ保留X、11、17號(hào)染色體具有胸苷激酶活性，Ⅰ、Ⅲ都有磷酸甘油酸激酶活性，Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ均有乳酸脫氫酶活性，所以支配芳烴羥化酶合成的基因位于2號(hào)染色體上，支配胸苷激酶合成的基因位于17號(hào)染色體上；支配磷酸甘油酸激合成的基因位于X號(hào)染色體上；支配乳酸脫氫酶合成的基因位于11號(hào)染色體上。

【詳解】

A；動(dòng)物細(xì)胞融合過(guò)程中；可以利用滅活的仙臺(tái)病毒可以促進(jìn)細(xì)胞融合，原理是細(xì)胞膜具有流動(dòng)性，A錯(cuò)誤；

B；細(xì)胞Ⅲ中保留了人的X、11、17號(hào)染色體；故不會(huì)是鼠-鼠融合細(xì)胞，B錯(cuò)誤；

CD；Ⅰ保留X、11號(hào)染色體；Ⅱ保留2、11號(hào)染色體，具有芳烴羥化酶活性，Ⅲ保留X、11、17號(hào)染色體具有胸苷激酶活性，Ⅰ、Ⅲ都有磷酸甘油酸激酶活性，Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ均有乳酸脫氫酶活性，所以支配芳烴羥化酶合成的基因位于2號(hào)染色體上，支配胸苷激酶合成的基因位于17號(hào)染色體上；支配磷酸甘油酸激合成的基因位于X號(hào)染色體上；支配乳酸脫氫酶合成的基因位于11號(hào)染色體上，C正確，D錯(cuò)誤。

故選C。4、D【分析】【分析】

采取基因療法替換致病基因；使得正常基因的表達(dá)產(chǎn)物發(fā)揮功能，從而達(dá)到治療遺傳病的目的。

【詳解】

人類遺傳病的病因是細(xì)胞內(nèi)的遺傳物質(zhì)發(fā)生了改變；其治療措施是基因治療，正?；?qū)氩∪梭w內(nèi)有缺陷的細(xì)胞中，使該基因的表達(dá)產(chǎn)物發(fā)揮功能，從而達(dá)到治療疾病的目的，因此治療白化??；苯丙酮尿癥等人類遺傳病的根本途徑是用基因治療糾正或彌補(bǔ)有缺陷的基因。D正確，ABC錯(cuò)誤。

故選D。5、D【分析】【分析】

蛋白質(zhì)工程指以蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)規(guī)律及其與生物功能的關(guān)系作為基礎(chǔ)；通過(guò)基因修飾或基因合成，對(duì)現(xiàn)有蛋白質(zhì)進(jìn)行基因改造，或制造一種新的蛋白質(zhì)，以滿足人類的生產(chǎn)和生活的需要。蛋白質(zhì)工程是在基因工程的基礎(chǔ)上，延伸出來(lái)的第二代基因工程。

【詳解】

A；根據(jù)蛋白質(zhì)工程的概念可知；通過(guò)蛋白質(zhì)工程可生產(chǎn)更符合人類需要的產(chǎn)品，A正確；

B；通過(guò)蛋白質(zhì)工程可以改變蛋白質(zhì)的活性；B正確；

C；利用蛋白質(zhì)工程可制成體積小、耗電少、效率高的電子元件；C正確；

D；利用基因工程可以在大腸桿菌細(xì)胞中得到人干擾素；D錯(cuò)誤。

故選D。

【點(diǎn)睛】二、多選題(共7題，共14分)6、B:C【分析】【分析】

本題主要考查胚胎發(fā)育的知識(shí)。

過(guò)程：受精卵→卵裂期→桑椹胚→囊胚→原腸胚→幼體．

①卵裂期：細(xì)胞進(jìn)行有絲分裂；數(shù)量增加，胚胎總體積不增加；

②桑椹胚：32個(gè)細(xì)胞左右的胚胎（之前所有細(xì)胞都能發(fā)育成完整胚胎的潛能屬全能細(xì)胞）；

③囊胚：細(xì)胞開(kāi)始分化；其中個(gè)體較大的細(xì)胞叫內(nèi)細(xì)胞團(tuán)將來(lái)發(fā)育成胎兒的各種組織；而滋養(yǎng)層細(xì)胞將來(lái)發(fā)育成胎膜和胎盤；胚胎內(nèi)部逐漸出現(xiàn)囊胚腔（注：囊胚的擴(kuò)大會(huì)導(dǎo)致透明帶的破裂，胚胎伸展出來(lái)，這一過(guò)程叫孵化）；

④原腸胚：內(nèi)細(xì)胞團(tuán)表層形成外胚層；下方細(xì)胞形成內(nèi)胚層，由內(nèi)胚層包圍的囊腔叫原腸腔。（細(xì)胞分化在胚胎期達(dá)到最大限度）。

【詳解】

A；由桑椹胚發(fā)育到囊胚進(jìn)行的是有絲分裂；形成的每個(gè)細(xì)胞內(nèi)DNA總量不變，A錯(cuò)誤；

B；細(xì)胞分化的實(shí)質(zhì)是基因的選擇性表達(dá)；不改變細(xì)胞的遺傳物質(zhì)，B正確；

C；囊胚期內(nèi)細(xì)胞團(tuán)和滋養(yǎng)層細(xì)胞的差異是基因選擇性表達(dá)的結(jié)果；這是轉(zhuǎn)錄水平上的差異，不是復(fù)制水平的差異，C正確；

D；卵裂期細(xì)胞進(jìn)行有絲分裂；數(shù)量增加，但每個(gè)細(xì)胞體積有所減小，胚胎的總體積不變，D錯(cuò)誤。

故選BC。

【點(diǎn)睛】7、A:B:C【分析】【分析】

1；胚胎干細(xì)胞簡(jiǎn)稱ES或EK細(xì)胞；來(lái)源于早期胚胎或原始性腺（即囊胚期的內(nèi)細(xì)胞團(tuán)）。

2；ES細(xì)胞在飼養(yǎng)層細(xì)胞上或在添加抑制因子的培養(yǎng)液中；能夠維持不分化的狀態(tài)．在培養(yǎng)液中加入分化誘導(dǎo)因子，如牛黃酸、丁酰環(huán)腺苷酸等化學(xué)物質(zhì)時(shí)，就可以誘導(dǎo)ES細(xì)胞向不同類型的組織細(xì)胞分化，這為揭示細(xì)胞分化和細(xì)胞凋亡機(jī)理提供了有效的手段。

【詳解】

A；為了獲得更多的囊胚；可以采用激素促進(jìn)成熟雌性個(gè)體超數(shù)排卵，然后將卵細(xì)胞從母體內(nèi)取出，在試管內(nèi)與人工采集的精子進(jìn)行體外受精，培育成胚胎，A錯(cuò)誤；

B、細(xì)胞a和細(xì)胞b是由同一個(gè)受精卵經(jīng)過(guò)有絲分裂形成的；故核基因相同，B錯(cuò)誤；

C；運(yùn)用細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)可以從哺乳動(dòng)物的早期胚胎中獲得胚胎干細(xì)胞；首先必須用胰蛋白酶處理內(nèi)細(xì)胞團(tuán)，分解細(xì)胞間的膠原蛋白等，使之分散成單個(gè)細(xì)胞，C錯(cuò)誤；

D、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)需要在5%CO2的培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)；以維持培養(yǎng)液的pH，D正確。

故選ABC。8、B:C:D【分析】【分析】

用酒曲釀酒菌種是酵母菌；代謝類型是兼性厭氧型真菌，屬于真核細(xì)胞，條件是18～25℃；前期需氧，后期不需氧。

【詳解】

A、用酒曲釀酒是利用了微生物細(xì)胞呼吸的原理，進(jìn)行的是酵母菌的無(wú)氧發(fā)酵，不能一直通入O2；A錯(cuò)誤；

B；由于呼吸作用會(huì)產(chǎn)熱；故會(huì)導(dǎo)致酒液溫度產(chǎn)生變化，B正確；

C、起泡是由微生物進(jìn)行呼吸作用產(chǎn)生的CO2釋放到發(fā)酵液中形成的；C正確；

D；“曲勢(shì)盡”可能是隨著發(fā)酵的進(jìn)行甕中液體pH降低、酒精濃度過(guò)高導(dǎo)致酵母菌大量死亡；D正確。

故選BCD。9、A:C:D【分析】【分析】

分析題干信息：Ⅰ保留X；11號(hào)染色體；Ⅱ保留2、11號(hào)染色體，具有芳烴羥化酶活性，Ⅲ，保留X、11、17號(hào)染色體具有胸苷激酶活性，Ⅰ、Ⅲ都有磷酸甘油酸激酶活性，Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ均有乳酸脫氫酶活性，所以支配芳烴羥化酶合成的基因位于2號(hào)染色體上，支配胸苷激酶合成的基因位于17號(hào)染色體上；支配磷酸甘油酸激合成的基因位于X號(hào)染色體上；支配乳酸脫氫酶合成的基因位于11號(hào)染色體上。

【詳解】

A；動(dòng)物細(xì)胞融合過(guò)程中；可以利用滅活的仙臺(tái)病毒或聚乙二醇作誘導(dǎo)劑促進(jìn)細(xì)胞融合，A正確；

B；細(xì)胞Ⅲ中保留了人的X、11、17號(hào)染色體；故不會(huì)是鼠-鼠融合細(xì)胞，B錯(cuò)誤；

CD；根據(jù)分析可知；芳烴羥化酶基因位于2號(hào)染色體上，乳酸脫氫酶基因位于11號(hào)染色上，胸苷激酶基因位于17號(hào)染色體上，磷酸甘油酸激酶基因位于X染色體上，CD正確。

故選ACD。10、B:C:D【分析】【分析】

“人造精子”是一種可以替代精子使卵細(xì)胞“受精”的單倍體胚胎干細(xì)胞。目前構(gòu)建成功的單倍體胚胎干細(xì)胞系；其細(xì)胞核內(nèi)包含的性染色體全部都是X染色體，而無(wú)包含Y染色體的細(xì)胞。單倍體胚胎干細(xì)胞在培養(yǎng)過(guò)程中可能會(huì)成為二倍體細(xì)胞，原因是有一部分單倍體細(xì)胞在分裂期時(shí)發(fā)生異常，跳過(guò)分裂期重新進(jìn)入分裂間期，導(dǎo)致DNA含量加倍。

【詳解】

A；過(guò)程①只是去掉雌原核遺傳物質(zhì)（核遺傳物質(zhì)）；受精卵中還有卵細(xì)胞細(xì)胞質(zhì)的遺傳物質(zhì)，A錯(cuò)誤；

B；過(guò)程②需保證培養(yǎng)過(guò)程無(wú)菌；因而可添加抗生素，由于人們對(duì)細(xì)胞所需的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)尚未全部研究清楚，因此在使用合成培養(yǎng)基時(shí)，通常需要添加血清等天然成分，B正確；

C；孤雌單倍體胚胎細(xì)胞只含有精子的染色體；而精子只含1條性染色體，因而過(guò)程③獲得的干細(xì)胞只有一條性染色體，C正確；

D；卵母細(xì)胞的性染色體是X；類精子單倍體胚胎干細(xì)胞的性染色體也是X，因而半克隆小鼠的性染色體是X，發(fā)育成雌性，受體只為胚胎提供營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，不影響胚胎的遺傳物質(zhì)，D正確。

故選BCD。11、A:B:C【分析】【分析】

微生物常見(jiàn)的接種的方法：

①平板劃線法：將已經(jīng)熔化的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿制成平板；接種，劃線，在恒溫箱里培養(yǎng)。在線的開(kāi)始部分，微生物往往連在一起生長(zhǎng)，隨著線的延伸，菌數(shù)逐漸減少，最后可能形成單個(gè)菌落。

②稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經(jīng)過(guò)大量稀釋后；均勻涂布在培養(yǎng)皿表面，經(jīng)培養(yǎng)后可形成單個(gè)菌落。

【詳解】

A；為避免雜菌的污染；實(shí)驗(yàn)中的濾膜、培養(yǎng)皿、固體培養(yǎng)基等均需滅菌處理，A正確；

B；對(duì)活菌進(jìn)行計(jì)數(shù)的方法是稀釋涂布平板法；具體方法是：先將菌體進(jìn)行梯度稀釋，再涂布到濾膜的表面，待菌落數(shù)穩(wěn)定時(shí)進(jìn)行計(jì)數(shù)，不能用顯微鏡直接計(jì)數(shù)的原因是顯微鏡直接計(jì)數(shù)不能區(qū)分死菌和活菌，B正確；

C；tcel蛋白是一種有毒性的分泌蛋白；乙組中野生型可產(chǎn)生tce1蛋白作用于tcel-tcil雙突變體，后者無(wú)法產(chǎn)生tci1蛋白中和tcel蛋白的毒性，使野生菌在競(jìng)爭(zhēng)中占據(jù)優(yōu)勢(shì)；而在丙組中，野生型可產(chǎn)生tce1蛋白作用于tcel突變體，后者可以產(chǎn)生tci1蛋白中和tcel蛋白的毒性，使野生型的生長(zhǎng)受到抑制，由此推測(cè)，tcil蛋白能夠中和tcel蛋白的毒性，C正確；

D；由甲組、乙組可知；野生型細(xì)菌X在與tcel-tcil雙突變體的競(jìng)爭(zhēng)中均占優(yōu)勢(shì)，由甲組、丙組可知，野生型細(xì)菌X在與tcel突變體的競(jìng)爭(zhēng)中不占優(yōu)勢(shì)，D錯(cuò)誤。

故選ABC。12、A:B:C【分析】【分析】

基因工程：目的基因的篩選與獲取；構(gòu)建基因表達(dá)載體、將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞、目的基因的檢測(cè)與鑒定。

分泌蛋白的合成：首先；在游離的核糖體中以氨基酸為原料開(kāi)始多肽鏈的合成。當(dāng)合成了一段肽鏈后，這段肽鏈會(huì)與核糖體一起轉(zhuǎn)移到粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)上繼續(xù)合成過(guò)程，并且邊合成邊轉(zhuǎn)移到內(nèi)質(zhì)網(wǎng)腔內(nèi)，再經(jīng)過(guò)加工；折疊，形成具有一定空間結(jié)構(gòu)的蛋白質(zhì)。內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膜鼓出形成囊泡，包裹著蛋白質(zhì)離開(kāi)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)，到達(dá)高爾基體，與高爾基體融合，高爾基體對(duì)蛋白質(zhì)做進(jìn)一步的加工，然后形成包裹著蛋白質(zhì)的囊泡轉(zhuǎn)運(yùn)到細(xì)胞膜，與細(xì)胞膜融合。

【詳解】

A；科研人員根據(jù)AmyS2的氨基酸序列設(shè)計(jì)并人工合成了AmyS2基因；因此獲得AmyS2基因并將其導(dǎo)入芽孢桿菌得到AmyS2的過(guò)程是通過(guò)蛋白質(zhì)工程和基因工程實(shí)現(xiàn)的，A錯(cuò)誤；

B；BamHI會(huì)破壞AmyS2基因；B錯(cuò)誤；

C；在分泌蛋白的合成過(guò)程中；信號(hào)肽序列可幫助肽鏈進(jìn)入內(nèi)質(zhì)網(wǎng)，在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)被切割，因此信號(hào)肽基因表達(dá)的產(chǎn)物可幫助核糖體上合成的AmyS2進(jìn)入內(nèi)質(zhì)網(wǎng)，但不能引導(dǎo)其進(jìn)入高爾基體，C錯(cuò)誤；

D；可用PCR技術(shù)檢測(cè)芽孢桿菌的DNA上是否插入了AmyS2基因；如果經(jīng)過(guò)PCR擴(kuò)增，不出現(xiàn)擴(kuò)增產(chǎn)物，說(shuō)明沒(méi)有插入基因，反之，則成功插入，D正確。

故選ABC。三、填空題(共7題，共14分)13、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】低當(dāng)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞連在一起時(shí)，平板上觀察到的只是一個(gè)菌落菌落數(shù)14、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】提取目的基因、目的基因與運(yùn)載體結(jié)合、將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞、目的基因的檢測(cè)與鑒定。15、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】直接分離人工合成反轉(zhuǎn)錄法化學(xué)合成法16、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)體外擴(kuò)增DNA片段17、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】冷酒精白色218、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】貼附在瓶壁上細(xì)胞貼壁相互抑制停止分裂增殖細(xì)胞的接觸抑制。19、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】細(xì)胞產(chǎn)物的工廠化生產(chǎn)。四、判斷題(共1題，共4分)20、B【分析】【詳解】

動(dòng)物細(xì)胞核移植技術(shù)體現(xiàn)了動(dòng)物細(xì)胞核的全能性，不能體現(xiàn)動(dòng)物細(xì)胞的全能性，高度分化的動(dòng)物細(xì)胞的全能性受到了限制，故錯(cuò)誤。五、實(shí)驗(yàn)題(共4題，共28分)21、略

【分析】【分析】

1；大腸桿菌屬于細(xì)菌；是原核生物。微生物營(yíng)養(yǎng)成分主要有碳源、氮源、水和無(wú)機(jī)鹽等，另外還需要注意滲透壓、溫度、pH等條件。大腸桿菌常作為遺傳學(xué)研究的實(shí)驗(yàn)材料．微生物培養(yǎng)的關(guān)鍵是無(wú)菌技術(shù)，防止外來(lái)雜菌的污染。

2；微生物培養(yǎng)的關(guān)鍵是無(wú)菌操作。使用強(qiáng)烈的理化因素殺死物體內(nèi)外一切微生物的細(xì)胞、芽孢和孢子的過(guò)程稱為滅菌；常用的方法有灼燒滅菌、干熱滅菌和高壓蒸汽滅菌。消毒是指用較為溫和的物理或化學(xué)方法僅殺死物體體表或內(nèi)部的一部分微生物的過(guò)程。常用的方法有煮沸消毒法、巴氏消毒法、紫外線或化學(xué)藥物消毒法等。

【詳解】

（1）大腸桿菌具有體積小；結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單、變異類型容易選擇、易培養(yǎng)、生活周期短等優(yōu)點(diǎn)；培養(yǎng)過(guò)程中，除考慮營(yíng)養(yǎng)條件外，還要考慮溫度、酸堿度和滲透壓等條件。

（2）滅菌使用強(qiáng)烈的理化因素殺死物體內(nèi)外所有的微生物；所以對(duì)培養(yǎng)基和培養(yǎng)皿進(jìn)行滅菌；消毒使用較為溫和的物理或化學(xué)方法，僅殺死物體表面或內(nèi)部一部分對(duì)人體有害的微生物，操作者的雙手需要進(jìn)行清洗和消毒，紫外線能使蛋白質(zhì)變性，還能損傷DNA的結(jié)構(gòu)。

（3）稀釋涂布平板法是將菌液進(jìn)行一系列的梯度稀釋；然后將不同稀釋度的菌液，分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面進(jìn)行培養(yǎng)，應(yīng)保證樣品稀釋的比例適合。

（4）對(duì)獲得的純菌種還可以依據(jù)菌落的形狀；大小等菌落特征對(duì)細(xì)菌進(jìn)行初步的鑒定。

（5）培養(yǎng)大腸桿菌時(shí)；在接種前需要檢測(cè)培養(yǎng)基是否被污染。對(duì)于固體培養(yǎng)基應(yīng)采用的檢測(cè)方法是將未接種的培養(yǎng)基在適宜的溫度下放置適宜的時(shí)間，觀察培養(yǎng)基上是否有菌落產(chǎn)生。

（6）因?yàn)橛械拇竽c桿菌會(huì)釋放一種強(qiáng)烈的毒素；并可能導(dǎo)致腸管出現(xiàn)嚴(yán)重癥狀，使用過(guò)的培養(yǎng)基及其培養(yǎng)物必須經(jīng)過(guò)滅菌處理后才能丟棄，以防止培養(yǎng)物的擴(kuò)散。

【點(diǎn)睛】

本題主要考查微生物培養(yǎng)的相關(guān)知識(shí)，要求考生能夠識(shí)記大腸桿菌的培養(yǎng)條件以及其作為遺傳實(shí)驗(yàn)的優(yōu)點(diǎn)，區(qū)分掌握不同材料消毒和滅菌的方法，識(shí)記菌種鑒定的方法等，屬于基礎(chǔ)題?！窘馕觥竣?溫度②.酸堿度③.易培養(yǎng)④.生活周期短⑤.滅菌⑥.消毒⑦.損傷DNA的結(jié)構(gòu)⑧.比例合適⑨.鑒定(或分類)⑩.將未接種的培養(yǎng)基在適宜的溫度下放置適宜的時(shí)間，觀察培養(yǎng)基上是否有菌落產(chǎn)生.?.滅菌22、略

【分析】【分析】

參與果酒的制作的微生物主要是酵母菌；其新陳代謝的類型為異養(yǎng)兼性厭氧型，較適宜的發(fā)酵溫度為18~30℃。在無(wú)氧的環(huán)境中酵母菌把糖類分解為酒精和二氧化碳。在果酒制作過(guò)程中檢測(cè)發(fā)酵液是否含有酒精，取樣后滴加適量酸性重鉻酸鉀溶液并振蕩，若觀察到溶液顏色的變化是橙色變成灰綠色，則說(shuō)明發(fā)酵液中含有酒精。

【詳解】

（1）傳統(tǒng)發(fā)酵釀酒與現(xiàn)代工業(yè)發(fā)酵釀酒都是利用了酵母菌的無(wú)氧呼吸。酵母菌屬于真核生物；其代謝類型是兼性厭氧型，在有氧條件下進(jìn)行大量增殖，在無(wú)氧條件下將葡萄糖分解為酒精。

橙色的重鉻酸鉀溶液在酸性條件下與乙醇（即酒精）發(fā)生化學(xué)反應(yīng)；變成灰綠色，該實(shí)驗(yàn)?zāi)康氖球?yàn)證發(fā)酵過(guò)程中產(chǎn)生了酒精，因此實(shí)驗(yàn)自變量是是否加入發(fā)酵液，因變量為溶液顏色變化。對(duì)照組中應(yīng)加入酒精作為陽(yáng)性對(duì)照。實(shí)驗(yàn)過(guò)程中應(yīng)遵循等量原則；單一變量原則等，因此實(shí)驗(yàn)思路是：取兩支試管分別標(biāo)號(hào)A、B，A試管中各加入2ml發(fā)酵液，作為實(shí)驗(yàn)組，B試管中各加入2ml酒精，作為對(duì)照組，兩試管中都加入適量酸性重鉻酸鉀，振蕩后觀察試管中顏色變化，AB兩試管都變?yōu)榛揖G色，即可驗(yàn)證發(fā)酵過(guò)程中產(chǎn)生了酒精。

（2）傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)一般不進(jìn)行嚴(yán)格滅菌操作；因此其發(fā)酵菌種為天然的混合菌種。現(xiàn)代工業(yè)發(fā)酵釀制果酒不同于自制果酒，需要經(jīng)過(guò)沉淀；過(guò)濾、滅菌、裝瓶等過(guò)程才能獲得成品酒。

（3）25×16型的血細(xì)胞計(jì)數(shù)板計(jì)算公式：酵母細(xì)胞個(gè)數(shù)/1mL=1個(gè)中方格中酵母菌數(shù)×25×10000×稀釋倍數(shù)，因此該實(shí)驗(yàn)中每毫升發(fā)酵液中酵母菌數(shù)量=9×25×10000×1000=2.25×109。

（4）釀酒利用酵母菌的無(wú)氧呼吸，需要關(guān)閉充氣口，釀醋利用醋酸菌，醋酸菌是需氧型微生物，因此需向充氣孔中充入無(wú)菌空氣?！窘馕觥?1)酵母菌是兼性厭氧微生物；在無(wú)氧條件下將葡萄糖分解為酒精實(shí)驗(yàn)思路：取兩支試管分別標(biāo)號(hào)A；B，向A試管中各加入2ml發(fā)酵液，向B試管中各加入2ml酒精，向AB兩試管各滴加0．5ml溶有0．1g重鉻酸鉀的濃硫酸溶液（或酸性重鉻酸鉀），并輕輕震蕩，觀察試管中溶液顏色變化。

(2)混合菌種沉淀；過(guò)濾、滅菌。

(3)2.25×109

(4)釀酒時(shí)需關(guān)閉充氣口，釀醋時(shí)則需向充氣孔中充入無(wú)菌空氣23、略

【分析】【分析】

圖1可知：T-2毒素是一種常見(jiàn)的菌素；CYP3A是降解T-2毒素的關(guān)鍵酶，T-2毒素可誘導(dǎo)其表達(dá)水平升高，當(dāng)用兩種調(diào)控序列同時(shí)連接啟動(dòng)子，啟動(dòng)子的活性最高。

圖2可知：野生型探針能與NF-Y結(jié)合；突變型探針不能與NF-Y結(jié)合，NF-Y抗體一定能與NF-Y結(jié)合。

【詳解】

（1）初級(jí)代謝產(chǎn)物一般是霉菌生命活動(dòng)所必需的，大多存在于細(xì)胞內(nèi)。次級(jí)代謝產(chǎn)物不是霉菌生命活動(dòng)必需的，并且分泌到體外，故T-2毒素是霉菌的次級(jí)代謝產(chǎn)物。T-2毒素是一種由霉菌分泌的脂溶性小分子，脂溶性小分子以自由擴(kuò)散的方式進(jìn)入細(xì)胞。

（2）實(shí)驗(yàn)的自變量是有無(wú)調(diào)控序列；根據(jù)單一變量原則，對(duì)照組的目的是為了排除無(wú)光變量的影響，除了沒(méi)有調(diào)控序列，其他處理和實(shí)驗(yàn)組相同，所以對(duì)照組和實(shí)驗(yàn)組豬肝細(xì)胞均導(dǎo)入含CYP3A基因啟動(dòng)子及LUC基因的表達(dá)載體，然后向各組豬肝細(xì)胞培養(yǎng)液中加入加入等量T-2毒素，適宜條件下進(jìn)行培養(yǎng)。從圖中信息可知，缺失兩個(gè)調(diào)控序列和對(duì)照組活性一致，缺失一個(gè)比對(duì)照組活性略強(qiáng)，兩個(gè)都存在活性最高，說(shuō)明這兩個(gè)調(diào)控序列是CYP3A基因響應(yīng)T-2毒素的核心元件。故缺失兩個(gè)調(diào)控序列或其中任一個(gè)，T-2毒素都不能誘導(dǎo)啟動(dòng)子活性明顯增強(qiáng)。

（3）①實(shí)驗(yàn)的目的是要驗(yàn)證NF-Y能與B1結(jié)合；根據(jù)第2組和第3組結(jié)果，依據(jù)B1序列制備的NF-Y結(jié)合位點(diǎn)野生型探針能與NF-Y結(jié)合，根據(jù)第4組結(jié)果，突變型探針不能與NF-Y結(jié)合。第5組加入了NF-Y抗體，一定能與NF-Y結(jié)合。故可以解釋為：結(jié)合位點(diǎn)突變的探針不能結(jié)合核蛋白中的NF-Y，也不會(huì)競(jìng)爭(zhēng)NF-Y與標(biāo)記探針的結(jié)合，所以第4組與第2組同樣位置出現(xiàn)阻滯帶。第5組，NF-Y的抗體結(jié)合NF-Y，因此第5組中出現(xiàn)標(biāo)記探針；NF-Y和NF-Y抗體的結(jié)合物，結(jié)合物分子量大，阻滯帶的位置更靠后。

②假設(shè)NF-Y和Sp1通過(guò)互作共同發(fā)揮調(diào)控功能，它們之間的距離是發(fā)揮作用的最佳距離，故增大或縮小B1和B2兩者之間的距離都會(huì)降低CYP3A基因的啟動(dòng)子的活性。【解析】(1)次級(jí)自由擴(kuò)散。

(2)等量的T-2毒素缺失兩個(gè)調(diào)控序列或其中任一個(gè)；T-2毒素都不能誘導(dǎo)啟動(dòng)子活性增強(qiáng)。

(3)結(jié)合位點(diǎn)突變的探針不能結(jié)合核蛋白中的NF-Y，也不會(huì)競(jìng)爭(zhēng)NF-Y與標(biāo)記探針的結(jié)合，所以第4組與第2組同樣位置出現(xiàn)阻滯帶。NF-Y的抗體結(jié)合NF-Y，因此第5組中出現(xiàn)標(biāo)記探針、NF-Y和NF-Y抗體的結(jié)合物，結(jié)合物分子量大，阻滯帶的位置更靠后。NF-Y和Sp1通過(guò)互作共同發(fā)揮調(diào)控功能，它們之間的距離是發(fā)揮作用的最佳距離。24、略

【分析】【分析】

在動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中，為防止培養(yǎng)過(guò)程中雜菌污染，通常要在細(xì)胞培養(yǎng)液中添加一定量的抗生素。培養(yǎng)過(guò)程中通常采用培養(yǎng)皿或松蓋培養(yǎng)瓶，將其置于含95%空氣加5%CO2的混合氣體的培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。

【詳解】

（1）培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞時(shí)，為防止培養(yǎng)過(guò)程中雜菌污染，通常要在細(xì)胞培養(yǎng)液中添加一定量的抗生素。培養(yǎng)肺癌細(xì)胞需要提供適宜溫度和維持培養(yǎng)液的pH，因此要放在37℃的含95%空氣加5%CO2的混合氣體的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

根據(jù)題干“新冠刺突蛋白S1可緩解肺癌發(fā)展”及圖可知；刺突蛋白能促進(jìn)細(xì)胞凋亡，且在一定范圍內(nèi)，隨著所用的刺突蛋白的濃度增大，其促進(jìn)凋亡的效果越明顯。

（2）NNK是尼古丁的衍生物亞硝胺酮；是致癌物，用其長(zhǎng)時(shí)間處理小鼠目的是誘導(dǎo)小鼠肺部腫瘤產(chǎn)生，即侯建肺癌小鼠模型。

（3）由題干“刺突蛋白S1在體內(nèi)抑癌的效果比體外的效果好得多”可知；在體內(nèi)環(huán)境下，刺突蛋白S1激活了免疫系統(tǒng)的免疫監(jiān)視功能，進(jìn)而識(shí)別和殺傷以及清除體內(nèi)的突變細(xì)胞,防止腫瘤的發(fā)生。為探究肺部腫瘤比例的減少是不是因?yàn)樾鹿诓《敬掏坏鞍譙1的作用，還應(yīng)該設(shè)計(jì)一組對(duì)照：NNK+等量其他外源蛋白，若實(shí)驗(yàn)組肺部腫瘤比例的減少量大于對(duì)照組，說(shuō)明肺部腫瘤比例的減少確實(shí)是因?yàn)樾鹿诓《敬掏坏鞍譙1的作用。

（4）由題干“媒體報(bào)道稱感染新冠病毒可以治療肺癌”可知，其自變量為是否感染新冠病毒，而論文中自變量為刺突蛋白S1處理的濃度，二者不是同種變量，刺突蛋白并不能模擬新冠病毒的感染，無(wú)法做出上述推測(cè)，因此結(jié)論并不可靠?！窘馕觥?1)抗生素含95%空氣加5%CO2的混合氣體的培養(yǎng)箱刺突蛋白能促進(jìn)細(xì)胞凋亡；且在一定范圍內(nèi)，濃度大的促進(jìn)凋亡效果好。（答出自變量和因變量的定性和定量關(guān)系即可）

(2)建立肺癌小鼠模型（誘導(dǎo)肺部腫瘤產(chǎn)生）

(3)免疫監(jiān)視等量其他外源蛋白。

(4)不合理（1分）自變量不同，媒體的報(bào)導(dǎo)中的自變量是新冠病毒的感染，論文中的是刺突蛋白S1，刺突蛋白并不能模擬新冠病毒的感染/對(duì)照設(shè)置不合理，結(jié)論不可靠（與不合理偶聯(lián)，從自變量或?qū)嶒?yàn)設(shè)計(jì)角度合理即可）六、綜合題(共3題，共12分)25、略

【分析】【分析】

（1）萃取的效率主要取決于萃取劑的性質(zhì)和使用量；同時(shí)還受到原料顆粒的大小；緊密程度、含水量、草取的溫度和時(shí)間等條件的影響。一般來(lái)說(shuō)，原料顆粒小，萃取溫度高，時(shí)間長(zhǎng)，需要提取的物質(zhì)就能夠充分溶解，萃取效果就好。

（2）區(qū)分篩選平板上的醋酸菌和乳酸菌；可根據(jù)二者代謝類型的不同，在無(wú)氧條件下進(jìn)行培養(yǎng)，觀察菌落生長(zhǎng)情況。

【詳解】

（1）天然食用色素花色苷可用萃取法提??；萃取劑與水應(yīng)不混溶，萃取前將原料干燥，有利于萃取劑溶解花色苷，提高溶解率；粉碎的目的是使原料與萃取劑充分接觸；萃取效率主要取決于萃取劑的性質(zhì)和使用量。萃取過(guò)程需要在適宜溫度下進(jìn)行，溫度過(guò)高會(huì)導(dǎo)致花色苷分解。萃取時(shí)輔以纖維素酶；果膠酶處理，可破壞細(xì)胞壁，有利于提高花色苷的提取率。

（2）為了解皮渣中微生物的數(shù)量，取10g皮渣加入90mL無(wú)菌水，混勻、靜置后取上清液，用稀釋涂布平板法將0.1mL稀釋液接種于培養(yǎng)基上。104倍稀釋對(duì)應(yīng)的三個(gè)平板中菌落數(shù)量分別為78、91和95，則三個(gè)平板中平均菌落數(shù)為（78+91+95）÷3=88，每克皮渣中微生物數(shù)量為88÷0.1×104=8.8×106個(gè)。

（3）醋酸菌屬于細(xì)菌；制備醋酸菌初篩平板時(shí)，需要將培養(yǎng)基的pH調(diào)至中性或弱堿性，滅菌后在未凝固的培養(yǎng)基中加入無(wú)菌碳酸鈣粉末；充分混勻后倒平板，加入碳酸鈣可使培養(yǎng)基不透明，醋酸菌產(chǎn)生的醋酸可分解碳酸鈣，產(chǎn)生透明圈，根據(jù)這一特點(diǎn)可篩選出醋酸菌，在缺少糖源的液體培養(yǎng)基中醋酸菌以乙醇為碳源，先把乙醇氧化為乙醛，再把乙醛氧化為乙酸。

（4）醋酸菌為好氧菌；與兼性厭氧型的乳酸菌菌落形態(tài)相似，且二者產(chǎn)生的代謝產(chǎn)物均可使碳酸鈣分解，區(qū)分篩選平板上的醋酸菌和乳酸菌，可將平板置于無(wú)氧環(huán)境下繼續(xù)培養(yǎng)，觀察菌落形態(tài)和透明圈大小。若菌落繼續(xù)生長(zhǎng)，且透明圈增大，則為兼性厭氧型的乳酸菌菌落，若菌落不能繼續(xù)生長(zhǎng)，透明圈不再擴(kuò)大，則為醋酸菌菌落。

【點(diǎn)睛】

本題考查植物成分的提取和微生物的分離，考查考生對(duì)植物成分提取方法和原理、微生物培養(yǎng)、分離、計(jì)數(shù)方法的理解和識(shí)記。解答本題，需充分利用題干信息，如醋酸菌、乳酸菌代謝類型的區(qū)別等，才能準(zhǔn)確作答?！窘馕觥竣?利于萃取劑溶解花色苷、使原料與萃取劑充分接觸②.性質(zhì)和使用量③.分解④.纖維素酶、果膠酶可破壞細(xì)胞壁，有利于提高花色苷的提取率⑤.8.8×106⑥.中性或偏堿⑦.使培養(yǎng)基不透明，從而使醋酸菌菌落周圍出現(xiàn)透明圈⑧.碳源⑨.實(shí)驗(yàn)步驟：將平板置于無(wú)氧環(huán)境下繼續(xù)培養(yǎng)，觀察菌落形態(tài)和透明圈大小

預(yù)期結(jié)果：若菌落繼續(xù)生長(zhǎng)，且透明圈增大，則為兼性厭氧型的乳酸菌菌落，若菌落不能繼續(xù)生長(zhǎng)，透明圈不再擴(kuò)大，則為醋酸菌菌落26、略

【分析】【分析】

1；分析題意；大腸桿菌DNA中存在可被遺傳毒性物質(zhì)激活的毒性響應(yīng)啟動(dòng)子序列。但是將毒性響應(yīng)啟動(dòng)子插入驅(qū)動(dòng)噬菌體裂解基因前時(shí)，以此構(gòu)建基因表達(dá)載體，并導(dǎo)入大腸桿菌中，獲得基因工程改造的大腸桿菌。當(dāng)改造后的大腸桿菌遇到遺傳毒性物