多色免疫組化在病理診斷中的應(yīng)用

最新：多色免疫組化在病理診斷中的應(yīng)用

多色免疫組化能在一個(gè)切片上觀察多個(gè)抗原的染色結(jié)果，不同抗原之

間的關(guān)系對(duì)比直觀，有利于節(jié)省組織與腫瘤微浸潤(rùn)的觀察。目前，多

色免疫組化技術(shù)已經(jīng)應(yīng)用到前列腺，乳腺，消化道等多種疾病的病理

診斷中。

多色免疫組化前列腺疾病中的應(yīng)用

前列腺癌與癌前病變的鑒別診斷在泌尿及男性生殖系統(tǒng)腫瘤病理診斷

免疫組化標(biāo)志物選擇專家共識(shí)中提到推薦應(yīng)用由AMACR、高分子量

角蛋白和p63聯(lián)合陶成的雞尾酒套餐，其診斷價(jià)值要優(yōu)于這幾個(gè)標(biāo)記

的單獨(dú)應(yīng)用，并且能最大限度地在穿刺標(biāo)本中節(jié)省組織⑴。

前列腺良性增生

前列腺上皮內(nèi)瘤變

前列腺癌

p63/CK-HW（34PE12）/AMACR雞尾酒抗體染色（p63/CK-HW棕

色，AMACR紅色）（圖片來(lái)源于賽諾特生物）

多色免疫組化在膀胱腫瘤中的應(yīng)用

尿路上皮病變的鑒別

P53/CK20免疫組化雙重染色作為檢測(cè)膀胱活檢的有效工具，可客觀

地區(qū)分尿路上皮癌和尿路上皮發(fā)育不良改變與反應(yīng)性非腫瘤性異型性

病變0。P53和CK20雙重染色還可以用于尿液細(xì)胞學(xué)檢測(cè)，p53和

CK20的雙重免疫細(xì)胞化學(xué)染色易于進(jìn)行和評(píng)估，可提高細(xì)胞學(xué)敏感

性。有助于惡性腫瘤的診斷，并可作為臨床隨訪中膀胱鏡檢查的患者

疾病鑒別的工具⑶。

A-B:反應(yīng)性尿路上皮異型性;C-D:意義不明的異型性;E-F:尿路上

皮增生；G-H:尿路上皮原位癌P53/CK20免疫組化雙染（圖片來(lái)源

于文獻(xiàn)0）

多色免疫組化在乳腺疾病中的應(yīng)用

判斷乳腺導(dǎo)管原位癌有無(wú)合并浸潤(rùn)在免疫組織化學(xué)在乳腺病理中的應(yīng)

用共識(shí)（2022版）中提出微浸潤(rùn)癌和炎癥灶內(nèi)的散在癌細(xì)胞或細(xì)胞簇

不易識(shí)別，建議采用肌上皮和腔面上皮或廣譜細(xì)胞角蛋白（CKpan）

的雙重或多重染色1在與原位癌的鑒別中效果更好⑷。例如三抗體雞

尾;酉雙重IHC（calponin/p63+E?cadherin）與IHC單染、雙抗體

雙重IHC相比，可以更清晰、更準(zhǔn)確地標(biāo)注出乳腺浸潤(rùn)性癌成分，

顯著提高乳腺微浸潤(rùn)癌的確診率⑸。

圖1正常乳腺組織A為HE低倍放大；B示雞尾酒calponin/p63+E-

cadherin雙重免疫組織化學(xué)染色中倍放大圖2乳腺導(dǎo)管原位癌伴多

灶浸潤(rùn)（箭頭示浸潤(rùn)灶）圖A為HE低倍放大；圖B為雞尾酒

calponin/p63+E-cadherin雙重免疫組織化學(xué)染色中倍放大，左上

角圖為浸潤(rùn)灶、微浸潤(rùn)灶的放大高倍放大圖3乳腺導(dǎo)管原位癌伴微浸

潤(rùn)（箭頭示微浸潤(rùn)灶）圖A為HE高倍放大;圖B為雞尾酒

calponin/p63+E-cadherin雙重免疫組織化學(xué)染色高倍放大圖4

乳腺高級(jí)別導(dǎo)管原位癌伴微浸潤(rùn)圖A為HE中倍放大；圖B為雞尾

酒calponin/p63+E-cadherin雙重免疫組織化學(xué)染色高倍放大（圖

片來(lái)源于文獻(xiàn)5）

乳頭狀病變的鑒別乳腺的乳頭狀病變雖然相對(duì)比較罕見(jiàn)，僅占乳腺疾

病的1%-2%,但是在病理學(xué)上區(qū)分良惡性卻不容易。

CK5/p63/CK8/18抗體組合能較好地對(duì)穿刺活檢的乳頭狀病變進(jìn)行

分層，準(zhǔn)確率達(dá)95%⑹。

乳頭狀病變（CK5/p63/CK8/18雞尾酒抗體染色）

不典型乳頭狀癌（CK5/p63/CK8/18雞尾酒抗體染色）

乳頭狀癌（CK5/p63/CK8/18雞尾酒抗體染色）（圖片來(lái)源于文獻(xiàn)⑹）

導(dǎo)管原位癌與小葉癌的鑒別利用E-cadherin和P120catenin組成的

雞尾酒抗體可提高導(dǎo)管原位癌與小葉癌鑒別診斷的準(zhǔn)確性和可信度，

該抗體組合可應(yīng)用于石蠟包埋組織的日常診斷，尤其適用于小活檢樣

本⑺。

導(dǎo)管原位癌

小葉原位癌

E-cadherin/P120catenin免疫組化雙染（P120catenin紅色，

E-cadherin棕色）。圖片來(lái)源于文獻(xiàn)[7]

多色免疫組化在肺疾病中的應(yīng)用

肺鱗癌與腺癌的鑒別診斷非小細(xì)胞肺癌亞型在細(xì)胞團(tuán)塊和穿刺小標(biāo)本

中的診斷非常困難,尤其是分化不好的腫瘤。常用的肺腺癌和肺鱗癌

鑒別的標(biāo)記物有研究表明，可選

NapsinArTTF-1p40,CK5/6O

擇以上標(biāo)記物組合?進(jìn)行免疫組化雙染,如N叩sinA/p40,

TTF1/NapsinA,p40/CK5/6等抗體組合，其鑒別診斷的效果更好

⑹叫尤其是對(duì)于穿刺標(biāo)本和細(xì)胞標(biāo)本，可節(jié)約標(biāo)本，保留更多組冢用

于后續(xù)的分子檢測(cè)。

月市鱗癌CK5/6+p40

月市鱗癌CK5/6+TTF-1

肺鱗癌NapsinA+p40

（圖片來(lái)源于賽諾特生物）

多色免疫組化在消化道疾病中的應(yīng)用

結(jié)直腸癌脈管侵犯的鑒別雞尾酒抗體D2-40/CD34-CK雙重免疫組

化染色能更好的區(qū)分裂隙和脈管，有利于識(shí)別脈管內(nèi)癌栓，也能勾勒

出一些較小的癌栓,基于該方法的半定量分析能更好的反映脈管侵犯

與患者預(yù)后的關(guān)系。研究結(jié)果顯示該方法可作為淋巴結(jié)檢出數(shù)量不足

結(jié)直腸癌標(biāo)本的補(bǔ)充檢測(cè)指標(biāo)

[10]o

圖1HE染色下的脈管侵犯（紅色箭頭）；圖2應(yīng)用雞尾酒抗體

D2-40/CD34-CK雙重免疫組化染色驗(yàn)證圖1所示的脈管侵犯（紅

色箭頭）；

染色下人工裂隙與腫瘤脈管侵犯不易區(qū)分（紅色箭頭）；圖4雞尾酒抗

體D2-40/CD34-CK雙重免疫組化染色證實(shí)圖3為人工裂隙（紅

色箭頭）（圖片來(lái)源于文獻(xiàn)［10］）胃癌神經(jīng)侵氾的鑒別S-100用來(lái)標(biāo)記

神經(jīng)細(xì)胞，AE1/AE3用來(lái)標(biāo)記胃癌組織的上皮細(xì)胞，免疫組化雙染

S-100（藍(lán)黑色）+AE1/AE3（紅色）抗體與單染相比，能提高胃癌組

織中的周圍神經(jīng)浸潤(rùn)的診斷的準(zhǔn)確性，尤其在彌散型胃癌亞型中口I

圖3A:HE染色顯示彌漫性胃癌中有神經(jīng)。分散的癌細(xì)胞難以識(shí)別。

圖3B:S100染色標(biāo)記神經(jīng)（棕色）。由于癌細(xì)胞不明顯，神經(jīng)周圍浸

潤(rùn)情況尚不清楚。圖3C:雙重染色增強(qiáng)神經(jīng)（深藍(lán)色）和單散的癌細(xì)胞

（紅色）的可見(jiàn)性。神經(jīng)周圍侵犯明顯，可輕易快速判斷。（圖片來(lái)源

于文獻(xiàn)［11］）

結(jié)直腸癌腫瘤原發(fā)灶的鑒別轉(zhuǎn)移性結(jié)直腸癌的活檢標(biāo)本有時(shí)組織非常

有限，有效的使用免疫組化標(biāo)記確定腫瘤來(lái)源，避免組織浪費(fèi)非常重

要。研究表明，采用SATB2/CK20或者SATB2/Villin雙重染色比單

一免疫組化標(biāo)記具有更高的特異性和敏感性，可以有限節(jié)省組織,對(duì)

于活檢樣本的檢測(cè)具有極大幫助112】。

ColonLungP^ncrM*Stomach

SATB2^/CK2G-SATB2-/CK2O-SATB2-/Villin-SATB2-/CK20^

不同癌中CDX2/SATB2和CK20/Villin的染色結(jié)果

多色免疫組化在淋巴瘤中的應(yīng)用

T/B細(xì)胞的鑒別

淋巴瘤的種類繁多?在HE和單純性標(biāo)記免疫組化的基礎(chǔ)上診斷淋巴

瘤有時(shí)比較困難。利用CD3/CD20免疫組化雙染，可在同一張淋巴組

織切片上明確的標(biāo)記出T淋巴細(xì)胞和B淋巴細(xì)胞。有利于對(duì)腫瘤組

織學(xué)結(jié)構(gòu)的判讀，從而更加容易做出明確的診斷口叫

參考文獻(xiàn)：

川泌尿及男性生殖系統(tǒng)腫瘤病理診斷免疫組化標(biāo)志物選擇專家共識(shí)

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