DB2201T 64-2024梅花鹿布魯氏菌病膠體金免疫層析檢測方法

ICS65.020.30CCSB452201法SpecificationforthedetectionofcolloidalgoldteststripsforsikadeerbrucellIDB2201/T64—2024本文件按照GB/T1.1—2020《標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則第1部分：標(biāo)準(zhǔn)化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》的規(guī)定起草。請注意本文件的某些內(nèi)容可能涉及專利。本文件的發(fā)布機構(gòu)不承擔(dān)識別專利的責(zé)任。本文件由長春市乾藝生物科技研究院提出。本文件由長春市畜牧業(yè)管理局歸口。本文件起草單位：長春市乾藝生物科技研究院、吉林省畜牧獸醫(yī)科學(xué)研究院、吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)。本文件主要起草人：田來明、權(quán)心嬌、田賀實、赫雪、田怡豪、王凱立、王向輝、尚麗元、高啟臣、張鴻、趙春梅。2DB2201/T64—2024梅花鹿布魯氏菌病膠體金免疫層析檢測方法本文件給出了梅花鹿布魯氏菌病膠體金免疫層析的試驗原理和檢測方法，規(guī)定了儀器設(shè)備、試劑與材料、樣品處理、樣品檢測及結(jié)果判定。本文件適用于梅花鹿布魯氏菌病抗體的初篩。2規(guī)范性引用文件本文件沒有規(guī)范性引用文件。3術(shù)語和定義本文件沒有需要界定的術(shù)語和定義。4原理通過篩選特異性抗原進行對比，將膠體金作為示蹤標(biāo)志物，將抗原或抗體固定在硝酸纖維素膜上，然后添加待檢樣品和緩沖液，使待檢物質(zhì)在膜上遷移并發(fā)生免疫反應(yīng)，從而實現(xiàn)定性檢測。5儀器設(shè)備離心機，轉(zhuǎn)速≥3000rpm。6試劑與材料6.1鹿布魯氏菌病抗體膠體金免疫層析試紙條。6.2采血管。6.3EP管。6.4PBS（0.01MpH7.2）。7樣品處理7.1采集全血于采血管中，管上標(biāo)記好鹿只編號，將采血管放入裝有冰袋的保溫箱中保存。填寫采樣單，注明樣品編號、鹿場名稱、采集地點、采集時間等信息。7.2血樣3000rpm離心5min獲得血清，置于EP管中待檢；暫不檢測的血清樣品于-80℃保存。7.3樣品需要運輸時，應(yīng)做好包裝。8樣品檢測3DB2201/T64—20248.1室溫下，樣品用PBS液1倍～2倍稀釋。8.2試紙條水平放置，用一次性滴管向加樣孔內(nèi)垂直滴入2滴～4滴待測樣品。8.3加樣后計時，8min～10min讀取檢測結(jié)果。9結(jié)果判定9.1檢測成立條件在試紙條質(zhì)控線“C”的位置出現(xiàn)一條反應(yīng)指示條帶，判定檢測結(jié)果成立，否則結(jié)果不成立。9.2結(jié)果判定在檢測成立條件下，進行判定如下：a）出現(xiàn)兩條反應(yīng)指示條帶，一條位于質(zhì)控線“C”的位置，另一條位于檢測線“