實(shí)驗(yàn)一生物組織中還原糖脂肪蛋白質(zhì)的鑒定培訓(xùn)資料_第1頁
實(shí)驗(yàn)一生物組織中還原糖脂肪蛋白質(zhì)的鑒定培訓(xùn)資料_第2頁
實(shí)驗(yàn)一生物組織中還原糖脂肪蛋白質(zhì)的鑒定培訓(xùn)資料_第3頁
實(shí)驗(yàn)一生物組織中還原糖脂肪蛋白質(zhì)的鑒定培訓(xùn)資料_第4頁
實(shí)驗(yàn)一生物組織中還原糖脂肪蛋白質(zhì)的鑒定培訓(xùn)資料_第5頁
已閱讀5頁,還剩15頁未讀, 繼續(xù)免費(fèi)閱讀

下載本文檔

版權(quán)說明:本文檔由用戶提供并上傳,收益歸屬內(nèi)容提供方,若內(nèi)容存在侵權(quán),請(qǐng)進(jìn)行舉報(bào)或認(rèn)領(lǐng)

文檔簡(jiǎn)介

實(shí)驗(yàn)一生物組織中還原糖、脂肪、蛋白質(zhì)的鑒定教學(xué)內(nèi)容:知識(shí)點(diǎn)可溶性還原糖脂肪蛋白質(zhì)實(shí)驗(yàn)原理

幻燈片4實(shí)驗(yàn)步驟

幻燈片7

幻燈片8

幻燈片9

成功關(guān)鍵注意事項(xiàng)

幻燈片10

幻燈片11

幻燈片12

幻燈片13討論練習(xí)

幻燈片14幻燈片16作業(yè)

幻燈片19一、實(shí)驗(yàn)原理1.可溶性還原糖生物組織中普遍存在的可溶性糖類較多,有葡萄糖、果糖、麥芽糖和蔗糖。前三種糖的分子內(nèi)都含有游離的具還原性的半縮醛羥基,因此叫做還原糖;蔗糖分子內(nèi)沒有,為非還原糖。實(shí)驗(yàn)中所用的斐林試劑,只能鑒定生物組織中可溶性還原糖,而不能鑒定可溶性非還原糖及不能溶解的糖。斐林試劑為0.1g/mL的NaOH和0.05g/mL的CuSO4配制而成的淡藍(lán)色Cu(OH)2沉淀的懸濁液,葡萄糖溶液在加入斐林試劑后,在加熱條件下Cu(OH)2被還原為磚紅色的Cu2O沉淀,而葡萄糖氧化成葡萄糖酸。其反應(yīng)式為:-CHO+Cu(OH)2-COOH+Cu2O↓磚紅色2.脂肪的鑒定蘇丹Ⅲ(蘇丹Ⅳ)為一種脂肪染色劑(易溶解于酒精,不溶解于水)。蘇丹Ⅲ染液遇脂肪的顏色反應(yīng)為橘黃色,蘇丹Ⅳ染液遇脂肪的顏色反應(yīng)為紅色。其反應(yīng)式為:脂肪蘇丹Ⅲ(蘇丹Ⅳ)

橘黃色(紅色)選材:含糖量較高的白色或近于白色,蘋果、梨最好

。二、實(shí)驗(yàn)步驟與現(xiàn)象1.可溶性還原糖

制備組織樣液:制漿:去皮、切塊、研磨過濾:(用單層紗布)取液:(2mL)顯色反應(yīng)2mL組剛配制的斐現(xiàn)象:呈現(xiàn)藍(lán)色開水加變成磚紅色2.脂肪的鑒定

取材:花生種子(浸泡3-4h),去皮,將子葉削成薄片制片:選取最薄的薄片移至載玻片中央在薄片上滴加蘇丹Ⅲ染液2-3滴,染色2-3min滴加體積分?jǐn)?shù)為50%的酒精溶液1—2滴,洗去浮色吸去余液,滴1-2滴蒸餾水,蓋上蓋玻片觀察:先在低倍鏡下找到已著色的薄片,后用高倍鏡觀察結(jié)果:有被染成橘黃色的脂肪微粒3.蛋白質(zhì)的鑒定選材與制備組織樣液:黃豆組織樣液(或雞蛋白稀釋液)[黃豆浸泡→去皮→切片→研磨→過濾→濾液]

顯色反應(yīng)2mL組雙縮脲試劑現(xiàn)象:無色雙縮脲試劑紫色或紫紅色三、實(shí)驗(yàn)成功的關(guān)鍵與注意事項(xiàng):1.實(shí)驗(yàn)成功的關(guān)鍵在于實(shí)驗(yàn)材料的選擇:⑴.在做可溶性還原糖的鑒定實(shí)驗(yàn)中,最理想的實(shí)驗(yàn)材料是含糖量較高的生物組織(或器官),而且組織的顏色較淺,最好是白色或近于白色的植物組織,這樣可以避免材料自身顏色對(duì)實(shí)驗(yàn)變化顏色的掩蓋。經(jīng)實(shí)驗(yàn)比較,顏色反應(yīng)的明顯程度依次為蘋果、梨、白色甘藍(lán)葉、白蘿卜。⑵.在做脂肪的鑒定實(shí)驗(yàn)中,實(shí)驗(yàn)材料最好選用富含脂肪的種子,且徒手切片要成功,要求實(shí)驗(yàn)技能較高,不妨改成刮取花生子葉泥制作臨時(shí)裝片,易做,效果又好。⑶.在做糖和蛋白質(zhì)的實(shí)驗(yàn)時(shí),最好選用富含蛋白質(zhì)的生物組織,植物材料常用的是大豆,動(dòng)物材料常用的是雞蛋,鑒定之前需要留出一部分樣液,以便與鑒定后的樣液的顏色做比較,這樣可增強(qiáng)說服力。

(1)斐林試劑很不穩(wěn)定,故應(yīng)將組成斐林試劑的甲液(0.1g/mL的NaOH溶液)和乙液(0.05g/mL的CuSO4溶液)分別配制、儲(chǔ)存,使用時(shí),再臨時(shí)配制,將4~5滴乙液滴入2mL甲液中,配完后立即使用。切勿將甲液和乙液分別加入組織樣液中。

(2)鑒定可溶性還原糖,加熱試管時(shí),應(yīng)該用試管夾夾住試管上部,放入盛開水的大燒杯加熱;注意試管底部不接觸燒杯底部,同時(shí)試管口不要朝向?qū)嶒?yàn)者,以免試管內(nèi)溶液沸騰時(shí)沖出試管,造成燙傷。如果試管內(nèi)溶液過于沸騰,可以提起試管夾,使試管與沸水接觸面減少,以免溶液溢出。

A.可溶性還原糖

2.注意事項(xiàng):

(3)在鑒定脂肪的實(shí)驗(yàn)中,若用花生種子作實(shí)驗(yàn)材料,必須提前浸泡3~4小時(shí),浸泡時(shí)間短了,不容易切片,浸泡時(shí)間過長(zhǎng),則組織太軟,切下的薄片不易成形,切片要盡可能的薄。

(4)染色后一定要用50%的酒精溶液洗去浮色,染色和洗浮色時(shí)間不宜過長(zhǎng)(否則酒精將脂肪溶解影響實(shí)驗(yàn)效果),觀察時(shí)找最薄處最好只有1—2層細(xì)胞。B.脂肪的鑒定

(5)在蛋白質(zhì)的鑒定實(shí)驗(yàn)中,若用蛋白質(zhì)作實(shí)驗(yàn)材料,必須稀釋,如果稀釋不夠,與雙縮脲試劑發(fā)生反應(yīng)后會(huì)粘固在試管內(nèi)壁上,使反應(yīng)不徹底,且試管不易洗刷干凈。

(6)雙縮脲試劑的使用,應(yīng)先雙縮脲加試劑A(0.1g/mL的NaOH溶液),造成堿性的反應(yīng)環(huán)境,再加試劑B(0.01g/mL的CuSO4溶液)。C.蛋白質(zhì)的鑒定例1將小麥種子分別置于20℃和30℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)4天,依次取等量的萌發(fā)種子分別制成提取液Ⅰ和提取液Ⅱ。取3支試管甲、乙、丙,分別加入等量的淀粉液,然后按下圖加入等量的提取液和蒸餾水,45℃水浴保溫5分鐘,立即在3支試管中加入等量斐林試劑并煮沸2分鐘,搖勻觀察試管中顏色。結(jié)果是 (

)A.甲呈藍(lán)色,乙呈磚紅色,丙呈無色B.甲呈無色,乙呈磚紅色,丙呈藍(lán)色C.甲、乙皆呈藍(lán)色,丙呈磚紅色D.甲呈淺磚紅色,乙呈磚紅色,丙呈藍(lán)色各種可供實(shí)驗(yàn)的材料梨黃桃胡蘿卜黃豆花生種子小麥種子①其中適合于鑒定糖的是

,理由是梨的組織細(xì)胞

,你打算用什么試劑鑒定?

。②小麥種子不如花生種子更適合用來鑒定脂肪,這是因?yàn)?/p>

,你打算用什么試劑鑒定?

.

③適合于鑒定蛋白質(zhì)的是

,理由是

,鑒定所用的試劑是

。

3.討論:做生物組織中可溶性還原糖、脂肪、蛋白質(zhì)的鑒定實(shí)驗(yàn)時(shí),需要根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要選擇不同的實(shí)驗(yàn)材料。清根據(jù)下表所列各種材料回答問題:梨顏色為白色,并且糖含量較高

斐林試劑或班氏試劑脂肪含量不如花生高,也不容易做切片

用蘇丹Ⅲ或蘇丹Ⅳ試劑黃豆和花生

蛋白質(zhì)含量高

雙縮脲試劑

1、某些單子葉植物,如韭菜、鳶尾的葉子內(nèi)含有大量的可溶性還原糖,但這些單子葉植物的葉子不宜作實(shí)驗(yàn)材料,原因是:

這些葉子的顏色較深,對(duì)還原性糖與斐林試劑的顏色反應(yīng)起遮蔽作用2、下列哪組試劑在使用過程中,必須加熱:

A.斐林試劑鑒定可溶性還原糖的過程中

B.蘇丹Ⅲ染液在鑒定動(dòng)物組織中的脂肪時(shí)

C.雙縮脲試劑鑒定蛋白質(zhì)時(shí)

D.碘化鉀溶液鑒定淀粉時(shí)()A課堂練習(xí):3、某學(xué)生在鑒定脂肪的實(shí)驗(yàn)中,在顯微鏡下觀察花生子葉切片,當(dāng)轉(zhuǎn)動(dòng)細(xì)調(diào)節(jié)器時(shí),有一部分細(xì)胞看的清楚,另一部分較模糊,這是由于

A.反光鏡未調(diào)節(jié)好

B.標(biāo)本切的厚薄不均

C.細(xì)調(diào)節(jié)器未調(diào)節(jié)好D.顯微鏡物鏡損壞B4、蘇丹Ⅲ溶液的配制的方法是:稱取0.1g蘇丹Ⅲ干粉,溶于100mL酒精的體積分?jǐn)?shù)為95%溶液中,待全部溶解后再使用,為什么用酒精而不用蒸餾水?蘇丹Ⅲ染液易溶解于酒精中,不易溶解于水。5、鑒定蛋白質(zhì)樣品時(shí)加雙縮脲試劑的正確做法是

A.先加A液,混合后再加B液搖勻觀察()

B.先加B液,混合后再加A液搖勻觀察

C.A、B混合后加入,搖勻觀察

D.A、B液同時(shí)加入樣液,搖勻后觀察

A6、在生物組織中可溶性還原糖、脂肪、蛋白質(zhì)的鑒定實(shí)驗(yàn)中,對(duì)實(shí)驗(yàn)材料的選擇中,錯(cuò)誤的是()

A、甘蔗莖的薄壁組織、甜菜的塊根等,都含有較多的糖且近于白色,因此可用于進(jìn)行可溶性還原糖的鑒定

B、花生種子含脂肪多且子葉肥厚,適用于脂肪鑒定

C、大豆種子蛋白質(zhì)含量高,可用于蛋白質(zhì)的鑒定

D、雞蛋清含蛋白質(zhì)多,是蛋白質(zhì)鑒定的理想材料A五、作業(yè):

1.將可溶性糖、脂肪、蛋白質(zhì)鑒定原理及結(jié)淪填寫在《實(shí)驗(yàn)報(bào)告冊(cè)》上。

2.斐林試劑主要用來鑒定可溶性還原糖,其主要成分為NaOH和CuSO4的混合液,用你已有的化學(xué)知識(shí)判斷,這兩種物質(zhì)混合以后能發(fā)生了什么化學(xué)反應(yīng)?

,請(qǐng)解釋為什么斐林試劑要現(xiàn)配現(xiàn)用,不能放置太久:

。

溫馨提示

  • 1. 本站所有資源如無特殊說明,都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請(qǐng)下載最新的WinRAR軟件解壓。
  • 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等,如果需要附件,請(qǐng)聯(lián)系上傳者。文件的所有權(quán)益歸上傳用戶所有。
  • 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙,網(wǎng)頁內(nèi)容里面會(huì)有圖紙預(yù)覽,若沒有圖紙預(yù)覽就沒有圖紙。
  • 4. 未經(jīng)權(quán)益所有人同意不得將文件中的內(nèi)容挪作商業(yè)或盈利用途。
  • 5. 人人文庫網(wǎng)僅提供信息存儲(chǔ)空間,僅對(duì)用戶上傳內(nèi)容的表現(xiàn)方式做保護(hù)處理,對(duì)用戶上傳分享的文檔內(nèi)容本身不做任何修改或編輯,并不能對(duì)任何下載內(nèi)容負(fù)責(zé)。
  • 6. 下載文件中如有侵權(quán)或不適當(dāng)內(nèi)容,請(qǐng)與我們聯(lián)系,我們立即糾正。
  • 7. 本站不保證下載資源的準(zhǔn)確性、安全性和完整性, 同時(shí)也不承擔(dān)用戶因使用這些下載資源對(duì)自己和他人造成任何形式的傷害或損失。

最新文檔

評(píng)論

0/150

提交評(píng)論