2025年北師大新版選擇性必修3生物下冊階段測試試卷

…………○…………內(nèi)…………○…………裝…………○…………內(nèi)…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………※※請※※不※※要※※在※※裝※※訂※※線※※內(nèi)※※答※※題※※…………○…………外…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………第=page22頁，總=sectionpages22頁第=page11頁，總=sectionpages11頁2025年北師大新版選擇性必修3生物下冊階段測試試卷742考試試卷考試范圍：全部知識點；考試時間：120分鐘學(xué)校：______姓名：______班級：______考號：______總分欄題號一二三四五六總分得分評卷人得分一、選擇題(共8題，共16分)1、動物細(xì)胞培養(yǎng)是動物細(xì)胞工程的基礎(chǔ)，如圖所示，a、b；c表示現(xiàn)代工程技術(shù)；①、②、③表示其對應(yīng)的結(jié)果，下列說法正確的是（）

A.若a是核移植技術(shù)，①反映了動物細(xì)胞也具有全能性B.若c是胚胎分割技術(shù)，③中個體的基因型和表現(xiàn)型一定相同C.①②③中作為受體的動物品種是珍稀的或存量少的雌性動物D.若b是體外受精技術(shù)，則②為良種家畜快速大量繁殖提供了可能2、在胚胎移植過程中，很多操作步驟都需要“檢查”，以避免后期人力、物力、財力的浪費，下列相關(guān)說法錯誤的是（）A.體外受精的受精卵移入特定培養(yǎng)液中培養(yǎng)，以檢查受精狀況和受精卵的發(fā)育能力B.胚胎移植前，要對胚胎進(jìn)行檢查以確定其是否發(fā)育到桑椹胚或囊胚階段C.在胚胎分割時，應(yīng)取樣內(nèi)細(xì)胞團細(xì)胞做DNA分析，以檢查胚胎的性別D.胚胎移植入受體母畜的子宮后，還需對受體母畜進(jìn)行是否妊娠檢查3、某些土壤細(xì)菌可將尿素分解成CO2和NH3，供植物吸收和利用。下列關(guān)于土壤中分解尿素的細(xì)菌分離和計數(shù)的相關(guān)敘述，正確的是（）A.分解尿素的細(xì)菌是以尿素的分解產(chǎn)物CO2作為碳源的B.倒平板時應(yīng)將打開的培養(yǎng)皿蓋放到一邊，以免培養(yǎng)基濺到皿蓋上C.培養(yǎng)基中KH2PO4等的作用之一是作為緩沖劑保持pH穩(wěn)定D.若實驗組菌落平均數(shù)為37個/平板，空白對照平板上有3個菌落，則本組菌落數(shù)的平均值為34個/平板4、實時熒光RT-PCR可用于RNA病毒的核酸檢測，其原理是：在PCR復(fù)性過程中探針和引物一起與模板結(jié)合，探針兩側(cè)分別帶有熒光基團和抑制熒光發(fā)出的淬滅基團，新鏈延伸過程中，DNA聚合酶會破壞探針，導(dǎo)致熒光基團與淬滅基團分離而發(fā)出熒光。利用RT-PCR進(jìn)行核酸檢測的相關(guān)過程如圖所示。下列說法錯誤的是（）

A.若檢測結(jié)果有強烈熒光信號發(fā)出，說明被檢測者沒有感染病毒B.做RT-PCR之前，需要先根據(jù)cDNA的核苷酸序列合成引物和探針C.需要將樣本中的RNA反轉(zhuǎn)錄為DNA后再進(jìn)行擴增D.病毒的檢測還可以檢測病毒引發(fā)產(chǎn)生的抗體，其原理是抗原-抗體雜交5、重慶忠州豆腐乳被業(yè)界稱為“腐乳王”，因風(fēng)味獨特而盛銷不衰，遠(yuǎn)銷英國、加拿大、中東、東南亞等國家和地區(qū)，腐乳的制作流程為“讓豆腐塊長出白色菌絲（前期發(fā)酵）→加鹽腌制→加鹵湯裝瓶→密封腌制”。下列相關(guān)說法正確的是（）A.腐乳制作過程中有多種微生物的參與，其中起主要作用的是曲霉B.霉菌分泌的蛋白酶等物質(zhì)，能將蛋白質(zhì)分解為小分子肽和氨基酸C.加鹽和鹵湯腌制的目的僅僅是調(diào)味，并不能抑制瓶內(nèi)雜菌的生長D.豆腐塊相當(dāng)于固體培養(yǎng)基，腌制用的玻璃瓶常用紫外線進(jìn)行滅菌6、據(jù)下圖分析，下列有關(guān)基因工程的說法不正確的是（）

A.為防止目的基因與質(zhì)粒任意結(jié)合而影響基因的表達(dá)，應(yīng)用限制酶Ⅰ、Ⅱ同時切割二者B.DNA聚合酶、DNA連接酶的作用部位都是磷酸二酯鍵C.與啟動子結(jié)合的是RNA聚合酶D.能夠檢測到標(biāo)記基因表達(dá)產(chǎn)物的受體細(xì)胞中，也一定會有目的基因的表達(dá)產(chǎn)物7、二倍體馬鈴薯受核糖核酸酶基因（S-RNase）影響，普遍存在自交不親和的現(xiàn)象——自交不產(chǎn)生種子，我國科研人員通過CRISPR/Cas9基因編輯技術(shù)敲除了馬鈴薯的S-RNase基因，獲得自交親和的二倍體。馬鈴薯圖示該技術(shù)的原理：由一條單鏈向?qū)NA引導(dǎo)內(nèi)切核酸酶Cas9蛋白到一個特定的基因位點進(jìn)行切割。下列敘述錯誤的是（）

A.向?qū)NA和S-RNase基因識別結(jié)合的堿基互補配對方式與目標(biāo)DNA雙鏈中的堿基互補配對方式相同B.Cas9蛋白可催化磷酸二酯鍵水解，剪切特定DNA片段C.可讓馬鈴薯自交看能否產(chǎn)生種子，從個體水平上檢測該基因編輯技術(shù)是否成功D.向?qū)NA的序列越短，該基因編輯技術(shù)在編輯對象時出錯的概率就越高8、新冠病毒包膜表面的S蛋白能識別人體細(xì)胞膜表面的ACE2受體并導(dǎo)致病毒入侵人體細(xì)胞。制備重組亞單位新冠疫苗的線路是：提取新冠病毒RNA→通過RT-PCR（反轉(zhuǎn)錄酶聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)）技術(shù)擴增篩選RBD蛋白（S蛋白中真正與ACE2結(jié)合的關(guān)鍵部分）基因（圖1）→構(gòu)建基因表達(dá)載體（圖2）→導(dǎo)入CHO細(xì)胞并培養(yǎng)→提取并純化RBD蛋白→制成疫苗。圖3為利用電泳技術(shù)對PCR的產(chǎn)物進(jìn)行純度鑒定，1號泳道為標(biāo)準(zhǔn)（Marker），2號泳道為陽性對照組，3號泳道為實驗組。下列相關(guān)敘述錯誤的是（）

A.利用RT-PCR技術(shù)獲取RBD蛋白基因時，需加入逆轉(zhuǎn)錄酶、TaqDNA聚合酶B.利用PCR擴增含有限制酶切點的RBD蛋白基因時，應(yīng)選擇的引物為引物4、引物5C.2號泳道是以（提純的）RBD蛋白基因片段為材料所做的陽性對照組D.為提高目的基因和運載體的正確連接效率，應(yīng)選擇限制酶EcoRI切割評卷人得分二、多選題(共7題，共14分)9、下列關(guān)于人早期胚胎發(fā)育過程中桑椹胚和囊胚的敘述中，正確的是（）A.囊胚與桑椹胚相比，每個細(xì)胞內(nèi)DNA總量增加B.囊胚期出現(xiàn)了細(xì)胞分化，但遺傳物質(zhì)未發(fā)生改變C.囊胚期內(nèi)細(xì)胞團和滋養(yǎng)層細(xì)胞差異不是復(fù)制水平上的差異，而是轉(zhuǎn)錄水平上的差異引起D.桑椹胚的形成在卵巢，囊胚的形成在輸卵管10、基因工程利用某目的基因（圖甲）和Pl噬菌體載體（圖乙）構(gòu)建重組DNA；限制性核酸內(nèi)切酶的酶切位點分別是BglⅡ；EcoRⅠ和Sau3AⅠ。下列分析正確的是（）

A.構(gòu)建重組DNA時，可用BglⅡ和Sau3AⅠ切割目的基因和Pl噬菌體載體B.構(gòu)建重組DNA時，可用EcoRⅠ和Sau3AⅠ切割目的基因和Pl噬菌體載體C.圖乙中的P1噬菌體載體只用EcoRⅠ切割后，含有2個游離的磷酸基團D.用EcoRⅠ切割目的基因和P1噬菌體載體，再用DNA連接酶連接，只能產(chǎn)生一種重組DNA11、下圖是胚胎干細(xì)胞潛能示意圖,相關(guān)敘述正確的是()

A.由細(xì)胞形態(tài)判斷,4種細(xì)胞中細(xì)胞②最可能連續(xù)分裂B.胚胎干細(xì)胞能分化為各種細(xì)胞的實質(zhì)是基因的選擇性表達(dá)C.分化得到的各種細(xì)胞,功能不同的主要差異是特定蛋白不同D.定向誘導(dǎo)胚胎干細(xì)胞分化形成的組織或器官,進(jìn)行自體移植可避免免疫排斥反應(yīng)12、熒光定量PCR技術(shù)可定量檢測樣本中DNA含量，也可用于RNA病毒的核酸檢測。其原理是：先由病毒的RNA逆轉(zhuǎn)錄得到cDNA，然后對得到的DNA進(jìn)行PCR擴增。在PCR反應(yīng)體系中加入引物的同時，加入與某條模板鏈互補的熒光探針，當(dāng)Taq酶催化子鏈延伸至探針處會水解探針，使熒光監(jiān)測系統(tǒng)接受到熒光信號，即每個DNA分子擴增一次，就有一個熒光分子生成（如圖）。Ct值（循環(huán)閾值）的含義為：每個反應(yīng)管內(nèi)的熒光信號到達(dá)設(shè)定閾值時所經(jīng)歷的循環(huán)數(shù)。下列說法錯誤的是（）

A.擴增過程中引物先于探針結(jié)合到模板DNA上B.若最初該反應(yīng)體系中只有逆轉(zhuǎn)錄而來的一個DNA分子，經(jīng)n次循環(huán)后，需要消耗熒光探針2n-1個C.C值越大表示被檢測樣本中病毒數(shù)目越多D.若樣本被污染，RNA酶將病毒RNA降解，檢測結(jié)果可能為陰性13、將單克隆抗體與前體藥物的專一性活化酶藕聯(lián)（簡稱抗體導(dǎo)向酶偶聯(lián)）是特異性治療腫瘤并減少對正常細(xì)胞傷害的最新研究方向。堿性磷酸酶是抗腫瘤藥物多柔比星前體的專一性活化酶，醫(yī)學(xué)研究中利用抗體導(dǎo)向酶偶聯(lián)機理將堿性磷酸酶與單克隆抗體制成“生物導(dǎo)彈”，通過活化多柔比星使其對DNA造成損傷，進(jìn)而抑制以DNA為模板進(jìn)行的生理活動，達(dá)到治療腫瘤的目的。下列說法正確的是（）A.為獲得單克隆抗體應(yīng)首先給小白鼠注射腫瘤細(xì)胞表面抗原，得到能產(chǎn)生特定抗體的B淋巴細(xì)胞B.制備單克隆抗體的過程中至少要經(jīng)過兩次原理和目的均不同的篩選過程C.生物導(dǎo)彈綜合利用了堿性磷酸酶的定向制導(dǎo)作用和單克隆抗體的特異性殺傷能力D.多柔比星只作用于有增殖能力的細(xì)胞14、下列關(guān)于土壤中纖維素分解菌的分離與計數(shù)，敘述正確的是（）A.可從富含腐殖質(zhì)的林下土壤中篩選產(chǎn)纖維素酶菌B.培養(yǎng)基中應(yīng)含大量的葡萄糖或蔗糖提供生長營養(yǎng)C.培養(yǎng)微生物的試劑和器具都要進(jìn)行高壓蒸汽滅菌D.菌種分離和菌落計數(shù)都可以使用固體培養(yǎng)基15、利用基因工程技術(shù)可使大腸桿菌生產(chǎn)人的胰島素原。下列相關(guān)敘述中，錯誤的是（）A.人和大腸桿菌在合成胰島素原時，轉(zhuǎn)錄和翻譯的場所是相同的B.DNA連接酶能催化磷酸與脫氧核糖形成化學(xué)鍵C.通過檢測發(fā)現(xiàn)大腸桿菌中沒有胰島素原產(chǎn)生，則可判斷重組質(zhì)粒未導(dǎo)入受體菌D.人胰島素原基因在大腸桿菌中表達(dá)的胰島素原有較高的生物活性評卷人得分三、填空題(共9題，共18分)16、在課題1中，我們學(xué)習(xí)了稀釋涂布平板法。這一方法常用來統(tǒng)計樣品中_________________的數(shù)目。當(dāng)樣品的稀釋度足夠高時，____________________。17、請回答下列有關(guān)生物技術(shù)的安全性和倫理問題：

（1）一些持支持態(tài)度的科學(xué)家認(rèn)為，由于不同物種間存在__________，同時花粉的傳播距離和__________有限；轉(zhuǎn)基因農(nóng)作物很難與其它植物雜交，因而不大可能對生物多樣性造成威脅。

（2）在轉(zhuǎn)基因生物或產(chǎn)品研究過程中，絕大多數(shù)科學(xué)家都能自覺遵守科學(xué)研究道德。例如，把重組DNA的轉(zhuǎn)移限制在遺傳上具有___________的生物上；對外源DNA進(jìn)行認(rèn)真選擇，避免能夠表達(dá)出對人體有毒性或過敏的___________．

（3）一些持反對態(tài)度的科學(xué)家認(rèn)為，由于克隆技術(shù)尚不成熟，現(xiàn)在就做克隆人很可能孕育出有嚴(yán)重缺陷的孩子。但是支持克隆人的科學(xué)家則認(rèn)為，一些技術(shù)問題可以通過胚胎分級、______和__________等方法得到解決。

（4）對于克隆技術(shù)，中國政府的態(tài)度是___________．但不反對___________。18、20世紀(jì)70年代以后；以基因工程為代表的一大批生物技術(shù)成果，進(jìn)入人類的生產(chǎn)和生活，特別是在醫(yī)藥和農(nóng)業(yè)生產(chǎn)上發(fā)揮了極大的作用，但是與其他高新技術(shù)一樣，生物技術(shù)也同樣具有雙刃劍效應(yīng)。如同其他高新技術(shù)一樣，轉(zhuǎn)基因成果和轉(zhuǎn)基因技術(shù)也需要你的理性看待。在轉(zhuǎn)基因生物安全方面；

（1）你認(rèn)為轉(zhuǎn)基因生物有哪些優(yōu)點，①____________②___________③__________。

（2）你認(rèn)為轉(zhuǎn)基因生物有哪些缺點，①____________②___________③__________。

（3）你對于轉(zhuǎn)基因生物的態(tài)度是__________。19、______——“分子手術(shù)刀”20、在___________條件下，DNA與___________反應(yīng)呈現(xiàn)______________，因此_____________可以作為鑒定DNA的試劑。21、_______mol/L濃度下，DNA溶解度最大。22、蛋白質(zhì)工程在生物制藥上有廣泛的應(yīng)用。如果已經(jīng)確認(rèn)某種新蛋白質(zhì)可能具有特殊的抗癌功能，其氨基酸序列也已經(jīng)確認(rèn)，如何通過蛋白質(zhì)工程生產(chǎn)這種新藥？如果回答有困難，可以向老師請教或通過互聯(lián)網(wǎng)查找答案。_____23、生物武器的致病能力強、攻擊范圍廣。它可以直接或通過食物、生活必需品和帶菌昆蟲等散布，經(jīng)由呼吸道、消化道和皮膚等侵入人、畜體內(nèi)，造成大規(guī)模傷亡，但對植物無害。（選擇性必修3P111）()24、首先要檢測轉(zhuǎn)基因生物的染色體DNA上是否插入了______，方法是采用______。評卷人得分四、判斷題(共1題，共8分)25、生殖性克隆和治療性克隆兩者有著本質(zhì)的區(qū)別。()A.正確B.錯誤評卷人得分五、實驗題(共3題，共18分)26、氨基丁酸（GABA）是具有降血壓；抗焦慮等功能的水溶性氨基酸。科研人員通過實驗研究了白方腐乳在前發(fā)酵鹽腌和后發(fā)酵過程中GABA的含量變化；為尋找生產(chǎn)富含GABA腐乳的工藝奠定基礎(chǔ)。實驗步驟如下：

①豆腐白坯表面接種毛霉孢子后；在適宜的溫度和濕度下培養(yǎng)48h，獲得毛坯。

②將毛坯分層整齊地擺放在瓶中；鹽腌5天。

③腌制后加入鹵湯；置于28℃恒溫箱中后發(fā)酵90天。

④分別采集各時段的腐乳坯樣品；測定GABA含量，結(jié)果如圖。

請分析并回答問題：

（1）前發(fā)酵過程中，毛坯的GABA含量發(fā)生明顯變化的原因是毛霉產(chǎn)生的_______促進(jìn)蛋白質(zhì)水解產(chǎn)生GABA。

（2）步驟②中，加鹽腌制的正確操作是______________。此過程腐乳干重中的GABA含量下降，一方面與食鹽抑制毛霉生長，酶活性降低有關(guān)；另一方面，豆腐中的水分滲出，部分GABA會____________而導(dǎo)致測定值減小。

（3）后發(fā)酵所加的鹵湯中，具有抑菌防腐和調(diào)味的成分主要有_______。此過程中，發(fā)酵_______天后的白方腐乳出廠銷售比較適宜。27、黏多糖貯積癥是由IDUA基因突變導(dǎo)致的遺傳病。科研人員對此病的治療進(jìn)行相關(guān)研究。

(1)黏多糖貯積癥患者細(xì)胞中IDUA基因由于堿基對___________造成突變，轉(zhuǎn)錄出的mRNA長度不變但提前出現(xiàn)終止密碼子，最終導(dǎo)致合成的IDUA酶分子量___________；與正常IDUA酶的空間結(jié)構(gòu)差異顯著而失去活性，積累過多的黏多糖無法及時清除，造成人體多系統(tǒng)功能障礙。

(2)抑制性tRNA（sup-tRNA）與普通tRNA的結(jié)構(gòu)、功能相同，但它的反密碼子可以與終止密碼子配對。在上述這一類突變基因的翻譯過程中，加入sup-tRNA可以發(fā)揮的作用是___________；從而誘導(dǎo)通讀獲得有功能的全長蛋白。

(3)不同的sup-tRNA可以攜帶不同氨基酸；為比較它們的通讀效果，科研人員進(jìn)行了相關(guān)研究，實驗結(jié)果如圖。

注：“-”代表未加入。

據(jù)圖分析，實驗組將___________基因?qū)胧荏w細(xì)胞，并采用___________技術(shù)檢測導(dǎo)入基因的表達(dá)情況。據(jù)結(jié)果分析，攜帶酪氨酸的sup-tRNA能___________。

(4)科研人員利用攜帶酪氨酸的sup-tRNA對IDUA突變基因純合小鼠及IDUA基因敲除小鼠進(jìn)行治療，檢測肝臟細(xì)胞IDUA酶活性和組織黏多糖的積累量，與不治療的小鼠相比較，實驗結(jié)果為_____________，表明攜帶酪氨酸的sup-tRNA可以治療黏多糖貯積癥。28、T-2毒素是一種由霉菌分泌的脂溶性小分子；可通過污染飼料引起畜禽中毒反應(yīng)。CYP3A是豬體內(nèi)降解T-2毒素的關(guān)鍵酶，T-2毒素可誘導(dǎo)CYP3A基因表達(dá)水平升高。

(1)T-2毒素是霉菌的_____（選填“初級”或“次級”）代謝產(chǎn)物，主要以_____方式進(jìn)入豬細(xì)胞。

(2)B1和B2是CYP3A基因啟動子上游的兩個調(diào)控序列，為研究T-2毒素誘導(dǎo)CYP3A基因表達(dá)的機理，研究者首先將不同調(diào)控序列分別和CYP3A基因啟動子及熒光素酶基因（LUC基因）連接構(gòu)建表達(dá)載體，再分別導(dǎo)入豬肝細(xì)胞，然后向各組豬肝細(xì)胞培養(yǎng)液中加入_____，適宜條件下進(jìn)行培養(yǎng)；24h后檢測LUC酶活性，計算啟動子活性相對值，結(jié)果如圖1所示。據(jù)圖可知，B1和B2調(diào)控序列是CYP3A基因響應(yīng)T-2毒素的核心元件，理由是_____。

(3)研究表明NF-Y和Sp1兩種蛋白均參與T-2毒素對CYP3A的誘導(dǎo)；B2是Spl的結(jié)合位點。研究者推測，NF-Y通過與B1結(jié)合，與Sp1共同調(diào)控CYP3A基因的表達(dá)。

①為證明Bl是NF-Y的結(jié)合位點，研究者依據(jù)B1序列制備了野生型和突變型探針，分別與豬肝細(xì)胞核蛋白提取物混合，實驗分組及結(jié)果如圖2．據(jù)實驗結(jié)果推測，第4組出現(xiàn)阻滯帶的原因是_____，進(jìn)而推測第5組結(jié)果產(chǎn)生的原因是_____。

②研究者設(shè)計實驗進(jìn)一步證明了NF-Y和Spl通過互作共同發(fā)揮調(diào)控功能，實驗設(shè)計思路是：增大或縮小B1和B2兩者之間的距離，檢測CYP3A基因的啟動子活性。據(jù)此分析，實驗假設(shè)是_____。評卷人得分六、綜合題(共4題，共24分)29、營養(yǎng)缺陷型菌株就是在人工誘變或自發(fā)突變后；微生物細(xì)胞代謝調(diào)節(jié)機制中的某些酶被破壞，使代謝過程中的某些合成反應(yīng)不能進(jìn)行的菌株。以下是實驗人員利用影印法初檢氨基酸缺陷型菌株的過程?；卮鹣铝袉栴}：

(1)過程①的接種方法為______，平板倒置可以防止培養(yǎng)皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基，以免造成污染。用此方法統(tǒng)計的菌落數(shù)往往比活菌的實際數(shù)目______。

(2)從培養(yǎng)基成分分析，圖中基本培養(yǎng)基與完全培養(yǎng)基存在差異的成分是______。

(3)為了進(jìn)一步完成對初檢的營養(yǎng)缺陷型菌株的鑒定；實驗人員進(jìn)行了如下操作：

①用接種針挑取菌落______（填“A”或“B”）接種于盛有完全培養(yǎng)液的離心管中；28℃振蕩培養(yǎng)1～2天后，離心，取沉淀物用無菌水洗滌3次，并制成菌懸液。

【規(guī)律提煉】由此可知，營養(yǎng)缺陷菌株在基本培養(yǎng)基和完全培養(yǎng)基上生長的特點是：___________________________________

②吸取1mL菌懸液加入無菌培養(yǎng)皿中，傾注15mL融化并冷卻至50℃左右的基本培養(yǎng)基，待其冷凝后用記號筆在______（填“皿蓋”或“皿底”）劃分A、B、C、D、E五個區(qū)域。③在劃分的五個區(qū)域?qū)?yīng)的培養(yǎng)基上放入少量分組的氨基酸粉末（如下表所示），經(jīng)培養(yǎng)后，觀察生長圈出現(xiàn)的區(qū)域，從而確定屬于何種氨基酸缺陷型。組別所含氨基酸A組氨酸蘇氨酸谷氨酸天冬氨酸亮氨酸B精氨酸蘇氨酸賴氨酸甲硫氨酸苯丙氨酸C酪氨酸谷氨酸賴氨酸色氨酸丙氨酸D甘氨酸天冬氨酸甲硫氨酸色氨酸絲氨酸E半胱氨酸亮氨酸苯丙氨酸丙氨酸絲氨酸

在上述鑒定實驗中，發(fā)現(xiàn)在培養(yǎng)基A、D區(qū)域出現(xiàn)生長圈，說明該氨基酸缺陷型菌株屬于______缺陷型。30、金黃色葡萄球菌具有高度耐鹽性；感染人體易導(dǎo)致肺炎腸炎等。某人飲用鮮牛奶后出現(xiàn)腸胃不適，懷疑是鮮牛奶中含有金黃色葡萄球菌導(dǎo)致，為驗證這一推測，進(jìn)行了如圖實驗。

回答下列問題。

(1)實驗中所用的肉湯培養(yǎng)基可為微生物提供的營養(yǎng)成分包括水、無機鹽、__________等；從培養(yǎng)過程分析，振蕩培養(yǎng)的目的是__________；從功能分析，該培養(yǎng)基屬于__________培養(yǎng)基。

(2)接種環(huán)節(jié)除本實驗中方法外，還有__________；后者除用于分離微生物外，還常用于統(tǒng)計樣品中活菌的數(shù)目，依據(jù)是__________。

(3)金黃色葡萄球菌在血平板上生長時會破壞菌落周圍的紅細(xì)胞，使其褪色。經(jīng)過實驗，發(fā)現(xiàn)血平板上菌落周圍出現(xiàn)__________，初步證明鮮牛奶中含有金黃色葡萄球菌。若要對本實驗進(jìn)一步完善，可增設(shè)一組對照，該組的處理是__________。31、科研工作者將檉柳匙葉草液泡膜IIa+/K+逆向轉(zhuǎn)運蛋白基因（TaNHX2基因）轉(zhuǎn)移到棉花細(xì)胞內(nèi)；獲得了耐鹽新品種。圖1是含有目的基因的DNA片段，Sau3AI；EcoRI、BamHI為三種限制酶（Sau3AI、BamHI切割形成的黏性末端相同）；圖2是農(nóng)桿菌Ti質(zhì)粒結(jié)構(gòu)示意圖。請分析回答問題：

(1)目前常用_____方法從檉柳葉草基因組中獲取TaNHX2基因，該方法需有分別與兩條模板鏈結(jié)合的2種引物，引物是_____。

(2)計劃用EcoR1分別切割圖1中DNA片段和圖2所示質(zhì)粒；以構(gòu)建基因表達(dá)載體。

①構(gòu)建表達(dá)載體的目的是_____需要的工具酶是_____。

②本方案的缺陷是：可能導(dǎo)致_____以及目的基因與質(zhì)粒的反向連接。

③為避免上述缺陷，最佳方案是用_____切割圖1的DNA，用_____切割圖2質(zhì)粒。

(3)目的基因成功導(dǎo)入受體細(xì)胞后，還需要利用_____技術(shù)才能得到轉(zhuǎn)基因棉花苗，這一技術(shù)的原理是_____。

(4)要在個體生物學(xué)水平上檢測耐鹽新品種的培育效果，檢測方法是_____。32、面對新冠疫情；最常見的檢測方法是新冠病毒核酸檢測，原理為實時熒光定量PCR（RT-PCR）檢測法，技術(shù)流程如下圖所示，①②③表示相關(guān)步驟。請回答：

(1)PCR技術(shù)與DNA體內(nèi)復(fù)制過程相比，兩者的復(fù)制方式都是______。RT-PCR過程中，需先以RNA為模板合成cDNA，故裝置中需添加______酶。裝置中加入引物的作用是______。

(2)過程①中，RNA提取裂解液可同時滅活病毒，原因是______。RNA酶抑制劑的作用是______。

(3)檢測新型冠狀病毒的方法還可采用抗原檢測和抗體檢測。這些檢測方法的原理是______。對于新型冠狀病毒疑似患者早期確診，抗體檢測比核酸和抗原檢測滯后的原因是____________。參考答案一、選擇題(共8題，共16分)1、D【分析】【分析】

1；動物細(xì)胞核移植技術(shù)表明動物細(xì)胞核具有全能性。

2；體外受精包括精子的采集和獲能、卵母細(xì)胞的采集和培養(yǎng)、體外受精；該技術(shù)產(chǎn)生的動物稱為試管動物。

3；胚胎分割的特點：來自同一胚胎的后代具有相同的遺傳物質(zhì)；胚胎分割可以看做動物無性繁殖或克隆的方法之一。

【詳解】

A；通過核移植技術(shù)獲得動物個體只能證明動物細(xì)胞的細(xì)胞核具有全能性；A錯誤；

B；胚胎分割技術(shù)是將一個囊胚或者桑椹胚分割成多份；獲得多個后代個體，屬于無性繁殖系，獲得的個體的基因型一定相同，但是表現(xiàn)型是基因型和環(huán)境條件共同作用的結(jié)果，B錯誤；

C；珍稀的或存量少的雌性動物屬于保護動物；不能作為生物工程的受體，應(yīng)該用本地中數(shù)量較多的雌性動物，C錯誤；

D、若b是體外受精技術(shù)；則②為試管動物，這為良種家畜快速大量繁殖提供了可能，D正確。

故選D。

【點睛】2、C【分析】【分析】

胚胎移植的基本程序主要包括：①對供；受體的選擇和處理（選擇遺傳特性和生產(chǎn)性能優(yōu)秀的供體；有健康的體質(zhì)和正常繁殖能力的受體。用激素進(jìn)行同期發(fā)情處理，用促性腺激素對供體母牛做超數(shù)排卵處理）；②配種或人工授精；③對胚胎的收集、檢查、培養(yǎng)或保存（對胚胎進(jìn)行質(zhì)量檢查，此時的胚胎應(yīng)發(fā)育到桑椹或胚囊胚階段）；④對胚胎進(jìn)行移植；⑤移植后的檢查。

【詳解】

AB；哺乳動物的體外受精主要包括卵母細(xì)胞的采集和培養(yǎng)、精子的采集和獲能和受精等幾個主要步驟。精子與卵子在體外受精后；應(yīng)將受精卵移入發(fā)育培養(yǎng)基中繼續(xù)培養(yǎng)，以檢查受精狀況和受精卵的發(fā)育能力，并將其培養(yǎng)至桑椹胚或囊胚進(jìn)行胚胎移植，所以胚胎移植前，要對胚胎進(jìn)行檢查以確定其是否發(fā)育到桑椹胚或囊胚階段，AB正確；

C；在胚胎移植前；若要對胚胎的性別進(jìn)行鑒定，應(yīng)取囊胚的滋養(yǎng)層細(xì)胞做DNA分析，C錯誤；

D；胚胎移植入受體母畜的子宮后；還需對受體母畜進(jìn)行是否妊娠檢查，以保證其為移植的胚胎提供孕育的條件，D正確。

故選C。3、C【分析】【分析】

土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離與計數(shù)實驗中；需要使用以尿素為唯一氮源的選擇培養(yǎng)基，計數(shù)的關(guān)鍵是經(jīng)梯度稀釋后的倍數(shù)要合適，計數(shù)時通常選擇菌落數(shù)在30-300之間的實驗組平板進(jìn)行計數(shù)。

【詳解】

A、分解尿素的細(xì)菌是異養(yǎng)型，不能以CO2作為碳源；A錯誤；

B；倒平板時；不能將打開的培養(yǎng)皿蓋放到一邊，以免微生物污染，正確的做法是：用左手將培養(yǎng)皿打開一條稍大于瓶口的縫隙，右手將錐形瓶中的培養(yǎng)基（約10～20mL）倒入培養(yǎng)皿，左手立即蓋上培養(yǎng)皿的皿蓋，B錯誤；

C、無機鹽可以作為緩沖劑保持細(xì)胞生長過程中pH穩(wěn)定，所以培養(yǎng)基中KH2PO4等的作用之一是作為緩沖劑保持pH穩(wěn)定；C正確；

D；在完全正確的操作情況下；空白對照組中不應(yīng)出現(xiàn)菌落。若空白對照組出現(xiàn)菌落，說明操作過程中存在微生物污染（或培養(yǎng)基不合格），屬于實驗失誤，所有實驗數(shù)據(jù)均不應(yīng)采用，D錯誤。

故選C。

【點睛】4、A【分析】【分析】

根據(jù)題意；通過病毒的RNA進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄產(chǎn)生cDNA，cDNA在PCR過程中解旋后可以和引物一起與模板結(jié)合，探針兩側(cè)有熒光基團和抑制熒光發(fā)出的淬滅基團，延申過程DNA酶破壞了探針使淬滅基團分離后發(fā)出熒光而檢測到是否有cDNA來判斷是否有病毒。

【詳解】

A；若檢測結(jié)果有強烈熒光信號發(fā)出；說明被檢測者體內(nèi)有該病毒RNA，即被檢測者感染病毒，A錯誤；

B；PCR需要根據(jù)目的基因的核苷酸序列合成引物；同時RT-PCR還需要探針與待測樣本DNA混合，B正確；

C；PCR擴增必須以DNA為模板；RNA不能作為PCR擴增的模板，所以需要將樣本中的RNA反轉(zhuǎn)錄為DNA后再進(jìn)行擴增，C正確；

D；RNA病毒的檢測還可以通過特異性抗體檢測；即檢測感染者體內(nèi)通過免疫反應(yīng)所產(chǎn)生的某種抗體，原理是抗原-抗體雜交，D正確。

故選A。

【點睛】5、B【分析】【分析】

腐乳的制作原理：參與豆腐發(fā)酵的微生物有青霉；酵母、曲霉、毛霉等多種；其中起主要作用的是毛霉，其代謝類型為異養(yǎng)需氧型；毛霉能夠產(chǎn)生蛋白酶和脂肪酶，將蛋白質(zhì)和脂肪分別水解成小分子的肽和氨基酸、甘油和脂肪酸。

【詳解】

A；參與豆腐發(fā)酵的微生物有青霉、酵母、曲霉、毛霉等多種；其中起主要作用的是毛霉，A錯誤；

B；毛霉能夠產(chǎn)生蛋白酶和脂肪酶；將蛋白質(zhì)和脂肪分別水解成小分子的肽和氨基酸、甘油和脂肪酸，B正確；

C；加鹽腌制和加鹵湯的目的是抑制瓶內(nèi)雜菌生長的同時又能調(diào)制腐乳的風(fēng)味；C錯誤；

D；豆腐塊相當(dāng)于固體培養(yǎng)基；能為微生物發(fā)酵提供營養(yǎng)條件等，在密封腌制時，最好將瓶口通過酒精燈的火焰，用灼燒法進(jìn)行滅菌，以防止瓶口被污染，D錯誤。

故選B。6、D【分析】【分析】

基因表達(dá)載體的構(gòu)建：1；過程：用同一種限制酶切割目的基因和運載體；再用DNA連接酶將目的基因和運載體連接形成重組DNA分子。2、目的：使目的基因在受體細(xì)胞中穩(wěn)定存在并且可以遺傳給下一代并表達(dá)和發(fā)揮作用。3、基因表達(dá)載體的組成：目的基因+啟動子+終止子+標(biāo)記基因。（1）啟動子在基因的首段，它是RNA聚合酶的結(jié)合位點，能控制著轉(zhuǎn)錄的開始；（2）終止子在基因的尾端，它控制著轉(zhuǎn)錄的結(jié)束；（3）標(biāo)記基因便于目的基因的鑒定和篩選。

【詳解】

A；限制酶Ⅰ和酶Ⅱ識別的核苷酸序列不同；所以用限制酶Ⅰ和酶Ⅱ同時切割目的基因和質(zhì)?？煞乐苟呷我饨Y(jié)合，A正確；

B；DNA聚合酶、DNA連接酶的作用部位都是磷酸二酯鍵；前者是連接單個的脫氧核苷酸，后者是連接DNA片段，B正確；

C；啟動子和終止子都是一段有特殊結(jié)構(gòu)的DNA片段；其中啟動子是RNA聚合酶的結(jié)合位點，能啟動轉(zhuǎn)錄過程，而終止子能終止轉(zhuǎn)錄過程，C正確；

D；重組DNA分子上的抗性基因可用于目的基因的檢測與鑒定；但是有目的基因也不一定成功表達(dá)，D錯誤。

故選D。7、A【分析】【分析】

由圖分析可知；向?qū)NA可識別S-RNase基因一條鏈并與之配對，引導(dǎo)內(nèi)切核酸酶Cas9蛋白到特定的基因位點進(jìn)行切割，以敲除馬鈴薯的S-RNase基因。

【詳解】

A；向?qū)NA和S-RNase基因識別結(jié)合的堿基互補配對方式存在U-A；而目標(biāo)DNA雙鏈中的堿基互補配對方式為T-A，A錯誤；

B；Cas9蛋白為內(nèi)切核酸酶；可催化磷酸二酯鍵水解，以剪切特定DNA片段，B正確；

C；二倍體馬鈴薯原本自交不產(chǎn)生種子；該基因編輯技術(shù)成功后可產(chǎn)生種子。故可讓馬鈴薯自交看能否產(chǎn)生種子，從個體水平上檢測該基因編輯技術(shù)是否成功，C正確；

D；向?qū)NA的序列越短；與其他基因片段結(jié)合的概率越大，該基因編輯技術(shù)在編輯對象時出錯的概率就越高，D正確。

故選A。8、D【分析】【分析】

PCR全稱為聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)；是一項在生物體外復(fù)制特定的DNA片段的核酸合成技術(shù)，利用的原理是DNA復(fù)制，需要條件有模板DNA；四種脫氧核苷酸、一對引物、熱穩(wěn)定DNA聚合酶（Taq酶），過程包括：①高溫變性：DNA解旋過程（PCR擴增中雙鏈DNA解開不需要解旋酶，高溫條件下氫鍵可自動解開）；②低溫復(fù)性：引物結(jié)合到互補鏈DNA上；③中溫延伸：合成子鏈。

【詳解】

A；RT-PCR技術(shù)是將RNA的反轉(zhuǎn)錄和cDNA的聚合酶鏈?zhǔn)綌U增（PCR）相結(jié)合的技術(shù)；利用RT酶PCR技術(shù)，獲取S蛋白基因時，需加入逆轉(zhuǎn)錄酶、Taq酶，A正確；

B；引物與模板鏈的3'端堿基互補配對；故引物1、引物2、引物7和引物8不合適，擴增得到的RBD蛋白基因也應(yīng)該含有限制酶的酶切位點，故引物3和引物6不合適，故選引物4和引物5，B正確；

C、PCR的產(chǎn)物可通過電泳鑒定，設(shè)置如下：1號泳道為標(biāo)準(zhǔn)（Marker）；2號泳道是以RBD蛋白基因片段為材料做的陽性對照組，3號泳道為實驗組，C正確；

D；質(zhì)粒上沒有SmaⅠ酶切位點；且若使用EcoRⅠ酶切，易造成目的基因和質(zhì)粒自身環(huán)化，故應(yīng)該選擇BamHⅠ和HindⅢ，D錯誤。

故選D。二、多選題(共7題，共14分)9、B:C【分析】【分析】

胚胎發(fā)育過程：（1）卵裂期：細(xì)胞進(jìn)行有絲分裂；數(shù)量增加，胚胎總體積不增加；（2）桑椹胚：32個細(xì)胞左右的胚胎；（3）囊胚：細(xì)胞開始分化，其中個體較大的細(xì)胞叫內(nèi)細(xì)胞團將來發(fā)育成胎兒的各種組織；而滋養(yǎng)層細(xì)胞將來發(fā)育成胎膜和胎盤；胚胎內(nèi)部逐漸出現(xiàn)囊胚腔；（4）原腸胚：內(nèi)細(xì)胞團表層形成外胚層，下方細(xì)胞形成內(nèi)胚層，由內(nèi)胚層包圍的囊腔叫原腸腔。

【詳解】

A；由桑椹胚發(fā)育到囊胚進(jìn)行的是有絲分裂；形成的每個細(xì)胞內(nèi)DNA總量不變，A錯誤；

B；囊胚期細(xì)胞出現(xiàn)了細(xì)胞分化；但細(xì)胞分化的實質(zhì)是基因的選擇性表達(dá)，因此其遺傳物質(zhì)未發(fā)生改變，B正確；

C；囊胚期內(nèi)細(xì)胞團和滋養(yǎng)層細(xì)胞的差異不是DNA復(fù)制水平上的差異；而是轉(zhuǎn)錄水平上的差異，即基因的選擇性表達(dá)，C正確；

D；受精卵在輸卵管中形成；后在子宮中發(fā)育，故胚胎發(fā)育的早期不可能在卵巢，D錯誤。

故選BC。10、A:B:C【分析】【分析】

一種限制酶只能識別一種核苷酸序列且在特定的位點對DNA分子進(jìn)行切割；切割出的末端有黏性末端和平末端兩種，具有相同黏性末端的DNA片段之間可以在DNA連接酶的作用下連接到一起。

【詳解】

A；如果用BglⅡ和Sau3AI切割目的基因；目的基因兩端將形成不同的黏性末端，同樣用BglⅡ和Sau3AI切割Pl噬菌體載體也形成這兩種相同的黏性末端，因此它們可構(gòu)成重組DNA，A正確；

B；由于Sau3AI的切割位點在EcoRI的左側(cè)；因此用EcoRI和Sau3AI切割目的基因，目的基因兩端將形成不同的黏性末端，同樣用EcoRI和Sau3AI切割Pl噬菌體載體也形成這兩種相同的黏性末端，因此它們可構(gòu)成重組DNA，B正確；

C；P1噬菌體載體為環(huán)狀DNA；其上只含有一個EcoRI的切點，因此用EcoRI切割后，該環(huán)狀DNA分子變?yōu)榫€性雙鏈DNA分子，因每條鏈上含有一個游離的磷酸基團，因此切割后含有兩個游離的磷酸基團，C正確；

D；從圖甲看出；用EcoRI切割目的基因后兩端各有一切口，與圖乙中EcoRI切口對接時，可有兩種可能，即可產(chǎn)生兩種重組DNA，D錯誤。

故選ABC。11、A:B:C:D【分析】【分析】

干細(xì)胞：在個體發(fā)育過程中；通常把那些具有自我復(fù)制能力，并能在一定條件下分化形成一種以上類型的細(xì)胞的多潛能細(xì)胞稱為干細(xì)胞。

（1）全能干細(xì)胞：如胚胎干細(xì)胞；

（2）多能干細(xì)胞：如造血干細(xì)胞；

（3）專能干細(xì)胞：如骨髓瘤細(xì)胞；皮膚生發(fā)層干細(xì)胞。

【詳解】

A；由細(xì)胞形態(tài)判斷；①為精細(xì)胞，③為肌肉細(xì)胞，④為神經(jīng)細(xì)胞，這3種細(xì)胞都是高度分化的細(xì)胞，所以推測圖示4種細(xì)胞中細(xì)胞②分化程度最低，最可能連續(xù)分裂，A正確；

B；胚胎干細(xì)胞分化為各種細(xì)胞的實質(zhì)是基因的選擇性表達(dá)；B正確；

C；分化得到的各種細(xì)胞；功能不同的主要差異是特定蛋白不同，C正確；

D；定向誘導(dǎo)胚胎干細(xì)胞分化形成的組織或器官；進(jìn)行自體移植可避免免疫排斥反應(yīng)，D正確。

故選ABCD。

【點睛】12、A:B:C【分析】【分析】

多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)擴增DNA片段：

1；PCR原理：在解旋酶作用下；打開DNA雙鏈，每條DNA單鏈作為母鏈，以4種游離脫氧核苷酸為原料，合成子鏈，在引物作用下，DNA聚合酶從引物3'端開始延伸DNA鏈，即DNA的合成方向是從子鏈的5'端自3'端延伸的。實際上就是在體外模擬細(xì)胞內(nèi)DNA的復(fù)制過程。DNA的復(fù)制需要引物，其主要原因是DNA聚合酶只能從3′端延伸DNA鏈。

2；PCR反應(yīng)過程是：變性→復(fù)性→延伸。

【詳解】

A；基因擴增過程中需要特定的引物；該引物的作用是定位基因的位置，與模板鏈結(jié)合并為子鏈的延伸提供起點，擴增過程中引物和探針應(yīng)同時結(jié)合到模板DNA上，A錯誤；

B、若最初該反應(yīng)體系中只有逆轉(zhuǎn)錄而來的一個DNA分子，每個DNA分子需要1個探針，擴增n次，可得到2n個DNA分子，則共需要消耗2n-1個探針；B錯誤；

C；由題可知C值越大；該反應(yīng)管內(nèi)的熒光信號到達(dá)設(shè)定閾值經(jīng)歷的循環(huán)數(shù)越大，即每次循環(huán)出現(xiàn)的熒光信號越少。每次循環(huán)出現(xiàn)的熒光信號越少，代表被檢測樣本中的病毒數(shù)目越少，C錯誤；

D；如果樣本內(nèi)的病毒RNA被降解；會導(dǎo)致無法檢測出樣本內(nèi)的正確病毒數(shù)目，D正確。

故選ABC。13、A:B【分析】【分析】

單克隆抗體的制備。

（1）制備產(chǎn)生特異性抗體的B淋巴細(xì)胞：向免疫小鼠體內(nèi)注射特定的抗原；然后從小鼠脾內(nèi)獲得相應(yīng)的B淋巴細(xì)胞。

（2）獲得雜交瘤細(xì)胞。①將鼠的骨髓瘤細(xì)胞與脾細(xì)胞中形成的B淋巴細(xì)胞融合。②用特定的選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細(xì)胞；該雜種細(xì)胞既能夠增殖又能產(chǎn)生抗體。

（3）克隆化培養(yǎng)和抗體檢測。

（4）將雜交瘤細(xì)胞在體外培養(yǎng)或注射到小鼠腹腔內(nèi)增殖。

（5）提取單克隆抗體：從細(xì)胞培養(yǎng)液或小鼠的腹水中提取。

【詳解】

A；單克隆抗體制備過程中；需要給小白鼠注射腫瘤細(xì)胞表面抗原，刺激小鼠產(chǎn)生體液免疫，才能得到能產(chǎn)生特定抗體的B淋巴細(xì)胞，A正確；

B；制備單克隆抗體的過程中至少要經(jīng)過兩次原理和目的均不同的篩選過程；第一次篩選雜交瘤細(xì)胞，第二次篩選能產(chǎn)生特異性抗體的雜交瘤細(xì)胞，B正確；

C；生物導(dǎo)彈綜合利用了單克隆抗體的定向制導(dǎo)作用和堿性磷酸酶的特異性殺傷能力；C錯誤；

D；根據(jù)題干信息“通過活化多柔比星使其對DNA造成損傷；進(jìn)而抑制以DNA為模板進(jìn)行的生理活動”，說明多柔比星還可以抑制細(xì)胞的轉(zhuǎn)錄過程，而不增殖的細(xì)胞也具有轉(zhuǎn)錄過程，D錯誤。

故選AB。14、A:D【分析】【分析】

纖維素分解菌能合成和分泌纖維素酶，纖維素酶是一種復(fù)合酶，包括C1酶；Cx酶和葡萄糖苷酶；前兩種酶使纖維素分解成纖維二糖，第三種酶將纖維二糖分解成葡萄糖。用以纖維素為唯一碳源的培養(yǎng)基可以篩選出纖維素分解菌。

【詳解】

A；木材、秸稈中富含纖維素；故可以從富含腐殖質(zhì)的林下土壤中篩選產(chǎn)纖維素酶菌，A正確；

B；應(yīng)該用以纖維素為唯一碳源的培養(yǎng)基篩選纖維素分解菌；只有纖維素分解菌能夠存活，B錯誤；

C；接種室、接種箱等常用紫外線消毒法處理；接種環(huán)等常用灼燒滅菌法處理，吸管、培養(yǎng)皿等常用干熱滅菌法處理，培養(yǎng)基用高壓蒸汽滅菌法處理，C錯誤；

D；菌落只能在固體培養(yǎng)基中形成；菌種分離和菌落計數(shù)都可以使用固體培養(yǎng)基，D正確。

故選AD。15、A:C:D【分析】【分析】

大腸桿菌是原核生物；原核細(xì)胞與真核細(xì)胞相比，最大的區(qū)別是原核細(xì)胞沒有被核膜包被的成形的細(xì)胞核（沒有核膜；核仁和染色體）；原核細(xì)胞只有核糖體一種細(xì)胞器；原核細(xì)胞中，轉(zhuǎn)錄和翻譯在相同時空中進(jìn)行，而真核生物的轉(zhuǎn)錄和翻譯過程在不同時間和空間進(jìn)行。

【詳解】

A；人體胰島細(xì)胞是真核細(xì)胞；在合成胰島素原時，轉(zhuǎn)錄在細(xì)胞核中進(jìn)行，翻譯在細(xì)胞質(zhì)的核糖體上進(jìn)行，原核細(xì)胞沒有細(xì)胞核，A錯誤；

B；DNA連接酶能在兩個相同黏性末端配對后的磷酸與脫氧核糖之間形成化學(xué)鍵（磷酸二酯鍵）；B正確；

C；通過檢測；大腸桿菌中沒有胰島素原產(chǎn)生，不能判斷重組質(zhì)粒未導(dǎo)入受體菌，也可能是導(dǎo)入后沒有表達(dá)，C錯誤；

D；大腸桿菌是原核生物；沒有內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體，不能對胰島素原進(jìn)行加工，因此人胰島素原基因在大腸桿菌中表達(dá)的胰島素原沒有生物活性，D錯誤。

故選ACD。三、填空題(共9題，共18分)16、略

【解析】①.活菌②.培養(yǎng)基表面生長的一個菌落，來源于樣品稀釋液中的一個活菌17、略

【分析】1；試管嬰兒技術(shù)是指通過人工操作使卵子和精子在體外條件下成熟和受精；并通過培養(yǎng)發(fā)育為早期胚胎后，再經(jīng)移植后產(chǎn)生后代的技術(shù)。

2；設(shè)計試管嬰兒技術(shù)是通過體外受精獲得許多胚胎；然后從中選擇符合要求的胚胎，再經(jīng)移植后產(chǎn)生后代的技術(shù)。

3；轉(zhuǎn)基因生物的安全性問題：食物安全（滯后效應(yīng)、過敏源、營養(yǎng)成分改變）、生物安全（對生物多樣性的影響）、環(huán)境安全（對生態(tài)系統(tǒng)穩(wěn)定性的影響）；生物安全主要是指轉(zhuǎn)基因生物釋放到環(huán)境中，可能會對生物多樣性構(gòu)成潛在的風(fēng)險和威脅。

【詳解】

（1）一些持支持態(tài)度的科學(xué)家認(rèn)為；由于不同物種間存在生殖隔離，同時花粉的傳播距離和存活時間有限，不會造成轉(zhuǎn)基因農(nóng)作物與其它植物的雜交，因而也不太可能對生物多樣性造成威脅。

（2）在轉(zhuǎn)基因生物或產(chǎn)品研究過程中；為保證轉(zhuǎn)基因生物的安全，要把重組DNA的轉(zhuǎn)移限制在遺傳上具有特定缺陷的生物上；對外源DNA進(jìn)行認(rèn)真選擇，避免能夠表達(dá)出對人體有毒性或過敏的蛋白質(zhì)等等。

（3）堅持克隆人的科學(xué)家則認(rèn)為；一些技術(shù)問題可以通過胚胎分級；基因診斷和染色體檢查等方法得到解決。

（4）中國政府對于克隆技術(shù)的態(tài)度是禁止生殖性克隆；但不反對治療性克隆。

【點睛】

本題難度一般，屬于考綱中識記、理解層次的要求，結(jié)合基因工程的應(yīng)用，綜合考查了基因工程、試管嬰兒和轉(zhuǎn)基因生物的安全性問題，并且深入考查了相關(guān)基礎(chǔ)知識，要求考生能夠構(gòu)建一定的知識網(wǎng)絡(luò)．面對轉(zhuǎn)基因技術(shù)的利弊，正確的做法應(yīng)該是趨利避害，不能因噎廢食?！窘馕觥竣?生殖隔離②.存活時間③.特定缺陷④.蛋白質(zhì)⑤.基因診斷⑥.染色體檢查⑦.禁止生殖性克隆人⑧.治療性克隆18、略

【分析】【分析】

基因工程是指按照人們的愿望；進(jìn)行嚴(yán)格的設(shè)計，并通過體外DNA重組和轉(zhuǎn)基因等技術(shù)，賦子生物以新的遺傳特性，從而創(chuàng)造出更符合人們需要的新的生物類型和生物產(chǎn)品。由于基因工程是在DNA分子水平上進(jìn)行設(shè)計和施工的，因此又叫做DNA重組技術(shù)。

基因工程的原理是基因重組；其優(yōu)點是打破了生殖隔離。但由于科學(xué)發(fā)展水平的限制，目前科學(xué)家對基因的結(jié)構(gòu)；基因間的相互作用以及基因的調(diào)控機制等都了解得相當(dāng)有限；再加上轉(zhuǎn)移的基因雖然是功能已知的基因，但不少卻是異種生物的基因；同時，由于外源基因插入宿主基因組的部位往往是隨機的，因此在轉(zhuǎn)基因生物中，有時候會出現(xiàn)一些人們意想不到的后果。

【詳解】

（1）轉(zhuǎn)基因生物具有以下優(yōu)點：

作物產(chǎn)量高；能解決糧食短缺問題；利用基因工程生產(chǎn)的抗蟲作物能夠減少農(nóng)藥使用，減少環(huán)境污染；利用基因工程培育的生長迅速；營養(yǎng)品豐富的生物，能增加食物營養(yǎng)，提高附加值；利用基因工程培育微生物，能夠生產(chǎn)稀缺的生化藥物。

（2）轉(zhuǎn)基因生物受限于科學(xué)發(fā)展水平；可能會產(chǎn)生以下問題：

轉(zhuǎn)基因生物與同種生物雜交；可能產(chǎn)生重組病菌；重組病毒或超級雜草；導(dǎo)入轉(zhuǎn)基因生物的外源基因有可能與感染轉(zhuǎn)基因生物的某些細(xì)菌或病毒雜交，從而重組出對人類或其他生物有害的病原體，可能使疾病的傳播跨越物種障礙。

（3）轉(zhuǎn)基因技術(shù)取得了巨大的成果；但科學(xué)技術(shù)是把雙刃劍，面對轉(zhuǎn)基因技術(shù)的利弊，正確的做法應(yīng)該是趨利避害，而不能因噎廢食。

【點睛】

本題考查轉(zhuǎn)基因生物的安全性問題，意在考查學(xué)生對轉(zhuǎn)基因生物安全性問題的識記與理解?！窘馕觥拷鉀Q糧食短缺問題減少農(nóng)藥使用，減少環(huán)境污染增加食物營養(yǎng)，提高附加值能產(chǎn)生有毒蛋白或新過敏原可能產(chǎn)生重組病菌、重組病毒或超級雜草可能使疾病的傳播跨越物種障礙趨利避害不能因噎廢食19、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】限制性核酸內(nèi)切酶（限制酶20、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】沸水浴二苯胺藍(lán)色二苯胺21、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】0．1422、略

【分析】【詳解】

蛋白質(zhì)工程的基本途徑：從預(yù)期的蛋白質(zhì)功能出發(fā)，設(shè)計預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)，推測應(yīng)有的氨基酸序列，找到相對應(yīng)的脫氧核苷酸序列，以下按照基因工程的一般步驟進(jìn)行。該蛋白質(zhì)的氨基酸序列已知，因此通過蛋白質(zhì)工程，生產(chǎn)該蛋白質(zhì)新藥的基本過程為：根據(jù)已知的氨基酸序列→找到相對應(yīng)的脫氧核苷酸序列→合成該蛋白質(zhì)新藥基因→將獲得的目的基因與質(zhì)粒構(gòu)建形成基因表達(dá)載體→將重組質(zhì)粒導(dǎo)入受體菌→獲得工程菌→生產(chǎn)該蛋白質(zhì)新藥?！窘馕觥扛鶕?jù)已知的氨基酸序列→找到相對應(yīng)的脫氧核苷酸序列→合成該蛋白質(zhì)新藥基因→將獲得的目的基因與質(zhì)粒構(gòu)建形成基因表達(dá)載體→將重組質(zhì)粒導(dǎo)入受體菌→獲得工程菌→生產(chǎn)該蛋白質(zhì)新藥23、略

【分析】【詳解】

生物武器是利用生物戰(zhàn)劑殺傷人員、牲畜、毀壞植物的武器。致病能力強、攻擊范圍廣。它可以直接或通過食物、生活必需品和帶菌昆蟲等散布，經(jīng)由呼吸道、消化道和皮膚等侵入人、畜體內(nèi)，造成大規(guī)模傷亡，同時可毀壞植物，該說法錯誤。【解析】錯誤24、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】目的基因DNA分子雜交技術(shù)。四、判斷題(共1題，共8分)25、A【分析】【分析】

生殖性克隆和治療性克隆兩者有著本質(zhì)區(qū)別；最重要的體現(xiàn)在目的不同。

【詳解】

治療性克?。菏侵赴芽寺〕鰜淼慕M織和器官用于治療疾病，這種用于醫(yī)療目的的使用克隆技術(shù)制造胚胎稱為治療性克隆。生殖性克?。禾幱谏车哪康氖褂每寺〖夹g(shù)在實驗室制造人類胚胎。治療性克隆和生殖性克隆最重要的差別是目的不同。五、實驗題(共3題，共18分)26、略

【分析】【分析】

腐乳的制作過程主要是：讓豆腐上長出毛霉→加鹽腌制→加鹵湯裝瓶→密封腌制。

1；讓豆腐上長出毛霉：將豆腐塊平放在籠屜內(nèi)；將籠屜中的溫度控制在15～18℃，并保持在一定的濕度。約48h后，毛霉開始生長，3d之后菌絲生長旺盛，5d后豆腐塊表面布滿菌絲。豆腐塊上生長的毛霉來自空氣中的毛霉孢子。

2；加鹽腌制：將長滿毛霉的豆腐塊分層整齊地擺放在瓶中；同時逐層加鹽，隨著層數(shù)的加高而增高鹽量，接近瓶口表面的鹽要鋪厚一些。加鹽研制的時間約為8d左右．加鹽可以析出豆腐中的水分，使豆腐塊變硬，在后期的制作過程中不會過早酥爛。同時，鹽能抑制微生物的生長，避免豆腐塊腐敗變質(zhì)。

3；加鹵湯裝瓶：鹵湯直接關(guān)系到腐乳的色、香、味。鹵湯是由酒及各種香辛料配制而成的。鹵湯中的酒可以選用料酒、黃酒、米酒、高粱酒等；含量一般控制在12%左右。加酒可以抑制微生物的生長，同時能使腐乳具有獨特的香味。香辛料種類很多，如胡椒、花椒、八角、桂皮、姜、辣椒等。香辛料可以調(diào)制腐乳的風(fēng)味，也具有防腐殺菌的作用。可據(jù)個人口味配置鹵湯。

4；密封腌制。

【詳解】

（1）前發(fā)酵過程中，毛霉等微生物產(chǎn)生的蛋白酶促進(jìn)豆腐中的蛋白質(zhì)水解產(chǎn)生GABA，使得毛坯的GABA含量明顯升高。

（2）步驟②中；加鹽腌制的正確操作是將長滿毛霉的豆腐塊分層整齊地擺放在瓶中，同時逐層加鹽，隨著層數(shù)的加高而增高鹽量，接近瓶口表面的鹽要鋪厚一些。鹽能抑制微生物的生長，避免豆腐塊腐敗變質(zhì)。此過程腐乳干重中的GABA含量下降的原因可能是：①食鹽會抑制毛霉生長，酶的活性降低；②豆腐中的水分滲出，部分GABA會溶解于水而導(dǎo)致測定值減小。

（3）鹵湯是由料酒及各種香辛料配制而成的；可以抑制微生物的生長，同時能使腐乳具有獨特的香味。后發(fā)酵過程中GABA的含量變化曲線圖顯示，在60天以后，GABA的含量達(dá)到最大值且保持相對穩(wěn)定，所以此時出廠銷售白方腐乳比較適宜。

【點睛】

解答本題的關(guān)鍵是掌握腐乳的制作的相關(guān)流程和知識要點，主要依靠學(xué)生對課本知識的理解和掌握，并結(jié)合題目中所給的GABA為水溶性氨基酸這一關(guān)鍵信息回答問題，同時需要學(xué)生在做題時思考符合經(jīng)濟效益的選擇?！窘馕觥康鞍酌钢饘蛹欲}隨著層數(shù)的加高增加鹽量，接近瓶口表面的鹽要鋪厚一些隨水流失（溶解于水中）香辛料和料酒6027、略

【分析】【分析】

基因突變是指DNA分子中發(fā)生堿基對的替換；增添和缺失；而引起的基因結(jié)構(gòu)的改變。翻譯是指在核糖體上，以mRNA為模板、以氨基酸為原料合成蛋白質(zhì)的過程，該過程還需要tRNA來運轉(zhuǎn)氨基酸。

密碼子由位于mRNA上決定一個氨基酸的三個相鄰的堿基組成。終止密碼子的作用是終止翻譯過程。

基因工程中檢測目的基因在受體細(xì)胞內(nèi)是否成功表達(dá)可以用抗原-抗體雜交技術(shù)。

【詳解】

（1）由題干信息可知；黏多糖貯積癥患者細(xì)胞中IDUA基因突變后，轉(zhuǎn)錄出的mRNA長度不變，說明其沒有發(fā)生堿基對的增添和缺失，因為這兩者改變會導(dǎo)致轉(zhuǎn)錄出的mRNA長度改變，因此推測其基因突變是由于堿基對替換。由于終止密碼子提前出現(xiàn)，導(dǎo)致翻譯提前終止，肽鏈變短，IDUA酶分子量變小，空間結(jié)構(gòu)改變而失活。

（2）由題干可知；抑制性tRNA（sup-tRNA）可以最終誘導(dǎo)核糖體通讀mRNA上的遺傳信息合成具有功能的全長蛋白，并且抑制性tRNA（sup-tRNA）與普通tRNA的結(jié)構(gòu)；功能相同，據(jù)此推測該抑制性tRNA可以攜帶氨基酸至核糖體并與終止密碼子堿基配對使翻譯過程繼續(xù)。

（3）本實驗?zāi)康氖潜容^攜帶不同氨基酸的sup-tRNA的通讀效果；需要保證實驗組細(xì)胞含有突變IDUA基因，即其不能合成具有正常功能的IDUA酶（防止正常IDUA酶對實驗結(jié)果產(chǎn)生干擾），同時保證在不同的實驗組細(xì)胞中可以轉(zhuǎn)錄出攜帶不同中氨基酸的sup-tRNA，因此實驗組中受體細(xì)胞中應(yīng)該含有導(dǎo)入攜帶不同氨基酸的sup-tRNA基因和突變IDUA基因。若要判斷各個實驗組細(xì)胞中攜帶不同氨基酸的sup-tRNA是否成功誘導(dǎo)了具有功能的IDUA酶，可以采用該酶的特異性抗體對其進(jìn)行檢測，即進(jìn)行抗原-抗體雜交。分析題圖可知，與對照組（含正常IDUA基因的組）相比，含攜帶酪氨酸的sup-tRNA的受體細(xì)胞中表達(dá)的全長IDUA蛋白量比其他實驗組都多，說明其能有效恢復(fù)細(xì)胞中全長IDUA蛋白的合成，且效果最好。

（4）由以上實驗可知，攜帶酪氨酸的sup-tRNA能有效誘導(dǎo)核糖體對突變IDUA基因轉(zhuǎn)錄出的mRNA進(jìn)行通讀，進(jìn)而產(chǎn)生具有正常功能的IDUA酶，因此利用攜帶酪氨酸的sup-tRNA對IDUA突變基因純合小鼠進(jìn)行治療，與不進(jìn)行治療的IDUA突變基因純合小鼠相比，治療組小鼠的IDUA酶活性高，組織黏多糖積累量少；同時，利用攜帶酪氨酸的sup-tRNA對IDUA基因敲除小鼠進(jìn)行治療，與不進(jìn)行治療的IDUA基因敲除小鼠相比，由于二者都不含有IDUA基因，則其細(xì)胞內(nèi)都沒有相應(yīng)mRNA，因此攜帶酪氨酸的sup-tRNA無法發(fā)揮作用，最終導(dǎo)致治療組與不治療組的IDUA酶活性與組織黏多糖積累量無明顯差異。【解析】(1)替換減少。

(2)識別終止密碼子并攜帶氨基酸至核糖體使翻譯過程繼續(xù)。

(3)攜帶不同氨基酸的suptRNA基因和變IDUA抗原一抗體雜交恢復(fù)細(xì)胞中全長IDUA蛋白的合成；且效果最好。

(4)IDUA突變基因純合小鼠IDUA酶活性高，組織黏多糖積累量少；IDUA基因敲除小鼠IDUA酶活性與組織黏多糖積累量無明顯差異28、略

【分析】【分析】

圖1可知：T-2毒素是一種常見的菌素；CYP3A是降解T-2毒素的關(guān)鍵酶，T-2毒素可誘導(dǎo)其表達(dá)水平升高，當(dāng)用兩種調(diào)控序列同時連接啟動子，啟動子的活性最高。

圖2可知：野生型探針能與NF-Y結(jié)合；突變型探針不能與NF-Y結(jié)合，NF-Y抗體一定能與NF-Y結(jié)合。

【詳解】

（1）初級代謝產(chǎn)物一般是霉菌生命活動所必需的，大多存在于細(xì)胞內(nèi)。次級代謝產(chǎn)物不是霉菌生命活動必需的，并且分泌到體外，故T-2毒素是霉菌的次級代謝產(chǎn)物。T-2毒素是一種由霉菌分泌的脂溶性小分子，脂溶性小分子以自由擴散的方式進(jìn)入細(xì)胞。

（2）實驗的自變量是有無調(diào)控序列；根據(jù)單一變量原則，對照組的目的是為了排除無光變量的影響，除了沒有調(diào)控序列，其他處理和實驗組相同，所以對照組和實驗組豬肝細(xì)胞均導(dǎo)入含CYP3A基因啟動子及LUC基因的表達(dá)載體，然后向各組豬肝細(xì)胞培養(yǎng)液中加入加入等量T-2毒素，適宜條件下進(jìn)行培養(yǎng)。從圖中信息可知，缺失兩個調(diào)控序列和對照組活性一致，缺失一個比對照組活性略強，兩個都存在活性最高，說明這兩個調(diào)控序列是CYP3A基因響應(yīng)T-2毒素的核心元件。故缺失兩個調(diào)控序列或其中任一個，T-2毒素都不能誘導(dǎo)啟動子活性明顯增強。

（3）①實驗的目的是要驗證NF-Y能與B1結(jié)合；根據(jù)第2組和第3組結(jié)果，依據(jù)B1序列制備的NF-Y結(jié)合位點野生型探針能與NF-Y結(jié)合，根據(jù)第4組結(jié)果，突變型探針不能與NF-Y結(jié)合。第5組加入了NF-Y抗體，一定能與NF-Y結(jié)合。故可以解釋為：結(jié)合位點突變的探針不能結(jié)合核蛋白中的NF-Y，也不會競爭NF-Y與標(biāo)記探針的結(jié)合，所以第4組與第2組同樣位置出現(xiàn)阻滯帶。第5組，NF-Y的抗體結(jié)合NF-Y，因此第5組中出現(xiàn)標(biāo)記探針；NF-Y和NF-Y抗體的結(jié)合物，結(jié)合物分子量大，阻滯帶的位置更靠后。

②假設(shè)NF-Y和Sp1通過互作共同發(fā)揮調(diào)控功能，它們之間的距離是發(fā)揮作用的最佳距離，故增大或縮小B1和B2兩者之間的距離都會降低CYP3A基因的啟動子的活性?！窘馕觥?1)次級自由擴散。

(2)等量的T-2毒素缺失兩個調(diào)控序列或其中任一個；T-2毒素都不能誘導(dǎo)啟動子活性增強。

(3)結(jié)合位點突變的探針不能結(jié)合核蛋白中的NF-Y，也不會競爭NF-Y與標(biāo)記探針的結(jié)合，所以第4組與第2組同樣位置出現(xiàn)阻滯帶。NF-Y的抗體結(jié)合NF-Y，因此第5組中出現(xiàn)標(biāo)記探針、NF-Y和NF-Y抗體的結(jié)合物，結(jié)合物分子量大，阻滯帶的位置更靠后。NF-Y和Sp1通過互作共同發(fā)揮調(diào)控功能，它們之間的距離是發(fā)揮作用的最佳距離。六、綜合題(共4題，共24分)29、略

【分析】【分析】

分析題圖；圖中首先利用稀釋涂布平板法分離細(xì)菌，然后運用“影印法”將菌種接種到兩種培養(yǎng)基中：基本培養(yǎng)基；完全培養(yǎng)基，則在基本培養(yǎng)基中，氨基酸缺陷型菌株不能生長，而在完全培養(yǎng)基中能夠生長，因此可以選擇出氨基酸缺陷型菌株。

【詳解】

（1）根據(jù)過程①培養(yǎng)的效果圖可以判斷；該過程所采用的接種方法為稀釋涂布平板法；平板倒置可以防止培養(yǎng)皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基，以免造成污染；用稀釋涂布平板法接種方法統(tǒng)計的菌落數(shù)往往比活菌的實際數(shù)目低，原因是當(dāng)兩個或多個細(xì)胞連在一起時，平板上觀察到的只有一個菌落。

（2）在基本培養(yǎng)基中；氨基酸缺陷型菌株不能生長，而在完全培養(yǎng)基中能夠生長，因此從完全培養(yǎng)基上可獲得相應(yīng)的營養(yǎng)缺陷型菌株。

（3）①在基本培養(yǎng)基中；氨基酸缺陷型菌株不能生長，而在完全培養(yǎng)基中能夠生長，因此圖中菌落A應(yīng)該為氨基酸缺陷型菌株，則用接種針挑取菌落A接種于盛有完全培養(yǎng)液的離心管中。

②由于平板倒置；故待其冷凝后用記號筆在皿底劃分A；B、C、D、E五個區(qū)域。

③表中信息顯示：A、D區(qū)域含有、其它區(qū)域不含有的氨基酸是天冬氨酸，而實驗結(jié)果只有A、D區(qū)域出現(xiàn)生長圈，說明該營養(yǎng)缺陷型菌株屬于天冬氨酸缺陷型?！窘馕觥?1)稀釋涂布平板法低。

(2)氨基酸。

(3)A氨基酸缺陷型菌株在基本培養(yǎng)基中不能生長，而在完全培養(yǎng)基中能夠生長皿底天冬氨酸30、略

【分析】【分析】

微生物培養(yǎng)需要配置供其生長繁殖的營養(yǎng)基質(zhì)——培養(yǎng)基；培養(yǎng)基中一般含有水