左氧氟沙星片含量測(cè)定分析方法驗(yàn)證

左氧氟沙星片含量測(cè)定分析方法驗(yàn)證摘要：目的建立反相高效液相色譜法，測(cè)定左氧氟沙星片的含量。方法以C18柱為固定相；以醋酸銨高氯酸鈉溶液（取醋酸銨4.0g和高氯酸鈉7.0g，加水1300ml使溶解，用磷酸調(diào)節(jié)pH至2.2）-乙腈（83:17）為流動(dòng)相；稀釋劑：0.1mol/L鹽酸；檢測(cè)波長(zhǎng)為294nm。結(jié)果左氧氟沙星在0.04μg/ml~146.36μg/ml內(nèi)線性關(guān)系良好，相關(guān)系數(shù)1.0000；低，中，高3種濃度的平均回收率分別為98.4%，98.2%，98.3%。結(jié)論本方法準(zhǔn)確，簡(jiǎn)便，專屬性強(qiáng)，可用于左氧氟沙星片含量測(cè)定的考察。關(guān)鍵詞：左氧氟沙星；含量測(cè)定；分析；驗(yàn)證導(dǎo)言：通過下文實(shí)驗(yàn)采用高效液相色譜法對(duì)左氧氟沙星片的含量進(jìn)行測(cè)定，可以為左氧氟沙星片質(zhì)量控制提供有效的依據(jù)，并且這種測(cè)量方法的專屬性強(qiáng)，精密度好，準(zhǔn)確度高，能夠?yàn)樽笱醴承瞧|(zhì)量控制提供有效的定量方法。1儀器與試劑1.1實(shí)驗(yàn)儀器本次實(shí)驗(yàn)使用的儀器是島津LC-2030C液相色譜儀、BSA124S型賽多利斯電子天平、PB-10型賽多利斯酸度計(jì)、DK-S22型恒溫?cái)?shù)顯水浴鍋。1.2實(shí)驗(yàn)試劑、樣品及對(duì)照品本次實(shí)驗(yàn)使用的試劑是高氯酸鈉、醋酸銨、鹽酸、磷酸（均為分析純）、乙腈（色譜純）及去離子水；樣品為左氧氟沙星片（樂信樂美（海南）生物科技有限公司，批號(hào)：200301）；左氧氟沙星對(duì)照品（中國(guó)食品藥品檢定研究院，批號(hào)：130455-201607；含量：97.3%）2實(shí)驗(yàn)方法2.1實(shí)驗(yàn)的色譜條件本次實(shí)驗(yàn)使用的色譜柱為SHIMADZUC18色譜柱（規(guī)格：4.6*250mm，5μm），其柱溫為40℃，其流動(dòng)相為醋酸銨高氯酸鈉溶液（取醋酸銨4.0g和高氯酸鈉7.0g，加水1300ml使溶解，用磷酸調(diào)節(jié)pH至2.2）-乙腈（83:17）；流速為1.0ml/分鐘；進(jìn)樣量為10μl；檢測(cè)波長(zhǎng)為294nm。稀釋劑：0.1mol/L鹽酸。2.2配制供試品溶液的方法供試品貯備液：精密稱取本品細(xì)粉約0.14g（約相當(dāng)于左氧氟沙星，按C18H20FN3O4計(jì)0.1g），置100ml量瓶中，加稀釋劑適量，超聲使溶解，冷卻至室溫，用稀釋劑稀釋至刻度，搖勻，濾過，即得。供試品溶液：精密量取供試品儲(chǔ)備液1ml，至10ml量瓶中，加稀釋劑稀釋至刻度，搖勻，即得。2.3專屬性①未破壞試驗(yàn)：精密量取供試品儲(chǔ)備液1ml，至10ml量瓶中，加稀釋劑稀釋至刻度，搖勻，即得。②酸破壞試驗(yàn)：精密量取供試品儲(chǔ)備液1ml，至10ml量瓶中，加1mol/LHCl溶液1ml，輕輕搖勻，98℃水浴破壞6小時(shí)后，加1mol/LNaOH溶液1ml中和，用稀釋劑稀釋至刻度，搖勻，濾過，即得。③堿破壞試驗(yàn)：精密量取供試品儲(chǔ)備液1ml，至10ml量瓶中，加1mol/LNaOH溶液1ml，輕輕搖勻，98℃水浴破壞6小時(shí)后，加1mol/LHCl溶液1ml中和，用稀釋劑稀釋至刻度，搖勻，濾過，即得。④氧化破壞試驗(yàn)：精密量取供試品儲(chǔ)備液1ml，置10ml量瓶中，加3%過氧化氫溶液1ml，輕輕搖勻，90℃水浴破壞3小時(shí)后，用稀釋劑稀釋至刻度，搖勻，濾過，即得。⑤高溫破壞試驗(yàn)：精密量取供試品儲(chǔ)備液1ml，置10ml量瓶，用稀釋劑稀釋至刻度，搖勻，98℃水浴破壞6小時(shí)后，取出，放冷，濾過，即得。⑥光照破壞試驗(yàn)：精密量取供試品儲(chǔ)備液1ml，置10ml量瓶，用稀釋劑稀釋至刻度，搖勻，置光照度為4500lx±500lx、紫外照度1.5W/m2的強(qiáng)度下，放置1天，取出，濾過，即得。同法對(duì)空白溶液分別進(jìn)行上述破壞試驗(yàn)。精密量取上述溶液各10μl，分別注入液相色譜儀，記錄色譜圖。結(jié)果顯示，各破壞條件下，未破壞空白溶液及破壞后的空白溶液均對(duì)測(cè)試無(wú)干擾，各破壞溶液中雜質(zhì)峰與主峰均能達(dá)到基線分離，主峰峰純度高，物料保持平衡，表明本方法具有良好的專屬性。2.4線性精密稱取左氧氟沙星對(duì)照品50.14mg，精密稱定，置50ml量瓶中，加稀釋劑適量，超聲使溶解，冷卻至室溫，用稀釋劑稀釋至刻度，搖勻，作為對(duì)照品貯備液。精密量取對(duì)照品儲(chǔ)備液1ml，至100ml量瓶中，加稀釋劑稀釋至刻度，搖勻，精密量取1ml，至250ml量瓶中，加稀釋劑稀釋至刻度，搖勻，作為線性溶液1。精密量取對(duì)照品儲(chǔ)備液1.0ml，置20ml量瓶中，用稀釋劑稀釋至刻度，搖勻，作為線性溶液2。精密量取對(duì)照品儲(chǔ)備液1.5ml，置20ml量瓶中，用稀釋劑稀釋至刻度，搖勻，作為線性溶液3。精密量取對(duì)照品儲(chǔ)備液2.0ml，置20ml量瓶中，用稀釋劑稀釋至刻度，搖勻，作為線性溶液4。精密量取對(duì)照品儲(chǔ)備液2.5ml，置20ml量瓶中，用稀釋劑稀釋至刻度，搖勻，作為線性溶液5。精密量取對(duì)照品儲(chǔ)備液3.0ml，置20ml量瓶中，用稀釋劑稀釋至刻度，搖勻，作為線性溶液6。精密量取上述線性溶液各10μl，分別注入液相色譜儀，記錄色譜圖，并以主成分左氧氟沙星峰面積與其濃度計(jì)算線性回歸方程，求出相關(guān)系數(shù)r。結(jié)果顯示，在所驗(yàn)證濃度范圍（0.04μg/ml~146.36μg/ml）內(nèi)，主峰的峰面積與其相應(yīng)濃度呈現(xiàn)良好的線性關(guān)系，線性回歸方程為y=56393x+17111，相關(guān)系數(shù)r為1.0000。2.5回收率按處方量配制空白輔料溶液，精密稱取9份空白輔料各約4mg，分別置9個(gè)100ml量瓶中，1~3號(hào)瓶分別加入左氧氟沙星原料約8mg，加稀釋劑適量，超聲使溶解，冷卻至室溫，用稀釋劑稀釋至刻度，搖勻，用0.45μm濾膜過濾，取續(xù)濾液，作為80%回收率溶液；4~6號(hào)瓶分別加入左氧氟沙星原料約10mg，加稀釋劑適量，超聲使溶解，冷卻至室溫，用稀釋劑稀釋至刻度，搖勻，用0.45μm濾膜過濾，取續(xù)濾液，作為100%回收率溶液；7~9瓶分別加入左氧氟沙星原料約12mg，加稀釋劑適量，超聲使溶解，冷卻至室溫，用稀釋劑稀釋至刻度，搖勻，用0.45μm濾膜過濾，取續(xù)濾液，作為120%回收率溶液。另外精密稱取左氧氟沙星對(duì)照品約10mg，置100ml量瓶中，加稀釋劑適量，超聲使溶解，冷卻至室溫，用稀釋劑稀釋至刻度，搖勻，即得。平行配制2份溶液。精密量取對(duì)照品溶液和上述回收率溶液各10μl，分別注入到液相色譜儀中，記錄色譜圖，計(jì)算回收率，回收率%=測(cè)得量/加入量×100%。結(jié)果顯示，9份回收率溶液測(cè)得的回收率分別為98.55%，98.36%，98.22%，98.30%，97.95%，98.26%，98.31%，98.68%，98.03%，平均回收率為98.3%，RSD為0.2%，表明本方法準(zhǔn)確度良好。3討論3.1通過試驗(yàn)，確定了左氧氟沙星片的含量測(cè)定方法，測(cè)定結(jié)果可靠，方法簡(jiǎn)便，為左氧氟沙星片的質(zhì)量控制提供了依據(jù)。3.2通過200~400nm進(jìn)行掃描，左氧氟沙星對(duì)照品溶液溶液在294nm處有最大吸收，故選擇294nm為測(cè)定波長(zhǎng)。4結(jié)論實(shí)驗(yàn)室主要是使用高效液相色譜法測(cè)定左氧氟沙星片中左氧氟沙星的含量。此檢測(cè)方法的專屬性強(qiáng)，精密度好，準(zhǔn)確度高。本文以上研究主要是探討用反相高效液相色