【名師伴你行】2021屆高考生物二輪復(fù)習(xí)專題提能專訓(xùn)15基因工程、細(xì)胞工程

提能專訓(xùn)(十五)基因工程、細(xì)胞工程(老師用書獨(dú)具)1．植物葉肉細(xì)胞原生質(zhì)體的分別和培育的主要過程可用如圖所示圖解簡潔表示：eq\x(葉片)eq\o(→,\s\up17(a),\s\do15(洗凈、滅菌、切條、酶解))eq\x(原生質(zhì)體懸液)eq\o(→,\s\up17(b),\s\do15(過濾、離心))eq\x(純潔的原生質(zhì)體)eq\o(→,\s\up17(c),\s\do15(培育基中培育))eq\x(愈傷組織)eq\o(→,\s\up17(d))eq\x(胚狀體)eq\o(→,\s\up17(e))eq\x(植株)(1)培育胚狀體利用了________________這一項(xiàng)生物技術(shù)，胚狀體再連續(xù)培育，則可培育出完整的植株，這體現(xiàn)了________________。培育基中除了含有肯定的養(yǎng)分外，還必需含有________________等植物激素，還需要對(duì)培育基進(jìn)行嚴(yán)格的____________________。(2)假如愈傷組織是三七葉肉細(xì)胞培育產(chǎn)生的，若為了獲得三七的細(xì)胞產(chǎn)物，則只需培育到______________；若為了獲得三七的人工種子，則需要培育到______________。假如愈傷組織是棉花葉肉細(xì)胞培育產(chǎn)生的，通過基因工程要獵取抗蟲棉，目的基因?qū)朊藁ㄓ鷤M織細(xì)胞常用的方法是______________法。(3)從葉片的葉肉細(xì)胞到獲得胚狀體的過程中，必需要經(jīng)過______________。①無絲分裂'②有絲分裂'③減數(shù)分裂'④原代培育⑤傳代培育'⑥植物體細(xì)胞雜交'⑦細(xì)胞融合'⑧脫分化'⑨再分化答案：(1)植物組織培育植物細(xì)胞的全能性細(xì)胞分裂素、生長素滅菌(2)愈傷組織胚狀體農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化(3)②⑧⑨解析：(1)離體植物細(xì)胞通過脫分化形成愈傷組織，通過再分化形成具有根和芽的胚狀體，再通過細(xì)胞分裂、分化發(fā)育成一個(gè)完整的植株。該技術(shù)為植物組織培育，其原理為植物細(xì)胞的全能性。培育基的成分為水、無機(jī)鹽、維生素，氨基酸、蔗糖、植物激素(生長素和細(xì)胞分裂素等)等；培育基要求進(jìn)行嚴(yán)格的滅菌。(2)三七的細(xì)胞產(chǎn)物為細(xì)胞的代謝產(chǎn)物，將三七葉肉細(xì)胞培育到愈傷組織即可；獲得人工種子需培育至胚狀體；棉花為雙子葉植物，導(dǎo)入抗蟲基因常用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法。(3)離體葉肉細(xì)胞培育到胚狀體的過程中必需經(jīng)過脫分化和有絲分裂形成愈傷組織，再分化和有絲分裂形成具有根和芽的胚狀體。2．(2022·東城區(qū)檢測(cè))大腸桿菌pUC18質(zhì)粒是基因工程中常用的運(yùn)載體。某限制酶在此質(zhì)粒上的唯一酶切位點(diǎn)位于LacZ基因中，假如沒有插入外源基因，LacZ基因便可表達(dá)出β－半乳糖苷酶。當(dāng)培育基中含有IPTG和X－gal時(shí)，X－gal便會(huì)被β－半乳糖苷酶水解成藍(lán)色，大腸桿菌將形成藍(lán)色菌落。反之，則形成白色菌落。下圖表示利用此質(zhì)粒實(shí)施基因工程的主要流程。請(qǐng)分析并回答問題。(1)對(duì)已獲得的目的基因可利用________技術(shù)進(jìn)行擴(kuò)增。(2)目的基因插入質(zhì)粒構(gòu)建重組質(zhì)粒的過程中，需要DNA連接酶恢復(fù)________鍵。(3)將試管Ⅰ中的物質(zhì)和大腸桿菌共同置于試管Ⅱ的目的是__________；大腸桿菌需事先用Ca2＋進(jìn)行處理，目的是__________________________。(4)將試管Ⅱ中的菌液接種于選擇培育基上培育，培育基中應(yīng)含有大腸桿菌必需的養(yǎng)分物質(zhì)________________和生長因子，還應(yīng)加入IPTG、X－gal以及氨芐青霉素，其中加入氨芐青霉素的作用是篩選出__________________。(5)若觀看到培育基上消滅________色菌落，則說明大腸桿菌中已成功導(dǎo)入了重組質(zhì)粒。假如作為受體細(xì)胞的大腸桿菌也含有LacZ基因，則不利于重組質(zhì)粒的篩選，緣由是________________。答案：(1)PCR(2)磷酸二酯(3)進(jìn)行轉(zhuǎn)化使大腸桿菌細(xì)胞處于感受態(tài)(4)碳源、氮源、無機(jī)鹽、水導(dǎo)入pUC18質(zhì)粒的大腸桿菌(5)白無論大腸桿菌中是否導(dǎo)入重組質(zhì)粒，均會(huì)呈現(xiàn)藍(lán)色菌落3．依據(jù)相關(guān)信息回答問題。據(jù)報(bào)道，科學(xué)家發(fā)覺了“核糖開關(guān)”。核糖開關(guān)是自然界細(xì)菌、一些植物中自然?存在的、有調(diào)控作用的傳感器，位于細(xì)菌等生物體內(nèi)特定的非翻譯區(qū)RNA序列區(qū)域，核糖開關(guān)無需依靠任何蛋白質(zhì)而直接結(jié)合小分子代謝物，從而發(fā)生結(jié)構(gòu)變化，參與調(diào)控生物的基本代謝。借助核糖開關(guān)，這些細(xì)菌能“一對(duì)一”地識(shí)別氨基糖苷類抗生素，進(jìn)而產(chǎn)生相應(yīng)的酶，將抗生素滅活。長期以來，以慶大霉素和新霉素等為代表的氨基糖苷類抗生素，臨床上主要用于治療一些由“敏感需氧革蘭氏陰性桿菌”所導(dǎo)致的腦膜炎、肺炎和關(guān)節(jié)炎等感染，但具有“核糖開關(guān)”的細(xì)菌卻能導(dǎo)致此類抗生素失效，現(xiàn)在，人類有望通過阻擋核糖開關(guān)的功能，使細(xì)菌失去抗藥性。(1)核糖開關(guān)________(填“能”或“不能”)作為基因工程的載體，由于________；合成“核糖開關(guān)”需要________聚合酶。(2)若某種蛋白質(zhì)X經(jīng)過修飾后即能阻擋核糖開關(guān)的功能，人們可以通過修飾過的蛋白質(zhì)X的三維結(jié)構(gòu)推想其應(yīng)有的__________序列，進(jìn)而找到相對(duì)應(yīng)的________，再通過動(dòng)物細(xì)胞培育技術(shù)，獲得大量的修飾過的蛋白質(zhì)X。獲得蛋白質(zhì)X基因及將基因轉(zhuǎn)移至受體細(xì)胞的技術(shù)稱為________。(3)利用動(dòng)物細(xì)胞生產(chǎn)能阻擋核糖開關(guān)功能的蛋白質(zhì)，在培育的過程中，需要定期________，以防止細(xì)胞代謝產(chǎn)物對(duì)細(xì)胞自身造成危害。同時(shí)，還要接受培育皿或培育瓶，將其置于含有5%二氧化碳的培育箱中進(jìn)行培育，二氧化碳的主要作用是維持________。答案：(1)不能核糖開關(guān)是RNA，基因工程的載體是雙鏈DNARNA(2)氨基酸脫氧核糖核苷酸序列蛋白質(zhì)工程(3)更換培育液培育液的pH4．以下為人工合成reAnti基因，轉(zhuǎn)入豬成纖維細(xì)胞，做成轉(zhuǎn)基因克隆豬的培育過程示意圖，請(qǐng)據(jù)圖回答：(1)構(gòu)建的重組質(zhì)粒除了要有reAnti基因和標(biāo)記基因外，還要有________________和________。(2)過程③將重組質(zhì)粒導(dǎo)入豬胎兒成纖維細(xì)胞后，要通過DNA分子雜交技術(shù)，來檢測(cè)reAnti基因是否已重組到豬胎兒成纖維細(xì)胞的______________上。(3)從豬中取胎兒成纖維細(xì)胞，用______________處理，然后進(jìn)行分散培育。培育時(shí)，將培育瓶置于含________的混合氣體培育箱中進(jìn)行培育。(4)去核前的卵母細(xì)胞應(yīng)培育到______________期。其去核后與成纖維細(xì)胞通過電刺激后融合，形成重組細(xì)胞，再利用物理或化學(xué)方法刺激，使之完成細(xì)胞____________，在體外培育成重組早期胚胎。(5)在進(jìn)行過程⑦操作前，應(yīng)用激素對(duì)受體母豬進(jìn)行______________處理。答案：(1)(Anti基因的)啟動(dòng)子終止子(2)染色體DNA(3)胰蛋白酶(或膠原蛋白酶)95%空氣加5%CO2(4)MⅡ中分裂和發(fā)育(5)同期發(fā)情5．某質(zhì)粒上有SalⅠ、HindⅢ、BamHⅠ三種限制酶切割位點(diǎn)，同時(shí)還含有抗四環(huán)素基因和抗氨芐青霉素基因。利用此質(zhì)粒獲得轉(zhuǎn)基因抗鹽煙草的過程如圖所示，請(qǐng)回答下列問題。(1)將抗鹽基因?qū)霟煵菁?xì)胞內(nèi)，使煙草植株產(chǎn)生抗鹽性狀，這種新性狀(變異性狀)的來源屬于________。(2)假如將抗鹽基因直接導(dǎo)入煙草細(xì)胞，一般狀況下，煙草不會(huì)具有抗鹽特性，緣由是抗鹽基因在煙草細(xì)胞中不能________，也不能________。(3)在構(gòu)建重組質(zhì)粒時(shí)，應(yīng)選用________和________兩種酶對(duì)________和________進(jìn)行切割，以保證重組DNA序列的唯一性。(4)基因工程中的檢測(cè)篩選是一個(gè)重要的步驟。為篩選出導(dǎo)入了重組質(zhì)粒的農(nóng)桿菌，下圖表示運(yùn)用影印培育法(使一系列培育皿的相同位置上能消滅相同菌落的一種接種培育方法)檢測(cè)基因表達(dá)載體是否導(dǎo)入了農(nóng)桿菌。培育基除了含有細(xì)菌生長繁殖必需的成格外，培育基A和培育基B分別還含有________、________。從檢測(cè)篩選的結(jié)果分析，含有目的基因的是________菌落中的細(xì)菌。為了確定抗鹽煙草是否培育成功，既要用放射性同位素標(biāo)記的________作探針進(jìn)行分子雜交檢測(cè)，又要用________的方法從個(gè)體水平鑒定煙草植株的耐鹽性。(5)將轉(zhuǎn)入抗鹽基因的煙草細(xì)胞培育成完整的植株需要用______________技術(shù)，愈傷組織經(jīng)______________進(jìn)而形成完整植株，此過程除養(yǎng)分物質(zhì)外還必需向培育基中添加________。答案：(1)基因重組(2)復(fù)制表達(dá)(合成抗鹽基因的mRNA)(3)SalⅠHindⅢ質(zhì)粒含抗鹽基因的DNA(4)氨芐青霉素四環(huán)素(氨芐青霉素和四環(huán)素)4和6抗鹽基因肯定濃度的鹽水澆灌煙草植株(將煙草植株移栽到鹽堿地中)(5)植物組織培育細(xì)胞增殖和分化植物激素(生長素和細(xì)胞分裂素)6．基因工程和植物細(xì)胞工程技術(shù)在科研和生產(chǎn)實(shí)踐中有廣泛應(yīng)用，請(qǐng)據(jù)圖回答有關(guān)問題。(1)獵取目的基因的方法包括________(答一種即可)和用化學(xué)方法直接人工合成。(2)基因表達(dá)載體的組成除目的基因外，還必需有________和標(biāo)記基因。(3)①②過程接受最多的是農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法，緣由是農(nóng)桿菌中Ti質(zhì)粒上的________可轉(zhuǎn)移到受體細(xì)胞并整合到受體細(xì)胞的染色體DNA上，檢測(cè)目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)的方法是從轉(zhuǎn)基因生物中提取蛋白質(zhì)，用相應(yīng)的抗體進(jìn)行________。(4)圖中③④過程須在無菌條件下進(jìn)行，培育基中除加入養(yǎng)分物質(zhì)外，還需添加________等物質(zhì)，作用是促進(jìn)細(xì)胞分裂、生長、分化。(5)若要獵取轉(zhuǎn)基因植物人工種子，需培育到________階段，再進(jìn)行人工種皮的包裹；若用植物細(xì)胞實(shí)現(xiàn)目的基因所表達(dá)的蛋白質(zhì)類藥物的工廠化生產(chǎn)，培育到________階段即可。(6)從含有目的基因的受體細(xì)胞發(fā)育成完整的植物體依據(jù)的原理是____________________________________________。答案：(1)從基因文庫獵取、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增(答一種即可)(2)啟動(dòng)子、終止子(答全得分)(3)T-DNA(可轉(zhuǎn)移的DNA)抗原—抗體雜交(4)植物激素(植物生長調(diào)整劑)(5)胚狀體愈傷組織(6)植物細(xì)胞的全能性7．下面是一項(xiàng)“利用轉(zhuǎn)基因番茄生產(chǎn)人胰島素的方法”的專利摘要，請(qǐng)回答：本創(chuàng)造利用轉(zhuǎn)基因番茄作為生物反應(yīng)器生產(chǎn)人胰島素。所用的人胰島素基因是依據(jù)植物“偏愛”的密碼子來設(shè)計(jì)所含的密碼子，通過某方法合成若干DNA片段，拼接而成，重組DNA分子可通過農(nóng)桿菌介導(dǎo)的方法轉(zhuǎn)入番茄中，在番茄的果實(shí)中表達(dá)人胰島素。(1)本專利是接受________方法獲得目的基因。獲得的人胰島素基因與人體細(xì)胞中胰島素基因的堿基序列不同，但兩者所編碼的蛋白質(zhì)中氨基酸序列相同，緣由是_____________。要想在體外獲得大量該目的基因的片段，可以接受______技術(shù)。該技術(shù)中使用的關(guān)鍵酶是________；原料是四種脫氧核苷酸。(2)依據(jù)上述摘要，轉(zhuǎn)基因操作時(shí)所用的載體是________，載體上的________可以轉(zhuǎn)移至受體細(xì)胞，并且整合到受體細(xì)胞染色體的DNA上。(3)假如要檢測(cè)在受體細(xì)胞中是否存在目的基因可接受________技術(shù)，再經(jīng)________方法培育成個(gè)體。答案：(1)人工合成密碼子具有簡并性，基因序列不同，蛋白質(zhì)可以相同PCR熱穩(wěn)定性DNA聚合酶(或Taq酶)(2)農(nóng)桿菌的Ti質(zhì)粒T-DNA(3)DNA分子雜交組織培育8．基因工程被廣泛應(yīng)用于藥物制備、動(dòng)植物育種等，下圖所示為基因工程在動(dòng)物乳腺生物反應(yīng)器——轉(zhuǎn)基因山羊和抗蟲棉的培育過程。據(jù)圖回答：(1)在圖示①過程中，使用的限制酶能夠識(shí)別________的某種特定核苷酸序列，并且使每一條鏈中特定部位的兩個(gè)核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷開，從而獲得A。也可接受________(填技術(shù)名稱)從人的DNA分子或蘇云金芽孢桿菌中對(duì)已知序列的A進(jìn)行分別并擴(kuò)增。(2)基因工程的關(guān)鍵環(huán)節(jié)之一是構(gòu)建B，其完整結(jié)構(gòu)至少包括________等部分，在此過程中除了使用工具酶外，還需使用的工具是________。(3)在通過⑤過程形成轉(zhuǎn)基因抗蟲棉時(shí)，一般要用到植物組織培育技術(shù)，但若在③過程中接受________法則不需要；在形成轉(zhuǎn)基因山羊C的過程中，需要從雌性動(dòng)物體內(nèi)取出卵，在②過程中通過________將目的基因?qū)隷_______，在形成轉(zhuǎn)基因山羊的過程中除了基因工程技術(shù)外，還需要用到________技術(shù)。(4)由于轉(zhuǎn)基因表達(dá)產(chǎn)物存在于山羊的乳汁中。檢測(cè)其體內(nèi)是否消滅藥用蛋白，在分子水平上的檢測(cè)方法是從轉(zhuǎn)基因生物中提取蛋白質(zhì)，用________，表明目的基因已形成蛋白質(zhì)產(chǎn)品。答案：(1)雙鏈DNA分子PCR(或多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng))(2)目的基因、啟動(dòng)子、終止子、復(fù)制原點(diǎn)和標(biāo)記基因載體(3)花粉管通道顯微注射受精卵胚胎移植(4)相應(yīng)的抗體進(jìn)行抗原—抗體雜交，若有雜交帶消滅9．(2022·河南中原名校第一次聯(lián)考)藍(lán)色妖姬(藍(lán)玫瑰)因其顏色華貴而始終為人們所幻想，但玫瑰沒有產(chǎn)生藍(lán)色素的基因，無法生長藍(lán)色花瓣。下圖是利用藍(lán)三葉草中的藍(lán)色素基因培植藍(lán)玫瑰的過程(PstⅠ、SamⅠ、EcoRⅠ、ApaⅠ為四種限制酶)。請(qǐng)回答下列問題：(1)構(gòu)建表達(dá)載體A時(shí)，應(yīng)選用限制酶______________，基因工程中通常狀況下使用兩種不同酶同時(shí)處理質(zhì)粒和外源DNA，優(yōu)點(diǎn)是可以防止____________________。(2)為使藍(lán)色素基因在玫瑰細(xì)胞中高效表達(dá)，一般需要把藍(lán)色素基因插入表達(dá)載體A的________和終止子之間，將藍(lán)色素基因?qū)胧荏w細(xì)胞的常用方法是________。(3)要檢測(cè)藍(lán)色素基因是否插入到玫瑰細(xì)胞染色體DNA上，應(yīng)接受____________技術(shù)，在個(gè)體水平上是否需要檢測(cè)？________(填“是”或“否”)。(4)由玫瑰組織塊培育藍(lán)色妖姬過程中①②分別為________和________。答案：(1)PstⅠ、EcoRⅠ(答一個(gè)不給分)質(zhì)粒和目的基因自身連接環(huán)狀化(2)啟動(dòng)子農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法(3)DNA分子雜交否(4)脫分化再分化10．(2022·湖北荊州畢業(yè)班質(zhì)量檢查)口蹄疫是由RNA病毒引起的一種偶蹄動(dòng)物傳染病?？茖W(xué)家嘗試?yán)棉D(zhuǎn)基因番茄生產(chǎn)口蹄疫疫苗(其主要成分是該病毒的一種結(jié)構(gòu)蛋白VP1)，過程如下圖所示。請(qǐng)據(jù)圖回答下列問題：(1)圖示②成功構(gòu)建重組質(zhì)粒的過程中，需要用到的工具酶除限制性核酸內(nèi)切酶外，還需要______________。(2)圖示⑤代表的過程是________。經(jīng)過該過程形成的細(xì)胞所具有的主要特點(diǎn)是_________________。(3)若要檢測(cè)轉(zhuǎn)化成功的番茄植株，除檢測(cè)標(biāo)記基因的產(chǎn)物外，還可接受______________技術(shù)，檢測(cè)目的基因在番茄體內(nèi)是否轉(zhuǎn)錄。(4)圖示⑤⑥⑦代表的過程所涉及的生物工程技術(shù)是________________________________________________________。答案：(1)DNA連接酶(2)脫分化分裂力量強(qiáng)，分化程度低(3)分子雜交(4)植物細(xì)胞工程(或植物組織培育)11．(2022·太原階段測(cè)評(píng)二)如圖所示為動(dòng)物細(xì)胞培育過程中，動(dòng)物細(xì)胞增殖狀況的變化曲線(圖中B、D兩點(diǎn)表示經(jīng)篩選后連續(xù)培育)。請(qǐng)據(jù)圖回答：(1)OA段的培育稱為__________培育，AB段可能發(fā)生了__________現(xiàn)象，需要用__________酶處理使組織細(xì)胞分散開來。(2)G點(diǎn)之后的細(xì)胞能克服__________，并朝著__________的方向進(jìn)展。(3)為使進(jìn)行同體細(xì)胞或組織移植時(shí)細(xì)胞的核型不變，實(shí)際使用或冷凍保存的細(xì)胞應(yīng)為圖中__________的細(xì)胞。(4)動(dòng)物細(xì)胞培育和植物組織培育過程中，就細(xì)胞增殖、分化來說，動(dòng)植物細(xì)胞都要進(jìn)行__________，不同的是植物細(xì)胞還要進(jìn)行__________。(5)為制備單克隆抗體，需將__________注射到小鼠體內(nèi)，以此獵取__________細(xì)胞，同時(shí)可選取圖中__________點(diǎn)的細(xì)胞與該細(xì)胞融合形成雜交細(xì)胞，所選取的細(xì)胞，其細(xì)胞膜上的__________比正常細(xì)胞顯著削減。為篩選能夠產(chǎn)生單克隆抗體的雜交細(xì)胞，可用__________培育基達(dá)到目的。答案：(1)原代細(xì)胞接觸性抑制(接觸性抑制)胰蛋白(2)細(xì)胞壽命的自然極限，獲得不死性(含義對(duì)即可)等同于癌細(xì)胞(癌細(xì)胞)(3)B～C(4)細(xì)胞增殖(細(xì)胞分裂)脫分化和再分化(5)抗原反復(fù)(抗原)漿(效應(yīng)B)G糖蛋白選擇12．(2022·烏魯木齊診斷測(cè)試二)科學(xué)家從某耐鹽植物中得到耐鹽基因(R)，培育出耐鹽轉(zhuǎn)基因農(nóng)作物。回答下列問題：(1)在基因工程中，耐鹽基因(R)被稱為________。(2)假如用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法將R基因?qū)朕r(nóng)作物細(xì)胞，應(yīng)先將R基因插入農(nóng)桿菌的________中，然后用該農(nóng)桿菌感染農(nóng)作物細(xì)胞，將R基因插入農(nóng)作物細(xì)胞的________上。(3)上述過程中用到的DNA連接酶分為兩類，其中T4DNA連接酶既能連接雙鏈DNA分子片段的________，也能連接________。DNA連接酶的功能是連接兩個(gè)脫氧核苷酸之間的________。(4)若得到的耐鹽轉(zhuǎn)基因農(nóng)作物的基因類型有甲、乙兩種，R基因的整合位點(diǎn)如圖(只考慮其中的兩對(duì)染色體，R基因都能正常表達(dá))。讓植株自花傳粉(植株的減數(shù)分裂正常，且不考慮交叉互換)，會(huì)產(chǎn)生含兩個(gè)R基因配子的植株為圖________類型；若子代耐鹽植株所占比例為100%，則R基因的整合位點(diǎn)屬于圖________類型。答案：(1)目的基因(2)Ti質(zhì)粒的T-DNA染色體DNA(3)黏性末端平末端磷酸二酯鍵(4)乙甲13．(2022·山東濰坊高三四月模擬)下圖表示應(yīng)用現(xiàn)代生物技術(shù)制備H7N9病毒單克隆抗體的流程，請(qǐng)回答下列問題：(1)①過程表示____________________，②過程用到的工具酶是______________。(2)構(gòu)建基因表達(dá)載體時(shí)，目的基因的首端必需含有__________________，③過程常用的方法是____________________，目的基因能否在受體細(xì)胞中穩(wěn)定遺傳的關(guān)鍵是__________________。(3)從分子水平上鑒定目的基因是否轉(zhuǎn)錄可接受________技術(shù)，對(duì)于轉(zhuǎn)基因成功的細(xì)胞Ⅱ還要進(jìn)行克隆化培育和________檢測(cè)，經(jīng)多次篩選獲得足夠數(shù)量的該類細(xì)胞。(4)細(xì)胞Ⅰ是________，細(xì)胞Ⅱ的特點(diǎn)是______________。(5)若要預(yù)防H7N9禽流感，可用圖中的__________作為疫苗。答案：(1)逆轉(zhuǎn)錄限制性核酸內(nèi)切酶(限制酶)(2)啟動(dòng)子顯微注射法轉(zhuǎn)基因生物的DNA上是否插入了目的基因(3)分子雜交抗體(4)漿細(xì)胞既能無限增殖，又能產(chǎn)生抗體(5)抗原蛋白解析：本題考查基因工程及單克隆抗體制備的學(xué)問，意在考查能理解所學(xué)學(xué)問的要點(diǎn)，把握學(xué)問間的內(nèi)在聯(lián)系，能用文字、圖表以及數(shù)學(xué)方式等多種表達(dá)形式精確?????地描述生物學(xué)方面的內(nèi)容。能運(yùn)用所學(xué)學(xué)問的觀點(diǎn)，通過比較、分析與綜合等方法對(duì)某些生物學(xué)問題進(jìn)行解釋、推理，做出合理的推斷或得出正確的結(jié)論的力量。(1)據(jù)圖分析可知，①過程表示逆轉(zhuǎn)錄過程，②為從DNA上獵取目的基因的過程，需要的工具酶是限制性核酸內(nèi)切酶。(2)基因表達(dá)載體主要由目的基因、標(biāo)記基因、啟動(dòng)子、終止子組成。③過程為重組DNA導(dǎo)入受體細(xì)胞，常用顯微注射法，目的基因能否在受體細(xì)胞中穩(wěn)定遺傳的關(guān)鍵是轉(zhuǎn)基因生物的DNA上是否插入了目的基因。(3)可接受分子雜交技術(shù)鑒定目的基因是否轉(zhuǎn)錄，轉(zhuǎn)基因成功的細(xì)胞Ⅱ要進(jìn)行抗體檢測(cè)。(4)小鼠受抗原刺激后，可由B細(xì)胞增殖分化形成漿細(xì)胞，即細(xì)胞Ⅰ，漿細(xì)胞可產(chǎn)生抗體。細(xì)胞Ⅱ?yàn)殡s交瘤細(xì)胞，既能無限增殖，又能產(chǎn)生抗體。(5)圖中抗原蛋白是H7N9病毒基因表達(dá)的產(chǎn)物，可作為疫苗預(yù)防H7N9禽流感。14．(2022·江蘇揚(yáng)州中學(xué)高三模擬)重疊延長PCR技術(shù)是一種通過寡聚核苷酸鏈之間重疊的部分相互搭橋、互為模板，通過多次PCR擴(kuò)增，從而獲得目的基因的方法。該技術(shù)在擴(kuò)增較長片段的DNA、不同來源的DNA片段拼接、基因的定點(diǎn)誘變等方面具有廣泛的應(yīng)用前景。如圖是利用重疊延長PCR技術(shù)擴(kuò)增某目的基因的過程。其主要設(shè)計(jì)思路是用具有互補(bǔ)配對(duì)片段的引物(圖中引物2、引物3)，分別PCR，獲得有重疊鏈的兩種DNA片段，再在隨后的擴(kuò)增反應(yīng)中通過重疊鏈的延長獲得目的基因。結(jié)合所學(xué)學(xué)問，分析下列問題。(1)引物中G＋C的含量影響著引物與模板DNA結(jié)合的穩(wěn)定性，引物中G＋C的含量越高，結(jié)合穩(wěn)定性________________________。(2)在第一階段獲得兩種具有重疊片段DNA的過程中，必需將引物1、2和引物3、4置于不同反應(yīng)系統(tǒng)中，這是由于_________。(3)引物1、引物2組成的反應(yīng)系統(tǒng)和引物3、引物4組成的反應(yīng)系統(tǒng)中均進(jìn)行一次復(fù)制，共產(chǎn)生________種雙鏈DNA分子。(4)在引物1、引物2組成的反應(yīng)系統(tǒng)中，經(jīng)第一階段形成圖示雙鏈DNA至少要經(jīng)過________次復(fù)制。(5)若利用微生物擴(kuò)增該目的基因，其基本步驟包括：________________、__________________、微生物的篩選和培育、從菌群中獵取目的基因。答案：(1)越高(2)引物2和引物3存在互補(bǔ)配對(duì)片段，置于同一反應(yīng)系統(tǒng)中它們會(huì)發(fā)生結(jié)合而失去作用(3)3(4)2(5)目的基因與載體結(jié)合(基因表達(dá)載體的構(gòu)建)將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞解析：本題考查基因工程的相關(guān)學(xué)問，意在考查理解所學(xué)學(xué)問的要點(diǎn)，把握學(xué)問間的內(nèi)在聯(lián)系的力量。(1)G與C配對(duì)需要形成三個(gè)氫鍵，所以引物中G＋C的含量越高，結(jié)合的穩(wěn)定性越高。(2)引物2和引物3存在互補(bǔ)配對(duì)片段，置于同一反應(yīng)系統(tǒng)中它們會(huì)發(fā)生結(jié)合而失去作用，所以必需將引物1、2和引物3、4置于不同反應(yīng)系統(tǒng)中。(3)由圖分析可知，共產(chǎn)生3種雙鏈DNA分子。(4)在引物1、引物2組成的反應(yīng)系統(tǒng)中，經(jīng)第一階段形成圖示雙鏈DNA至少要經(jīng)過兩次復(fù)制。(5)擴(kuò)增目的基因的基本步驟包括基因與載體結(jié)合(基因表達(dá)載體的構(gòu)建)、將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞、微生物的篩選和培育，從菌群中獵取目的基因。15．(2022·東北三校聯(lián)考)抗凍蛋白是一類抑制冰晶生長的蛋白質(zhì)，能降低水溶液的冰點(diǎn)，從而導(dǎo)致水溶液的熔點(diǎn)和冰點(diǎn)消滅差值，這個(gè)溫度差稱為熱滯值。昆蟲抗凍蛋白的熱滯值最高，為3℃～6℃，魚的熱滯值為0.7℃(1)基因工程的核心步驟是________，這一過程需要的酶是________。將AFPS基因?qū)霟煵菁?xì)胞中，常用________法，這是由于煙草屬于________(填“單”或“雙”)子葉植物，當(dāng)植物體受到損傷時(shí)，傷口處的細(xì)胞會(huì)分泌大量的________，此操作過程中使用的運(yùn)載體是________。(2)若檢測(cè)AFPS基因是否整合到煙草的染色體上，一般接受________技術(shù)，若檢測(cè)是否產(chǎn)生抗凍蛋白，一般接受________方法檢測(cè)雜交帶；還可以從________生物學(xué)水平進(jìn)行抗凍鑒定。(3)生產(chǎn)上可將上述轉(zhuǎn)基因煙草大范圍種植，提高了農(nóng)夫的經(jīng)濟(jì)收入，從生態(tài)工程角度分析，主要體現(xiàn)了________原理。答案：(1)基因表達(dá)載體的構(gòu)建限制酶和DNA連接酶農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化雙酚類化合物Ti質(zhì)粒(2)DNA分子雜交抗原—抗體雜交個(gè)體(3)整體性解析：本題考查基因工程和生態(tài)工程，難度中等。(1)構(gòu)建基因表達(dá)載體是基因工程的核心步驟，這一過程需要限制酶和DNA連接酶；將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞常用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法；農(nóng)桿菌能感染雙子葉植物；當(dāng)植物體受到損傷時(shí)，傷口處的細(xì)胞會(huì)分泌大量的酚類化合物，吸引農(nóng)桿菌移向這些細(xì)胞；這一操作過程中使用的運(yùn)載體是農(nóng)桿菌的Ti質(zhì)粒。(