氣相色譜法檢查法標準操作規(guī)程

氣相色譜法標準操作規(guī)程QC-SOP-00012-00PAGE第2頁共3頁第1頁共3頁XXX有限公司GMP文件文件名稱氣相色譜法標準操作規(guī)程編碼QC-SOP-000X-00編制人審核人批準人編制日期年月日審核日期年月日批準日期年月日頒發(fā)部門質量部版本第四版實施日期年月日分發(fā)部門質量部1目的制定氣相色譜法標準操作規(guī)程,規(guī)范氣相色譜法檢驗操作。2適用范圍適用于氣相色譜法檢查。3責任人QC員4內容4.1制定依據《中國藥典》2010年版二部附錄ⅤE“氣相色譜法”及《中國藥品檢驗標準操作規(guī)范》2010版“氣相色譜法”4.2實驗環(huán)境、儀器與用具4.2.1氣相色譜儀：主要包括載氣源、進樣部分、色譜柱、柱溫箱、檢測器和數據處理系統(tǒng)等組成。主機儀器應經過定期檢定，且在檢定有效期內，并符合有關規(guī)定。4.2.2環(huán)境條件：應在常溫且干燥少灰塵的地方使用。4.3檢查人員條件4.3.1基本理論：了解并熟悉有關色譜分析的基礎知識，并對所用儀器及工作站有全面了解。4.3.2基本技能：應熟悉對儀器的一般要求和常用色譜條件的設置包括進樣部分、色譜柱及檢測器等的配置，及對樣品的處理及測定。4.4對儀器的一般要求4.4.1載氣源：氣相色譜法的流動相為氣體，稱為載氣。氦、氮和氫可用作載氣，多由高壓鋼瓶或高純度氣體發(fā)生器提供。常用載氣為氮氣。4.4.24.4.2.1溶液直接進樣：采用微量注射器，或有分流裝置的氣化室進樣。此時進樣口溫度應該高于柱溫30～50°C，進樣量一般不超過數微升。采用毛細管柱4.4.2.2頂空進樣：適合于固體和液體供試品中揮發(fā)性組分的分離和測定。樣品配置好之后應該待氣液平衡后由進樣器自動吸取一定體積的頂空氣注入色譜柱中。4.4.3色譜柱：色譜柱多為填充柱或毛細管柱，填充柱材質多為不銹鋼或玻璃。常用載體為經酸洗并硅烷化處理的硅藻土或高分子多孔小球，常用固定液有甲基聚硅氧烷、聚乙二醇等。毛細管柱的材質多為玻璃或石英，內壁或載體經涂漬或交聯固定液。常用固定液有甲基聚硅氧烷，不同比例組成的苯基甲基聚硅氧烷，聚乙二醇等。4.4.4柱溫箱：柱溫箱控溫精度應在±1°C，且溫度波動小于每小時0.14.4.5檢測器：最常用為火焰離子化檢測器（FID）。該檢測器對碳氫化合物響應良好，適合檢測大多數的藥物。該檢測器用氫氣做燃氣，空氣做助燃氣。檢測器溫度應該高于柱溫，并不得低于150°C，以免水汽凝結，通常為250～350°C，并依據儀器維護保養(yǎng)計劃4.4.6數據處理系統(tǒng)：為達到系統(tǒng)適用性要求，可對色譜柱內徑、長度、載體牌號、粒度、固定液涂布濃度、載氣流速、柱溫、進樣量、檢測器的靈敏度作適當改變。一般色譜圖約于30分鐘內記錄完畢4.5系統(tǒng)適用性試驗4.5.1系統(tǒng)適用性通常包括理論板數、分離度4.5.1.1理論板數：評價色譜柱的分離效能。多為待測組分或內標物質的理論板數。4.5.1.2分離度：評價待測組分與相鄰共存物或難分離物質之間的分離程度，是衡量色譜系統(tǒng)效能的關鍵指標。且待測組分與相鄰共存物之間的分離度應大于1.5。4.5.1.3重復性：用于評價連續(xù)進樣中，色譜系統(tǒng)響應值的重復性能。外標法多用對照品溶液連續(xù)進樣5次，其峰面積測量值的相對標準偏差應不大于2.0%；內標法通常配制相當于80%、100%和120%的對照品溶液，加入規(guī)定量的內標溶液，配制成3種不同濃度的溶液，分別至少進樣24.5.1.4拖尾因子：用于評價色譜峰的對稱性。峰高法定量時T應在0.95～1.05之間。峰面積法定量時，不能有嚴重拖尾。4.6操作方法4.6.14.6.1.1精密量取對照品和內標物質，分別配成溶液，精密量取適量，混合配成校正因子測定用對照品溶液。進樣后記錄色譜圖，測量對照品和內標物質的峰面積或峰高，計算校正因子。再取各品種項下含有內標物質的供試品溶液，進樣后記錄色譜圖，測量供試品中待測成分和內標物質的峰面積或峰高，計算含量。4.6.1.2采用內標法，可避免因樣品前處理及進樣體積誤差對測定結果的影響。4.6.24.6.2.1精密量（稱）取對照品和供試品，配制成溶液，分別精密取一定量，進樣后計算。4.6.2.2外標法測定成分或雜質含量時，以定量環(huán)或自動進樣器進樣為好。4.6.3標準溶液加入法：精密量取某個雜質或待測成分對照品適量，配制成適當濃度的對照品溶液，取一定量，精密加入到供試品溶液中，根據外標法或內標法測定雜質或主成分含量，再扣除加入的對照品溶液含量，即得供試品溶液中某個雜質和主成分4.6.4面積歸一化法：按各品種項下規(guī)定，配制供試品溶液，取一定量注入儀器，記錄色譜圖。測量各峰的面積和色譜圖上除溶劑峰以外的總色譜峰面積，計算各峰面積占總峰面積的百分率4.7注意事項4.7.1手動進樣法多用內標法定量以減小進樣誤差。4.7.2頂空進樣時，可采用標準溶液加入法以消除基質效應的影響。4.7.3進樣密封硅橡膠墊應先加熱老化，除去揮發(fā)性物質再用，并注意經常更換，另外也要注意經常更換襯管上端的密封硅橡膠圈。4.7.4一般情況下，氮氣（尾吹氣+載氣）、空氣和氫氣三者的比例接近或等于1：1：10（如：氮氣30～40ml/min，空氣300～400ml/min，氧氣30～40ml/min）時，FID的靈敏度最高。4.7.5為防止檢測器被污染，檢測器溫度設置應不低于色譜柱實際工作的最高溫度，一般情況下，檢測器的溫度不應低于150°C4.7.6新毛細管柱需要老化，以除去殘留溶劑及低分子量的聚合物。此外，用過的柱也應定期老化，尤其是出現基線漂移，某些色譜峰開始拖尾時，應該進行老化以除去樣品中的難揮發(fā)物在柱