DB12T 885-2019 植物提取物中原花青素的測定 紫外可見分光光度法

植物提取物中原花青素的測定紫外/可見天津市市場監(jiān)督管理委員會發(fā)布I本標準依據(jù)GB/T1.1-2009給出的規(guī)則起草。本標準由天津市農(nóng)業(yè)科學(xué)院提出并歸口。本標準起草單位：天津市農(nóng)業(yè)質(zhì)量標準與檢測技術(shù)研究所。本標準主要起草人：劉征輝、趙琳琳、魏靜娜、張強、趙云平、薛天凱、徐石勇、鄭貴忠。1本標準規(guī)定了采用紫外/可見分光光度法測定植物提取物中原花青素含量的原理、試劑材料、儀器設(shè)備、分析步驟、分析結(jié)果表述和精密度。本標準適用于植物提取物中原花青素的測定。2規(guī)范性引用文件下列文件對于本文件的應(yīng)用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，僅注日期的版本適用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本(包括所有的修改單)適用于本文件。GB/T6682分析實驗室用水規(guī)格和試驗方法。原花青素本身無色，但經(jīng)過用熱酸處理后，可以生成深紅色的花青素離子，用分光光度法測定原花青素在水解過程中生成的花青素離子，計算試樣中原花青素含量。4試劑和材料4.1.1甲醇(CH?OH4.1.3鹽酸(HCL):純度為35%～37%(g/g)。4.1.4硫酸鐵銨(NH?Fe(SO?)2·12H?O)。4.1.5水(H?O):GB/T6682規(guī)定的一級水。4.2試劑配制4.2.1鹽酸-正丁醇溶液：取正丁醇50mL,于100mL容量瓶中，準確量取鹽酸5mL,用正丁醇定容，搖4.2.22mol/L鹽酸溶液：準確量取鹽酸20mL于燒杯中，加100mL水，搖勻，備用。4.2.3硫酸鐵銨溶液：稱取硫酸鐵銨2.0g于三角瓶中，加2mol/L鹽酸溶液，放置于沸水浴中，至其全部溶解后，取出放置至室溫，將其轉(zhuǎn)移至100mL容量瓶中用2mol/L鹽酸溶液定容至刻度。4.3標準品原花青素標準品純度≥95%,或經(jīng)國家認證并授予標準物質(zhì)證書的標準物質(zhì)。24.4.1原花青素標準儲備液(1.0mg/mL):取原花青素標準品10mg,精密稱定，置10mL容量瓶中，4.4.2原花青素標準系列工作液：準確量取原花5.1紫外分光光度計，配1cm比色杯，波長范圍(110～900)nm。5.4天平：感量0.01mg。5.5具蓋安瓿瓶：10mL。5.6封口鉗。5.7容量瓶：10mL、50mL、100mL。6分析步驟取樣品(10～100)mg,精密稱定，置50mL容量瓶中，加入30mL甲醇，超聲處理(功率250W,頻率50kHz)20min,放至室溫后，加甲醇至刻度，搖勻，離心或放至澄清后取上清液作為供試品溶液。6.2測定準確吸取原花青素標準系列工作液各1mL,置于安瓿瓶中，精密加入鹽酸-正丁醇溶液(4.2.1)6mL,硫酸鐵銨溶液(4.2.3)0.2mL,混勻，用封口鉗將其密封，置沸水中加熱40min后，取出，立即置冰精密吸取6.1項下的供試品溶液1mL,置于安瓿瓶中，然后按照標準曲線制作步驟執(zhí)行。以相應(yīng)試7分析結(jié)果表述試樣中原花青素的含量按式(1)計算：3X——試樣中原花青素的含量，單位為克每100克