王旭西安分析方法驗證文字稿

中藥分析方法驗證的內容和要求國家藥典委員會王旭中藥分析方法驗證的特殊性與國際協(xié)調方法接軌（ICH）

中藥方法學驗證的特點分析方法的建立與分析方法驗證中藥提取純化技術要求提取方法提取條件提取方式分離純化液-液萃取法固液萃取法沉淀法中藥分析方法驗證實驗項目以前方法回收率精密度（儀器精密度）重復性專屬性

線性關系和線性范圍

2005版藥典一部指導原則準確性（回收率）精密度重復性中間精密度重現(xiàn)性專屬性檢測限定量限線性范圍耐用性驗證的目的證明采用的方法是否適合于相應的檢測方法新建立的檢測方法、改變原檢測方法、工藝變更、處方變更等均須驗證驗證過程和結果均應記載在標準起草或修訂說明中需驗證的分析方法類型鑒別限量檢查含量測定溶出度、釋放度需控制的殘留物、添加物等需驗證的分析方法類型

①已有重現(xiàn)性驗證，不需驗證中間精密度。

②重現(xiàn)性只有在該分析方法將被法定標準采用時做。

③如一種方法不夠專屬，可用其他分析方法予以補充。準確度(Accuracy)可用已知純度的對照品做加樣回收測定，即于已知被測成分含量的供試品中再精密加入一定量的已知純度的被測成分對照品，依法測定。用實測值與供試品中含有量之差，除以加入對照品量計算回收率。準確度(Accuracy)在加樣回收試驗中須注意對照品的加入量與供試品中被測成分含有量之和必須在標準曲線線性范圍之內；加入的對照品的量要適當，過小則引起較大的相對誤差，過大則干擾成分相對減少，真實性差回收率%=（C-A）/B×100%

式中A為供試品所含被測成分量；

B為加入對照品量；

C為實測值。準確度(Accuracy)數(shù)據要求在規(guī)定范圍內，取同一濃度的供試品，用6個測定結果進行評價；或設計3個不同濃度，每個濃度各分別制備3份供試品溶液進行測定，用9個測定結果進行評價，一般中間濃度加入量與所取供試品含量之比控制在1:1左右。準確度(Accuracy)

報告的數(shù)據：樣品中待測成分含有量對照品加入量測定量回收率計算值（%）相對標準偏差（RSD%）準確度(Accuracy)試驗方法：測定份數(shù)的選擇樣品取樣量和對照品加入量的計算對照品加入方法的選擇測定結果的計算結果判定實驗中應注意的問題

精密度（Precision）

精密度系指在規(guī)定的測試條件下，同一個均勻供試品，經多次取樣測定所得結果之間的接近程度

包括：

重復性(Repeatability)

中間精密度(Intermediateprecision)

重現(xiàn)性(Reproducibility)重復性(Repeatability)定義:

在相同操作條件下，由同一個分析人員在較短的間隔時間內測定所得結果的精密度實驗要求：在規(guī)定范圍內，取同一濃度的樣品，用6個測定結果進行評價；或設3個不同濃度9份樣品，用9個測定結果進行評價

重復性(Repeatability)

試驗方法：測定份數(shù)的選擇樣品取樣量的設計結果判定實驗中應注意的問題中間精密度

(Intermediateprecision)

在同一個實驗室，不同時間由不同分析人員,用不同設備測定結果之間的精密度，稱為中間精密度。考察的目的：考察隨機變動因素對精密度的影響考察的變動因素:不同時間不同分析人員不同設備中間精密度

(Intermediateprecision)實驗方法結果判定重現(xiàn)性(Reproducibility)定義：在不同實驗室由不同分析人員、不同設備測定結果之間的精密度

考察的目的：當分析方法將被法定標準采用時，應進行重現(xiàn)性試驗報告的數(shù)據：標準偏差、相對標準偏差或可信限

專屬性（Specificity

）專屬性系指在其他成分可能存在下，采用的方法能正確測定出被測成分的特性。鑒別試驗、限量檢查、含量測定等方法均應考察其專屬性。專屬性（Specificity）專屬性有以下含義：鑒別：確證被測物是否符合其特性。檢查：確保采用的分析方法可檢出被測物中雜質或應控制物的準確含量，如有關物質、有毒成分、重金屬、溶劑殘留量等。含量測定：提供樣品中被測物含量的準確結果。專屬性（Specificity）鑒別應能與可能共存的物質或結構相似化合物區(qū)分。不含被測成分的供試品，以及結構相似或組分中的有關化合物，均不得干擾測定顯微鑒別、色譜光譜鑒別等應附相應的代表性圖象或圖譜。專屬性（Specificity）含量測定和限量檢查以不含被測成分的供試品（除去含待測成分藥材或不含待測成分的模擬復方）試驗說明方法的專屬性。并標明相關成分在圖中的位置，色譜法中的分離度應符合要求。必要時可采用二極管陣列檢測或質譜檢測進行驗證專屬性（Specificity）試驗方法：陰性干擾試驗色譜純度試驗易混淆試驗結果判定檢測限

（LimitofDetection，LOD)

檢測限系指供試品中被測物能被檢測出的最低量。檢測限

（LimitofDetection，LOD)實驗方法目測法理化反應薄層色譜法信噪比法偏差計算法定量限

（LimitofQuantitative,LOQ）

定量限系指供試品中被測成分能被定量測定的最低量，其測定結果應具一定準確度和精密度。用于限量檢查的定量分析方法應確定定量限。

定量限

（LimitofQuantitative,LOQ）實驗方法目測法理化反應薄層色譜法信噪比法偏差計算法線性（Linearity）

線性系指在設計的范圍內，測試結果與供試品中被測物濃度直接呈正比關系的程度。

線性（Linearity）應在方法允許的盡可能寬的范圍內測定線性關系。可用一貯備液經精密稀釋，或分別精密稱樣，制備一系列供試品的方法進行測定，至少制備5個濃度的供試品，其最低濃度可約為定量限濃度。以測得的響應信號作為被測物濃度的函數(shù)作圖，觀察是否呈線性，再用最小二乘法進行線性回歸。如響應信號與濃度不呈線性關系，必要時可經數(shù)學轉換，再進行線性回歸計算。數(shù)據要求：應列出回歸方程、相關系數(shù)和線性圖。線性（Linearity）實驗方法測定濃度的基本要求配制方式結果判定范圍（Range）

范圍系指能達到一定精密度、準確度和線性，測試方法適用的高低限濃度或量的區(qū)間。范圍應根據分析方法的具體應用和線性、準確度、精密度結果及要求確定。

范圍（Range）實驗項目限度范圍含量測定標示量90-110%80-120%雜質檢查限度值限度值的50-120%溶出度限度值限度值的±20%

含量均勻度測試濃度測試濃度的70-130%

范圍（中藥和復方制劑）實驗方法樣品和對照取樣的確定測定方法的確定結果判定

耐用性（Robustness）

耐用性系指在測定條件有小的變動時，測定結果不受影響的承受程度，為把方法用于常規(guī)檢驗提供依據開始研究分析方法時，就應考慮其耐用性。如果測試條件要求苛刻，則應在方法中寫明

耐用性（Robustness）典型的變動因素

被測溶液的穩(wěn)定性樣品提取方式時間分離純化耐用性耐用性（Robustness）被測溶液的穩(wěn)定性實驗操作和考察項目液相色譜和氣相色譜薄層色譜結果判定耐用性（Robustness）分離純化的耐用性實驗操作和考察項目結果判定耐用性（Robustness）

薄層色譜考察項目和具體操作要求薄層板的考察

溫度考察濕度考察

耐用性