DB51T 3064-2023 中國大鯤野外種群及棲息地調(diào)查技術(shù)規(guī)程　　

DB512023-06-19發(fā)布四川省市場監(jiān)督管理局發(fā)布I 1 1 1 2 2 4 4 5 6 7 8 91本文件適用于對四川省行政范圍內(nèi)中國大鯢野外種群及棲息HJ710.8生物多樣性觀測技術(shù)導(dǎo)則淡水底棲大型無環(huán)境DNA（e-DNA）調(diào)查法envi24.2中國大鯢的主要形態(tài)學(xué)性狀4.4中國大鯢棲息地的主要環(huán)境因子體流速、水體濁度、水溫、總磷、總氮、氨氮、總硬度、溶解氧、總堿度、水體pH、電4.5中國大鯢及其棲息地的受脅因素包括道路建設(shè)、砂石采挖、涉水工程建設(shè)、農(nóng)牧漁業(yè)活動、污染類型、污的樣線設(shè)置應(yīng)為長500m~1000m，寬離岸2m，小型河流（長度小于5km，河寬小于應(yīng)為長200m~500m，寬為整應(yīng)在天黑后進行。調(diào)查開始后，3個~4個調(diào)查者并排沿著河流由下游至3昏，收網(wǎng)時間為次日早上6點。誘餌可選擇雞腸，豬肝、沙丁魚等。網(wǎng)籠陷阱調(diào)查法不宜在大鯢的繁殖季節(jié)使用。相關(guān)調(diào)查結(jié)果參照附錄A進行填寫。該方法應(yīng)在白天進行。在樣線中水深大于1m,流速小于1m/s且有大石塊分布的點取e-DNA水樣，取樣點設(shè)置為每條樣線3個。采用清潔劑清洗并用采樣點河水潤洗過的容器(4L~5L塑料瓶)取水體表面以下2cm~5cm的水樣4L。采樣人員應(yīng)佩戴手套，且每次采樣應(yīng)更換手套。每個點取兩瓶水樣，用孔徑為0.45μm的硝酸纖維濾紙(或玻璃纖維濾紙)在真空抽濾機過濾(玻璃設(shè)備應(yīng)提前高溫滅菌處理),濾膜保存在95%無水乙醇中用作后續(xù)分析(必要時可以更換濾膜，但所有濾膜均應(yīng)保存在95%無水乙醇中)。相關(guān)調(diào)查結(jié)果參照附錄B進行填寫。對采集到的個體編號，采用軟尺和游標卡尺測量其11個外部形態(tài)學(xué)性狀(如圖1所示),采用便攜外部寄生蟲等，并參照附錄D填寫。測量人員均需佩戴一次性橡膠手套，并在每次測量前更換。圖1中國大鯢形態(tài)學(xué)測量示意圖采用無菌棉簽采集口腔粘液或體表粘液，其次可采用剪尾低損傷取樣。樣品采集后用95%的乙醇5.4.1調(diào)查時間4棲息地調(diào)查在白天進行。在調(diào)查河流的1km樣線測量9個點的棲息地微生境環(huán)境因子（上、中、下生物按其豐富程度分級為高、中、低三個等級；水質(zhì)指標（水溫、濁度、電導(dǎo)率、pH、溶解氧、總硬），5觀測者：卵6海拔：經(jīng)度：緯度：序號位點號注：DNA提取結(jié)果和PCR檢測結(jié)果都以7省縣村別間業(yè)鯢目擊次目擊次目擊式大鯢野外種群數(shù)量大鯢野外種對大鯢保護大鯢保護的89利用類型(①河岸兩側(cè)無耕作土