生物制品及其應(yīng)用

1、第十章  生物制品及其應(yīng)用§10-1  免疫診斷和免疫防治一、免疫診斷與檢測（一）免疫血清學(xué)技術(shù)診斷與檢測1疾病診斷凝集試驗 沉淀試驗 中和試驗2妊娠診斷間接凝集試驗或間接凝集抑制試驗間接血凝抑制試驗瓊脂擴(kuò)散試驗等3生物活性物質(zhì)的超微定量   對動物、植物和昆蟲體內(nèi)微量激素、白細(xì)胞介素（IL）等生物活性物質(zhì)的超微量測定。4物種鑒定分析物種鑒定和生物分類的依據(jù)用于人和動物血型的分類與鑒定。5免疫增強(qiáng)藥物和疫苗研究研究疫苗免疫效力評價免疫增強(qiáng)藥物的功效6免疫診斷與高新技術(shù)結(jié)合  （二）變態(tài)反應(yīng)診斷  遲發(fā)型變態(tài)反應(yīng)常用于診斷結(jié)核

2、分支桿菌、鼻疽桿菌、布氏桿菌等細(xì)胞內(nèi)寄生菌的感染。例如，將結(jié)核菌素進(jìn)行皮內(nèi)注射同時點眼，可以診斷動物是否已經(jīng)感染結(jié)核分支桿菌。目前，用結(jié)核菌素進(jìn)行皮內(nèi)注射、點眼診斷是動物結(jié)核病的規(guī)范化檢疫方法。（三）細(xì)胞免疫測定技術(shù)  1E玫瑰花環(huán)試驗  2T淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化試驗。3細(xì)胞毒性T細(xì)胞試驗   二、免疫防治獲得性免疫的獲得途徑：                    

3、0;    天然主動免疫（自然感染耐過）              主動免疫                         人工主動免疫（注射疫苗）獲得性免疫  

4、60;                      天然被動免疫（獲得母源抗體）              被動免疫人工被動免疫（注射免疫血清、卵黃抗體）（一）主動免疫動物自身在抗原刺激下主動產(chǎn)生特異性免疫保護(hù)力的過程稱為主動免疫。1天然主動免疫  概

5、念：動物在感染某種病原微生物耐過后產(chǎn)生的對該病原體再次侵入的抵抗力稱為天然主動免疫。自然感染耐過2人工主動免疫  概念：給動物接種疫苗，刺激機(jī)體免疫系統(tǒng)發(fā)生應(yīng)答反應(yīng)，產(chǎn)生的特異性免疫力稱為人工主動免疫。接種的物質(zhì)是刺激產(chǎn)生免疫應(yīng)答的各種疫苗制品，包括各種疫苗、類毒素等。特點：有一定的誘導(dǎo)期，出現(xiàn)免疫力的時間與抗原種類有關(guān)免疫力持續(xù)時間長，免疫期可達(dá)數(shù)月甚至數(shù)年，而且有回憶反應(yīng)，某些疫苗免疫后，可產(chǎn)生終生免疫。生產(chǎn)中人工主動免疫是預(yù)防和控制傳染病的行之有效的措施之一。（二）被動免疫并非動物自身產(chǎn)生，而是被動接受其他動物形成的抗體或免疫活性物質(zhì)而獲得特異性免疫力的過程稱為被動免疫。1天然

6、被動免疫  概念：新生動物通過母體胎盤、初乳或卵黃從母體獲得母源抗體從而獲得對某種病原體的免疫力稱為天然被動免疫。動物在生長發(fā)育的早期可通過獲得母源抗體增強(qiáng)免疫力，以保證早期的生長發(fā)育。在初乳中的IgG、IgM可抵抗敗血性感染，IgA可抵抗腸道病原體的感染。然而母源抗體可干擾弱毒疫苗對幼齡動物的免疫效果，導(dǎo)致免疫失敗是其不利的一面。2人工被動免疫  概念：給機(jī)體注射免疫血清、康復(fù)動物血清或高免卵黃抗體而獲得的對某種病原體的免疫力稱為人工被動免疫如抗犬瘟熱病毒血清可防治犬瘟熱，精制的破傷風(fēng)抗毒素可防治破傷風(fēng)，尤其是患病毒性傳染病的珍貴動物，用抗血清防治更有意義。特點：注射免疫

7、血清可使抗體立即發(fā)揮作用，無誘導(dǎo)期，免疫力出現(xiàn)快抗體在體內(nèi)逐漸減少，免疫維持時間短，根據(jù)半衰期的長短，一般維持14周。 §10-2  生物制品及其應(yīng)用一、生物制品的概念利用微生物、寄生蟲及其組織成分或代謝產(chǎn)物以及動物或人的血液與組織液等生物材料為原料，通過生物學(xué)、生物化學(xué)以及生物工程學(xué)的方法制成的，用于傳染病或其他疾病的預(yù)防、診斷和治療的生物制劑稱為生物制品。狹義的生物制品是指利用微生物及其代謝產(chǎn)物或免疫動物而制成的，用于傳染病的預(yù)防、診斷和治療的各種抗原或抗體制劑。主要包括疫苗、免疫血清和診斷液三大類。 二、生物制品的命名原則   

8、 根據(jù)中華人民共和國獸用新生物制品管理辦法規(guī)定，生物制品命名原則有10條。    1生物制品的命名原則以明確、簡練、科學(xué)為基礎(chǔ)原則。    2生物制品名稱不采用商品名或代號。    3生物制品名稱一般采用“動物種名+病名+制品名稱”的形式。診斷制劑則在制品種類前加診斷方法名稱。如：牛巴氏桿菌病滅活疫苗、馬傳染性貧血活疫苗、豬支原體肺炎微量間接血凝抗原。特殊的制品命名可參照此方法。病名應(yīng)為國際公認(rèn)的、普遍的稱呼，譯音漢字采用國內(nèi)公認(rèn)的習(xí)慣定法。4共患病一般可不列動物種名。如：氣腫疽滅活疫苗、狂犬病滅活疫苗。

9、    5由特定細(xì)菌、病毒、立克次氏體、螺旋體、支原體等微生物以及寄生蟲制成的主動免疫制品，一律稱為疫苗。例如：仔豬副傷寒活疫苗、牛瘟活疫苗、牛環(huán)形泰勒蟲疫苗。    6凡將特定細(xì)菌、病毒等微生物及寄生蟲毒力致弱或采用異源毒制成的疫苗，稱“活疫苗”；用物理或化學(xué)方法將其滅活后制成的疫苗，稱“滅活疫苗”。    7同一種類而不同毒（菌、蟲）株（系）制成的疫苗。可在全稱后加括號注明毒（菌、蟲）株（系）。例如：豬丹毒活疫苗（GC42株）、豬丹毒活疫苗（G4T10株）。    8由兩

10、種以上的病原體制成的一種疫苗，命名采用“動物種名+若干病名+x聯(lián)疫苗”的形式。例如：羊黑疫、快疫二聯(lián)滅活疫苗，豬瘟、豬丹毒、豬肺疫三聯(lián)活疫苗。    9由兩種以上血清型制備的一種疫苗，命名采用“動物種名+病名+若干型名+x價疫苗”的形式。例如：口蹄疫O型、A型雙價活疫苗。10制品的制造方法、劑型、滅活劑、佐劑一般不標(biāo)明。但為區(qū)別已有的制品，可以標(biāo)明。 三、獸醫(yī)臨床常用的生物制品及應(yīng)用（一）疫苗  概念：利用病原微生物、寄生蟲及其組分或代謝產(chǎn)物制成的，用于人工主動免疫的生物制品稱為疫苗。用于預(yù)防疫病1疫苗的種類  。（1）活疫苗

11、0; 簡稱活苗強(qiáng)毒苗：現(xiàn)在的生產(chǎn)中應(yīng)嚴(yán)格禁止。弱毒苗：優(yōu)點是能在動物體內(nèi)有一定程度的增殖，免疫劑量小，免疫保護(hù)期長，不需要使用佐劑，應(yīng)用成本低。缺點是弱毒苗有散毒的可能或有一定的組織反應(yīng)，難以制成聯(lián)苗，運(yùn)輸保存條件要求高，現(xiàn)多制成凍干苗。異源苗是用具有共同保護(hù)性抗原的不同種病毒制成的疫苗（2）滅活疫苗  簡稱死苗。優(yōu)點是研制周期短，使用安全，易于保存和運(yùn)輸，容易制成聯(lián)苗或多價苗缺點是不能在動物體內(nèi)增殖，使用劑量大，免疫保護(hù)期短，通常需加佐劑以增強(qiáng)免疫效果，常需多次免疫且只能注射免疫。（3）代謝產(chǎn)物疫苗  利用細(xì)菌的代謝產(chǎn)物如毒素、酶等制成的疫苗。如：破傷風(fēng)類毒素（4）亞單位

12、疫苗  除去病毒核酸用提純的蛋白質(zhì)衣殼制成的疫苗優(yōu)點：僅含病毒的抗原成分，無核酸，因而無不良反應(yīng)，使用安全，效果較好。缺點：制備困難，價格昂貴。降低成本是推廣的關(guān)鍵。（5）生物技術(shù)疫苗  基因工程亞單位疫苗： 合成肽疫苗：抗獨特性疫苗： DNA疫苗： 基因工程活疫苗：包括基因缺失苗、重組活載體疫苗及非復(fù)制性疫苗三類。（6）多價苗和聯(lián)苗  多價苗是指將細(xì)菌（或病毒）的不同血清型混合制成的疫苗聯(lián)苗是指由兩種以上的細(xì)菌或病毒聯(lián)合制成的疫苗，一次免疫可達(dá)到預(yù)防幾種疾病的目的。如豬瘟豬丹毒豬肺疫三聯(lián)苗，新城疫減蛋綜合癥傳染性法氏囊病三聯(lián)苗，犬的六聯(lián)苗等。 

13、0;  （7）寄生蟲疫苗  2疫苗使用的注意事項（1）疫苗的質(zhì)量     （2）疫苗的保存和運(yùn)輸  （3）疫苗的稀釋與及時使用（4）選擇適當(dāng)?shù)拿庖咄緩?#160; （5）制定合理的免疫程序  。（6）免疫劑量、接種次數(shù)及時間間隔 （7）疫苗的型別與疫病型別的一致性  （8）藥物的干擾  （9）防止不良反應(yīng)的發(fā)生 （二）免疫血清  概念：動物經(jīng)反復(fù)多次注射同一種抗原物質(zhì)（菌苗、疫苗、類毒素等）后，機(jī)體體液中尤其血清中產(chǎn)生大量抗體，由此分離所得的血清稱為免疫血清，又稱高免血清或抗血清。常用

14、于傳染病的緊急預(yù)防和治療，屬人工被動免疫。    1免疫血清的分類  根據(jù)制備免疫血清所用抗原物質(zhì)的不同分為：抗菌血清   抗病毒血清    抗毒素根據(jù)制備免疫血清所用動物的不同分為：同種血清   異種血清    家禽常用卵黃抗體制劑2免疫血清使用的注意事項  （1）早期使用      （2）多次足量     （3）血清用量      （

15、4）途徑適當(dāng)      （5）防止過敏  （三）診斷液  概念：利用微生物、寄生蟲或其代謝產(chǎn)物，以及含有其特異性抗體的血清制成的，專供傳染病、寄生蟲病或其他疾病診斷以及機(jī)體免疫狀態(tài)檢測用的生物制品，稱為診斷液。種類：診斷抗原：變態(tài)反應(yīng)性抗原   血清學(xué)反應(yīng)抗原診斷抗體（血清）：診斷血清   診斷用特殊抗體 §10-3  常用生物制品的制備及檢驗    一、疫苗的制備及檢驗（一）菌種、毒種的一般要求1背景資料完整  2生物學(xué)特性典型

16、60; 3遺傳性狀穩(wěn)定 （二）菌種、毒種的鑒定與保存。1菌種、毒種的鑒定  2菌種、毒種的保存  （三）滅活、滅活劑與佐劑1滅活與滅活劑  滅活的方法有兩種：物理法：加熱法是一種常見的物理滅活法，但疫苗生產(chǎn)上主要采用化學(xué)滅活法?；瘜W(xué)法：來進(jìn)行滅活的試劑稱為滅活劑。如甲醛、苯酚、結(jié)晶紫及烷化劑等2佐劑（1）佐劑的概念 本身無免疫原性，但與抗原物質(zhì)合用能增強(qiáng)抗原的免疫原性和機(jī)體免疫應(yīng)答，或改變機(jī)體免疫應(yīng)答類型的物質(zhì)稱為佐劑。（2）佐劑的分類與常用佐劑  佐劑可簡單地分為兩類貯存型：與抗原混合成懸濁狀態(tài)，使抗原在注射局部存留時間延長，通過抗原的緩慢釋放，持續(xù)刺

17、激機(jī)體免疫系統(tǒng)。如：氫氧化鋁膠  白油-Span非貯存型：不與抗原混合，分別在機(jī)體不同部位同時注射也可發(fā)揮佐劑作用。如：吐溫-80  蜂膠（四）疫苗的制備1細(xì)菌性滅活苗的制備（圖12-1）：無菌條件下無菌操作（1）種子培養(yǎng)  （2）菌液培養(yǎng)  （3）滅活與濃縮  （4）配苗與分裝  2細(xì)菌性活疫苗的制備（1）種子液及菌液培養(yǎng)  （2）濃縮、配苗與凍干  3病毒性組織苗的制備（圖12-2）（1）種毒與接種  （2）收獲與制苗  4病毒性禽胚苗的制備（1）種毒與接毒  （2）收獲與配苗  5病毒性細(xì)胞苗的制備（1）培養(yǎng)液與細(xì)胞  （2）接毒、收獲和配苗 （五）成品檢驗 1純度檢驗及活菌計數(shù)（1）純度檢驗  即無菌檢驗。（2）活菌計數(shù)  2安全與效力檢驗（1）安全檢驗  （2）效力檢驗  主要包括免疫原性、免疫產(chǎn)生期與持續(xù)期的檢驗可采用活菌計數(shù)、病毒量滴定或血清學(xué)試驗等多種方法但最常用的仍是動物保護(hù)試驗，即體內(nèi)中和試驗。3其他檢驗（1）物理性