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文檔簡介
三十八動物細胞工程(建議用時:40分鐘)一、選擇題:每小題給出的四個選項中只有一個符合題目要求。1.(2024·廣東東莞期末)一種雜交瘤細胞只能產一種抗體,抗體由兩條相同的重鏈和兩條相同的輕鏈構成??茖W家通過動物細胞融合技術,將兩株不同的雜交瘤細胞(A和B)融合形成雙雜交瘤細胞AB。雙雜交瘤細胞能夠懸浮在培育基中生長繁殖,產生的雙特異性抗體AB如下圖所示。下列相關說法錯誤的是()A.將雜交瘤細胞A、B混合并誘導融合后,利用選擇培育基無法篩選出雙雜交瘤細胞ABB.雙雜交瘤細胞同時識別α、β抗原后,才能產生雙特異性抗體C.對培育到肯定密度的雙雜交瘤細胞進行傳代培育時,無需運用胰蛋白酶處理D.將雜交瘤細胞注射到小鼠腹腔,腹水能為細胞供應糖類、氨基酸、無機鹽、維生素等養(yǎng)分條件2.如下圖所示,核苷酸合成有兩條途徑,物質A可以阻斷其中的全合成途徑。正常細胞內含有補救合成途徑所必需的轉化酶和激酶,制備單克隆抗體時選用的骨髓瘤細胞中缺乏轉化酶?,F用加入H、A、T三種物質的“HAT培育基”來篩選特定的雜交瘤細胞。下列相關敘述正確的是()A.B淋巴細胞及其自身融合細胞因含有轉化酶可在HAT培育基上大量增殖B.雜交瘤細胞因為可以進行上述兩個途徑所以能在HAT培育基上大量增殖C.HAT培育基上篩選出的雜交瘤細胞都能分泌針對同一種抗原的抗體D.利用雜交瘤細胞制備的單抗可作為特異性探針探討相應抗原蛋白的結構3.(2024·湖北武漢模擬)核移植后,從克隆胚胎中分別、培育而成的干細胞稱為核移植胚胎干細胞(NTESC),這種細胞對于胚胎嵌合探討和細胞治療探討均具有重要的意義。有關說法正確的是()A.重組細胞進行體外培育時,氣體環(huán)境中CO2的主要作用是促進呼吸作用B.NTESC在飼養(yǎng)層細胞上或在添加抑制因子的溶液中,能夠快速增殖分化C.將小鼠NTESC注入豬囊胚時須注入滋養(yǎng)層處才能獲得豬—鼠嵌合胚胎D.NTESC分化成的組織器官,移植給供核個體,發(fā)生免疫排斥可能性小4.青蒿素主要用于惡性瘧疾的癥狀限制以及耐氯喹蟲株的治療。為了快速檢測青蒿素,科研人員利用細胞工程技術制備了抗青蒿素的單克隆抗體,其基本操作過程如圖。以下相關敘述錯誤的是()A.過程②體現了細胞膜的流淌性,過程⑤若在體內進行則操作更簡潔B.過程③常運用選擇培育基,過程④常運用抗原—抗體雜交技術C.若細胞乙均由細胞兩兩融合而成,則細胞乙、丙、丁的染色體組數肯定相同D.骨髓瘤細胞通常是從小鼠脾臟中提取的,其表面糖蛋白削減,培育時失去接觸抑制5.(2024·山東日照三模)2024年6月,我國首個原創(chuàng)性抗體偶聯藥物(ADC)獲批上市。該藥采納人源化抗HER2抗體,通過可切割的接頭與高效毒性分子MMAE偶聯。ADC被腫瘤細胞內吞后,載荷MMAE被釋放到細胞質中后,可抑制細胞中微管蛋白聚合,進而影響紡錘體的形成。下列敘述錯誤的是()A.傳統(tǒng)鼠源性單抗可能會引起人體產生相應抗體進而影響ADC的效果B.ADC中接頭穩(wěn)定性偏低會導致藥物分子脫落而對正常細胞造成損傷C.連接抗體和MMAE的接頭可能在腫瘤細胞溶酶體中被蛋白酶破壞D.MMAE可能抑制腫瘤細胞內著絲粒分裂從而使其停滯在分裂中期6.阿霉素是一種抗腫瘤抗生素,可抑制RNA和DNA的合成。阿霉素沒有特異性,在殺傷腫瘤細胞的同時還會對機體其他細胞造成損害??蒲腥藛T將阿霉素與能特異性識別腫瘤抗原的單克隆抗體結合制成抗體—藥物偶聯物(ADC),ADC通常由抗體、接頭和藥物三部分組成,作用機制如下圖所示。下列有關敘述錯誤的是()A.阿霉素對腫瘤細胞和已經分化的組織細胞都有殺傷作用B.將腫瘤抗原反復注射到小鼠體內,從小鼠的血清中分別出的抗體為單克隆抗體C.ADC的制成實現了對腫瘤細胞的選擇性殺傷D.利用同位素標記的單克隆抗體在特定組織中的成像技術,可定位診斷腫瘤7.哺乳動物的單倍體胚胎干細胞(haESCs)是指只含有一套染色體(性染色體只含X染色體)、擁有類似于正常胚胎干細胞特性的細胞類群,可分為孤雌單倍體胚胎干細胞和孤雄單倍體胚胎干細胞兩種類型,在探討隱性基因突變、表觀遺傳修飾和配子發(fā)育中具有獨特的優(yōu)勢。下列說法錯誤的是()A.在體外培育條件下,haESCs可以只增殖而不發(fā)生細胞分化B.推想僅攜帶Y染色體的早期單倍體胚胎可能難以發(fā)育到囊胚階段C.haESCs與成體干細胞類似,可誘導分化成各種功能的細胞、組織和器官D.haESCs中通常不含等位基因,為獲得遺傳操作的動物模型供應了新思路8.生物活性繃帶能夠加速人的傷口愈合,其制作過程是:從患者身上采集一些細胞樣本,讓其在特別的膜片上增殖,5至7天后,將這種特別膜片敷在患者的傷口上,膜片會將其中細胞漸漸“釋放”到傷口。下列相關敘述正確的是()A.在生物活性繃帶上增殖的細胞不會產生接觸抑制B.特別膜片上含有細胞分裂素等調整生命活動的物質C.膜片釋放到傷口的細胞一般不會引起機體發(fā)生免疫排斥D.生物活性繃帶可以源源不斷地為傷口供應新的細胞9.NRP-1是人體血管內皮生長因子的受體,在腫瘤新生血管形成與腫瘤細胞遷移、黏附、侵襲等方面起重要調控作用。為探究NRP-1MAb(NRP-1的單克隆抗體)對乳腺癌的治療作用,探討人員以兔子為試驗材料進行相關試驗,得到以下數據如圖所示。下列敘述錯誤的是()A.據圖推想,NRP-1MAb能夠有效降低腫瘤的體積,中、高劑量抗體的降低效果比低劑量的效果更顯著B.NRP-1MAb的制備過程中利用滅活的病毒誘導兩細胞融合,其原理是利用了病毒表面的糖蛋白和相關酶與細胞膜表面的糖蛋白發(fā)生作用C.將NRP-1反復給兔子注射,提取已免疫的B細胞與骨髓瘤細胞融合,再經選擇性培育基篩選獲得的雜交瘤細胞都能產生NRP-1MAbD.治療機理可能為NRP-1MAb與NRP-1特異性結合,阻擋了NRP-1與血管內皮生長因子的結合,從而抑制了腫瘤血管的生成和腫瘤細胞的分散轉移10.DNA甲基化指生物體在DNA甲基轉移酶的作用下,將甲基基團加到DNA模板鏈的胞嘧啶上的過程,多數狀況下可抑制基因的表達。我國科學家首次勝利培育出體細胞克隆猴“中中”和“華華”,體細胞克隆技術的難點在于將體細胞的細胞核轉移到去核的卵細胞后,由于DNA甲基化修飾,某些生長因子基因無法正常表達,從而使重組細胞無法正常發(fā)育。下列相關敘述錯誤的是()A.克隆猴體細胞的細胞核中的染色體數目與受精卵的細胞核中的相同B.與DNA未甲基化相比,DNA甲基化后,基因表達狀況可不同,導致性狀有所差異C.DNA甲基化使某些生長因子基因無法正常表達的根本緣由是基因突變D.克隆猴的誕生說明已分化的動物體細胞的細胞核具有全能性二、非選擇題11.胚胎干細胞必需從胚胎中獲得,但這涉及倫理問題,因而限制了它在醫(yī)學上的應用??茖W家通過體外誘導成纖維細胞,獲得了類似于胚胎干細胞的一種細胞,稱為誘導多能干細胞(簡稱iPS細胞)。因為誘導過程無須破壞胚胎,而且iPS細胞可來源于病人自身的體細胞,因此iPS細胞的應用前景優(yōu)于胚胎干細胞。下圖為iPS細胞的獲得及用其培育不同種細胞的示意圖(c-Myc、Klf4、So2和Oct-3/4等基因與細胞的脫分化有關)?;卮鹣铝袉栴}。(1)在對成纖維細胞進行培育時,常用胰蛋白酶處理使之分散成單個細胞,這說明細胞間的物質為________。________(填“能”或“不能”)用胃蛋白酶處理成纖維細胞,緣由是_________________________________________________________________________________________________________________________。(2)在培育iPS細胞的過程中,培育基中應含有細胞所需的各種養(yǎng)分物質,并定期更換培育液。定期更換培育液的目的是_____________________________________________________________________________________________________。(3)過程③④為iPS細胞供應的條件不同,分化得到的細胞不同,可知細胞分化是________________的結果。若iPS細胞來源于病人自身體細胞的誘導,再將其分化出的細胞移入患者體內的優(yōu)勢是____________________________________。(4)假如誘導iPS細胞定向分化為原始生殖細胞,該技術可能的應用是____________________________________________________________________。12.小鼠體細胞中有20對同源染色體,是生物試驗和科學探討中最常用的一種小型哺乳動物?;卮鹣铝袉栴}。(1)培育小鼠細胞時,從體內取出組織塊,剪碎,用胰蛋白酶處理,使其分散成單個細胞,制成細胞懸液,放入培育瓶內進行________(填“傳代”或“原代”)培育,該培育須要的條件有________________________________________________________________________________________________________(答3點)。(2)若用小鼠來制備抗新冠病毒的單克隆抗體,制作過程中需向小鼠注入的抗原是____________________,一段時間后,提取B細胞和小鼠骨髓瘤細胞進行融合,通過選擇性培育篩選得到雜交瘤細胞,進行________培育和抗體檢測,獲得能無限增殖又能產生所需抗體的雜交瘤細胞,該細胞分裂中期有核DNA分子________個,通過體外或體內培育該細胞,從中提取抗新冠病毒的單克隆抗體。(3)為探究血清對動物細胞培育的影響,試驗的設計思路為__________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________。三十八動物細胞工程1.B解析:單克隆抗體制備過程中,雜交瘤細胞須要進行兩次篩選,第一次利用選擇培育基篩選出能在特定培育基上生長且能無限增殖的雜交瘤細胞,其次次篩選可用抗原—抗體雜交的方法篩選出產生特異性抗體的雜交瘤細胞,雙雜交瘤細胞本身就是由兩個雜交瘤細胞融合而成,無需運用選擇培育基篩選,A正確;雜交瘤細胞是由已免疫的B淋巴細胞和骨髓瘤細胞融合產生的,無需接觸抗原就能產生抗體,B錯誤;雜交瘤細胞是懸浮培育的細胞,細胞之間并未接觸,若要傳代培育,細胞培育液干脆離心,去除上清液培育基,加入簇新培育基即可,C正確;將雜交瘤細胞注射到小鼠腹水中培育,腹水作為自然培育基,為細胞供應各種生長條件,D正確。2.D解析:B淋巴細胞及其自身融合細胞因均屬于成熟細胞,不能增殖,A錯誤;雜交瘤細胞因為可以進行補救合成途徑,所以能夠在HAT培育基上大量增殖,B錯誤;HAT培育基上篩選出的雜交瘤細胞能大量增殖,也能產生抗體,但不肯定產生針對同一種抗原的抗體,C錯誤;單克隆抗體的作用之一是采納抗原—抗體雜交技術,利用抗體作為特異性探針,探討相應的抗原蛋白的結構,D正確。3.D解析:重組細胞進行體外培育時,氣體環(huán)境中CO2的主要作用是維持培育液的pH,A錯誤;NTESC細胞在飼養(yǎng)層細胞上或在添加抑制因子的培育基中,能夠使細胞維持不分化的狀態(tài),在此過程中,飼養(yǎng)層供應干細胞增殖所需的養(yǎng)分物質,B錯誤;滋養(yǎng)層細胞將來發(fā)育成胎膜、胎盤,內細胞團將來發(fā)育為胚胎的各種組織、器官,故應將小鼠NTESC注入豬囊胚的內細胞團處才能獲得豬—鼠嵌合胚胎,C錯誤;由于NTESC分化成的組織器官中細胞核內的遺傳物質與核供體相同,故獲得的組織器官移植給供核個體,發(fā)生免疫排斥可能性小,D正確。4.D解析:過程②為將具有免疫實力的B淋巴細胞和骨髓瘤細胞融合,體現了細胞膜的流淌性,過程⑤若在體內進行則操作更簡潔,A正確;過程③是篩選雜交瘤細胞,常運用選擇培育基,過程④用抗體檢測和克隆培育得到能產生特定抗體的雜交瘤細胞,常運用抗原—抗體雜交技術,B正確;若細胞乙均由細胞兩兩融合而成,則細胞乙、丙、丁的染色體組數肯定相同,C正確;骨髓瘤細胞是從小鼠的骨髓中提取的,脾臟中無骨髓瘤細胞,D錯誤。5.D解析:傳統(tǒng)鼠源性單抗對人體來說是抗原,可能會引起人體產生相應抗體,引起嚴峻的不良反應,進而影響ADC的效果,而人源化單抗能夠避開單抗分子被免疫系統(tǒng)當作異源蛋白而被快速清除,提高單抗藥物的藥效,A正確;抗體偶聯藥物(ADC)是采納人源化抗HER2抗體,通過可切割的接頭與高效毒性分子MMAE偶聯,因此ADC中接頭穩(wěn)定性偏低會導致藥物分子脫落而對正常細胞造成損傷,造成“脫靶毒性”,B正確;抗體的化學本質是蛋白質,連接抗體和MMAE的接頭是蛋白質,因此可能在腫瘤細胞溶酶體中被蛋白酶破壞,C正確;據題意可知,ADC被腫瘤細胞內吞后,可抑制細胞中微管蛋白聚合,進而影響紡錘體的形成,進而影響紡錘絲牽拉染色體移向兩極,不影響著絲粒的分裂,D錯誤。6.B解析:由題干信息可知,阿霉素沒有特異性,在殺傷腫瘤細胞的同時還會對機體其他細胞造成損害,所以阿霉素對腫瘤細胞和已經分化的組織細胞都有殺傷作用,A正確;將腫瘤抗原反復注射到小鼠體內,從小鼠的血清中分別出的抗體為血清抗體,單克隆抗體由雜交瘤細胞分泌,特異性強,B錯誤;阿霉素與能特異性識別腫瘤抗原的單克隆抗體結合制成抗體—藥物偶聯物(ADC),所以ADC的制成實現了對腫瘤細胞的選擇性殺傷,C正確;單克隆抗體特異性強,利用同位素標記的單克隆抗體在特定組織中的成像技術,可定位診斷腫瘤,D正確。7.C解析:單倍體胚胎干細胞是擁有類似于正常胚胎干細胞特性的細胞類群,在體外培育條件下,單倍體胚胎干細胞同樣具有胚胎干細胞的特點,也可只增殖而不發(fā)生細胞分化,A正確;由單倍體胚胎干細胞性染色體只含X染色體推想,僅攜帶Y染色體的早期單倍體胚胎可能難以發(fā)育到囊胚階段,B正確;單倍體胚胎干細胞類似于正常胚胎干細胞,具有發(fā)育的全能性,可誘導分化成各種功能的細胞、組織和器官,而成體干細胞具有組織特異性,只能分化成特定的細胞或組織,不具有發(fā)育成完整個體的實力,C錯誤;單倍體胚胎干細胞中不含等位基因,動物細胞核具有全能性,須要核移植技術才能培育成單倍體動物,為獲得遺傳操作的動物模型供應了新思路,D正確。8.C解析:在生物活性繃帶上增殖的細胞,進行有絲分裂,數量不斷增多,當貼壁生長的細胞相互接觸時,細胞就會停止分裂增殖,出現細胞的接觸抑制,A錯誤;細胞分裂素是植物激素,不會調整動物細胞生命活動,B錯誤;自身的細胞增殖后再回到自身,不會引起機體的免疫排斥反應,C正確;生物活性繃帶只能漸漸為傷口供應細胞,而不是源源不斷地為傷口供應新的細胞,D錯誤。9.C解析:由曲線圖可知,NRP-1MAb能夠有效降低腫瘤的體積,中、高劑量抗體的降低效果比低劑量的效果更顯著,A正確;滅活病毒誘導細胞融合的原理是病毒表面含有的糖蛋白和一些酶能夠與細胞膜上的糖蛋白發(fā)生作用,使細胞相互凝集,細胞膜上的蛋白質分子和脂質分子重新排布,細胞膜打開,細胞發(fā)生融合,B正確;經過選擇培育基篩選的雜交瘤細胞并不能產生單一的抗體,還須要進行克隆化培育和抗體陽性檢測,最終篩選到只能產生NRP-1MAb的雜交瘤細胞,C錯誤;依據題干信息“NRP-1是人體血管內皮生長因子的受體,在腫瘤新生血管形成與腫瘤細胞遷移、黏附、侵襲等方面起重要調控作用”,由此可推想,NRP-1MAb可能與NRP-1特異性結合,阻擋了NRP-1與血管內皮生長因子的結合,從而抑制了腫瘤血管的生成和腫瘤細胞的分散轉移,D正確。10.C解析:克隆猴體細胞的細胞核中的染色體數目與受精卵的細胞核中的相同,A正確;與DNA未甲基化相比,DNA甲基化后基因表達狀況可不同,導致性狀有所差異,B正確;DNA甲基化是指生物體在DNA甲基轉移酶的作用下,將甲基基團加到DNA模板鏈的胞嘧啶上的過程,此過程中DNA的堿基序列并未發(fā)生變更,因此不會導致基因突變,C錯誤;克隆猴的誕生說明已分化的動物體細胞的細胞核具有全能性,D正確。11.解析:(1)在對成纖維細胞進行培育時,常用胰蛋白酶處理使之分散成單個細胞,用胰蛋白酶分散細胞,說明細胞間的物質主要是蛋白質。胃蛋白酶作用的相宜pH約為2,當pH大于6時,胃蛋白酶就會失去活性。胰蛋白酶作用的相宜環(huán)境pH為7.2~8.4。多數動物細胞培育的相宜pH為7.2~7.4,胃蛋白酶在此環(huán)境中沒有活性,而胰蛋白酶在此環(huán)境中活性較高,因此胰蛋白酶適用于細胞培育。(2)在培育iPS細胞的過程中,培育基中應含有細胞所需的各種養(yǎng)分物質,并定期更換培育液。定期更換培育液的目的是清除代謝廢物,防止細胞代謝物積累對細胞自身造成危害。(3)細胞分化是基因選擇性表達的結果。若iPS細胞來源于病人自身體細胞的誘導,再將其分化出的細胞移入患者體內,與自身體細胞組織相容性抗
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