浙科版高三生物一輪復習選擇性必修3專題十八第2講動物細胞工程及其應用課件

專題十八細胞工程第2講動物細胞工程及其應用選擇性必修3

生物技術與工程精讀課本盤點基礎知識一、細胞培養(yǎng)是動物細胞工程的基礎1．動物細胞培養(yǎng)的地位：動物細胞工程常用的技術手段包括動物細胞培養(yǎng)、動物細胞核移植、____________等。其中____________是動物細胞工程的基礎。2．動物細胞培養(yǎng)的概念：從動物體獲得相關組織，分散成________后，在適宜環(huán)境下讓細胞____和____的過程。動物細胞融合動物細胞培養(yǎng)單個細胞生長增殖3．動物細胞培養(yǎng)的條件(1)含全部營養(yǎng)物質的培養(yǎng)液：____(保證細胞順利的生長增殖)、水、無機鹽、氨基酸、維生素、糖類、生長因子等。①__________是根據(jù)細胞生存所需物質的種類和含量，用人工方法模擬合成的，便于對各種成分進行人工控制和標準化。②由于人們并沒有完全了解動物細胞所需要的全部物質，實際工作中往往將天然培養(yǎng)基與合成培養(yǎng)基結合使用，如在合成培養(yǎng)基中添加一定比例的血清或其他天然成分。血清合成培養(yǎng)基(2)適宜的培養(yǎng)條件①無菌：培養(yǎng)材料、培養(yǎng)基、培養(yǎng)環(huán)境、操作過程嚴格控制____；對血清等成分進行____除菌，并在培養(yǎng)基中加入多種類型的______，能抑制細菌和真菌的生長，從而預防污染。②無毒：________培養(yǎng)液，防止細胞代謝產(chǎn)生的有毒物質危害細胞。③溫度：哺乳動物細胞培養(yǎng)：____________為宜。④pH：大多數(shù)動物細胞生存的適宜pH為__________，在CO2培養(yǎng)箱中，采用______培養(yǎng)的方式，使pH保持相對穩(wěn)定。⑤______：也是動物細胞培養(yǎng)過程中需要考慮的一個重要環(huán)境參數(shù)。⑥氣體環(huán)境：O2是細胞代謝所必需的，CO2的主要作用是維持培養(yǎng)液的pH。置于含有95%的____和5%的____的混合氣體的CO2培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)。無菌過濾抗生素定期更換37℃±0.5℃7.2～7.4開放式滲透壓空氣CO24．動物細胞培養(yǎng)的流程蛋白原代傳代30～505．需要理解的概念(1)原代培養(yǎng)和傳代培養(yǎng)細胞或組織離開有機體后的________，稱為原代培養(yǎng)。隨著時間的延長，體外培養(yǎng)的細胞數(shù)量不斷增加。當增長到一定程度后，由于發(fā)生________或________的限制及__________________，生長會逐漸減慢，甚至停止并死亡。因此，需要將原培養(yǎng)瓶內(nèi)的細胞____并____后轉到多個培養(yǎng)瓶中進行培養(yǎng)，這種稀釋后進行的分瓶____培養(yǎng)，稱為傳代培養(yǎng)。首次培養(yǎng)接觸抑制培養(yǎng)空間營養(yǎng)物質的消耗枯竭分離稀釋擴大(2)細胞系和細胞株

概念特性種類特性細胞系原代培養(yǎng)物經(jīng)首次傳代成功后即成細胞系，泛指能傳代的細胞遺傳特性不均一，具有異質性____細胞系不能連續(xù)培養(yǎng)下去的細胞系稱為有限細胞系，正常的______細胞通常為有限細胞系，大約可以傳______代，就會全部死亡細胞系原代培養(yǎng)物經(jīng)首次傳代成功后即成細胞系，泛指能傳代的細胞遺傳特性不均一，具有異質性____細胞系能連續(xù)培養(yǎng)下去的細胞系稱為連續(xù)細胞系或____細胞系，被認為是發(fā)生了____的細胞系(遺傳物質發(fā)生改變)。一類為___________；另一類是____無限細胞系，具不死性，但不致癌，仍保留________現(xiàn)象有限二倍體30～50連續(xù)無限轉化惡性細胞系良性接觸抑制

概念特性種類特性細胞株通過一定的__________方法，從原代培養(yǎng)物或細胞系中獲得的具有________的細胞稱為細胞株細胞株一般具有恒定的__________、__________或抗性及其他生化特性連續(xù)細胞株可以連續(xù)多次傳代的細胞株，如單抗細胞株有限細胞株傳代次數(shù)有限的細胞株選擇或純化特殊性質染色體組型病毒敏感性6．克隆培養(yǎng)(或細胞克隆)(1)概念：把一個______從群體中分離出來____培養(yǎng)，使之繁衍成一個新的細胞群體的技術。(2)要求：必須保證分離出來的細胞是一個而不是多個，即必須肯定所建成的克隆來源于________。(3)結果：由于來源于一個共同的祖細胞，所以稱為純系，也就是克隆系，所以，子代細胞______一致，________均一。單細胞單獨單個細胞基因型遺傳性狀7．動物細胞離體培養(yǎng)的生長特點(1)________：體外培養(yǎng)時，絕大多數(shù)細胞仍然保持了________的特性，必須____在某一固相支持物上如培養(yǎng)瓶壁上生長。但是____、________的細胞以及某些腫瘤細胞不需要貼附生長，而是呈懸浮生長狀態(tài)。(2)________：當培養(yǎng)瓶中內(nèi)壁生長細胞彼此緊密接觸時，細胞不再分裂。______無接觸抑制。(3)具有細胞一般的正常生命活動現(xiàn)象，包括_____、_____、有規(guī)律的衰老、死亡等。貼附生長貼附生長貼附血液淋巴組織接觸抑制癌細胞生長分裂8．動物細胞、組織培養(yǎng)技術的應用(1)培養(yǎng)正?；虿∽兊募毎?，可用于生理、病理、藥理等方面的研究。例如，細胞全能性的揭示、________調節(jié)控制的分析、癌變機理和衰老原因、抗癌藥物的篩選、有毒物質的檢測等研究。(2)器官__________。如皮膚細胞的培養(yǎng)用于燒傷患者的皮膚移植，其他器官的細胞培養(yǎng)用于相關損傷組織器官的修復等。(3)大規(guī)模培養(yǎng)獲得細胞________。如獲得動物疫苗、干擾素、單克隆抗體等有重要價值的生物制品。(4)______________。如“人造牛肉漢堡”。細胞周期移植或修復代謝產(chǎn)物獲得動物性食品二、通過細胞核移植克隆動物1．動物細胞核移植的概念：是指將體細胞核移入一個去核的________中，并使其發(fā)育成動物個體的過程。2．相關概念分析(1)供體：動物一個細胞的細胞核。(2)受體：去掉細胞核的______。(3)結果：重新組合的細胞發(fā)育成新胚胎，繼而發(fā)育成動物個體。(4)原理：動物體細胞核具有全能性。3．主要類型(1)______________：動物胚胎干細胞分化程度低，表現(xiàn)全能性相對容易。(2)____________：動物體細胞分化程度高，表現(xiàn)全能性十分困難。因此動物體細胞核移植的難度明顯高于胚胎細胞核移植。卵母細胞卵細胞胚胎細胞核移植體細胞核移植4．涉及技術：動物細胞培養(yǎng)技術、______技術、早期胚胎培養(yǎng)技術、________技術等。其中，______技術是核心技術。5．具體過程核移植胚胎移植核移植去核DNA變性電融合法早期胚胎6．實例：低等動物的胚胎細胞核移植——蛙____細胞核移植；低等動物的體細胞核移植——蛙______細胞核移植；高等動物體細胞核移植——____細胞核移植，培育成功克隆羊“多莉”。(1)克隆羊“多莉”的培育成功，表明動物克隆需要的條件：①具有物種完整______的活細胞核。②有能調控細胞核發(fā)育的______物質。③完成胚胎發(fā)育的必要________。(2)克隆羊“多莉”的培育成功進一步證明了：①動物細胞的______具有全能性。②高度分化的細胞經(jīng)過一定技術處理，可回復到類似______時期的功能。③在胚胎和個體發(fā)育中，細胞質具有______________的作用。囊胚腸上皮乳腺基因組細胞質環(huán)境條件細胞核受精卵調控細胞核發(fā)育三、通過細胞融合可產(chǎn)生具有新特性的細胞1．兩個或多個動物細胞經(jīng)誘導可融合形成一個細胞(1)概念：在一些融合因子的作用下，將兩個或兩個以上的細胞合并成一個細胞的技術。(2)誘導融合的因素：PEG(聚乙二醇)、________或____誘導等。(3)原理：細胞膜具有______。(4)結果：形成具有原來兩個或多個細胞遺傳信息的單核細胞。(5)應用：①由于雜種細胞在分裂過程中，來自某一方的染色體容易丟失，可利用雜種細胞檢測特定染色體丟失與特定基因產(chǎn)物(蛋白質)減少的對應關系，進行________；②利用產(chǎn)生特定抗體的B淋巴細胞與骨髓瘤細胞融合制備__________。電流刺激病毒流動性基因定位單克隆抗體2．細胞融合技術是制備單克隆抗體的基礎(1)血清抗體：早期人們?yōu)榱双@得抗體，就向動物體內(nèi)注射相應抗原，使動物產(chǎn)生抗體，然后從動物血清中分離所需抗體。用這種方法制備的抗體不僅產(chǎn)量低、______，而且________。(2)單克隆抗體制備的理論基礎：①每一種B淋巴細胞只產(chǎn)生______________；②骨髓瘤細胞能在體外________。[拓展點]

滅活是指用物理或化學手段使病毒或細菌失去感染能力，但并不破壞它們的抗原結構。滅活病毒誘導細胞融合的原理是：病毒表面含有的糖蛋白和一些酶能夠與細胞膜上的糖蛋白發(fā)生作用，使細胞互相凝聚，細胞膜上的蛋白質分子和脂質分子重新排布，細胞膜打開，細胞發(fā)生融合。純度低特異性差一種特異性抗體無限增殖(3)單克隆抗體的制備流程①用外界____刺激動物，使其發(fā)生免疫反應，使__________產(chǎn)生抗體。②利用________或聚乙二醇等融合因子進行誘導，使能產(chǎn)生抗體的B淋巴細胞與可以無限傳代的___________融合。③經(jīng)過____，獲得既能產(chǎn)生__________，又能_________的雜交瘤細胞。④將抗體檢測呈陽性的雜交瘤細胞在體外條件下大規(guī)模培養(yǎng)，或注射到小鼠腹腔內(nèi)增殖(優(yōu)點：腹水中抗體濃度高、產(chǎn)量大、不需要制備______和________等)，獲得單克隆抗體。抗原B淋巴細胞仙臺病毒骨髓瘤細胞篩選特異性抗體無限增殖培養(yǎng)基無菌操作(4)單克隆抗體制備過程中兩次篩選分析項目第一次篩選第二次篩選篩選原因誘導融合后會得到多種雜交細胞，另外還有未融合的細胞由于小鼠在生活中還受到其他抗原的刺激，所以經(jīng)選擇性培養(yǎng)獲得的雜交瘤細胞中有能產(chǎn)生其他抗體的B淋巴細胞篩選方法用特定的(HAT)選擇培養(yǎng)基篩選：未融合的細胞和同種細胞融合后形成的細胞(“B-B”細胞、“瘤-瘤”細胞)都會死亡，只有融合的雜交瘤細胞(“B-瘤”細胞)才能生長用多孔培養(yǎng)板培養(yǎng)，在每個孔只有一個雜交瘤細胞的情況下開始抗體檢測和克隆化培養(yǎng)，經(jīng)抗體檢測篩選出能產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細胞，并進行克隆培養(yǎng)，獲得細胞群篩選目的得到雜交瘤細胞得到能分泌所需抗體的雜交瘤細胞問題與思考在單克隆抗體制備過程中，第一次篩選出雜交瘤細胞，第二次篩選出能產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細胞后，往往還需要進行第二次抗體檢測，為什么？[提示]

在多孔培養(yǎng)板的每一個原始孔中，第一次抗體檢測并克隆獲得的陽性細胞群，可能來源于兩個或多個雜交瘤細胞，因此它們所分泌的抗體可能是不同質的，必須再克隆。另外，在克隆培養(yǎng)過程中，有可能會出現(xiàn)骨髓瘤細胞突變而無法產(chǎn)生抗體；染色體丟失導致雜交瘤細胞不分泌抗體；由于不同的雜交瘤細胞的抗體生成率有差異，選擇效率更高的雜交瘤細胞等；因此第二次抗體檢驗可以更好地選擇符合生產(chǎn)要求的雜交瘤細胞。(5)雜交瘤技術制備的單克隆抗體的最大優(yōu)點：________________________________________________________。(6)單抗的運用①利用抗原-抗體反應，可以診斷和防治多種疾病。②作為特異性探針，用于研究抗原蛋白的結構、細胞學分布及功能。③制備成生物導彈，專一性的殺死腫瘤細胞。純度高，可大量制備，在應用時具有特異性強、靈敏度高的特點內(nèi)化知識突破重點難點一、動物細胞培養(yǎng)和植物組織培養(yǎng)的比較項目動物細胞培養(yǎng)植物組織培養(yǎng)理論基礎細胞增殖植物細胞的全能性培養(yǎng)前處理無菌，用機械的方法或胰蛋白酶、膠原蛋白酶等處理，使組織分散成單個細胞無菌，離體的器官、組織、細胞取材動物胚胎或出生不久的幼齡動物的器官或組織植物幼嫩的部位或花藥等培養(yǎng)基狀態(tài)液體液體、固體或半固體項目動物細胞培養(yǎng)植物組織培養(yǎng)培養(yǎng)基成分葡萄糖、氨基酸、水、無機鹽、維生素、生長因子、血清等水、礦質元素、蔗糖、氨基酸、維生素、植物激素和瓊脂等結果建立細胞系或細胞株，不形成個體，不體現(xiàn)全能性植株個體或細胞代謝產(chǎn)物應用①用于生理、病理、藥理等方面的研究②器官移植或修復③大規(guī)模培養(yǎng)獲得動物細胞代謝產(chǎn)物④獲得動物性食品①植物繁殖的新途徑：植株快速繁殖、脫毒植株的培育、制備人工種子②培育作物新品種：轉基因植物的培育、單倍體育種、突變體的誘導與篩選、植物體細胞雜交③細胞產(chǎn)物的大規(guī)模工廠化生產(chǎn)相同點①兩種技術手段培養(yǎng)過程中細胞都進行有絲分裂，都是無性繁殖，都可稱克隆，都不涉及減數(shù)分裂②均為無菌操作，需要適宜的溫度、pH等條件例1

(2024·浙江1月選考)某動物細胞培養(yǎng)過程中，細胞貼壁生長至接觸抑制時，需分裝培養(yǎng)，實驗操作過程如圖。下列敘述錯誤的是(

)A．①加消化液的目的是使細胞與瓶壁分離B．②加培養(yǎng)液的目的是促進細胞增殖C．③分裝時需調整到合適的細胞密度D．整個過程需要在無菌、無毒條件下進行[解析]

①加消化液的目的是使細胞分散開來，A錯誤；②加培養(yǎng)液，為細胞增殖提供營養(yǎng)物質，因此目的是促進細胞增殖，B正確；③分裝時需調整到合適的細胞密度，因為若密度過大細胞仍存在接觸抑制，C正確；動物細胞培養(yǎng)需要無菌無毒環(huán)境，因此整個過程需要在無菌、無毒條件下進行，D正確?！汤?下列各項中不能作為植物組織培養(yǎng)與動物組織培養(yǎng)的共同點的是(

)A．都可以培養(yǎng)形成細胞系B．都能發(fā)生細胞的分裂C．培養(yǎng)前都必須用酶處理D．都必須在無菌條件下進行培養(yǎng)[解析]

植物組織培養(yǎng)可選擇植物的細胞、組織、器官作為外植體進行培養(yǎng)，獲得完整的植株，也可以建立細胞系后獲取細胞產(chǎn)物；動物細胞培養(yǎng)將動物組織細胞處理成單個，制成細胞懸液后進行培養(yǎng)，得到大量細胞，建立細胞系，兩種均需在無菌條件下操作。綜上所述，培養(yǎng)前都必須用酶處理不能作為植物組織培養(yǎng)與動物組織培養(yǎng)的共同點。√二、比較植物體細胞雜交和動物細胞融合

植物體細胞雜交動物細胞融合原理細胞膜的流動性、細胞全能性細胞膜的流動性、細胞增殖融合前處理去除細胞壁使細胞分散開來相關的酶纖維素酶、果膠酶胰蛋白酶或膠原蛋白酶誘導融合的方法物理法包括電刺激、離心、振蕩等；化學法一般是用聚乙二醇(PEG)作為誘導劑聚乙二醇處理、電流刺激、病毒誘導等結果雜種植株雜種細胞應用培養(yǎng)作物新品種制備單克隆抗體、研究基因定位例3中藥在我國憑借切實的療效得到了廣泛應用。芍藥的主要藥效成分是芍藥苷，研究人員利用抗芍藥苷的單克隆抗體對不同配伍方劑中芍藥苷的含量進行了測定。(1)將__________與蛋白結合作為抗原對小鼠進行免疫。并在__________前取血清作為免疫結果的陰性對照樣品。(2)取免疫后的小鼠脾臟細胞和___________置于離心管中，加入__________促進細胞融合。融合后的細胞加入選擇培養(yǎng)液中培養(yǎng)一周，而后進行專一抗體檢測篩選出_________________________________________進行克隆化培養(yǎng)，最終獲得與芍藥苷特異性結合的單克隆抗體。芍藥苷免疫處理骨髓瘤細胞聚乙二醇能產(chǎn)生抗芍藥苷的單克隆抗體的雜交瘤細胞(3)為了確定制備的單克隆抗體可以用于芍藥苷含量的檢測，研究人員檢測了單抗與芍藥苷結構類似的其他中藥小分子化合物結合率，結果如下表：該結果充分體現(xiàn)了單克隆抗體_______________________的特點?；衔锝Y合反應率(%)芍藥苷100人參皂苷<0.27三七皂苷<0.01甾類<0.01黃酮類<0.01特異性強、靈敏度高(4)研究人員選擇了《傷寒論》中6個含有白芍的方劑進行研究。首先按照原書中配方進行藥物配制，打碎后用相同濃度的乙醇浸提，過濾獲得提取液。而后利用單克隆抗體對提取液中的芍藥苷含量進行測定，并計算芍藥苷溶出率(溶出率＝芍藥苷質量/方劑中添加白芍質量)，結果見圖。實驗中還測定了單獨白芍一味藥物中的芍藥苷溶出率，測定的目的是__________。結果顯示，除__________________兩種方劑外，其他配伍對芍藥苷溶出率有較大影響，可見藥物成分間存在著復雜的相互作用。(5)研究不同配伍方劑中藥物有效成分含量的意義在于_______________________。作為對照桂枝湯和四逆散提高用藥的安全性和準確性三、動物細胞培養(yǎng)和動物體細胞核移植的比較

動物細胞培養(yǎng)動物體細胞核移植原理細胞增殖動物細胞核具有全能性目的得到大量細胞或細胞產(chǎn)物克隆動物個體過程

動物細胞培養(yǎng)動物體細胞核移植應用①生產(chǎn)病毒疫苗、干擾素、單克隆抗體等②培養(yǎng)基因工程中常用的受體細胞③用于檢測有毒物質以及醫(yī)學研究等①加速家畜遺傳改良進程，促進優(yōu)良畜群繁育②保護瀕危物種，增加存活數(shù)量③轉基因克隆動物作為生物反應器，生產(chǎn)珍貴的醫(yī)用蛋白④作為異種移植的供體⑤用于組織器官的移植等例4

(2023·天津等級考)根據(jù)如圖，正確的是(

)A．子代動物遺傳性狀和受體動物完全一致B．過程1需要MⅡ期去核卵母細胞C．過程2可以大幅改良動物性狀D．過程2為過程3提供了量產(chǎn)方式，過程3為過程1、2提供了改良性狀的方式[解析]

子代動物的遺傳性狀與供體基本一致，但與受體無關，A錯誤；核移植過程中需要處于MⅡ中期的去核卵母細胞，而過程1是培育試管動物，需要培育到適宜時期(桑葚胚或囊胚等時期)進行胚胎移植，B錯誤；過程2得到的是克隆動物，是無性生殖的一種，不能大幅改良動物性狀，C錯誤；過程2克隆技術可得到大量同種個體，為過程3提供了量產(chǎn)方式，過程3是轉基因技術，轉基因可導入外源優(yōu)良基因，為過程1、2提供了改良性狀的方式，D正確?！汤?

(2021·遼寧選擇性考試)如圖是利用體細胞核移植技術克隆優(yōu)質奶牛的簡易流程圖，有關敘述正確的是(

)A．后代丁的遺傳性狀由甲和丙的遺傳物質共同決定B．過程①需要提供95%空氣和5%CO2的混合氣體C．過程②常使用顯微操作去核法對受精卵進行處理D．過程③將激活后的重組細胞培養(yǎng)至原腸胚后移植[解析]

后代丁的細胞核的遺傳物質來自甲，細胞質的遺傳物質來自乙牛，則丁的遺傳性狀由甲和乙的遺傳物質共同決定，A錯誤；動物細胞培養(yǎng)中需要提供含95%空氣(保證細胞的需氧呼吸)和5%CO2(維持培養(yǎng)液的pH)的混合氣體，B正確；過程②常使用顯微操作去核法對卵母細胞進行處理，C錯誤；過程③將激活后的重組細胞培養(yǎng)至囊胚或桑葚胚后移植，D錯誤?！萄由爝w移實現(xiàn)融會貫通考向1圍繞動物細胞培養(yǎng)，考查科學思維素養(yǎng)1．(2021·浙江1月選考)如圖為動物成纖維細胞的培養(yǎng)過程示意圖。下列敘述正確的是(

)A．步驟①的操作不需要在無菌環(huán)境中進行B．步驟②中用鹽酸溶解細胞間物質使細胞分離C．步驟③到④的分瓶操作前常用胰蛋白酶處理D．步驟④培養(yǎng)過程中不會發(fā)生細胞轉化243題號165√C

[動物細胞培養(yǎng)過程需要無菌操作，故步驟①的操作需要在無菌環(huán)境中進行，A錯誤；動物細胞培養(yǎng)過程需要用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理動物組織，使其分散成單個細胞，制成細胞懸液，B錯誤；傳代培養(yǎng)時需要用胰蛋白酶處理貼壁生長的細胞，使之分散成單個細胞，再分瓶培養(yǎng)，C正確；步驟④為傳代培養(yǎng)過程，該過程中部分細胞可能發(fā)生細胞轉化，D錯誤。]243題號165243題號1652．科學家把小鼠胚胎細胞中的Oct4、Sox2、Klf4和c-Myc四種轉錄因子基因導入病毒載體，然后導入小鼠成纖維細胞獲得誘導多能干細胞(iPS細胞)。現(xiàn)將甲鼠的成纖維細胞誘導形成iPS細胞，然后將其導入去除內(nèi)細胞團的乙鼠囊胚，再移植到丙鼠的子宮內(nèi)進行胚胎發(fā)育。下列相關敘述正確的是(

)A．小鼠成纖維細胞培養(yǎng)的過程中不會發(fā)生接觸抑制的現(xiàn)象B．這四種轉錄因子可以誘導相關基因表達，從而改變細胞質中的蛋白質種類C．胚胎移植時需要對丙鼠注射免疫抑制劑，避免免疫排斥D．胚胎發(fā)育過程中，囊胚的所有細胞都參與分化形成胚胎的所有器官和組織B

[小鼠成纖維細胞培養(yǎng)的過程中會發(fā)生接觸抑制的現(xiàn)象，A錯誤；這四種轉錄因子可以誘導相關基因表達，從而改變細胞質中的蛋白質種類，B正確；胚胎移植時不需要對丙鼠注射免疫抑制劑，C錯誤；胚胎發(fā)育過程中，囊胚的內(nèi)細胞團細胞參與分化形成胚胎的所有器官和組織，但是滋養(yǎng)層細胞不發(fā)育成胎兒的組織，D錯誤。]√243題號65考向2圍繞細胞核移植，考查科學思維與科學探究素養(yǎng)3．我國支持治療性克隆，反對生殖性克隆。如圖表示治療性克隆過程，下列敘述錯誤的是(

)A．上述過程利用了核移植和胚胎移植技術B．①過程可采用電脈沖融合技術C．②③過程都需在CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)D．治療性克隆可解決器官移植中的排異問題√1243題號65A

[該過程表示治療性克隆過程，利用了核移植技術，但并沒有使用胚胎移植技術，A錯誤；①表示核移植過程，是把患者細胞核移植到去核卵母細胞中構建形成重組細胞，可采用電脈沖融合技術，B正確；②③過程都需置于含95%的空氣加5%的CO2的混合氣體的培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)，CO2的主要作用是維持培養(yǎng)液的pH，C正確；治療性克隆是指把患者細胞核移植到去核卵母細胞中構建形成重組細胞，體外培養(yǎng)到一定時期分離出ES細胞，獲得的ES細胞定向分化為所需的特定類型細胞，可解決器官移植中的排異問題，D正確。]1243題號654．(2023·稽陽聯(lián)誼學校高三聯(lián)考)M基因編碼的M蛋白在哺乳動物A的肝細胞中特異性表達?，F(xiàn)設計實驗，將外源DNA片段F插入M基因的特定位置，再通過核移植、胚胎培養(yǎng)和胚胎移植等技術獲得M基因失活的轉基因克隆動物A，流程如圖所示，下列說法錯誤的是(

)A．成纖維細胞取核前要進行營養(yǎng)限制性培養(yǎng)B．采集卵母細胞前應進行超數(shù)排卵處理，采集到的卵母細胞均需培養(yǎng)成熟后才能去核C．轉基因、核移植或體外受精等獲得的胚胎，都必須經(jīng)胚胎移植才能獲得動物A的后代D．該技術獲得的動物A可用于器官移植√1243題號65B

[對成纖維細胞進