生物課后訓練：專題課題微生物的實驗室培養(yǎng)

學必求其心得，業(yè)必貴于專精學必求其心得，業(yè)必貴于專精學必求其心得，業(yè)必貴于專精課后訓練一、選擇題1．下表是對四種生物的能源、碳源、氮源、新陳代謝類型的描述，正確的一組是（）。硝化細菌乳酸菌根瘤菌衣藻A能源NH3乳酸N2光能B碳源CO2糖類等糖類等CO2C氮源NH3N2N2NOeq\o\al(－，3)D代謝類型自養(yǎng)需氧型異養(yǎng)厭氧型自養(yǎng)需氧型自養(yǎng)需氧型2.對培養(yǎng)基、培養(yǎng)皿、接種環(huán)、實驗操作者的雙手、空氣、牛奶所采用的滅菌或消毒的方法依次是（）。①化學消毒②灼燒滅菌③干熱滅菌④紫外線滅菌⑤高壓蒸汽滅菌⑥巴氏消毒法A．⑤③②①④⑥ B．①②③④⑤⑥ C．⑥②③④①⑤ D．③④②①⑥⑤3．下列操作屬于滅菌的是(）。A．接種前用火焰灼燒接種環(huán) B．接種前用酒精擦拭雙手C．將平板倒置，放入培養(yǎng)箱中培養(yǎng) D．接種在酒精燈的火焰旁完成4．獲得純凈培養(yǎng)物的關鍵是（）.A．將用于微生物培養(yǎng)的器皿、接種用具和培養(yǎng)基等器具進行滅菌B．接種純種細菌C．適宜環(huán)境條件下培養(yǎng)D．防止外來雜菌的入侵5．金黃色葡萄球菌有很強的致病力，常引起骨髓炎等，還可能引起食物中毒，下列實驗結束后的做法錯誤的是（）。A．對接種環(huán)進行灼燒處理B．帶菌培養(yǎng)基必須經高壓蒸汽滅菌鍋滅菌后才能倒掉C．帶菌培養(yǎng)基必須經加熱后才能倒掉D．接種后雙手必須經肥皂洗凈，再用75%的酒精棉球擦拭6．下列敘述錯誤的是（).A．培養(yǎng)乳酸菌時需要在培養(yǎng)基中添加維生素B．培養(yǎng)霉菌時需將培養(yǎng)基的pH調至堿性C．培養(yǎng)細菌時需將培養(yǎng)基的pH調至中性或微堿性D．培養(yǎng)厭氧微生物時需要提供無氧的條件7．下列有關倒平板操作錯誤的是（）。A．在火焰旁進行操作B．使打開的錐形瓶瓶口迅速通過火焰C．將培養(yǎng)皿打開，培養(yǎng)皿蓋倒放在桌面上D．等待平板冷卻凝固后需要倒過來放置8．下列關于倒平板及對菌種純化的說法正確的是（）。A．倒平板時左手將滅過菌的培養(yǎng)皿蓋完全打開，右手將錐形瓶中培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿（約10～20mL），左手立即蓋上培養(yǎng)皿蓋B．使用已滅菌的接種環(huán)，培養(yǎng)基不需要再滅菌C．平板冷凝后要將平板倒置，以防皿蓋上的冷卻水倒流入培養(yǎng)基D．涂布器用火焰灼燒滅菌9．稀釋涂布平板法是微生物培養(yǎng)中的一種常用的接種方法。下列相關敘述錯誤的是（）。A．操作中需要將菌液進行一系列的濃度梯度稀釋B．需將不同稀釋度的菌液分別涂布到固體培養(yǎng)基表面C．不同濃度的菌液均可在培養(yǎng)基表面形成單個的菌落D．操作過程中對培養(yǎng)基和涂布器等均需進行嚴格滅菌處理二、非選擇題10．為了獲得純度高的大腸桿菌，需要對大腸桿菌進行培養(yǎng)和分離。培養(yǎng)大腸桿菌一般用牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基。（1)培養(yǎng)大腸桿菌，配制固體培養(yǎng)基的基本步驟是：計算→稱量→________→________→________→________→倒平板.（2)稱量時，牛肉膏由于比較黏稠，可以用________挑取，放在________上稱量。牛肉膏和蛋白胨由于________，稱量時動作要迅速，稱后要及時蓋上瓶蓋.（3）在牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基上大腸桿菌生長，說明培養(yǎng)基含有________等大腸桿菌生長所需的營養(yǎng)要素。(4）微生物純化培養(yǎng)可以通過多種接種方法如________和________等,使大腸桿菌在固體培養(yǎng)基上形成單個________，從而獲得純菌株。11．（2010·重慶理綜)炭疽病是由炭疽桿菌引起的一種人畜共患傳染病。炭疽桿菌兩端截平、呈竹節(jié)狀排列，菌落呈卷發(fā)狀。對炭疽病疑似患者，可根據噬菌體的宿主專一性，通過實驗確診。（1）細菌培養(yǎng):采集疑似患者的樣本,分離培養(yǎng)，獲得可疑菌落。（2）細菌鑒定：實驗流程如下圖所示。①對配制的液體培養(yǎng)基等需采取________方法滅菌；實驗所用液體培養(yǎng)基的碳源為________（填“無機碳"或“有機碳”）。②挑選可疑菌落制片后，用________觀察，可看到呈竹節(jié)狀排列的桿菌。③接種可疑菌后,35℃培養(yǎng)24h，液體培養(yǎng)基變渾濁,原因是________________。對照組試管中應加入________,與實驗組同時培養(yǎng)6h后，若實驗組液體培養(yǎng)基的渾濁度比對照組______(填“高"或“低”），則可明確疑似患者被炭疽桿菌感染;④對排除的疑似患者及易感人群,可接種炭疽桿菌疫苗，刺激機體產生相應抗體。與產生抗體相關的細胞除T細胞、B細胞外，還有____________。12．將50mL牛奶煮沸，倒入經消毒的一個錐形瓶內，錐形瓶口用棉團堵住，每日觀察牛奶的情況(如下圖），共進行4d.用藍色石蕊試紙檢驗結果。(1）這個實驗可證明_________________________________________________________。（2）為這個實驗設計的對照實驗應該是_________________________________________。（3）實驗結束時，牛奶會________，藍色石蕊試紙變______，產生這一現象的原因是_____________________________________________________________________________。(4）牛奶在這個實驗中的作用是______________________________________________。（5)實驗前先將牛奶煮沸的原因是_____________________________________________。(6）加入土樣前，先讓牛奶冷卻至室溫的原因是__________________________________________________________________________________________________________。(7）用棉團堵住錐形瓶的原因是_____________________________________________。（8）實驗前對錐形瓶進行消毒這一個步驟是否是必要的？________,理由是________________________________________________________________________________________________________________________________________________________。

參考答案1。答案：B從能源來看，乳酸菌需糖類等有機物供能；從氮源看，乳酸菌需要NHeq\o\al(＋，4）、NOeq\o\al（－,3）；從代謝類型看，根瘤菌為異養(yǎng)需氧型；從碳源看，硝化細菌與衣藻需CO2，乳酸菌和根瘤菌需要糖類等有機物。2.答案:A培養(yǎng)基用高壓蒸汽滅菌；培養(yǎng)皿能耐高溫，需用干熱滅菌;接種環(huán)可用灼燒滅菌達到迅速徹底的滅菌效果；實驗操作者的雙手可用化學藥劑進行消毒，如用酒精擦拭雙手；空氣可用紫外線消毒;牛奶為不破壞其營養(yǎng)成分可采用巴氏消毒法。3。答案：A要正確區(qū)分滅菌、消毒和防止雜菌污染。A屬于滅菌，B屬于消毒，C、D都是實驗操作過程中防止雜菌污染的措施，與滅菌無關.4.答案：D5.答案：C帶菌培養(yǎng)基必須經高壓蒸汽滅菌鍋滅菌后才能倒掉，不能通過簡單的加熱后就倒掉，這樣達不到滅菌效果。6。答案：B霉菌適宜的pH為5。0~6.0;細菌適宜的pH為6.5～7。5；放線菌適宜的pH為7.5～8.5。7.答案:C整個倒平板過程要防止外來雜菌的入侵，因此，滅過菌的培養(yǎng)皿放在火焰旁。打開的錐形瓶瓶口迅速通過火焰。培養(yǎng)皿打開一條稍大于瓶口的縫隙進行操作,不能將培養(yǎng)皿蓋完全打開。平板冷卻凝固后需要倒過來放置。8。答案：C倒平板時用左手的拇指和食指將培養(yǎng)皿打開一條稍大于瓶口的縫隙而不是直接將蓋完全打開；使用滅過菌的接種環(huán),培養(yǎng)基仍需進行滅菌處理，以免污染環(huán)境或感染操作者;涂布器滅菌時需沾少量酒精引燃。9。答案：C稀釋涂布平板法是將菌液進行一系列的梯度稀釋，然后將不同稀釋度的菌液分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面，在適宜條件下培養(yǎng)。只有在稀釋度足夠高的菌液里，聚集在一起的微生物才被分散成單個細胞，從而能在培養(yǎng)基表面形成單個的菌落。10。答案：(1）溶化定容調節(jié)pH滅菌（2）玻璃棒稱量紙容易吸潮（3）碳源、氮源、無機鹽、水（4)平板劃線法稀釋涂布平板法菌落11.解析:（2)①微生物的培養(yǎng)基配制后常用高壓蒸汽滅菌法滅菌;由于炭疽桿菌是異養(yǎng)型微生物，培養(yǎng)基中應加有機碳作碳源。②炭疽桿菌呈竹節(jié)狀排列，需借助顯微鏡觀察。③接種培養(yǎng)后,液體培養(yǎng)基由澄清變渾濁，應是細菌大量繁殖所致。實驗應遵循單一變量原則和等量原則，實驗組加入生理鹽水配制的澄清噬菌體液，對照組應加入等量的生理鹽水；若疑似患者被炭疽桿菌感染，則培養(yǎng)6小時后,實驗組中的炭疽桿菌由于噬菌體侵染而大量裂解死亡，渾濁度會明顯低于對照組。④接種疫苗后,機體通過體液免疫產生抗體，與此相關的細胞有吞噬細胞、T細胞、B細胞和漿（效應B）細胞.答案：（2)①高壓蒸汽（98kPa蒸汽）有機碳②顯微鏡③細菌大量繁殖等量生理