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果酒和果醋的制作(1)你認(rèn)為應(yīng)該先沖洗葡萄還是先除去枝梗?為什么?(2)你認(rèn)為應(yīng)該從哪些方面防止發(fā)酵液被污染?(3)制葡萄酒時(shí),為什么要將溫度控制在18~25℃?制葡萄醋時(shí),要將溫度控制在30~35℃?大腸桿菌的培養(yǎng)與分離(1)微生物接種的方法;平板劃線法稀釋涂布平板法。(2)用平板劃線法和稀釋涂布平板法接種的目的是:使聚集在一起的微生物分散成單個(gè)細(xì)胞,從而能在培養(yǎng)基表面形成單個(gè)的菌落,以便于純化菌種?!て桨鍎澗€操作的討論1.為什么在操作的第一步以及每次劃線之前都要灼燒接種環(huán)?在劃線操作結(jié)束時(shí),仍然需要灼燒接種環(huán)嗎?為什么?2.在灼燒接種環(huán)之后,為什么要等其冷卻后再進(jìn)行劃線?(3)涂布平板操作的步驟:①將涂布器浸在盛有酒精的燒杯中。②取少量菌液,滴加到培養(yǎng)基表面。③將沾有少量酒精的涂布器在火焰上引燃,待酒精燃盡后,冷卻8~10s。④用涂布器將菌液均勻地涂布在培養(yǎng)基表面。菌種的保存斜面保存甘油管藏土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離與計(jì)數(shù)1、尿素:一種重要的農(nóng)業(yè)氮肥,不能直接被農(nóng)作物吸收。只有當(dāng)土壤中的細(xì)菌將尿素分解成氨之后,才能被植物利用。土壤中的細(xì)菌之所以能分解尿素,是因?yàn)樗麄兡芎铣呻迕福蛩刈畛跏菑娜说哪蛞褐邪l(fā)現(xiàn)的)2、篩選菌株(1)實(shí)驗(yàn)室中微生物的篩選應(yīng)用的原理:人為提供有利于目的菌株生長(zhǎng)的條件,同時(shí)抑制或阻止其他微生物生長(zhǎng)。(2)選擇性培養(yǎng)基:在微生物學(xué)中,將允許特定種類(lèi)的微生物生長(zhǎng),同時(shí)抑制或阻止其他種類(lèi)微生物生長(zhǎng)的培養(yǎng)基,稱(chēng)作選擇培養(yǎng)基。(3)配制選擇培養(yǎng)基的依據(jù)根據(jù)選擇培養(yǎng)的菌種的生理代謝特點(diǎn)加入某種物質(zhì)以達(dá)到選擇的目的。例如,培養(yǎng)基中不加入有機(jī)物可以選擇培養(yǎng)自養(yǎng)微生物;培養(yǎng)基中不加入氮元素,可以選擇培養(yǎng)能固氮的微生物;加入高濃度的食鹽可選擇培養(yǎng)金黃色葡萄球菌等。3、統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)目(1)測(cè)定微生物數(shù)量的常用方法:稀釋涂布平板法顯微鏡直接計(jì)數(shù)。(2)稀釋涂布平板法統(tǒng)計(jì)樣品中活菌的數(shù)目的原理選擇菌落數(shù)在30~300的平板進(jìn)行計(jì)數(shù),并取平均值。統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)往往比活菌的實(shí)際數(shù)目低,因此,統(tǒng)計(jì)結(jié)果一般用菌落數(shù)而不是活菌數(shù)來(lái)表示。4、設(shè)置對(duì)照5、實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)(1)土壤取樣:同其他生物環(huán)境相比,土壤中的微生物,數(shù)量最大,種類(lèi)最多。鏟去表層土,在距地表約3~8cm的土壤層取樣。(2)樣品的稀釋?zhuān)簻y(cè)定土壤中細(xì)菌104105106放線菌103104105真菌102103104(3)微生物的培養(yǎng)與觀察細(xì)菌30~37℃1~2天放線菌25~28℃5~7天霉菌25~28℃3~4天每隔24小時(shí)統(tǒng)計(jì)一次菌落數(shù)目,選取菌落數(shù)目穩(wěn)定時(shí)的記錄作為結(jié)果在一定的培養(yǎng)條件下同種微生物表現(xiàn)出穩(wěn)定的菌落特征。形狀、大小、隆起程度、顏色疑難解答(1)如何從平板上的菌落數(shù)推測(cè)出每克樣品中的菌落數(shù)?植物組織培養(yǎng)基因工程1.回答下列(一)、(二)小題:(一)某科研團(tuán)隊(duì)利用植物細(xì)胞工程技術(shù),把基因序列已知的抗除草劑(Bar)基因?qū)朐|(zhì)體獲得抗除草劑大豆。請(qǐng)回答下列相關(guān)問(wèn)題:(1)對(duì)于已獲得的Bar基因可以用技術(shù)進(jìn)行擴(kuò)增。圖中的a過(guò)程通常使用相同的酶和DNA連接酶,使目的基因與載體連接形成重組DNA。(2)在b過(guò)程中,獲得原生質(zhì)體除了需要纖維素酶和果膠酶,還需要用到的試劑是。(3)成功導(dǎo)入重組DNA的原生質(zhì)體經(jīng)脫分化形成Ⅰ,進(jìn)而生長(zhǎng)發(fā)育成植株。下列不屬于Ⅰ細(xì)胞應(yīng)具有的特征是。A.薄壁細(xì)胞B.細(xì)胞質(zhì)豐富C.液泡小D.細(xì)胞核小(4)若要判斷轉(zhuǎn)基因抗除草劑大豆是否成功,比較簡(jiǎn)便的檢測(cè)方法是。(二)下圖是“分離以尿素為氮源的微生物”實(shí)驗(yàn)的基本流程,請(qǐng)回答下列問(wèn)題:(5)該實(shí)驗(yàn)培養(yǎng)基不能含有。A.尿素B.氯化鈉C.葡萄糖D.瓊脂(6)尿素溶液可用使之無(wú)菌。若要檢查B過(guò)程滅菌是否徹底,可以采用的方法是。(7)圖中步驟C為。相對(duì)于劃線分離法,過(guò)程D涂布分離法的優(yōu)點(diǎn)是。(8)如果菌落周?chē)霈F(xiàn)色環(huán)帶,說(shuō)明該菌落能分泌脲酶。2研究結(jié)果表明:除草劑2,4-D的使用對(duì)土壤生物群落中真菌數(shù)量有著明顯影響,當(dāng)濃度為5mg/kg時(shí),土壤中真菌數(shù)量沒(méi)有明顯改變;當(dāng)濃度為25mg/kg時(shí),真菌數(shù)有明顯下降但能逐漸恢復(fù);當(dāng)濃度等于或超過(guò)50mg/kg時(shí),真菌數(shù)位明顯下降且無(wú)法恢復(fù)。請(qǐng)根據(jù)以下提供的實(shí)驗(yàn)材料對(duì)上述結(jié)果進(jìn)行驗(yàn)證。實(shí)驗(yàn)材料:未使用除草劑2,4-D的土壤、濃度為50mg/kg的2,4-D溶液、蒸餾水、培養(yǎng)皿若干個(gè)、血細(xì)胞計(jì)數(shù)板、顯微鏡(要求與說(shuō)明:真菌計(jì)數(shù)的具體操作過(guò)程不作要求:實(shí)驗(yàn)條件適宜)請(qǐng)回答:(1)實(shí)驗(yàn)思路:(2)預(yù)測(cè)實(shí)驗(yàn)結(jié)果(設(shè)計(jì)一個(gè)坐標(biāo),用曲線圖表示檢測(cè)結(jié)果)(3)該實(shí)驗(yàn)還可以利用(儀器)測(cè)定溶液的渾濁度,來(lái)估算真菌的數(shù)量。(4)該實(shí)驗(yàn)對(duì)指導(dǎo)農(nóng)業(yè)生產(chǎn)具有重要意義。請(qǐng)從生態(tài)系統(tǒng)成分的角度分析不能過(guò)量施用2,4-D的原因:3.鐵皮石斛是一種名貴中藥材,有生津養(yǎng)胃、降血糖和增強(qiáng)免疫力等作用,有效成分為石斛多糖、石斛堿等,溫州雁蕩山素有“中國(guó)鐵皮石斛之鄉(xiāng)”的美譽(yù)。請(qǐng)回答:(1)用優(yōu)良品種自然生長(zhǎng)的莖快速繁殖鐵皮石斛時(shí),給莖消毒時(shí)無(wú)需使用的是______________(A.乙醇B.無(wú)菌水無(wú)C.甘露醇D.次氯酸鈉)。在細(xì)胞分裂素相對(duì)較多和生長(zhǎng)素相對(duì)較少的培養(yǎng)基中培養(yǎng)莖的切段,待長(zhǎng)出較多的__________,將其進(jìn)行__________(處理)后再轉(zhuǎn)入__________培養(yǎng)基中繼續(xù)培養(yǎng),直至長(zhǎng)成幼苗。這種通過(guò)組織培養(yǎng)技術(shù)快速繁殖植物的方法,也稱(chēng)為_(kāi)_________。(2)研究發(fā)現(xiàn),鐵皮石斛的生長(zhǎng)發(fā)育與其體內(nèi)的內(nèi)生菌密切相關(guān)。為進(jìn)一步研究?jī)?nèi)生菌作用,需要大量?jī)?nèi)生菌進(jìn)行相關(guān)實(shí)驗(yàn)。分離內(nèi)生菌時(shí)最好采用_____________(A.G6玻璃砂漏斗過(guò)濾法B.血細(xì)胞計(jì)數(shù)法C.劃線分離法D.涂布分離法),再將純化的內(nèi)生菌轉(zhuǎn)移到液體培養(yǎng)基中進(jìn)行_____________。(3)研究發(fā)現(xiàn),200mg/L濃度的卡那毒素能有效抑制鐵皮石斛細(xì)胞的增殖與分化??茖W(xué)家欲利用卡那霉素,采用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法對(duì)現(xiàn)有鐵皮石斛品種進(jìn)行基因改良。在基因工程操作中,導(dǎo)入受體細(xì)胞的_____________分子應(yīng)同時(shí)帶有目的基因和_____________基因,這樣才能利用含有卡那霉素的培養(yǎng)基將成功導(dǎo)入目的基因的受體細(xì)胞篩選出來(lái)。(4)鑒定鐵皮石斛的品質(zhì),可通過(guò)苯酚-濃硫酸法測(cè)定石斛多糖的含量。其原理是:石斛多糖水解成單糖并脫水生成糖醛衍生物后,與苯酚縮合生產(chǎn)橙黃色化合物,在490mm處測(cè)定光密度值,以不同濃度的葡萄糖溶液為標(biāo)準(zhǔn)溶液建立標(biāo)準(zhǔn)曲線,便可知道樣品的石斛多糖含量。這種方法類(lèi)似于泡菜汁中_____________含量的測(cè)定,稱(chēng)之為_(kāi)____________法。(5)為高效提取石斛多糖,可在提取液中加入_____________,以提高鐵皮石斛的出汁率。4.給健康雄性小鼠一次灌喂1mL50%乙醇,禁食16h后處死小鼠,取出肝臟進(jìn)行檢測(cè),發(fā)現(xiàn)肝組織中還原型谷胱甘肽(GSH)、甘油三酯(TG)的含量都明顯增加,分別為Xμg/mL、Ymmol/L。為研究小鼠每天灌喂護(hù)肝茶對(duì)一次灌喂1mL50%乙醇所致急性肝損傷的影響,請(qǐng)依據(jù)提供的材料用具,以肝組織中GSH、TG的含最為檢測(cè)指標(biāo),提出實(shí)驗(yàn)思路,并預(yù)測(cè)實(shí)驗(yàn)結(jié)果。材料用具:符合實(shí)驗(yàn)要求的雄性小鼠若干只,高、中、低劑量的護(hù)肝茶,清水,50%乙醇,灌喂設(shè)備,檢測(cè)設(shè)備等。(要求與說(shuō)明:實(shí)驗(yàn)期間小鼠在適宜條件下飼養(yǎng);30d后檢測(cè)小鼠肝組織中GSH、TG的含量,檢測(cè)方法和過(guò)程不作要求。)請(qǐng)回答:(1)實(shí)驗(yàn)思路:(2)結(jié)果表明,在實(shí)驗(yàn)劑量范圍內(nèi),護(hù)肝茶對(duì)1mL50%乙醇所致急性肝損傷有保護(hù)作用。對(duì)TG增加的抑制作用:隨劑量增大,抑制作用增強(qiáng),在高劑量情況下測(cè)得TG含量為3/4Ymmol/L;對(duì)GSH增加的促進(jìn)作用:只有在高劑量情況下才有明顯的促進(jìn)作用,測(cè)得G
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