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PAGE4-特別“組合4”主觀題模擬真演練(四)1.[2024·遼寧省大連市高三一模]微衛(wèi)星DNA是廣泛分布于真核生物基因組中的簡潔重復(fù)序列。由于重復(fù)單位的重復(fù)次數(shù)在個體間呈高度特異性并且數(shù)量豐富,因此,微衛(wèi)星DNA可以作為分子標(biāo)記,并有著廣泛應(yīng)用。(1)為了分別捕獲到某種生物的微衛(wèi)星DNA分子標(biāo)記,可以用同位素標(biāo)記的特定簡潔重復(fù)序列作為探針,與該生物的________文庫進行雜交,然后再經(jīng)多個步驟篩選獲得微衛(wèi)星DNA。(2)擴增分別到的微衛(wèi)星DNA序列的PCR反應(yīng)體系中含緩沖液、模板DNA、dNTP(包含dATP、dCTP、dGTP、dTTP)、引物及熱穩(wěn)定DNA聚合酶等。其中dNTP的作用是________________;該技術(shù)的前提是______________________________________,以便依據(jù)這一序列合成引物,所以引物應(yīng)選用圖中________(填圖中標(biāo)號)。(3)PCR的基本反應(yīng)步驟為____________________________________,其產(chǎn)物量以____________形式擴增。(4)依據(jù)“微衛(wèi)星DNA”的特點推斷,這種分子標(biāo)記可應(yīng)用于________(填字母)。A.人類親子鑒定B.種群遺傳多樣性探討C.誘導(dǎo)基因突變D.冠狀病毒遺傳物質(zhì)測序2.[2024·山東省試驗中學(xué)高三模擬]人乳鐵蛋白(hLF)對細菌、真菌和病毒等都有抑制作用。探討人員開展人乳鐵蛋白基因乳腺特異性表達載體構(gòu)建及轉(zhuǎn)染探討,主要流程如下圖,圖中AseⅠ、NheⅠ、SalⅠ、BamHⅠ代表相關(guān)限制酶切點,neor為新霉素抗性基因,BLG基因為B乳球蛋白基因,GFP基因為綠色熒光蛋白基因。請回答下列相關(guān)問題:(1)過程①中,不能從人肌肉細胞中提取RNA用于RT-PCR,是因為______________________________________。在RT-PCR過程中,加入的引物需在5′端添加____________________兩種限制酶的識別序列,以便于hLF基因插入pEB中。(2)過程②中,hLF基因插入到BLG基因之后的目的是___________________________________________________________________________________________________。(3)將轉(zhuǎn)染后的山羊乳腺上皮細胞先置于含新霉素的培育液中培育,能夠存活的細胞應(yīng)當(dāng)是導(dǎo)入________的細胞,再利用熒光顯微鏡視察山羊乳腺上皮細胞中________,以篩選出轉(zhuǎn)染勝利的細胞。(4)要獲得轉(zhuǎn)基因山羊,還須要將勝利表達hLF的乳腺上皮細胞的細胞核移植到山羊去核卵母細胞中,再借助____________________________________________________________技術(shù)孕育出羊羔。3.[2024·黑龍江省哈爾濱市三中高三其次次模擬]3月30日,《自然》期刊報道了清華高校生命學(xué)院王新泉和醫(yī)學(xué)院張林琦課題組關(guān)于新冠病毒(SARS-CoV-2)的重要探討成果。該探討解析了新冠病毒表面S蛋白(抗原)與人受體蛋白ACE2的高辨別率晶體結(jié)構(gòu)(新冠病毒主要通過S蛋白與受體ACE2結(jié)合侵染人體細胞),揭示了受體ACE2特異性介導(dǎo)新冠病毒侵染細胞的結(jié)構(gòu)基礎(chǔ),為治療性抗體藥物開發(fā)以及疫苗的設(shè)計奠定了堅實的基礎(chǔ)。(1)探討發(fā)覺,新冠病毒主要侵染人體肺部細胞,對機體其他部位細胞侵染實力相對較弱,可能緣由是________________________________________________________________。(2)人們可利用胚胎干細胞具有發(fā)育全能性的特點,在培育液中添加________________,誘導(dǎo)其分化成肺泡樣細胞,用來培育足量的新冠病毒以用于科學(xué)探討。(3)若用小鼠來生產(chǎn)新冠病毒疫苗,可將________________注入到小鼠體內(nèi),再從脾臟中分別出B淋巴細胞與骨髓瘤細胞融合,并用________________篩選出雜交瘤細胞。對上述篩選出的雜交瘤細胞,還需進行克隆化培育和抗體檢測,該步驟的目的是____________________________________。(4)培育雜交瘤細胞時,須要定期____________,以便清除代謝產(chǎn)物,防止細胞代謝產(chǎn)物積累對細胞自身造成危害。與傳統(tǒng)血清抗體相比,單克隆抗體主要的優(yōu)點是______________________________。4.[2024·安徽省安慶市高三第三次模擬]我國科學(xué)家利用生物工程技術(shù)勝利地培育出了人溶菌酶轉(zhuǎn)基因豬?;卮鹣铝袉栴}:(1)為獲得大量的人溶菌酶基因,常用________技術(shù)進行擴增,該技術(shù)的原理是____________。(2)培育人溶菌酶轉(zhuǎn)基因豬過程中,其核心步驟是________________。目的基因進入受體細胞,并在受體細胞內(nèi)維持穩(wěn)定和表達的過程,稱為________。(3)將受精卵培育至早期胚胎,胚胎的培育液成分一般比較困難,除一些無機鹽和有機鹽外,還須要維生素、激素、氨基酸、核苷酸等養(yǎng)分成分,以及________等物質(zhì)。體外培育受精卵時,須要供應(yīng)肯定濃度的CO2,其目的是________________________。(4)受精卵經(jīng)早期胚胎培育后進行胚胎移植,移植到受體子宮中,早期胚胎的________會形成胎盤和胎膜。也可在移植前對早期胚胎進行胚胎分割而得到兩個或多個胚胎,要留意將內(nèi)細胞團進行均等分割,否則__________________________________________________________________________________________________________________。特別“組合4”主觀題模擬真演練(四)1.(1)基因組(2)合成DNA的原料、供應(yīng)能量有一段已知目的基因的核苷酸序列Ⅰ和Ⅳ(3)DNA解鏈→引物結(jié)合到互補鏈→互補鏈的合成(變性、復(fù)性/退火、延長)(加熱解鏈→冷卻引物結(jié)合→加熱互補鏈合成)指數(shù)(約為2n)(4)AB解析:(1)由于微衛(wèi)星DNA是簡潔重復(fù)序列,可以用同位素標(biāo)記的特定簡潔重復(fù)序列作為探針,與該生物的基因組文庫進行雜交,然后再經(jīng)多個步驟篩選獲得微衛(wèi)星DNA。(2)dNTP在PCR過程中作為合成DNA分子的原料和供應(yīng)能量。PCR技術(shù)的前提是有一段已知目的基因的核苷酸序列,以便依據(jù)這一序列合成引物,這兩個DNA引物分別與目的基因雙鏈各一端序列相互補,所以引物應(yīng)選用圖中Ⅰ和Ⅳ。(3)PCR的基本反應(yīng)步驟為目的基因DNA受熱變性后解鏈為單鏈,引物與單鏈相應(yīng)互補序列結(jié)合,然后在DNA聚合酶作用下進行延長,如此重復(fù)循環(huán),因而每一次循環(huán)后目的基因的量可以增加一倍,即成指數(shù)形式擴增(約為2n,其中n為擴增循環(huán)的次數(shù))。PCR技術(shù)的步驟可簡潔概括為變性、復(fù)性/退火、延長。(4)微衛(wèi)星DNA是真核生物基因組中的簡潔重復(fù)序列,且重復(fù)單位的重復(fù)次數(shù)在個體間呈高度特異性,因此可用于人類親子鑒定、物種間親緣關(guān)系鑒定、物質(zhì)和遺傳多樣性的探討等,AB正確;誘導(dǎo)基因突變的因素有物理因素、化學(xué)因素和生物因素,與微衛(wèi)星DNA的特性無關(guān),C錯誤;冠狀病毒的遺傳物質(zhì)是RNA,其測序與微衛(wèi)星DNA的特性無關(guān),D錯誤。2.(1)hLF基因在人肌肉細胞中不轉(zhuǎn)錄(表達)SalⅠ和BamHⅠ(2)使人乳鐵蛋白基因在山羊的乳腺細胞中表達(或使目的基因表達)(3)pEB質(zhì)粒或pEBL質(zhì)粒(或一般質(zhì)?;蛑亟M質(zhì)粒)是否有綠色熒光(或是否有熒光)(4)早期胚胎培育和胚胎移植解析:(1)人肌肉細胞是高度分化的細胞,hLF基因在人肌肉細胞中不轉(zhuǎn)錄(表達),故過程①中,不能從人肌肉細胞中提取RNA用于RT-PCR。SalⅠ和BamHⅠ在質(zhì)粒上挨著,切割質(zhì)粒時不會破壞其他基因,故在RT-PCR過程中,加入的引物需在5′端添加SalⅠ和BamHⅠ兩種限制酶的識別序列,以便于hLF基因插入pEB中。(2)過程②重組載體的構(gòu)建,hLF基因插入到BLG基因之后的目的是使人乳鐵蛋白基因在山羊的乳腺細胞中表達。過程③重組載體導(dǎo)入受體細胞,運用人工膜制成的脂質(zhì)體將重組質(zhì)粒導(dǎo)入受體細胞,依據(jù)的主要原理是生物膜具有肯定的流淌性。(3)neor為新霉素抗性基因,具有抗新霉素的作用,故將轉(zhuǎn)染后的山羊乳腺上皮細胞先置于含新霉素的培育液中培育,能夠存活的細胞應(yīng)當(dāng)是導(dǎo)入pEB質(zhì)?;騪EBL質(zhì)粒的細胞,GFP基因為綠色熒光蛋白基因,作為標(biāo)記基因,可再利用熒光顯微鏡視察山羊乳腺上皮細胞中是否有綠色熒光,以篩選出轉(zhuǎn)染勝利的細胞。(4)要獲得轉(zhuǎn)基因山羊,還須要將勝利表達hLF的乳腺上皮細胞的細胞核移植到山羊去核卵母細胞中,再借助早期胚胎培育和胚胎移植技術(shù)孕育出羊羔。3.(1)ACE2蛋白基因主要在人體肺部細胞表達(2)分化誘導(dǎo)因子(3)新冠病毒(S蛋白)(特定的)選擇性培育基篩選出足量的能分泌抗新冠病毒(S蛋白)抗體的雜交瘤細胞(4)更換培育液特異性強、靈敏度高、可大量制備解析:(1)病毒是專性寄生物,新冠病毒主要侵染人體肺部細胞,對機體其他部位細胞侵染實力相對較弱,依據(jù)題目信息可知,新冠病毒對其他部位細胞侵染實力較弱的緣由是能特異性識別新冠病毒的受體ACE2基因主要在人體肺部細胞中表達。(2)胚胎干細胞具有發(fā)育的全能性,在培育液中添加分化誘導(dǎo)因子,誘導(dǎo)其分化成肺泡樣細胞,以滿意培育新冠病毒的要求,為科學(xué)探討創(chuàng)建條件。(3)若用小鼠來生產(chǎn)新冠病毒疫苗,則須要將新冠病毒表面S蛋白注入到小鼠體內(nèi),再從脾臟中分別出B淋巴細胞與骨髓瘤細胞融合,并用特定的選擇培育基將雜交瘤細胞篩選出來,對上述篩選出的符合要求的雜交瘤細胞,還需進行克隆化培育和抗體檢測,進一步找到能分泌新冠抗體(抗S蛋白)的雜交瘤細胞,然后再進行擴大培育獲得抗體。(4)培育雜交瘤細胞時,須要定期更換培育基,以便給雜交瘤細胞創(chuàng)建有利的生長條件,防止細胞代謝產(chǎn)物積累對細胞自身造成危害。與傳統(tǒng)血清抗體相比,單克隆抗體主要的優(yōu)點是特異性強、靈敏度高、并可大量制備。4.(1)PCRDNA雙鏈復(fù)制(2)基因表達載體的構(gòu)建轉(zhuǎn)化(3)血清維持培育液的pH(4)滋養(yǎng)層會影響分割后胚胎的復(fù)原和進一步發(fā)育解析:(1)為獲得大量的目的基因,常用PCR技術(shù)進行擴增,該技術(shù)的原理是DNA
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