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備案號(hào)：DB11DB11/T829—2011白菜品種純度及真實(shí)性分子檢測(cè)方法MethodsofidentifyingvarietalpurityandgenuinenessofChinesecabbagebyusingmolecularmarkers北京市質(zhì)量技術(shù)監(jiān)督局發(fā)布 本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了結(jié)球白菜和不結(jié)球白菜種子品種純度及真實(shí)性鑒定的SSR、用和適宜的反應(yīng)條件下，根據(jù)模板序列設(shè)計(jì)的兩條引物分別與模板DNA兩條鏈上相應(yīng)的一段生退火而相互結(jié)合，接著在DNA聚合酶的作用下以四種脫氧核糖核苷酸（d伸。然后不斷重復(fù)變性、退火和延伸這一循環(huán)過(guò)程，使欲擴(kuò)增的基因片段呈幾何簡(jiǎn)單重復(fù)序列（SSR）和內(nèi)部簡(jiǎn)單重復(fù)序列(ISSR)廣5儀器設(shè)備及耗材5.1.2水浴鍋(0℃~100℃)。5.1.8冰箱（最低溫度-20℃)。離心管（0.2mL、0.5mL、1.5mL、2.0mL）、槍頭（10μL、200μL、1mL）、96孔PCR板、一次性手），7.1.1應(yīng)優(yōu)先選用核心引物庫(kù)中的引物。當(dāng)不能滿足7.3.1白菜品種純度檢測(cè)常用的SSR引物名稱及序列參見附錄B。 —子和標(biāo)準(zhǔn)樣品中各隨機(jī)數(shù)取一定數(shù)量種子（保證10株— 9檢測(cè)結(jié)果鑒定SSR電泳譜帶帶型的一致性，計(jì)數(shù)供檢樣品種子粒數(shù)（株數(shù)）和非本）：——引物位點(diǎn)差異≥2，判定兩個(gè)品種為不同品），），D.1.2將1.5mL離心管置于80℃~90℃水浴鍋中水浴10min，水浴過(guò)程中混勻2～3次。將提取的白菜樣品DNA適當(dāng)稀釋，用紫外分光光度計(jì)在凹槽一端，將梳子齒向外，輕輕的插入梳子，使夾緊。在正極槽（下槽）和負(fù)極槽（上槽）中分別加在20μlPCR擴(kuò)增產(chǎn)物中加入5μL6倍非變性加樣緩沖液，混勻。用吸球吹吸加

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