消毒滅菌效果及環(huán)境衛(wèi)生學(xué)監(jiān)測

消毒滅菌效果及環(huán)境衛(wèi)生學(xué)監(jiān)測第一章消毒滅菌效果及環(huán)境衛(wèi)生學(xué)監(jiān)測第一節(jié)物體表面衛(wèi)生學(xué)監(jiān)測一、監(jiān)測范圍

1類環(huán)境：層流潔凈手術(shù)室、層流潔凈病房。II類環(huán)境：普通手術(shù)室、重癥監(jiān)護(hù)室、器官移植病房、產(chǎn)房、母嬰室、新生兒室、血液透析室、供應(yīng)室無菌間。皿類環(huán)境：治療室、換藥室、注射室、兒科病房、婦產(chǎn)科檢查室、內(nèi)鏡室、導(dǎo)管室、輸血科配血室、急診室、化驗(yàn)室、各類普通病室和房間。

IV類環(huán)境：傳染科及病房。二、采樣時間1.監(jiān)測頻率：普通病房每季度監(jiān)測1次；重癥監(jiān)護(hù)病房、產(chǎn)房、新生兒室、供應(yīng)室無菌問、手術(shù)室、血液透析室、輸血科配血室等每月監(jiān)測1次。2.具體采樣時間：常規(guī)監(jiān)測：消毒處理后進(jìn)行采樣：暴發(fā)流行時：對未處理的現(xiàn)場進(jìn)行采樣。三、采樣方法（一）采樣面積

被采樣物體表面Cl。cmL應(yīng)取全部物體表面。被采樣物體表面2100Cm2,則取100CmJ（二）采樣方法1.平面的物體，將5cmX5cm的標(biāo)準(zhǔn)滅菌規(guī)格板放在被檢物體表面，用浸有含相應(yīng)中和劑的無菌洗脫液（吐溫-801g、蛋白陳10g、氯化鈉8.5g、蒸做水1。ml配制而成,pH值7.2?7.4,121C壓力蒸汽滅菌20分鐘）的棉拭子1支，在規(guī)格板內(nèi)橫豎往返均勻涂抹各5次，并隨之轉(zhuǎn)動棉拭子。連續(xù)采樣1~4個規(guī)格板面積，然后剪去手接觸部位，將棉拭子投入I。ml含相應(yīng)中和劑的無菌洗脫液的試管內(nèi)，立即送檢。

2.門把手等小型或不規(guī)則物體則用棉拭子直接涂抹采樣。四、檢測方法將采樣管在混勻器上振蕩20秒或用力振打80次，用無菌吸管吸取1.。ml待檢樣本接種于滅菌平皿，每一樣本接種2個平皿，內(nèi)加入己融化的45?48C的營養(yǎng)瓊脂15?18ml,邊傾注邊搖勻，待瓊脂凝固后，置于37℃溫箱培養(yǎng)48小時后，計(jì)數(shù)菌落數(shù)。五、結(jié)果判斷

1類環(huán)境：細(xì)菌總數(shù)W5cfu/cm-并未檢出致病菌為消毒合格。II類環(huán)境：細(xì)菌總數(shù)W5cfu/cm2,并未檢出致病菌為消毒合格。

Ill類環(huán)境：細(xì)菌總數(shù)WI。CfU/cnΛ并未檢出致病菌為消毒合格。W類環(huán)境：細(xì)菌總數(shù)W15cfu/cnΛ并未檢出致病菌為消毒合格。母嬰室、早產(chǎn)兒室、嬰兒室、新生兒室及兒科病房的物體表面不得檢出沙門菌。六、注意事項(xiàng)

1.采取的標(biāo)本要有代表性。

2.采樣時棉拭子要處于濕潤狀態(tài)，禁止使用干棉拭子采樣。3.用于接種的培養(yǎng)基應(yīng)置于37C培養(yǎng)24小時證實(shí)無菌生長后方可使用。第二節(jié)手衛(wèi)生監(jiān)測一、采樣時間1.監(jiān)測頻率：普通病房醫(yī)務(wù)人員的手每季度監(jiān)測1次；重癥監(jiān)護(hù)病房、產(chǎn)房、新生兒室、供應(yīng)室無菌間、手術(shù)室、血液透析室、輸血科配血室等病房醫(yī)務(wù)人員的手，每月監(jiān)測1次。

2.具體采樣時間。常規(guī)監(jiān)測：洗手后，從事診療操作前。特殊監(jiān)測：當(dāng)發(fā)生醫(yī)院感染流行，高度懷疑或確定與醫(yī)務(wù)人員手的污染有關(guān)時，應(yīng)及時進(jìn)行監(jiān)測。二、采樣方法被檢者五指并攏,用浸有含相應(yīng)中和劑的無菌洗脫液浸濕的棉拭子在雙手指曲面從指跟到指端往返涂擦2次，一只手涂擦面積約30cm2,涂擦過程中同時轉(zhuǎn)動棉拭子，將棉拭子接觸操作者的部分剪去，投入I。ml含相應(yīng)中和劑的無菌洗脫液試管內(nèi)，及時送檢。三、檢測方法將采樣管在混勻器上振蕩20秒或用力振打80次，用無菌吸管吸取L。mI待檢樣品接種于滅菌平皿，每一樣本接種2個平皿，平皿內(nèi)加入己溶化的45?48C的營養(yǎng)瓊脂15~18ml,邊傾注邊搖勻，待瓊脂凝固，置36C±IC溫箱培養(yǎng)48小時，計(jì)數(shù)菌落數(shù)。四、結(jié)果判斷1、H類區(qū)域工作人員：細(xì)菌總數(shù)＜5cfu/cn?,并未檢出金黃色葡萄球菌、大腸桿菌、銅綠假單胞菌為消毒合格。

In類區(qū)域工作人員:細(xì)菌總數(shù)Wl。CfU/cm2,并未檢出金黃色葡萄球菌、大腸桿菌為消毒合格。W類區(qū)域工作人員：細(xì)菌總數(shù)W15cfu/cm一并未檢出金黃色葡萄球菌、大腸桿菌為消毒合格。母嬰室、嬰兒室、新生兒室及兒科病房的工作人員手上，不得檢出沙門菌、大腸桿菌、溶血性鏈球菌、金黃色葡萄球菌為消毒合格。五、注意事項(xiàng)1.用于接種的培養(yǎng)基應(yīng)置于37C培養(yǎng)24小時證實(shí)無菌生長后方可使用。

2.層流潔凈手術(shù)室每次抽檢人數(shù)不少于3人。3.所采樣本應(yīng)及時檢測，室溫下存放不得超過2小時；4C冰箱存放不得超過4小時。第三節(jié)空氣衛(wèi)生學(xué)監(jiān)測一、非潔凈區(qū)域空氣消毒效果監(jiān)測（一）采樣時間

在消毒處理后、操作前進(jìn)行采樣。（二）采樣布點(diǎn)方法室內(nèi)面積≤30n√,設(shè)內(nèi)、中、外封角線3點(diǎn)，距墻壁Im處各取1點(diǎn)；室內(nèi)面積＞30rn2,設(shè)4角及中央5點(diǎn)，4角的布點(diǎn)部位距墻Im處。（三）采樣方法平板暴露法：將普通營養(yǎng)瓊脂平皿（直徑為9cm）放在室內(nèi)各采樣點(diǎn)處，采樣高度距地面1.5m,采樣時將平皿蓋打開，扣放于平板旁，暴露5分鐘后蓋好立即送檢。將送檢的平板置37C溫箱培養(yǎng)48小時，計(jì)算菌落數(shù)，并分離致病菌。（四）結(jié)果計(jì)算

,C,3、 50。X平均菌落數(shù)仝I細(xì)困國浴息數(shù)（cfu∕m）=平板面積（Cm2）χ暴露時間（五）結(jié)果判斷

I類環(huán)境：細(xì)菌總數(shù)WI。CfU/n√（或0.2cfu/平皿），并未檢出金黃色葡萄球菌、溶血性鏈球菌為消毒合格。II類環(huán)境：細(xì)菌總數(shù)≤200cfu/m3（或4cfuf平皿），并未檢出金黃色葡萄球菌、溶血性鏈球菌為消毒合格。

In類環(huán)境：細(xì)菌總數(shù)≤5。cfu/m3,并未檢出金黃色葡萄球菌、溶血性鏈球菌為消毒合格"（六）注意事歡

1.采樣前，關(guān)好門窗，在無人走動的情況下，靜止I。分鐘進(jìn)行采樣。

2.采樣后立即送檢，培養(yǎng)皿禁止存放于冰箱中。二、潔凈區(qū)域空氣消毒效果監(jiān)測（一）等級標(biāo)準(zhǔn)

潔凈手術(shù)部用房分為四級，并以空氣潔凈度級別作為必要保障條件。在空態(tài)或靜態(tài)條件下，細(xì)菌濃度（沉降菌法濃度或浮游菌法濃度）和空氣潔凈度級別都必須符合表UT、表11-2的要求。表11/潔凈手術(shù)室分級等級 手術(shù)室名稱 手術(shù)切口類別 適用手術(shù)類型I 需要無菌操作的特殊實(shí)驗(yàn)室II 體外循環(huán)灌注準(zhǔn)備室刷手間、消毒準(zhǔn)備室、預(yù)麻室、一次性物品和無菌敖料及器械與精密儀器的存放室、護(hù)士站、潔凈走廊、重癥護(hù)理單元（ICU）、恢復(fù)（麻醉蘇醒）室。更衣室IV清潔走廊.（二）監(jiān)測內(nèi)容與要求1.潔凈手術(shù)室投入運(yùn)行前，應(yīng)當(dāng)經(jīng)有資質(zhì)的工程質(zhì)檢部門進(jìn)行綜合性能全面評定，并作為手術(shù)室基礎(chǔ)材料存檔。2.潔凈手術(shù)室日常實(shí)行動態(tài)監(jiān)測，必測項(xiàng)目為細(xì)菌濃度和空氣的氣壓差。3.每日可通過凈化自控系統(tǒng)進(jìn)行機(jī)組監(jiān)控并記錄，發(fā)現(xiàn)問題及時解決。4.每月對非潔凈區(qū)域局部凈化送、同風(fēng)口設(shè)備進(jìn)行清潔狀況的檢查，發(fā)現(xiàn)問題及時解決。5.每月對各級別潔凈手術(shù)室至少進(jìn)行1間靜態(tài)空氣凈化效果的監(jiān)測并記錄。6.每半年對潔凈手術(shù)室進(jìn)行1次塵埃粒子、高效過濾器的使用狀況、測漏、零部件的

工作狀況等在內(nèi)的綜合性能全面評定，監(jiān)控并記錄。

7.每半年對潔凈手術(shù)室的正負(fù)壓力進(jìn)行監(jiān)測并記錄。（三）監(jiān)測方法

分為靜態(tài)（空態(tài)）監(jiān)測和動態(tài)監(jiān)測。1.靜態(tài)監(jiān)測

（I）測點(diǎn)位置：見表11-3。測點(diǎn)布置在距地面0.8m高的平面上，在手術(shù)區(qū)檢測時應(yīng)無手術(shù)臺。當(dāng)手術(shù)臺

己固定時，測點(diǎn)高度在臺面之上。?25m。當(dāng)送風(fēng)13集中布置時，應(yīng)對手術(shù)區(qū)和周邊區(qū)分別檢測，測點(diǎn)數(shù)和位置應(yīng)符合表IlT的規(guī)定；當(dāng)附近有顯著障礙物時，可（2）監(jiān)測方法：將9cm直徑普通營養(yǎng)瓊脂平皿放在室內(nèi)各采樣點(diǎn)，將平皿蓋打開，扣放于平皿旁，暴露30分鐘后蓋好立即送檢。將送檢的平皿置37C溫箱培養(yǎng)24小時，計(jì)算菌落數(shù).（3）監(jiān)測要求.1）1級潔凈手術(shù)室和潔凈輔助用房檢測前，系統(tǒng)應(yīng)己運(yùn)行15分鐘，其他潔凈房間應(yīng)己運(yùn)行40分鐘。2）每次采樣的最小采樣量：100級區(qū)域?yàn)?.66L,其他各級區(qū)域?yàn)?.83L。3）在100級區(qū)域檢測時，采樣口應(yīng)對著氣流方向；在其他級別區(qū)域檢測時，采樣口均向上.4）當(dāng)檢測含塵濃度時，檢測人員不得多于2人，都應(yīng)穿潔凈工作服，處于測點(diǎn)下鳳向的位置，盡量少動作?（4）結(jié)果判斷根據(jù)中華人民共和國國家標(biāo)準(zhǔn)《醫(yī)院潔凈手術(shù)部建筑技術(shù)規(guī)范》（GB5。333-2。2）,潔凈手術(shù)室等級標(biāo)準(zhǔn)以及主要潔凈輔助用房等級標(biāo)準(zhǔn)分別見表I卜4、表If

（5）注意事項(xiàng)。

1）檢測細(xì)菌密度時，必須有2次空白對照。第1次對用于檢測的培養(yǎng)皿做對比試驗(yàn)，每批1個對照皿；第2次檢測時，每室或每區(qū)1個對照皿，對操作過程做對照試驗(yàn)，模擬操作過程，但培養(yǎng)皿打開后應(yīng)立即封蓋.2次對照結(jié)果必須為陰性，整個操作過程應(yīng)符合無菌操作要求.2）采用沉降法測定沉降菌密度時，細(xì)菌密度測點(diǎn)數(shù)應(yīng)滿足表11-6規(guī)定的最少培養(yǎng)皿數(shù)的要求（不含對照皿），如沉降時間適當(dāng)延長，最少要求培養(yǎng)皿數(shù)可按比例減少，但不能少于表1卜3的最少測點(diǎn)數(shù)。表11-4潔凈手術(shù)室的等級標(biāo)準(zhǔn)（空態(tài)或靜態(tài)）

注①浮游法的細(xì)菌最大平均密度采用括號內(nèi)數(shù)值。細(xì)菌密度是直接所測的結(jié)果，不是沉降法和浮游法互相換算的結(jié)果.②I級眼科專用手術(shù)室周邊區(qū)按10。級要求.③φ90HIL是采樣直徑為90mm的培養(yǎng)皿表11-5輔助用房的等級標(biāo)準(zhǔn)（空態(tài)或靜態(tài)）

注浮游法的細(xì)菌最大平均密度采用括號內(nèi)數(shù)值。細(xì)菌密度是直接所測的結(jié)果，不是沉降法和浮游法互相換算的結(jié)果。表11-6沉降菌最少培養(yǎng)皿數(shù)

2.動態(tài)監(jiān)測。

（1）監(jiān)測方法及要求。

1）空氣沉降菌密度應(yīng)在手術(shù)開始、中間和結(jié)束前抽檢3?4次。2）在每個回風(fēng)口中部擺放3個直徑為9cm培養(yǎng)皿，沉降30分鐘后，置于37C溫箱培養(yǎng)24小時。3）其他潔凈用房在當(dāng)天上午10時和下午4時各測I次，在每個回風(fēng)151中部擺放3個直徑為9cm培養(yǎng)皿，沉降30分鐘后，置于37C溫箱培養(yǎng)24小時。4)菌落計(jì)數(shù)的每皿平均值應(yīng)符合表11-7的動態(tài)要求，單皿最大值不應(yīng)超過平均值3倍。表11-7環(huán)境污染控制指標(biāo)

(2)監(jiān)測頻率。

I?II級：每月1次。

In級：每2個月1次。IV級：每3個月I次，疑有污染或檢測不符合標(biāo)準(zhǔn)應(yīng)隨時檢測直至達(dá)標(biāo)。第四節(jié)消毒劑衛(wèi)生學(xué)監(jiān)測一、使用中消毒劑濃度監(jiān)測(試紙法)(一)G-1型消毒劑濃度試紙1.適用范圍：過氧乙酸、二氯異鼠尿酸鈉、次氯酸鈉、氯胺T、二氧化氯、其他含氯消毒劑和含次氯酸鈉的清洗消毒劑等。

2.使用方法：取一條試紙浸于所測消毒劑溶液中，片刻取出。半分鐘內(nèi)在自然光下與標(biāo)準(zhǔn)色比較，直接讀出該溶液所含有效成分的濃度值。

3.注意事項(xiàng)。

(1)應(yīng)使用干燥抵子夾取試紙進(jìn)行測試，不要用手直接接觸試紙。

(2)時間超過1分鐘，顏色即逐漸消退，應(yīng)及時讀數(shù)。(3)消毒劑濃度超過試紙測量范圍時，試紙有“發(fā)白”現(xiàn)象，應(yīng)稀釋后再作測定。

(4)測試紙應(yīng)置陰涼、避光、防潮處保存，且在有效期內(nèi)使用。(二)戊二醛濃度試紙測試卡1.使用方法：從小瓶中取出一條試紙，并旋緊瓶蓋，將指示色塊完全浸沒于待測溶液中，取出后，沾一下瓶蓋上的紙墊，去除多余的液體，橫置于瓶蓋上，等候5?8分鐘，通過顏色變化判讀結(jié)果。指示色塊變成均勻黃色，表示溶液濃度＞2.0%：指示色塊全部或仍有部分白色，表示溶液濃度＜2.0%。

2.注意事項(xiàng)。

(1)靜置時不要將色塊面朝下，以免受到污染。

(2)必須在5?8分鐘之間判讀結(jié)果。時間少于5分鐘，顏色變化不徹底；超過8分鐘，顏色將逐漸消退，都可使結(jié)果不正確。

(3)開瓶后在120日內(nèi)用完(或在產(chǎn)品注明的有效期內(nèi)使用)。二、細(xì)菌染菌量檢測1.采樣時間：更換前使用中的消毒劑與無菌器械保存液，采樣后1小時內(nèi)檢測。2.采樣方法：在無菌條件下，用無菌吸管吸取Iml被檢樣液，加入9ml含相應(yīng)中和劑的采樣管內(nèi)混均。稀釋液中需根據(jù)不同種類消毒劑加入相應(yīng)中和劑，以中和被檢樣液的殘效作用.

3.檢測方法。(1)涂抹法：用無菌吸管吸取中和采樣液0.2ml,涂抹于普通營養(yǎng)瓊脂平板上，每份樣品同時做2個平行樣，一個平板置20C培養(yǎng)7天，觀察真菌生長情況，另一個平板置35C培養(yǎng)72小時，計(jì)數(shù)菌落數(shù)。消毒劑染菌量(CfU/ml)=每個平板上的菌落數(shù)X50(2)傾注法:用無菌吸管分別吸取中和采樣液0.5ml注入2個無菌平皿內(nèi)，加入己融化的45?48C的普通營養(yǎng)瓊脂15?18ml,邊傾注邊搖勻，待瓊脂凝固后，一個平板置20C培養(yǎng)7日，觀察真菌生長情況，另一個平板置37*0培養(yǎng)72小時，計(jì)數(shù)菌落數(shù)。消毒劑染菌量(CfU/ml)=每個平板上的菌落數(shù)X20

4.結(jié)果判定。

使用中消毒劑細(xì)菌菌落總數(shù)應(yīng)Wl。CfU/mh不得檢出致病性微生物。無菌器械保存液必須無菌生長。

5.常用消毒劑的中和劑選擇。

(1)醇類和酚類消毒劑：吐溫-80。

(2)含氯、含碘、過氧化物消毒劑：0.1%硫代硫酸鈉。(3)季較鹽類消毒劑：3%吐溫-8()或0.3%卵磷脂或0.1%硫代硫酸鈉。

(4)醛類消毒劑：1%甘氨酸。第五節(jié)醫(yī)療用品監(jiān)測醫(yī)院醫(yī)療用品的監(jiān)測，包括?次性醫(yī)療用品、一次性衛(wèi)生用品和消毒滅菌處理后的其他物品。一、采樣時間

在消毒或滅菌處理后存放至有效期內(nèi)采樣。一般采用無菌試驗(yàn)法，但因其操作繁瑣，監(jiān)測周期較長以及受抽樣最大小等因素的限制，故一般情況F可采用常規(guī)監(jiān)測法評價醫(yī)療器械滅菌效果。二、監(jiān)測方法（一）常規(guī)監(jiān)測1.采樣方法：用無菌方法將擬檢縫合針、針頭、手術(shù)刀片等小件醫(yī)療器械各5支，分別投入5ml無菌的0.9%氯化鈉溶液中;注射器則取5副在5ml無菌肉湯中分別抽吸5次,對手術(shù)鉗、徑子等大的醫(yī)療器械在無菌操作下取2份以上用沾有無菌的0.9%氯化鈉溶液的棉拭子反復(fù)涂擦采樣，并將棉拭子投入5ml無菌的0.9%氯化鈉溶液中；對一些特殊醫(yī)療用品，可用浸有無菌的0?9%氯化鈉溶液采樣液的棉拭子在被檢物體表面涂擦采樣。采樣后馬上送盤2.檢測方法：將采樣管用力振蕩80次，用無菌吸管取Iml待檢樣品放于滅菌平皿內(nèi)，加入己融化的45?48。C的普通營養(yǎng)瓊脂15T8ml,邊傾注邊搖勻，待瓊脂凝固后，置37C溫箱培養(yǎng)48小時，進(jìn)行菌落計(jì)數(shù)。若平皿上無菌生長為滅菌合格。（二）無菌檢驗(yàn)無菌檢驗(yàn)是指檢查經(jīng)滅菌的敷料、縫線、一次性使用的醫(yī)療用品、無菌器械以及適合于無菌檢查的其他品種是否無菌的一種方法。無菌檢驗(yàn)應(yīng)在潔凈度為100級單向流空氣區(qū)域內(nèi)進(jìn)行，應(yīng)嚴(yán)格遵守?zé)o菌操作，避免微生物污染；對單向流空氣區(qū)域及工作臺面，必須進(jìn)行潔凈度驗(yàn)證。

1.無菌檢驗(yàn)前準(zhǔn)備。（I）洗脫液與培養(yǎng)基無菌性試驗(yàn)：無菌試驗(yàn)前3日，于需一厭氧培養(yǎng)基與真菌培養(yǎng)基內(nèi)各接種Iml洗脫液，分別置30?35C與20?25℃培養(yǎng)72小時，應(yīng)無菌生長。

（2）陽性對照管窗液制備。1）在試驗(yàn)前一日取金黃色葡萄球菌（CMCC（B）26003］的普通瓊脂斜面新鮮培養(yǎng)物，接種1環(huán)至需一厭氧培養(yǎng)基內(nèi)，在30?35C培養(yǎng)16?18小時后，用0.9%無菌氯化鈉溶液稀釋至10~l00cfu∕ml<,2）取生抱梭菌［CMCC（B）64941］的需氧菌、厭氧菌培養(yǎng)基新鮮培養(yǎng)物1接種環(huán)種于相同培養(yǎng)基內(nèi)，于30?35*C培養(yǎng)18~24小時后,用0.9%無菌氯化鈉溶液稀釋10?100CfU/ml.3）取白色念珠菌［CMCC（F）98001］真菌瓊脂培養(yǎng)基斜面新鮮培養(yǎng)物1接種環(huán)種于相同培養(yǎng)基內(nèi)，于20?25C培養(yǎng)24小時后，用0.9%無菌氯化鈉溶液稀釋至10?Io。CfU/ml。2.無菌操作：取縫合針、針頭、刀片等小件醫(yī)療器械5件直接浸入6管需一厭氧培養(yǎng)管（其中1管作陽性對照）與4管真菌培養(yǎng)管。培養(yǎng)基用量為15ml/管。（1）取5付注射器，在5ml洗脫液中反復(fù)抽吸5次，洗下管內(nèi)細(xì)菌，混合后接種需一厭氧菌培養(yǎng)管（共6管，其中1管作陽性對照）與真菌培養(yǎng)管（共4管）。接種量：Iml注射器為0.5ml,2ml注射器為lml,5~I。mI注射器為2ml,20?50ml注射器為5ml。培養(yǎng)基用量：接種量為2ml以下為15ml/管，接種量5ml為40ml/管。（2）手術(shù)鉗、Ig子等大件醫(yī)療器械取2件用沾有無菌洗脫液的棉拭子反復(fù)涂抹采樣，將棉拭子投入5ml無菌洗脫液中，將采樣液混勻，接種于需一厭氧培養(yǎng)管（共6管，其中1管作陽性對照）與真菌培養(yǎng)基（共4管）.接種量為Iml/管，培養(yǎng)基用量為15ml/管。3.培養(yǎng)：在待檢樣品的需一厭氧培養(yǎng)管中，接種預(yù)先準(zhǔn)備的金黃色葡萄球菌陽性對照管液1：1。稀釋1ml,將需一厭氧培養(yǎng)管以及陽性與陰性對照管均于30?35.C培養(yǎng)5日，真菌培養(yǎng)管與陰性對照管于20?25七培養(yǎng)7日，培養(yǎng)期間逐日檢查是否有菌生長，如加入試品后培養(yǎng)基出現(xiàn)混濁或沉淀，經(jīng)培養(yǎng)后不能從外觀上判斷時，可取培養(yǎng)液轉(zhuǎn)種入另1支相同的培養(yǎng)基中或斜面培養(yǎng)基上，培養(yǎng)48?72小時后，觀察是否再現(xiàn)混濁或在斜面上有無菌落生長，并在轉(zhuǎn)種的

同時，取培養(yǎng)液少量，涂片染色，用顯微鏡觀察是否有菌生長。4.結(jié)果判定：陽性對照在24小時內(nèi)應(yīng)有菌生長，陰性對照在培養(yǎng)期間應(yīng)無菌生長，如需一厭氧菌及真菌培養(yǎng)管內(nèi)均為澄清或雖顯混濁但經(jīng)證明并非有菌生長，判為滅菌合格；如需一厭氧菌及真菌培養(yǎng)管中任何1管顯混濁并證實(shí)有菌生長，應(yīng)重新取樣，分別同法復(fù)試2次，除陽性對照外，其他各管均不得有菌生長，否則判為滅菌不合格.5.注意事項(xiàng).(1)送檢時間不得超過6小時，若樣品保存于0?4C,則不得超過24小時。(2)被采樣本表面積?100Cm2取全部表面；被采樣本表面積》I。oCm2,取100Cm，(3)若消毒因子為化學(xué)消毒劑，采樣液中應(yīng)加入相應(yīng)中和劑.第六節(jié)血液透析液監(jiān)測血液透析是指使用血液透析機(jī)及其相應(yīng)配件，利用血液透析器的彌散、對流、吸附和超濾原理，給患者進(jìn)行血液凈化治療措施。血液透析室接受血液透析的患者具有一定程度的腎衰竭，它們機(jī)體的免疫功能處于低下的狀態(tài)，很容易發(fā)生感染。因此做好透析機(jī)、透析用水、透析液、透析器的監(jiān)測尤為重要，同時也應(yīng)加強(qiáng)對患者的監(jiān)測。一、監(jiān)測范圍1.對進(jìn)入透析器的透析液每月進(jìn)行1次細(xì)菌培養(yǎng)，每3個月進(jìn)行1次內(nèi)毒素檢測。

2.對透析用水每月進(jìn)行1次細(xì)菌培養(yǎng)。

3.自行配置透析液的單位應(yīng)定期進(jìn)行透析液溶質(zhì)濃度的檢測。4.透析用水的化學(xué)污染物情況至少每年測定1次，軟水硬度及游離氯檢測至少每周進(jìn)行I次。5.當(dāng)疑有透析液污染或有嚴(yán)重感染病例時，應(yīng)增加采樣點(diǎn)，如原水口、軟化水出口、反滲水出口、透析液配液口等，并及時進(jìn)行監(jiān)測。二、采樣方法采樣人員戴一次性手套，在水進(jìn)入血液透析機(jī)的位置收集2?3ml透析用水，注入無菌試管中送檢；在透析液進(jìn)入透析器的位置收集2?3ml透析液，注入無菌試管中送檢。三、檢測方法用無菌吸管吸取透析液原液和10倍稀釋液0.5ml分別注入2個無菌平皿內(nèi)，加入已融化的45?48C的普通營養(yǎng)瓊脂15~18ml,邊傾注邊搖勻，待瓊脂凝固后，置37C培養(yǎng)24小時，計(jì)數(shù)菌落數(shù)。四、結(jié)果計(jì)算

透析液細(xì)菌總數(shù)(cfu/ml)=平均菌落數(shù)×稀釋倍數(shù)。五、結(jié)果判斷透析用水細(xì)菌總數(shù)W200cfu/ml;透析液細(xì)菌總數(shù)W200cfu/m1。六、注意事項(xiàng)

1.采集液體時要戴手套，采集不同透析機(jī)的進(jìn)口水時要更換手套。2.透析用水結(jié)果超標(biāo)時，須復(fù)查；懷疑或確定患者在透析中有熱原反應(yīng)和菌血癥，應(yīng)隨時監(jiān)測。第七節(jié)內(nèi)鏡消毒滅菌效果監(jiān)測一、采樣時間

在消毒滅菌后、使用前進(jìn)行采樣。二、采樣方法

監(jiān)測采樣部位為內(nèi)鏡的內(nèi)腔面。用無菌注射器抽取I。ml含相應(yīng)中和劑的緩沖液，從待檢內(nèi)鏡活檢1：［注入，用15ml無菌試管從活檢出口收集，及時送檢，2小時內(nèi)檢測。三、檢測方法將送檢液用旋渦器充分震蕩，取0.5ml,加入2只直徑9cm無菌平皿，每個平皿分別加入己經(jīng)熔化的45?48%營養(yǎng)瓊脂15?18ml,邊傾注邊搖勻，待瓊脂凝固，于35%培養(yǎng)48小時后計(jì)數(shù)。四、結(jié)果計(jì)算

菌落數(shù)/鏡=2個平皿菌落數(shù)平均值X20。五、致病菌檢測將送檢液用旋渦器充分震蕩，取0.2ml分別接種直徑9cm血平皿、中國蘭平皿和SS平

皿，均勻涂布，35%培養(yǎng)48小時，觀察有無致病菌生長。六、結(jié)果判斷消毒后的內(nèi)鏡(如喉鏡、氣管鏡、支氣管鏡、胃鏡、腸鏡、乙狀結(jié)腸鏡、直腸鏡)：細(xì)菌總數(shù)W20cfu/件，不得檢出致病菌。滅菌后的內(nèi)鏡(如腹腔鏡、關(guān)節(jié)鏡、膽道鏡、膀胱鏡、胸腔鏡)；不得檢出任何微生物。第八節(jié)壓力蒸汽滅菌效果監(jiān)測一、物理監(jiān)測1.監(jiān)測目的：判定物品在滅菌處理中，設(shè)備運(yùn)行狀況是否達(dá)到滅菌標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定的條件。

2.監(jiān)測頻次與方法：每次滅菌循環(huán)時必須進(jìn)行監(jiān)測和記錄。按照滅菌所確定的滅菌工藝和參數(shù)進(jìn)行監(jiān)測，主要包括滅菌溫度、時間、壓力、真空度等參數(shù)。

3.結(jié)果判定。(1)下排氣式壓力蒸汽滅菌器滅菌壓力為102.9kPa(1.05kg/cm2),溫度為121C,滅菌時間20?30分鐘。(2)預(yù)真空壓力蒸汽滅菌器的滅菌壓力為205.8kPa(2?lkg/cm2),溫度為I32C,滅

菌時間4分鐘，真空度-8.0kPa。脈動預(yù)真空循環(huán)3次以上。4.注意事項(xiàng)

(1)監(jiān)測結(jié)果記錄歸檔備查。(2)新安裝、移位或大修后的滅菌器，對各項(xiàng)滅菌參數(shù)必須進(jìn)行物理校正，合格后方

可使用。

(3)物理監(jiān)測不合格時，所有滅菌物品不能放行。二、化學(xué)監(jiān)測(一)B-D測試1.測試目的：對預(yù)真空和脈動真空壓力蒸汽滅菌器進(jìn)行真空系統(tǒng)性能測試，以判定排除冷空氣的有效性。2.測試頻次：每日每臺滅菌器在開始滅菌運(yùn)行前，必須進(jìn)行1次測試。監(jiān)測時使用標(biāo)準(zhǔn)測試包，宜使用一次性B-D測試包。如使用自制標(biāo)準(zhǔn)測試包，每次使用后應(yīng)清洗。

3.測試方法。

(I)B-D測試包的準(zhǔn)備：由I。0%脫脂純棉布折疊成長30cm±2cm、寬25Cm±2cm、高25~28cm大小的布包裹。(2)操作方法:將專用的B-D測試紙，放入自制的測試包或?qū)Ｓ玫?次性測試包的中間：將8-D測試包水平放于滅菌柜內(nèi)滅菌車的前底層，靠近柜門與排氣口前方；柜內(nèi)除測試包外無任何物品；測試溫度為134C,時間3.5?4分鐘.4.結(jié)果判定：測試結(jié)束，取出B-D測試紙觀察顏色變化：變成均勻-致的黑色，說明冷空氣排除效果好，滅菌器可以使用；反之，滅菌器內(nèi)有冷空氣殘留，測試不合格不能使用。

5.注意事項(xiàng)：滅菌艙內(nèi)除測試包外不得放入任何物品。測試不合格時，必須檢查失敗的原因，直至8-D測試通過后才能使用該滅菌器。新安裝、移位或大修后的滅菌器必須連續(xù)進(jìn)行BD測試3次，合格后方可使用。測試結(jié)果

記錄存檔3年。監(jiān)測指示物須經(jīng)衛(wèi)生部批準(zhǔn)，按照產(chǎn)品說明書存放，并在有效期內(nèi)使用。（二）包外化學(xué)指示膠帶監(jiān)測

1.監(jiān)測目的：指示和說明物品是否經(jīng)過滅菌處理。2.監(jiān)測頻次與方法：每個單包裝物品，進(jìn)行滅菌處理時包外均要有指示標(biāo)志或粘貼指示膠帶。每條化學(xué)指示膠帶長度應(yīng)為5~7cm,并有3條以上完整顯影帶。3.結(jié)果判定：經(jīng)過一個滅菌周期，觀察化學(xué)指示膠帶顏色在滅菌前后的變化，變成顏色均勻一致的黑色，以指示經(jīng)過完整滅菌周期，滅菌合格。反之，滅菌不合格。

4.注意事項(xiàng)：變色不合格的物品包不能放行和使用。如發(fā)現(xiàn)變色不合格的物品分布在裝載架或籃筐的外層或表面，則該次滅菌的所有物品均視為滅菌不合格，查找原因重新更換膠帶，再次滅菌處理。監(jiān)測指示物須經(jīng)衛(wèi)生部批準(zhǔn)，按照產(chǎn)品說明書存放，并在有效期內(nèi)使用。（三）包內(nèi)化學(xué)指示卡1.監(jiān)測目的：指示和說明物品在滅菌處理中接觸滅菌介質(zhì)、溫度、持續(xù)時間、壓力等條件是否達(dá)到滅菌標(biāo)準(zhǔn)要求。是快速判定滅菌效果的方法。2.監(jiān)測頻次與方法：每個滅菌包均應(yīng)使用化學(xué)指示卡.將化學(xué)指示卡放入物品包裹、容器的中央或?qū)翘?，?jīng)一個滅菌周期后取出指示卡，根據(jù)其顏色及性狀的改變判斷是否達(dá)到天菌條件。3.結(jié)果判定：包內(nèi)化學(xué)指示卡變色未達(dá)到均勻一致的黑色時，則該物品視為滅菌不合格，不能使用。應(yīng)用第5類化學(xué)指示卡時，指示卡上的化學(xué)球溶解后變?yōu)楹谏⒀丶埿疽苿舆M(jìn)入卡上的ACCEPT（成功）窗口，滅菌合格。如果沒有進(jìn)入這一窗口，則為滅菌失敗.

4.注意事項(xiàng)：變色不合格的物品不能放行和使用。金屬器械量大的包內(nèi)宜選用第5類化學(xué)指示卡。監(jiān)測指示物須經(jīng)衛(wèi)生部批準(zhǔn)，按照產(chǎn)品說明書存放，并在有效期內(nèi)使用.三、生物監(jiān)測1.監(jiān)測目的：對滅菌器進(jìn)行綜合性能監(jiān)測，最終判定物品滅菌質(zhì)量和處理效果。

2.監(jiān)測頻次：每臺滅菌器每周必須監(jiān)測1次。有植入物時每次滅菌循環(huán)必須進(jìn)行生物監(jiān)測，合格后滅菌物品方可放行。

3.監(jiān)測方法。（1）標(biāo)準(zhǔn)嗜熱脂肪桿菌芽抱菌片滅菌效果監(jiān)測.1）指示菌株：指示菌株為嗜熱脂肪桿菌芽抱（ATCC7953或SSIK31株），菌片含菌量為5.。X105?5.。X106CfU/片。在121*C±0.5C條件下，D值為1.3?1.9分鐘，殺滅時間（KT值）W19分鐘，存活時間（ST值）為23.9分鐘。

2）培養(yǎng)基：試驗(yàn)用培養(yǎng)基為溟甲酚紫葡葡糖蛋白陳水培養(yǎng)基。3）標(biāo)準(zhǔn)測試包的準(zhǔn)備：3件平紋長袖手術(shù)衣，4塊小手術(shù)巾，2塊中手術(shù)巾，1塊大毛巾，30塊I。CmXI。cm8層紗布敷料包裹成25CmX30CmX30Cm大小。手提壓力蒸汽滅菌器用通氣貯物盒（22CmXI3cmX6cm）代替標(biāo)準(zhǔn)試驗(yàn)包，盒內(nèi)盛滿中試管。4）測試包及菌片放置：將2個嗜熱脂肪桿菌芽抱菌片分別裝入滅菌小紙袋內(nèi)，置于標(biāo)準(zhǔn)試驗(yàn)包中心部位。在下排氣壓力蒸汽滅菌器、預(yù)真空和脈動真空壓力蒸汽滅菌器滅菌柜內(nèi)，排氣口上方放置1個標(biāo)準(zhǔn)測試包；手提壓力蒸汽滅菌器的指示菌片放于中心部位的2只滅菌試管內(nèi)(試管口用滅菌牛皮紙包封)，將貯物盒平放于手提壓力蒸汽滅菌器底部。5)菌片培養(yǎng)：經(jīng)1個滅菌周期后，在無菌條件下，取出標(biāo)準(zhǔn)試驗(yàn)包或通氣貯物盒中的指示菌片，投入澳甲酚紫葡萄糖蛋白陳水培養(yǎng)基中，經(jīng)56℃土1℃培養(yǎng)7天，觀察培養(yǎng)基顏色變化。檢測時設(shè)陰性對照和陽性對照。6)結(jié)果判定：每個指示菌片接種的漠甲酚紫蛋白陳水培養(yǎng)基都不變色,判定為滅菌合格;指示菌片之一接種的澳甲酚紫蛋白陳水培養(yǎng)基，由紫色變?yōu)辄S色時，則滅菌過程不合格。(2)自含式生物指示物測試方法.

1)標(biāo)準(zhǔn)測試包的準(zhǔn)備同嗜熱脂肪桿菌芽抱菌片測試包。2)將2個自含式生物指示物分別裝入滅菌小紙袋內(nèi)，放于一標(biāo)準(zhǔn)測試包中心部位。3)預(yù)真空和脈動真空壓力蒸汽滅菌器及下排氣壓力蒸汽滅菌器標(biāo)準(zhǔn)測試包均置于滅菌柜內(nèi)排氣口上方。手提壓力蒸汽滅菌器將儲物盒平放于手提壓力蒸汽滅菌器底部.4)將滅菌后的菌管和1支同一批次的陽性對照管擠破，置于培養(yǎng)器內(nèi)，經(jīng)56℃培養(yǎng)48小時，觀察培養(yǎng)結(jié)果。5)結(jié)果判定：滅菌菌管不變色，陽性對照管變?yōu)辄S色時滅菌合格；滅菌菌管變?yōu)辄S色時,滅菌不合格。4.注意事項(xiàng).

(1)如使用自制生物監(jiān)測包，每次使用后應(yīng)清洗。(2)生物監(jiān)測不合格時，應(yīng)先重復(fù)一次生物監(jiān)測程序，如合格，滅菌器可繼續(xù)使用。仍不合格時，必須停止使用滅菌器查找原因，同時，應(yīng)盡快召回上次監(jiān)測合格以來所有尚未使用的滅菌物品，重新處理；滅菌器經(jīng)改進(jìn)后連續(xù)生物監(jiān)測3次合格，方可使用?(3)對新安裝、移位或大修后的滅菌器應(yīng)在物理監(jiān)測、化學(xué)監(jiān)測通過后，空載連續(xù)進(jìn)行生物監(jiān)測3次，合格后方

可使用。對于臺式壓力蒸汽滅菌器，生物監(jiān)測應(yīng)滿載連續(xù)監(jiān)測3次，合格后方可使用。(4)采用新的包裝材料和方法時必須進(jìn)行生物監(jiān)測，以確定其方法的安全性。

(5)生物監(jiān)測結(jié)果準(zhǔn)確完整記錄并歸檔留存3年。(6)監(jiān)測所用菌片須經(jīng)衛(wèi)生部認(rèn)可，按要求存放，并在有效期內(nèi)使用。第九節(jié)干熱滅菌效果監(jiān)測干熱滅菌適用于高溫下不損壞、不變質(zhì)、不蒸發(fā)物品的滅菌；也可用于不耐濕熱的器械的滅菌以及蒸汽或氣體不能穿透物品的滅菌，如玻璃、油脂、粉劑和金屬等制品的消毒滅菌。對其滅菌效果的監(jiān)測方法有物理監(jiān)測法、化學(xué)監(jiān)測法和生物監(jiān)測法。一、物理監(jiān)測

1.監(jiān)測頻次：每滅菌批次應(yīng)進(jìn)行物理監(jiān)測。2.監(jiān)測方法：將多點(diǎn)溫度檢測儀的多個探頭分別放于滅菌器各層內(nèi)、中、外各點(diǎn)，關(guān)好柜門，引出導(dǎo)線，由記錄儀中觀察溫度上升與持續(xù)時間。3.結(jié)果判定：溫度在設(shè)定Ijt間內(nèi)均達(dá)到預(yù)置溫度，則物理監(jiān)測合格。二、化學(xué)監(jiān)測

1.監(jiān)測頻次：每滅菌批次應(yīng)進(jìn)行化學(xué)監(jiān)測。2.監(jiān)測方法：將既能指示溫度又能指示溫度持續(xù)時間的化學(xué)指示物3?5個分別放入待滅菌的物品中，并置于滅

菌器各層內(nèi)、中、外不同部位。經(jīng)過一個滅菌周期后取出，據(jù)其顏色的改變判斷是否達(dá)到滅菌要求。3.結(jié)果判定：檢測時，所放置的指示物顏色及性狀均變至規(guī)定的條件，則判為滅菌合格：若其中之一未達(dá)到規(guī)定的條件，則判為滅菌不合格。三、生物監(jiān)測

1.監(jiān)測頻次：應(yīng)每周監(jiān)測1次。2.監(jiān)測方法.(I)指示菌株：菌株為枯草桿菌黑色變種芽抱(ATCC9372),菌片含菌量為5.。X105?5.。X106CfU/片。其抗力應(yīng)符合以下條件：在溫度I6。%±2?C時，其D值為1.3?1.9分鐘,存活時間》3.9分鐘，死亡時間≤19分鐘。

(2)將枯草桿菌芽抱菌片分別裝入中號滅菌試管內(nèi)(1片/管)。滅菌器與每層門把手對角線內(nèi)、外角處放置2個含菌片的試管，試管帽置于試管旁，關(guān)好柜門，經(jīng)1個滅菌周期后，待溫度降至80%時，加蓋試管帽后取出試管。在無菌條件下，加入普通營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基(5ml/管)，置36%土1℃溫箱培養(yǎng)48小時，觀察初步結(jié)果，無菌生長管繼續(xù)培養(yǎng)至第7日。3.結(jié)果判定.

若每個指示菌片接種的肉湯管均澄清，判為滅菌合格。若指示菌片之一接種的肉湯管渾濁，判為滅菌不合格。對難以判定的肉湯管，取0.1ml接種于營養(yǎng)瓊脂平板，用滅菌L棒涂勻，置36%土IC溫箱培養(yǎng)48小時，觀察菌落形態(tài)，并做涂片染色鏡檢，判斷是否有指示菌生長，若有指示菌生長，判為滅菌不合格；反之則判為滅菌合格。4.注意事項(xiàng).(I)檢測所用的指示菌片、指示卡需經(jīng)衛(wèi)生部認(rèn)可，并在有效期內(nèi)使用。

(2)物品包裝不能過大，不超過IoCmXI。CmX20cm,物品不能超過烤箱內(nèi)高度的2/3,物品間應(yīng)留有充分的空間(可放入一只手)，柜室內(nèi)滅菌物滿載與空載差別很大，故檢測時應(yīng)在滿載條件下進(jìn)行。(3)滅菌器新安裝、移位和大修后,應(yīng)進(jìn)行物理監(jiān)測法、化學(xué)監(jiān)測法和生物監(jiān)測法監(jiān)測(重復(fù)3次)，監(jiān)測合格后，滅菌器方可使用。第十節(jié)環(huán)氧乙烷滅菌效果監(jiān)測一、物理監(jiān)測1.每次滅菌均應(yīng)進(jìn)行程序監(jiān)測，根據(jù)操作規(guī)程和滅菌的各種必要條件，逐項(xiàng)檢查所用環(huán)氧乙烷的濃度、劑量、溫度、相對濕度、持續(xù)時間、滅菌物品的性質(zhì)及記錄鍋號、滅菌日期、有效期、操作者姓名或代號。

2.滅菌參數(shù)應(yīng)符合滅菌器的使用說明或操作手冊的要求。3.監(jiān)測達(dá)到真空的程度和速度；加入環(huán)氧乙烷氣體時壓力升高的數(shù)值與速度:排出環(huán)氧乙烷時達(dá)到的真空度；通入空氣時壓力升高的程度與速度。二、化學(xué)監(jiān)測每個滅菌物品包外應(yīng)使用包外化學(xué)指示膠帶，作為滅菌過程的標(biāo)志；每包內(nèi)最難滅菌位置放置包內(nèi)化學(xué)指示卡。當(dāng)包外化學(xué)指示物變色有不符合要求的情況時，滅菌物品不應(yīng)發(fā)放：包內(nèi)化學(xué)指示物變色不符合要求時，滅菌物品不應(yīng)使用。三、生物監(jiān)測

1.生物指示物：用枯草桿菌黑色變種芽抱(ATCC9372)。抗力要求為：菌量為5X105?5X106cfu/片，在環(huán)氧乙烷劑量為(600±30)mg/L,作用溫度54%±2℃、相對濕度為60%±10%條件下，其殺滅90%該微生物的D值為2.6?5.8分鐘，存活時間應(yīng)N7.8分鐘，殺滅時間應(yīng)《58分鐘。2.監(jiān)測方法：環(huán)氧乙烷測試包分挑戰(zhàn)性測試包和常規(guī)測試包，前者主要用于對滅菌器的考核，后者作為平時的常規(guī)生物監(jiān)測之用。(I)挑戰(zhàn)性生物測試包的制備：將I生物指示劑放于1個20ml無菌注射器內(nèi)，去掉針頭和針頭套，生物指示劑帶孔的塑料帽應(yīng)朝向針頭處，再將注射器芯放在原位(注意不要碰及生物指示物)；另選I成人型氣管插管或1個塑料注射器(內(nèi)含化學(xué)指示卡)，1個琥珀色乳膠管(25.4Cm長，0.76Cm內(nèi)徑，1.6mm管壁厚)和4條全棉清潔手術(shù)巾(46CmX76Cm),每條巾單先折疊成3層，再對折，即每條巾單形成6層，然后將折疊好的巾單從下至上疊放在-起，再將上述物品放于巾單中間層，最后選2條清潔布或無紡布包裹，用化學(xué)指示膠帶封扎成I個測試包。(2)常規(guī)生物測試包的制備：取1個20ml無菌注射器，去掉針頭，拔出針?biāo)ǎ瑢⑸镏甘緞┓湃脶樛矁?nèi)，帶孔的塑料帽應(yīng)朝向針頭處，再將注射器的針?biāo)ú寤蒯樛?注意不要碰及生物指示物)，之后用一條全棉小毛巾兩層包裹，置于紙塑包裝袋中封裝。(3)常規(guī)生物測試包放在滅菌器最難滅菌的部位，并均勻分布于整個滅菌物品中。滅菌周期完成后應(yīng)立即將生物指示物從被滅菌物品中取出，接種于含有復(fù)方中和劑的0.5%的葡蜀糖肉湯培養(yǎng)基管中，以未經(jīng)處理的陽性菌片做相同接種，兩者均置于36.C±1C培養(yǎng)。24小時觀察初步結(jié)果，陽性對照管在24小時內(nèi)有菌生長，無菌生長管繼續(xù)培養(yǎng)至第7日(自含式生物指示物應(yīng)遵循產(chǎn)品說明)，觀察培養(yǎng)基顏色變化。(4)結(jié)果判定：對照組培養(yǎng)陽性，試驗(yàn)組培養(yǎng)陰性，判定為滅菌合格。對照組培養(yǎng)陽性，試驗(yàn)組培養(yǎng)陽性，則滅菌不合格：同時應(yīng)進(jìn)-步鑒定試驗(yàn)組陽性的細(xì)菌是否為指示菌或是污染所致。

3.布點(diǎn)數(shù)量：應(yīng)按滅菌器容積而定。在滅菌負(fù)載中，生物指示劑的數(shù)量，應(yīng)能驗(yàn)證整個滅菌負(fù)載的生物活性。(1)對新安裝、大修后或移位的環(huán)氧乙烷滅菌器，在啟動初期，監(jiān)測用的生物指示劑分布于滅菌負(fù)載的數(shù)量應(yīng)足夠多。(2)滅菌器柜室可用體積V5n?l?,至少放置10個菌片：滅菌器柜室可用體積為5?Iom3時，每增加InP應(yīng)增加1個菌片：滅菌器柜室可用體積＞10π?時，每增加2π?應(yīng)增加1個菌片。

4.監(jiān)測頻率：每滅菌批次應(yīng)進(jìn)行常規(guī)生物監(jiān)測1次。設(shè)備性能每月進(jìn)行挑戰(zhàn)性生物測

試1次。四、注意事項(xiàng)1.檢測所用化學(xué)和微生物指示物必須經(jīng)衛(wèi)生部批準(zhǔn)，并在有效期內(nèi)使用。2.生物指示物應(yīng)在預(yù)處理之前放入被滅菌物品內(nèi)或被滅菌物品的試件中。3.應(yīng)盡量在滅菌周期完成后立即將生物指示物從被滅菌物品中取出并進(jìn)行培養(yǎng)?4.凡遇滅菌器新安裝、移位、大修及滅菌失敗、包裝材料或被滅菌物品改變，應(yīng)對滅菌效果進(jìn)行重新評價,包括采用物理監(jiān)測法、化學(xué)監(jiān)測法和生物監(jiān)測法進(jìn)行監(jiān)測(重復(fù)3次)，監(jiān)測合格后，滅菌器方可使用。

5.監(jiān)測記錄準(zhǔn)確完整，保存3年。第十一節(jié)過氧化氫低溫等離子滅菌效果監(jiān)測一、物理監(jiān)測1.監(jiān)測目的：判定物品在滅菌處理中，設(shè)備運(yùn)行狀況是否達(dá)到滅菌標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定的條件。2.監(jiān)測頻次與方法：每次滅菌應(yīng)連續(xù)監(jiān)測并記錄每個滅菌周期的臨界參數(shù)如艙內(nèi)壓、溫度、過氧化氫的濃度、電源輸入和滅菌時間等參數(shù)。3.結(jié)果判定：滅菌循環(huán)程序中各期參數(shù)達(dá)到標(biāo)準(zhǔn)為合格，反之為不合格。4.注意事項(xiàng).

(1)滅菌參數(shù)必須符合滅菌器的使用說明或操作手冊的要求。

(2)物理監(jiān)測不合格時，所有滅菌物品不能放行。(3)新安裝、移位或大修后的滅菌器，對各項(xiàng)滅菌的關(guān)鍵參數(shù)必須進(jìn)行物理校正，合格后方可使用。

(4)打印監(jiān)測結(jié)果，資料留存3年。二、化學(xué)監(jiān)測1.監(jiān)測頻次：每個單包裝物品，進(jìn)行滅菌處理時包內(nèi)外均要有化學(xué)指示物。2.化學(xué)指示膠帶監(jiān)測：將化學(xué)指示膠帶粘貼于每一滅菌物品包外，經(jīng)一個滅菌周期后,觀察其顏色的改變，以指示是否經(jīng)過滅菌處理。3.化學(xué)指示卡監(jiān)測：在包內(nèi)最難滅菌部位放置化學(xué)指示物，經(jīng)一個滅菌周期后，取出指示卡，根據(jù)其顏色及性狀的改變判斷是否達(dá)到滅菌條件。4.結(jié)果判定：化學(xué)指示物變色為橘黃色或黃色為合格，反之為不合格。三、生物監(jiān)測1.監(jiān)測頻次：每臺滅菌器每周必須監(jiān)測1次；有植入物時每次滅菌循環(huán)應(yīng)進(jìn)行生物監(jiān)測，合格后滅菌物品方可放行。2.監(jiān)測方法.(1)指示菌株為嗜熱脂肪桿菌芽抱(ATCC7953),含菌量為5X105?5X106CfU/片。

(2)將1個專用自含式生物指示管，封裝于75?20。mm的專用紙塑包裝袋內(nèi)，放置在滅菌器內(nèi)過氧化氫到達(dá)的位置，一般置于頂部。(3)生物指示管經(jīng)一個滿載荷滅菌周期后取出，設(shè)同一批號的陽性對照管1支，置于溫箱內(nèi)55?60℃培養(yǎng)48小時，閱讀監(jiān)測結(jié)果。3.結(jié)果判定：觀察指示菌管的變色情況：滅菌指示管不變色，陽性對照管變?yōu)辄S色，滅菌合格。滅菌指示管變?yōu)辄S色，則滅菌不合格。4.注意事項(xiàng).(1)生物監(jiān)測不合格時，應(yīng)先重復(fù)一次生物監(jiān)測程序，如合格，滅菌器可繼續(xù)使用?仍不合格時，必須停止使用滅菌器查找原因。同時，應(yīng)盡快召回上次監(jiān)測合格以來所有尚未使用的滅菌物品，重新處理。滅菌器經(jīng)改進(jìn)后生物監(jiān)測連續(xù)3次合格，方可使用。(2)對新安裝、移位或大修后的滅菌器應(yīng)在物理監(jiān)測、化學(xué)監(jiān)測通過后，空載連續(xù)進(jìn)行生物監(jiān)測3次，合格后方可使用。(3)采用新的包裝材料和方法時必須進(jìn)行生物監(jiān)測，以確定其方法的安全性。

(4)生物監(jiān)測結(jié)果準(zhǔn)確完整記錄并歸檔留存3年。

(5)指示菌管需經(jīng)衛(wèi)生部批準(zhǔn)，按要求存放，并在有效期內(nèi)使用。第十二節(jié)紫外線消毒效果監(jiān)測一、日常監(jiān)測1.13常監(jiān)測包括對燈管應(yīng)用時間、照射累計(jì)時間及物理化學(xué)監(jiān)測結(jié)果記錄并簽名。

2.記錄每次的具體照射時間，并累加該支燈管已經(jīng)使用的時間。二、物理監(jiān)測

物理監(jiān)測是利用紫外線輻射照度計(jì)直接讀出其輻照度值的方法。1.監(jiān)測方法:開啟紫外線燈5分鐘后，將測定波長為253.7nm的紫外線輻照計(jì)探頭置于被檢紫外線燈下垂直Im的中央處，待儀表穩(wěn)定后，所示數(shù)據(jù)即為該紫外線燈管的輻照度值。2.結(jié)果判斷：普通30W直管型紫外線燈，新燈管的輻照度值應(yīng)290μW/cm2為合格:使用中紫外線燈的輻照度值應(yīng)270μW/cn?為合格：30W高強(qiáng)度紫外線新燈的輻射強(qiáng)度2180μW∕cm2為合格。3.注意事項(xiàng)：測定時電壓應(yīng)穩(wěn)定在220V±5V,溫度20?25C,相對濕度＜60%：紫外線照度計(jì)必須在計(jì)量部門檢定的有效期內(nèi)使用：紫外線照度儀至少1年標(biāo)定1次。三、化學(xué)指示物監(jiān)測紫外線化學(xué)指示卡主要用于檢測紫外線燈的照射強(qiáng)度，以檢驗(yàn)紫外線燈是否符合要求。1.監(jiān)測方法：開啟紫外線燈5分鐘后，將指示卡置紫外線燈下垂直距離Im處，有圖案一面朝上，照射1分鐘(紫外線照射后，圖案正中光敏色塊由乳白色變成不同程度的淡紫色)，觀察指示卡色塊的顏色，將其與標(biāo)準(zhǔn)色塊比較，判斷照射強(qiáng)度。2.結(jié)果判斷：將指示卡中間光敏涂料的顏色與標(biāo)準(zhǔn)色塊比較，可以判斷出紫外線燈管照射強(qiáng)度的范圍。紫外線燈管是否合格的判斷標(biāo)準(zhǔn)與紫外線照度計(jì)檢測方法一致。3.注意事項(xiàng).

(1)指示卡應(yīng)獲得衛(wèi)生部批準(zhǔn)，并在有效期內(nèi)使用。(2)指示卡為一次性使用，使用過的指示卡退色后仍為乳白色，但不能再使用。應(yīng)將結(jié)果及時記錄于色卡上.(3)色卡背后記錄燈管編號或安裝位置，以備查和更換.(4)指示卡應(yīng)用避光紙包裝，置于4?0冰箱內(nèi)儲存，以免光敏涂料遇日光照射不穩(wěn)定變色而影響到監(jiān)測結(jié)果。

(5)燈管應(yīng)定期用酒精擦拭。(6)紫外線燈安置后及使用前應(yīng)進(jìn)行監(jiān)測，使用中的燈管照射強(qiáng)度監(jiān)測，應(yīng)每3?6個月監(jiān)測1次。監(jiān)測時應(yīng)特別注意照射距離和照射時間，以免影響檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性。(7)檢測中注意防護(hù)，以防紫外線灼傷.四、微生物學(xué)監(jiān)測1.檢測方法：開啟紫外線燈5分鐘后，將6片染菌玻片平放入滅菌器皿中，水平放于紫外線燈下適當(dāng)距離照射，于3個不同間隔時間各取出2片染菌玻片，分別投入2支盛有5ml洗脫液(含1%吐溫-80、1%蛋白陳的9g/L氯化鈉溶液)試管中振打80次，經(jīng)適當(dāng)稀杼后，取0.5ml洗脫液放入滅菌平皿內(nèi)，用普通營養(yǎng)瓊脂作

傾注培養(yǎng)，置37C溫箱內(nèi)培養(yǎng)48小時計(jì)數(shù)菌落。另取2片未作照射處理的染菌玻片分別投入2支盛有5ml洗脫液試管中振打80次，按上述操作進(jìn)行。

2.計(jì)算細(xì)菌殺滅率。蟲未照射染菌玻片回收菌數(shù)一紫外線照射染菌玻片回收菌數(shù)vιnn0z汆火平一 未照射染菌玻片回收菌數(shù)3.結(jié)果判斷：對指示菌殺滅率'99.9%為消毒合格；對達(dá)到物理學(xué)檢測標(biāo)準(zhǔn)時，作為消毒合格的參考標(biāo)準(zhǔn).第十三節(jié)醫(yī)院污水消毒效果監(jiān)測醫(yī)院污水日常監(jiān)測多以余氯量和大腸菌群的測定結(jié)果來判斷消毒效果?一、污水總余氯量的檢測方法

1.采樣時間：在消毒后1小時進(jìn)行采樣。

2.采樣方法：污水水樣中余氯Vl。mg/L時"，取200ml污水樣；余氯多時，應(yīng)按比例減少水樣體積。3.檢測方法：以前采用碘量法來測得總余氯量，由于該方法操作繁瑣，故現(xiàn)在日常監(jiān)測一