檢驗(yàn)科肌酐測定標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程

玉環(huán)縣人民醫(yī)院檢驗(yàn)科文件編號：JYK-3-SH-020版本/修訂號：C/0主題內(nèi)容生化室作業(yè)指導(dǎo)書生效日期：20110701第4頁共4頁編寫制定日期審核審核日期：核準(zhǔn)執(zhí)行日期李永臣2010-09-15李永臣2011-07-01章林華2011-07-01肌酐測定標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程1檢驗(yàn)申請單獨(dú)檢驗(yàn)項(xiàng)目申請：血清肌酐測定(縮寫CRE)，尿液肌酐測定；組合項(xiàng)目申請：腎功能測定，內(nèi)生肌酐清除率測定。臨床醫(yī)生根據(jù)需要提出檢驗(yàn)申請。2標(biāo)本采集與處理2.1標(biāo)本采集2.1.1常規(guī)靜脈采血約2ml，不抗凝，置普通試管中?；虿捎煤蛛x膠的真空采血管。2.1.2檢驗(yàn)申請單和血標(biāo)本試管標(biāo)上統(tǒng)一且唯一的標(biāo)識符。2.1.3急診標(biāo)本采集后，在檢驗(yàn)申請單上填寫標(biāo)本采集時間。2.1.4標(biāo)本采集后與檢驗(yàn)申請單一起及時運(yùn)送至檢驗(yàn)科。專人負(fù)責(zé)標(biāo)本的接收并記錄標(biāo)本的狀態(tài)，對不合格標(biāo)本予以拒收。2.1.5下列標(biāo)本為不合格標(biāo)本2.1.5.1標(biāo)本量不足：少于0.3ml的全血標(biāo)本，或少于0.1ml的血清或血漿。2.1.5.2對反應(yīng)吸光度有干擾的標(biāo)本，包括嚴(yán)重溶血、嚴(yán)重渾濁的標(biāo)本。2.1.5.3無法確認(rèn)標(biāo)本與申請單對應(yīng)關(guān)系的。2.1.5.4其他如標(biāo)識涂改、標(biāo)本試管破裂等。2.2標(biāo)本保存2.2.1接收標(biāo)本后在30min內(nèi)將標(biāo)本離心分離出血清。2.2.2標(biāo)本保存時間：室溫（15～25℃）下可穩(wěn)定一天，普通冰箱中（2～8℃）穩(wěn)定3天。為避免標(biāo)本中水分揮發(fā)使血清濃縮，對保存時間超過1天的標(biāo)本均加塞密閉或覆蓋濕巾。2.2.3已完成測試的標(biāo)本保持完整的識別號，置4～8℃冰箱內(nèi)保存7天。2.3標(biāo)本采集的注意事項(xiàng)2.3.1采血前使受檢者保持平靜、松弛和空腹?fàn)顟B(tài)。2.3.2不建議采集抗凝血標(biāo)本，如果必須使用血漿，推薦的抗凝劑是肝素。3方法原理肌酐酶肌酐+H2O肌酸肌酸酶肌酸+H2O肌氨酸+urea肌氨酸氧化酶肌氨酸+H2O+O2氨基乙酸+H2O2+甲醛過氧化物酶F-DAOS+H2O2+4-氨基安替比林藍(lán)色染料該染料在600nm波長下吸光度的變化與樣品中肌酐濃度成正比4試劑及其他用品4.1試劑：肌酐測定試劑盒（貨號CR6113），由北京利德曼生化股份有限公司出品。4.2試劑盒保存：未啟封試劑盒在2～8℃保存，可儲存至失效期。啟封使用的試劑置儀器試劑倉冰箱內(nèi)穩(wěn)定14天。開蓋后避免污染。當(dāng)試劑變混濁，或者未開蓋的液體有沉淀，表明試劑已變質(zhì)，不能繼續(xù)使用。4.3試劑準(zhǔn)備：液態(tài)雙試劑型，即開即用，無特殊準(zhǔn)備。4.4試劑盒主要成分：組成R1:R2=3:1混合后的濃度磷酸鹽緩沖液PH=7.7，100mmol/L肌氨酸氧化酶≥75U/mL4-氨基安替比林5mmol/L肌酐酶≥160kU/LF-DAOS1mmol/L抗壞血酸氧化酶≥10kU/L過氧化物酶≥5KU/L肌酸酶≥15KU/L疊氮鈉0.1%5校準(zhǔn)品與校準(zhǔn)模式5.1校準(zhǔn)品：Beckman-CoulterSYNCHRONLXMULTI校準(zhǔn)液（P/N442600），其濃度可溯源至美國國家標(biāo)準(zhǔn)技術(shù)研究所（NIST）標(biāo)準(zhǔn)參考材料。5.2校準(zhǔn)類型和校準(zhǔn)點(diǎn)數(shù)目：線性模式，1個校準(zhǔn)點(diǎn)。5.3校準(zhǔn)周期：校準(zhǔn)間隔時間不限。但在：①更換試劑批號或出現(xiàn)質(zhì)控漂移時；②儀器進(jìn)行全面保養(yǎng)后；③儀器的重要零件更換后，進(jìn)行一次校準(zhǔn)。5.4校準(zhǔn)液重建方法：Beckman-CoulterSYNCHRONLXMULTI校準(zhǔn)液即開即用，無需特殊準(zhǔn)備。6質(zhì)控品與室內(nèi)質(zhì)控規(guī)則6.1質(zhì)控品采用由Beckman-Coulter公司提供的兩個不同水平未定值質(zhì)控血清。6.2質(zhì)控液重建方法：液態(tài)質(zhì)控血清，即開即用，無需特殊準(zhǔn)備。6.3質(zhì)控品測定：在每一批標(biāo)本中測定兩個水平質(zhì)控血清各一次。6.4質(zhì)控規(guī)則：采用Westgard多規(guī)則質(zhì)控規(guī)則，由計(jì)算機(jī)程序進(jìn)行檢索與判斷。6.5如出現(xiàn)失控情況，按室內(nèi)質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)操作程序采取各種有效的糾正措施及時糾正，并在確認(rèn)重新回復(fù)到控制狀態(tài)后開始標(biāo)本檢測。7適用儀器適用AEROSET和C16000全自動生化分析儀器。8標(biāo)本檢測步驟裝載試劑→進(jìn)行校準(zhǔn)→進(jìn)行質(zhì)控→輸入標(biāo)本檢測項(xiàng)目→加載標(biāo)本→標(biāo)本測定→結(jié)果復(fù)核→報告。9主要分析參數(shù)化學(xué)原理：堿性苦味酸法；測定原理:比色法；測定方法：速率法；反應(yīng)方向：正反應(yīng)；單位：μmol/L；校準(zhǔn)模式：線性；校準(zhǔn)周期：3天；校準(zhǔn)點(diǎn)：2個；波長:520nm；樣本量：16.5μl(血清)；5.5μl(尿液)；試劑：0.57ml；測定時間：20.5-26.4sec；分析范圍：8.84-2210μmol/L。10結(jié)果計(jì)算肌酐（CREA）含量（umol/L）=（標(biāo)本吸光度÷標(biāo)準(zhǔn)管吸光度）×標(biāo)準(zhǔn)液濃度11檢驗(yàn)結(jié)果的報告及范圍11.1結(jié)果的報告11.1.1結(jié)果經(jīng)審核后，確認(rèn)準(zhǔn)確無誤后發(fā)出報告。11.1.2報告單上標(biāo)明結(jié)果的計(jì)量單位、參考區(qū)間、報告日期、時間、操作者和審核者簽名，并有與申請單相同的醫(yī)學(xué)信息。11.1.3如收到標(biāo)本的質(zhì)量可能對測定結(jié)果有影響的也在報告單上指出。11.2報告范圍：0-6000μmol/L，超過此范圍的結(jié)果報告時必須附有證明該結(jié)果準(zhǔn)確可靠的文字說明，例如：系根據(jù)標(biāo)本稀釋后重復(fù)測定的結(jié)果。12操作性能12.1精密度：批內(nèi)CV＜5.0%；總CV＜6%。12.2線性范圍：0-6000μmol/L。12.3方法的有限性及干擾因素：內(nèi)源性干擾物溶血為1000mg/ml、脂血2000mg/ml、黃疸30mg/ml、抗壞血酸300mg/ml對測試結(jié)果無明顯影響。13參考范圍及醫(yī)學(xué)決定水平40-120umol/L。14臨床意義14.1肌酐是小分子量含氮化合物，主要由肌肉產(chǎn)生且與肌肉的總量相關(guān)。血中肌酐濃度指示腎小球的濾過率（GFR），常作為腎功能的指標(biāo)。但血CRE濃度反映GFR的靈敏度不是太好，對早期較輕微的腎功能受損不靈敏。血CRE濃度還與個體肌肉量有關(guān)，故個體間差異較大，兒童中血CRE濃度尢低。14.2由同時測定的血CRE與24h尿CRE濃度可計(jì)算比值稱為內(nèi)生肌酐清除率。14.3凡GFR下降的疾病如急慢性腎小球腎炎、急性或慢性腎功能不全等均可有不同程度的血清CRE濃度升高。14.4血清CRE濃度還用于慢性腎功能不全的分期。第一期（腎功能不全代償期）：SCr133～177μmol/L；CCr51～80ml/min。第二期（腎功能不全失代償期）：SCr178～442；CCr50～20ml/min。第三期（腎功能衰竭期）：SCr443～707μmol/L；CCr19～10ml/min。第四期（尿毒癥期）：SCr≥707μmol/L；CCr﹤10ml/min。14.5同時測定尿素氮和肌酐對臨床診斷有更大幫助。若兩者單位均以mg/dl計(jì)，正常情況下尿素氮與肌酐比為15～24：1，在腎前性少尿時，血清尿素氮比肌酐增高更明顯，尿素氮與肌酐之比可達(dá)40：1，在這些情況下，經(jīng)常出現(xiàn)肌酐值正常，而尿素氮值明顯增高。由于尿道阻塞而使非蛋白含氮化合物滯留，則將出現(xiàn)尿素氮和肌酐成比例增高。在嚴(yán)重腎小球損害時，尿素氮與肌酐之比可降至10：1以下。14.6肌酐產(chǎn)生量較恒定，當(dāng)腎功能損傷不嚴(yán)重時，尿中肌酐的排泄較少受尿液濃縮和稀釋和影響，故尿中的肌酐濃度測定常作為尿中其它物質(zhì)濃度排泄的參照物。15結(jié)果審核以及分析與相關(guān)項(xiàng)目的聯(lián)系15.1由資深專業(yè)人員負(fù)責(zé)檢驗(yàn)結(jié)果的審核。15.2認(rèn)真審核每一個測定結(jié)果，審核者對發(fā)出報告結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性負(fù)責(zé)，并在報告單的審核者處簽名。15.3相關(guān)項(xiàng)目：審核與血尿素、其他反映腎功能的指標(biāo)如CysC等的關(guān)系，如出現(xiàn)與臨床不符甚至相悖的情況，應(yīng)分析與查找原因。16威脅生命的“緊急值”及報告規(guī)定：根據(jù)危急值報告制度執(zhí)行。血肌酐濃度＞442μmol/L。有可能是急性腎功能衰竭，常伴多器