2025屆陜西省渭南市大荔縣高三生物第一學期期末經(jīng)典模擬試題含解析

2025屆陜西省渭南市大荔縣高三生物第一學期期末經(jīng)典模擬試題考生須知：1．全卷分選擇題和非選擇題兩部分，全部在答題紙上作答。選擇題必須用2B鉛筆填涂；非選擇題的答案必須用黑色字跡的鋼筆或答字筆寫在“答題紙”相應位置上。2．請用黑色字跡的鋼筆或答字筆在“答題紙”上先填寫姓名和準考證號。3．保持卡面清潔，不要折疊，不要弄破、弄皺，在草稿紙、試題卷上答題無效。一、選擇題：（共6小題，每小題6分，共36分。每小題只有一個選項符合題目要求）1．赫爾希和蔡斯精妙的實驗設計思路使得T2噬菌體侵染大腸桿菌的實驗更具有說服力，相關敘述錯誤的是A．選擇了化學組成和結構簡單的T2噬菌體作為實驗材料B．利用放射性同位素標記技術區(qū)分DNA和蛋白質(zhì)分子C．被標記的T2噬菌體與大腸桿菌混合后，需長時間保溫培養(yǎng)D．對離心后試管中的上清液和沉淀物進行放射性檢測2．某小組為解決糧食貯存通風散熱問題，利用下圖所示裝置測定小麥種子呼吸作用強度（底物為葡萄糖）。氣體自動分析儀用于測定密閉容器中O2和CO2的含量變化。下列相關敘述錯誤的是（）A．該裝置可用于探究溫度對小麥種子呼吸作用強度的影響B(tài)．小麥種子呼吸作用釋放的能量部分儲存在ATP中，其余的以熱能形式散失C．當裝置中小麥種子同時存在有氧呼吸和無氧呼吸時，不能測出無氧呼吸強度D．通過O2與CO2的含量變化可推算出小麥種子呼吸作用釋放的熱能3．下列與細胞有關的敘述，錯誤的是（）A．活細胞能產(chǎn)生激素等具有催化作用的有機物B．高等植物細胞間的胞間連絲具有物質(zhì)運輸?shù)淖饔肅．漿細胞中內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膜形成的囊泡可與高爾基體膜融合D．丙酮酸轉化成乳酸的過程發(fā)生在細胞質(zhì)基質(zhì)4．某生物基因表達過程如圖所示。下列敘述與該圖相符的是A．在RNA聚合酶作用下DNA雙螺旋解開B．DNA-RNA雜交區(qū)域中A應與T配對C．mRNA翻譯只能得到一條肽鏈D．該過程發(fā)生在真核細胞中5．金鏈花由于受到能分泌細胞分裂素類物質(zhì)的病原體的侵襲，側芽生長失控，形成大量分支，稱為“掃帚病”。有關分析及推測不正確的是（）A．正常生長的金鏈花側芽生長受抑制是因為生長素含量過高B．該現(xiàn)象說明細胞分裂素類物質(zhì)能解除植物的頂端優(yōu)勢C．該病原體分泌的細胞分裂素類物質(zhì)能調(diào)節(jié)植物的生長發(fā)育，一定是一種植物激素D．生產(chǎn)上解除頂端優(yōu)勢可以達到增產(chǎn)的目的6．小明在寒冷的冬季，沒吃早飯就去學校，結果出現(xiàn)面色蒼白、全身顫抖等癥狀。關于此生理反應的表述，不合理的是（）A．此時內(nèi)環(huán)境中丙酮酸氧化分解為細胞提供能量，有利于生命活動的進行B．全身顫抖是因為骨骼肌收縮以加速熱量產(chǎn)生C．此時小明同學體內(nèi)血糖含量有所下降，細胞產(chǎn)熱不足D．小明面色蒼白的原因是皮膚毛細血管收縮，血流量減少二、綜合題：本大題共4小題7．（9分）青藏高原嚙齒類動物鼠兔是高寒草甸生態(tài)系統(tǒng)重要生物干擾源之一，其對草原生產(chǎn)力、物種多樣性以及水土保持等方面具有復雜而深遠的影響。研究高原鼠兔干擾強度與物種多樣性等的關系，對于科學解釋草地多樣性的維持機制和評價鼠兔對草地生態(tài)系統(tǒng)的危害具有重要意義。（1）可以通過______________來監(jiān)測鼠兔的種群密度。鼠兔作為高寒草地生態(tài)系統(tǒng)成分中的________，其采食、掘洞等行為會造成土壤裸斑。（2）控制鼠兔的干擾強度，劃分出高、中、低3種干擾區(qū)域，并對區(qū)域內(nèi)群落的______________進行調(diào)查，來研究干擾程度對高寒草地物種多樣性的影響。（3）鼠兔的適度干擾可以改善土壤的通透性，促進__________，進而提高土壤中N、P含量。但高強度鼠兔干擾會導致草原裸斑數(shù)量及面積增加，加劇草地生境的旱化，使得雜草增加，破壞高寒草甸生態(tài)系統(tǒng)的______。請?zhí)岢鲆环N措施或方案來控制鼠兔的干擾強度：_____________________________________。（4）為了更有效地科學防控草原鼠害，保護草原生物多樣性，請你從生態(tài)系統(tǒng)的功能的角度出發(fā)，提出一個可用數(shù)據(jù)來進一步深入研究的問題：____________________________________________。8．（10分）大鼠脊髓損傷后無法自主控制排尿。研究人員用截癱平面以上健存的神經(jīng)重新建立人工膀胱反射弧，如下圖所示。其中S1和S2表示神經(jīng)纖維連接處。該項研究有望實現(xiàn)截癱患者自主性悱尿，請回答下列問題：（1）分析上圖可知，在重建的人工膀胱反射孤中膀胱屬于____________，根據(jù)上圖中的反射弧，請用數(shù)字和箭頭的方式描述排尿反射的過程：____________。（2）傷害性刺激作用于神經(jīng)纖維后，膜外的________引起膜電位改變而產(chǎn)生興奮，此時神經(jīng)細胞支配的腎上腺分泌的腎上腺素的增多，導致呼吸和心率加快。以上生理活動的調(diào)節(jié)方式是________。大鼠脊髓損傷后，排尿反射仍可發(fā)生，但機體無法自主排尿，原因是________。（3）實驗后某只大鼠不能正常排尿，可能原因是S1或S2連接處異常。實驗小組在反射弧的b、c處分別連接靈敏電流計，然后刺激a點，發(fā)現(xiàn)b處的電流表偏轉，c處的電流表不偏轉，則可推測。________9．（10分）癌細胞表面蛋白“PDL-1”與T細胞表面蛋白“PD-1”特異性結合后，可抑制T細胞活性并啟動其凋亡，導致腫瘤細胞發(fā)生免疫“逃逸”。研究者對“PD-1”基因進行克隆、表達及生物學活性鑒定，為制備抗體打基礎。研究中所用引物α和β堿基序列見圖1、幾種常用限制酶名稱及識別序列與酶切位點見圖2：α鏈：5'-TCACTCGAGACCATGCAGATCCCACAGGCGCCC-3'β鏈：5'-CTCGAATTCTCAGAGGGGCCAAGAGCAGTG-3'圖1（1）首先提取細胞中的mRNA反轉錄生成____________________作為模板；設計含有不同的限制酶切點的α和β序列為引物，通過____________________技術擴增目的基因。（2）選用圖1中的兩種名稱分別為____________________的限制酶將“pIRES2-EGFP質(zhì)?！陛d體進行雙切，再用DNA連接酶將其與目的基因拼接，構建表達載體。該表達載體的組成，除了目的基因、標記基因抗卡那霉素基因外，還必須具有____________________等。（3）而后一定溫度下，與經(jīng)過處理的感受態(tài)大腸桿菌混合培養(yǎng)在含有_____________培養(yǎng)基中，可篩選出已經(jīng)完成轉化的大腸桿菌，繼續(xù)培養(yǎng)該種大腸桿菌以擴增重組DNA。（4）將擴增后的“pIRES2-EGFP載體/PD-1重組DNA”轉入可高度表達外源基因的原代293T細胞。一段時間后，為確定PD-1基因是否表達，檢測細胞膜表面是否具有____________________。為判斷其是否具有生物學活性和功能，則可裂解293T細胞，提取該物質(zhì)看能否與____________________發(fā)生結合，從而阻斷“PD-1與PDL-1信號通路”。研究中還會有一步驟，只將“pIRES2-EGFP載體”轉入293T細胞，其目的是_________________________。10．（10分）干擾素是動物體內(nèi)的一種蛋白質(zhì)，可用于治療病毒的感染和癌癥。長期以來，人們利用相關病毒誘導白細胞產(chǎn)生干擾素再從血液中提取，但每升血只能提取0.05μg。1982年，我國科學家通過基因工程等技術開發(fā)研制出我國首個基因工程藥物——重組人干擾素。回答下列相關問題。（1）相對于從基因組文庫中獲取干擾素基因，從已病毒免疫的白細胞中提取mRNA，再反轉錄并構建的cDNA文庫中獲取的干擾素基因，更易在大腸桿菌中合成正常干擾素。從基因表達的角度分析，其原因是_____。（2）天然的干擾素很難在體外保存，但通過蛋白質(zhì)工程可得到“可保存的干擾素”。蛋白質(zhì)工程以_____和_____的關系為基礎，通過基因修飾或基因合成，對現(xiàn)有蛋白質(zhì)進行改造，或制造一種新的蛋白質(zhì)。（3）在構建該基因表達載體時，需同時用限制酶HindⅢ和BstⅠ處理目的基因和質(zhì)粒，主要目的是_____。（4）質(zhì)粒中LacZ基因編碼的半乳糖苷酶，能催化生成藍色物質(zhì)從而將細菌染成藍色。在含有四環(huán)素的培養(yǎng)基中，未被轉化的大腸桿菌的生長現(xiàn)象是_____，含有質(zhì)粒載體的大腸桿菌的生長現(xiàn)象是_____，含有重組質(zhì)粒的大腸桿菌的生長現(xiàn)象是_____，從而獲得所需重組細胞。（注：若能正常生長需要寫出菌落特征）（5）轉基因細菌產(chǎn)生的干擾素可能會成為某些人的過敏原，存在潛在風險。有科學家將干擾素基因轉入小鼠基因組，獲得膀胱生物反應器，最終在尿液中獲得干擾素。在該操作中，應使干擾素基因在_____細胞中特異性表達。11．（15分）家蠶細胞具有高效表達外源基因能力。將人干擾素基因?qū)爰倚Q細胞并大規(guī)模培養(yǎng)，可以提取干擾素用于制藥。（1）進行轉基因操作前，需用________酶短時處理幼蠶組織，以便獲得單個細胞。（2）為使干擾素基因在家蠶細胞中高效表達，需要把來自cDNA文庫的干擾素基因片段正確插入表達載體的__________和__________之間。導入家蠶細胞后若要檢測干擾素基因在家蠶細胞中是否表達，可以采用的方法有___________________。（3）培養(yǎng)家蠶細胞時，貼壁生長的細胞會產(chǎn)生接觸抑制。通常將多孔的中空薄壁小玻璃珠放入反應器中，這樣可以_________________，增加培養(yǎng)的細胞數(shù)量，也有利于空氣交換。（4）“?；~塘”生態(tài)系統(tǒng)能充分利用廢棄物中的能量，形成“無廢棄物農(nóng)業(yè)”，這主要是遵循生態(tài)工程的__________原理。同時，通過飼養(yǎng)家禽、家畜，栽培食用菌，提高農(nóng)民經(jīng)濟收入，使保護環(huán)境和發(fā)展經(jīng)濟相互協(xié)調(diào)，這又體現(xiàn)了生態(tài)工程的_________原理。

參考答案一、選擇題：（共6小題，每小題6分，共36分。每小題只有一個選項符合題目要求）1、C【解析】

本題考查噬菌體侵染細菌的實驗，要求學生識記噬菌體的結構及噬菌體侵染細菌的過程，明確噬菌體結構簡單，其侵染細菌時只有DNA進入細菌；掌握噬菌體侵染細菌實驗的過程及實驗現(xiàn)象，能運用所學的知識準確判斷各選項。【詳解】A、噬菌體由蛋白質(zhì)和DNA組成，其化學組成和結構簡單，是噬菌體侵染細菌實驗獲得成功的原因之一，A正確；B、采用同位素標記法分別標記噬菌體的DNA和蛋白質(zhì)，可以證明噬菌體侵染細菌時只有DNA進入細菌，這也是噬菌體侵染細菌實驗獲得成功的原因之一，B正確；C、被標記的T2噬菌體與大腸桿菌混合后，不能長時間培養(yǎng)，否則，大腸桿菌裂解后，會釋放子代噬菌體，影響實驗結果，C錯誤；D、離心后檢測到35S標記的一組放射性主要集中在上清液，32P標記的一組放射性主要集中在沉淀物中，則可推測侵入細菌中的物質(zhì)是DNA，噬菌體的蛋白質(zhì)外殼留在細菌的外面，D正確。故選C。2、C【解析】

小麥種子有氧呼吸的產(chǎn)物為CO2、H2O，并釋放大量的能量，無氧呼吸的產(chǎn)物為CO2和酒精，并釋放少量的能量。10g葡萄糖中約有160KJ的能量，有氧呼吸徹底氧化分解，30%的能量儲存在ATP中，70%以熱能的形式釋放。本題可通過O2的吸收量確定葡萄糖的消耗量進而確定熱能的釋放量，也可通過CO2和O2的差值確定無氧呼吸消耗葡萄糖的量，進而確定熱能的釋放量?！驹斀狻緼、該裝置可通過調(diào)節(jié)恒溫箱的溫度，用于探究溫度對小麥種子呼吸作用強度的影響，A正確；B、小麥種子呼吸作用釋放的能量小部分儲存在ATP中，大部分以熱能形式散失，B正確；C、當裝置中小麥種子同時存在有氧呼吸和無氧呼吸時，可以通過CO2釋放量與O2吸收量的差值測出無氧呼吸強度，C錯誤；D、通過O2與CO2的含量變化可推算出小麥種子呼吸作用釋放的熱能，D正確。故選C。3、A【解析】

1.分泌蛋白的分泌過程體現(xiàn)了生物膜系統(tǒng)的間接聯(lián)系：核糖體合成蛋白質(zhì)→內(nèi)質(zhì)網(wǎng)進行粗加工→內(nèi)質(zhì)網(wǎng)“出芽”形成囊泡→高爾基體進行再加工形成成熟的蛋白質(zhì)→高爾基體“出芽”形成囊泡→細胞膜。2.真核細胞有氧呼吸的的場所是細胞質(zhì)基質(zhì)和線粒體，無氧呼吸的場所是細胞質(zhì)基質(zhì)。【詳解】A、激素對機體的生命活動起調(diào)節(jié)作用，發(fā)揮催化作用的有機物是酶，A錯誤；B、高等植物細胞之間形成的胞間連絲具有信息交流和物質(zhì)運輸?shù)淖饔?，B正確；C、抗體是漿細胞合成和分泌的，在抗體加工過程中，內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膜產(chǎn)生的囊泡可與高爾基體膜融合，C正確；D、丙酮酸轉化成乳酸的過程是無氧呼吸的第二階段，發(fā)生的場所是細胞質(zhì)基質(zhì)，D正確。故選A?！军c睛】本題考查激素的作用、胞間連絲的功能、細胞器之間的聯(lián)系和無氧呼吸的場所等知識，意在考查考生對所學知識的識記能力。4、A【解析】由圖可知，在RNA聚合酶的作用下，DNA雙鏈解開，并以其中一條鏈作模板合成RNA，故A對。在圖中的DNA—RNA雜交區(qū)域中，堿基配對是A—U，B錯。圖中一條mRNA上同時結合2個核糖體，可得到兩條肽鏈，C錯。由于圖中表示的基因表達過程中，是邊轉錄邊翻譯，所以該基因應該是原核細胞中的基因，D錯?！究键c定位】遺傳信息的轉錄和翻譯5、C【解析】

【詳解】頂端優(yōu)勢是由于頂芽產(chǎn)生的生長素向下運輸，大量積累在側芽部位，使側芽生長受抑制，A正確，金鏈花由于受到能分泌細胞分裂素類物質(zhì)的病原體的侵襲，側芽生長，說明細胞分裂素類物質(zhì)能解除植物的頂端優(yōu)勢，B正確，植物激素是植物產(chǎn)生的，該病原體分泌的細胞分裂素類物質(zhì)在植物體內(nèi)不一定含有，C錯誤，生產(chǎn)上解除頂端優(yōu)勢可以使側枝發(fā)育，達到增產(chǎn)的目的，D正確。6、A【解析】

人體體溫調(diào)節(jié)：（1）體溫調(diào)節(jié)中樞：下丘腦；（2）機理：產(chǎn)熱和散熱保持動態(tài)平衡；（3）寒冷環(huán)境下：①增加產(chǎn)熱的途徑：骨骼肌戰(zhàn)栗、甲狀腺激素和腎上腺素分泌增加；②減少散熱的途徑：立毛肌收縮、皮膚血管收縮等。（4）炎熱環(huán)境下：主要通過增加散熱來維持體溫相對穩(wěn)定，增加散熱的途徑主要有汗液分泌增加、皮膚血管舒張?！驹斀狻緼、丙酮酸氧化分解發(fā)生在線粒體內(nèi)，不屬于內(nèi)環(huán)境，A錯誤；B、全身顫抖是因為骨骼肌戰(zhàn)栗以增加熱量引起的，B正確；C、小明同學沒吃早飯，此時體內(nèi)血糖偏低，細胞產(chǎn)熱不足，C正確；D、小明面色蒼白的原因是皮膚毛細血管收縮，血流量減少，D正確。故選A。二、綜合題：本大題共4小題7、標志重捕法消費者豐富度微生物的分解作用抵抗力穩(wěn)定性（自我調(diào)節(jié)能力）符合題目要求即可。如：調(diào)查鼠兔的捕食者與被捕食者，控制鼠兔的數(shù)量；通過開洞堵洞的方式來控制鼠兔的生存區(qū)域符合題目要求即可。如：草甸生態(tài)系統(tǒng)中生產(chǎn)者流向鼠兔的能量的傳遞效率是多少？鼠兔干擾強度對草原土壤有機質(zhì)、N、P等含量的影響是怎樣的？【解析】

1、生態(tài)系統(tǒng)的生物成分包括生產(chǎn)者、消費者和分解者；調(diào)查種群密度常用方法有樣方法和標志重捕法。2、生態(tài)系統(tǒng)的動植物種類越多、營養(yǎng)結構越復雜，自我調(diào)節(jié)能力就越強，則抵抗力穩(wěn)定性越高?！驹斀狻浚?）鼠兔是動物，屬于生態(tài)系統(tǒng)的消費者，鼠兔活動能力強、活動范圍大，調(diào)查其種群密度應采用標志重捕法。（2）研究干擾程度對高寒草地物種多樣性的影響，需要控制鼠兔的干擾強度，劃分出高、中、低3種干擾區(qū)域，并對區(qū)域內(nèi)群落的豐富度進行調(diào)查。（3）根據(jù)題意分析，高強度鼠兔干擾會導致草原裸斑數(shù)量及面積增加，加劇草地生境的旱化，使得雜草增加，導致生態(tài)系統(tǒng)的抵抗力穩(wěn)定性降低，但鼠兔的適度干擾又可以改善土攘的通透性，促進微生物的分解作用，進而提高土壤中N、P含量。要控制鼠兔的干擾強度，可調(diào)查鼠兔的捕食者與被捕食者，控制鼠兔的數(shù)量，也可通過開洞堵洞的方式來控制鼠兔的生存區(qū)域等。（4）從生態(tài)系統(tǒng)功能的角度出發(fā)，提出更有效地科學防控草原鼠害，保護草原生物多樣性，則可研究草甸生態(tài)系統(tǒng)中生產(chǎn)者流向鼠兔的能量的傳遞效率是多少、鼠兔干擾強度對草原土壤有機質(zhì)、N、P等含量的影響是怎樣的等問題?！军c睛】解答本題的關鍵是掌握生態(tài)系統(tǒng)的組成成分、營養(yǎng)結構、穩(wěn)定性等知識點，能夠根據(jù)生物的種類確定其所屬的生態(tài)系統(tǒng)成分以及調(diào)查種群密度的方法，并能夠根據(jù)提示提出控制干擾強度的措施。8、感受器和效應器1→2→3→4→5→6→1Na+內(nèi)流神經(jīng)一體液調(diào)節(jié)脊髓損傷后高級中樞大腦皮層失去對脊髓中低級中樞的控制S1連接處正常，S2連接處異?！窘馕觥?/p>

反射弧是指完成反射的神經(jīng)結構，反射的結構基礎是反射弧，包括感受器、傳入神經(jīng)、神經(jīng)中摳、傳出神經(jīng)、效應器五部分。根據(jù)神經(jīng)節(jié)的位置，可以判斷2和3屬于傳入神經(jīng)，4是神經(jīng)中樞，5和6屬于傳出神經(jīng)，1既是感受器，又是效應器。3、靜息狀態(tài)下，神經(jīng)纖維上的膜電位表現(xiàn)為外正內(nèi)負，神經(jīng)纖維受刺激時，鈉離子通道開放，鈉離子內(nèi)流，膜內(nèi)電位逐漸增大，膜外電位逐漸減小，膜電位由外正內(nèi)負變成外負內(nèi)正，受刺激的部位稱為興奮部位，興奮部位與為興奮部位存在電位差，形成局部電流，興奮在神經(jīng)纖維上以局部電流的形式進行傳導。【詳解】（1）根據(jù)分析膀胱既屬于感受器，又屬于效應器。排尿反射的過程1→2→3→4→5→6→1。（2）動作電位的產(chǎn)生是由于Na+內(nèi)流，在調(diào)節(jié)過程中，有神經(jīng)和腎上腺素的參與，所以其調(diào)節(jié)方式是神經(jīng)-體液調(diào)節(jié)。機體的排尿反射受到脊髓中的低級中樞和大腦皮層高級中樞的控制，因此脊髓損傷后高級中樞大腦皮層失去對脊髓中低級中樞的控制。（3）刺激a點，發(fā)現(xiàn)b處的電流表偏轉，c處的電流表不偏轉，說明S1連接處正常，S2連接處異常?！军c睛】考查的知識點是神經(jīng)沖動傳導的途徑。解答時可以從反射弧的概念、組成、神經(jīng)沖動的傳導方向等方面來分析。關鍵是理解、熟記反射和反射弧的概念。9、cDNAPCRXhoIEoRI啟動子、終止子、復制原點卡那霉素PD-1蛋白PDL-1或答PD-1抗體作為對照【解析】

基因工程技術的基本步驟：（1）目的基因的獲?。悍椒ㄓ袕幕蛭膸熘蝎@取、利用PCR技術擴增和人工合成。（2）基因表達載體的構建：是基因工程的核心步驟，基因表達載體包括目的基因、啟動子、終止子和標記基因等。（3）將目的基因?qū)胧荏w細胞：根據(jù)受體細胞不同，導入的方法也不一樣。將目的基因?qū)胫参锛毎姆椒ㄓ修r(nóng)桿菌轉化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)雱游锛毎钣行У姆椒ㄊ秋@微注射法；將目的基因?qū)胛⑸锛毎姆椒ㄊ歉惺軕B(tài)細胞法。（4）目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉基因生物染色體的DNA是否插入目的基因采用DNA分子雜交技術；②檢測目的基因是否轉錄出了mRNA采用分子雜交技術；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)采用抗原—抗體雜交技術。個體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等。【詳解】（1）基因文庫包括基因組文庫和部分基因文庫（cDNA）。其中基因組文庫包含某種生物所有的基因，而部分基因文庫只包含某種生物的部分基因，可以mRNA為模板反轉錄形成cDNA；由于PCR技術利用的是DNA分子復制的原理，所以用該cDNA進行PCR技術擴增短時間內(nèi)可以獲得大量的目的基因。（2）分析圖1中堿基序列，α鏈上有“—CTCGAC—”識別序列，β鏈上有“—GAATTC—”堿基識別序列，與圖2中XhoI限制酶和EoRI限制酶的識別序列相同。故選用XhoI限制酶和EoRI限制酶將“pIRES2-EGFP質(zhì)?！陛d體進行雙切，再用DNA連接酶將其與目的基因拼接，構建基因表達載體?；虮磉_載體的組成包括目的基因、標記基因、啟動子、終止子、復制原點等。（3）根據(jù)第（2）題可知，基因表達載體上的標記基因是卡那霉素抗性基因，因此一定溫度下，與經(jīng)過Ca2+處理的感受態(tài)大腸桿菌混合培養(yǎng)在含有卡那霉素的培養(yǎng)基，可篩選出已經(jīng)完成轉化的大腸桿菌。（4）基因表達的產(chǎn)物是蛋白質(zhì)，一段時間后，為確定PD-1基因是否表達，可以檢測細胞膜表面是否具有PD-1基因表達的PD-1蛋白。為判斷其是否具有生物學活性和功能，可采用抗原—抗體雜交技術，即從裂解293T細胞中，提取PD-1蛋白看能否與PDL-1發(fā)生結合，從而阻斷“PD-1與PDL-1信號通路”。為了增加實驗的可信度，還需要設置對照實驗，只將“pIRES2-EGFP載體”轉入293T細胞，因為不含PD-1基因，所以“PD-1與PDL-1信號通路”不會阻斷?！军c睛】題考查基因工程的相關知識，要求考生識記基因工程的概念、原理及操作步驟，掌握各操作步驟中需要注意的細節(jié)，能結合所學的知識在新的情景材料下分析運用。10、從基因組文庫中獲得的干擾素基因有內(nèi)含子，在大腸桿菌中干擾素基因的轉錄產(chǎn)物中與內(nèi)含子對應的RNA序列不能被切除，無法表達出干擾素蛋白質(zhì)分子的結構規(guī)律生物功能防止目的基因和載體任意連接（或自身環(huán)化或反向連接）無法生長正常生長，菌落呈藍色正常生長，菌落呈白色（或無色）膀胱上皮【解析】

基因工程技術的基本步驟：（1）目的基因的獲取：方法有從基因文庫中獲取、利用PCR技術擴增和人工合成。（2）基因表達載體的構建：是基因工程的核心步驟，基因表達載體包括目的基因、啟動子、終止子和標記基因等。（3）將目的基因?qū)胧荏w細胞：根據(jù)受體細胞不同，導入的方法也不一樣。將目的基因?qū)胫参锛毎姆椒ㄓ修r(nóng)桿菌轉化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)雱游锛毎钣行У姆椒ㄊ秋@微注射法；將目的基因?qū)胛⑸锛毎姆椒ㄊ歉惺軕B(tài)細胞法。（4）目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉基因生物染色體的DNA是否插入目的基因——DNA分子雜交技術；②檢測目的基因是否轉錄出了mRNA——分子雜交技術；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)﹣﹣抗原﹣抗體雜交技術。個體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等?！驹斀狻浚?）從基因組文庫中獲得的干擾素基因有內(nèi)含子，在大腸桿菌中干擾素基因的轉錄產(chǎn)物中與內(nèi)含子對應的RNA序列不能被切除，無法表達出干擾素。因此相對于從基因組文庫中獲取干擾素基因，從已病毒免疫的白細胞中提取mRNA，再反轉錄并構建的cDNA文庫中獲取的干擾素基因，更易在大腸桿菌中合成正常干擾素。（2）蛋白質(zhì)工程以蛋白質(zhì)分子的結構規(guī)律和生物功能的關系為基礎，通過基因修飾或基因合成，對現(xiàn)有蛋白質(zhì)進行改造，或制造一種新的蛋白質(zhì)。（3）在構建該基因表達載體時，需同時用限制酶HindⅢ和BstⅠ處理目的基因和質(zhì)粒，主要目的是防止目的基因和載體任意連接（或自身環(huán)化或反向連接）。（4）用限制酶HindⅢ和BstⅠ處理質(zhì)粒時，破壞了lacZ基因，導致半乳糖苷酶不能合成，而半乳糖苷酶能催化生成藍色物質(zhì)從而將細菌染成藍色。在含有四環(huán)素的培養(yǎng)基中，未被轉化的大腸桿菌不含四環(huán)素抗性基因，無法生長；含有質(zhì)粒載體的大腸桿菌含有四環(huán)素抗性基因，能正常生長，含有l(wèi)acZ基因，菌落呈藍色；含有重組質(zhì)粒的大腸桿菌含有四環(huán)素抗性基因能正常生長，lacZ基因被破壞，菌落呈白色（或無色）。（5）要獲得膀胱生物反應器，最終在尿液中獲得干擾素，應使干擾素基因在膀胱上皮細胞中特異性表達?！军c睛】本題結合圖解，考查基因工程的相關知識，要求考生識記基因工程的原理及操作步驟，掌握各操作步驟中需要注意的細節(jié)，能正確分析題圖，再運用圖中信息準確答題，屬于考綱理解和應用層次的考查，有一定難度。11、胰蛋白酶（或膠原蛋白酶）啟