臨床本科3 溶貧檢測(cè)

第三節(jié)溶血性貧血(pínxuè)檢測(cè)共四十七頁(yè)溶血性貧血定義：

紅細(xì)胞的生存時(shí)間(shíjiān)縮短15～20天以下，破壞速度超過(guò)骨髓的代償造血能力時(shí)，才出現(xiàn)貧血發(fā)病機(jī)制分類(lèi)：RBC內(nèi)在因素（遺傳性/先天性）RBC外在因素（獲得性）共四十七頁(yè)freeHb(a2b2

tetramers)HbdimersHaptoglobin（Hp）haptoglobin-hemoglobincomplexkidneyslivermetHbbindstohemopexin&albuminferriheme(Fe3+)globin共四十七頁(yè)溶貧的臨床表現(xiàn)急性：發(fā)熱、畏寒，可出現(xiàn)Hb尿，腎功能改變慢性：貧血(pínxuè)、黃疸、脾腫大、免疫指標(biāo)異常，膽紅素代謝異常共四十七頁(yè)紅細(xì)胞破壞增多的依據(jù)RBC壽命<15天血片見(jiàn)RBC碎片血漿游離Hb增高（血管內(nèi)溶血）Hb尿檢測(cè)（＋），醬油(jiàngyóu)色尿含鐵血黃素試驗(yàn)（＋）血清非結(jié)合膽紅素增高尿膽原增高血清結(jié)合珠蛋白減低血漿高鐵血紅素白蛋白檢測(cè)共四十七頁(yè)球形紅細(xì)胞共四十七頁(yè)破碎(pòsuì)紅細(xì)胞、盔形紅細(xì)胞等共四十七頁(yè)一、溶貧篩查試驗(yàn)(shìyàn)1、血漿游離Hb測(cè)定

正常值：<50mg/L意義：血管(xuèguǎn)內(nèi)溶血的指征共四十七頁(yè)2、血清(xuèqīng)結(jié)合珠蛋白測(cè)定正常值：0.7~1.5g/L各種溶血時(shí)結(jié)合(jiéhé)珠蛋白均可減低，嚴(yán)重血管內(nèi)溶血明顯減低，甚至測(cè)不出（血漿游離血紅蛋白超過(guò)1.3g/L時(shí)）。巨幼細(xì)胞貧血、嚴(yán)重肝病、口服避孕藥、先天性無(wú)結(jié)合珠蛋白血癥等減低或消失。增高見(jiàn)于炎癥、感染、組織壞死、惡性腫瘤、風(fēng)濕性疾病、口服避孕藥、類(lèi)固醇激素治療。共四十七頁(yè)3、血漿高鐵血紅素清蛋白(dànbái)檢測(cè)

正常：陰性嚴(yán)重血管內(nèi)溶血(rónɡxuè)時(shí)呈陽(yáng)性4、RBC壽命測(cè)定（最佳）正常值：25~32天51Cr同位素標(biāo)記，半衰期<15天，說(shuō)明有溶血存在。共四十七頁(yè)5、尿含鐵血(tiěxuè)黃素試驗(yàn)（Roustest)正常值：陰性(yīnxìng)

溶貧中陽(yáng)性只占10~20%共四十七頁(yè)共四十七頁(yè)二、紅細(xì)胞膜缺陷(quēxiàn)的檢驗(yàn)1、RBC滲透脆性試驗(yàn)檢測(cè)紅細(xì)胞在不同濃度低滲鹽水中的抵抗力RBC表面積/RBC容積比值與RBC脆性成反比共四十七頁(yè)參考值：開(kāi)始溶血0.42%~0.46%(NaCl液)完全(wánquán)溶血0.28%~0.32%(NaCl液)意義：脆性增高遺傳性球形細(xì)胞增多癥脆性減低地中海貧血、缺鐵性貧血共四十七頁(yè)2、自身溶血(rónɡxuè)試驗(yàn)及其糾正試驗(yàn)正常人紅細(xì)胞經(jīng)孵育48h后，溶血率很低<4.0%，加葡萄糖或ATP后更低（<0.6%）膜缺陷性溶貧時(shí)，溶血率升高(shēnɡɡāo)，但可被糾正G6PD缺陷：＋ATP：可糾正但不能糾至正常＋G：同上PK缺陷：＋ATP：可糾正＋G：不糾正共四十七頁(yè)三、酶缺陷(quēxiàn)的檢驗(yàn)1、高鐵血紅蛋白還原(huányuán)試驗(yàn)

G6PD高鐵血紅蛋白還原酶G6PNADP還原型美蘭HbFe3+6PGNADPH氧化型美蘭HbFe2+NaNO2

共四十七頁(yè)正常值：定性(dìngxìng)法（－）半定量法還原率>75%G6PD缺陷：定性（＋），半定量<70%。共四十七頁(yè)2、氰化物-抗壞血酸試驗(yàn)(shìyàn)原理：略結(jié)果：正常血液幾小時(shí)后變暗色意義(yìyì)：G6PD缺乏者血液變成棕色（巧克力色），純合子在2h內(nèi)即變色，雜合子要3~4h變化共四十七頁(yè)3、變性珠蛋白小體生成(shēnɡchénɡ)試驗(yàn)受檢RBC＋乙酰苯肼作活體染色（甲基紫）37℃1~2h有變性珠蛋白小體，則膜上形成(xíngchéng)紫黑色顆粒下一張

G6PD缺乏致GSH減少，高鐵Hb增多，形成Heinz小體共四十七頁(yè)體外活體染色后，光鏡下發(fā)現(xiàn)的1~2μm顆粒狀折光小體。

結(jié)果：正常人<30%意義：見(jiàn)于(jiànyú)不穩(wěn)定血紅蛋白病、G6PD缺陷癥和芳香族苯胺或硝基類(lèi)化合物中毒所致的溶貧。共四十七頁(yè)4、G6PDPK活性測(cè)定(cèdìng)共四十七頁(yè)四、珠蛋白生成異常試驗(yàn)包括(bāokuò)血紅蛋白電泳、HbF定量測(cè)定（堿變性試驗(yàn)）等共四十七頁(yè)五、免疫性溶血(rónɡxuè)的檢驗(yàn)1、抗人球蛋白試驗(yàn)(shìyàn)（Coombs`test）直接法、間接法共四十七頁(yè)直接(zhíjiē)抗人球蛋白試驗(yàn)（DAGT）測(cè)RBC表面結(jié)合的抗體（更重要，價(jià)值高）受檢者RBC懸液+等量抗人球蛋白試劑

低速(dīsù)離心后觀察凝集37℃，15min

共四十七頁(yè)間接(jiànjiē)法（IAGT）：測(cè)游離特異的抗體（先使RBC致敏，再與抗人球蛋白血清結(jié)合）共四十七頁(yè)Coombs`test臨床意義正常人抗人球蛋白試驗(yàn)直接、間接均陰性自身免疫性溶血性貧血(pínxuè)（溫抗體型37℃條件下作用最強(qiáng)IgG）,(冷抗體型4℃條件下進(jìn)行試驗(yàn)IgM)

新生兒同種免疫溶血病、SLE、RA、HD、NHL可陽(yáng)性。共四十七頁(yè)2、冷熱溶血(rónɡxuè)試驗(yàn)

檢測(cè)(jiǎncè)補(bǔ)體依賴(lài)性冷熱溶血素存在D-L雙向抗體，則（+）正常為（-），（+）見(jiàn)于PNH

3、冷凝集素試驗(yàn)

參考值：效價(jià)<1:40意義：AIHA↑↑↑共四十七頁(yè)六、PNH相關(guān)檢測(cè)屬于(shǔyú)紅細(xì)胞膜缺陷，慢性血管內(nèi)溶血PNH不同(bùtónɡ)時(shí)間尿樣共四十七頁(yè)1、酸化溶血試驗(yàn)（Hamtest）特異性高，是國(guó)內(nèi)外公認(rèn)的PNH確診試驗(yàn)利用補(bǔ)體(bǔtǐ)在弱酸性環(huán)境中激活，并攻擊RBC膜，致溶血。正常人陰性，PNH陽(yáng)性。共四十七頁(yè)2、蔗糖溶血試驗(yàn)特異性敏感性均不如Ham試驗(yàn)，僅做篩選。參考值：陰性(yīnxìng)3、蛇毒因子溶血試驗(yàn)特異檢測(cè)PNH共四十七頁(yè)第四節(jié)血型鑒定(jiàndìng)與交叉配血共四十七頁(yè)血型(xuèxíng)定義：紅細(xì)胞系統(tǒng)血型：共四十七頁(yè)一、ABO系統(tǒng)(xìtǒng)與臨床意義

1、分型原則

根據(jù)紅細(xì)胞膜上含有(hányǒu)抗原和血漿中含有(hányǒu)相應(yīng)抗體分為A、B、AB、O四型

血型（表型）紅細(xì)胞上抗原血漿中抗體基因型

AA抗BAA、AO

BB抗ABB、BO

O無(wú)

抗A、

抗B、抗ABOO

ABA、B無(wú)

AB

共四十七頁(yè)共四十七頁(yè)父母的血型(xuèxíng)與子女的血型(xuèxíng)關(guān)系

共四十七頁(yè)2、抗原(kàngyuán)

A、B抗原(kàngyuán)（含H抗原(kàngyuán)）在胚胎期已形成，出生時(shí)抗原(kàngyuán)性不強(qiáng)，故胎兒、新生兒定血型時(shí)凝集性差。血型抗原終生不變。H抗原屬分泌型物質(zhì)，存在各組織中，以唾液為多，可輔助鑒定ABO血型。共四十七頁(yè)3、抗體(kàngtǐ)

抗A、抗B、抗AB屬I(mǎi)gG或IgM型，天然性抗體以IgM為主，免疫性以IgG為主（如輸血、妊娠后）。O血型血清內(nèi)抗體屬I(mǎi)gG。新生兒溶血(rónɡxuè)與IgG有關(guān)?？贵w也終生不變

抗A、抗B在生后3-6月才開(kāi)始產(chǎn)生,5-6歲達(dá)高峰，故嬰幼兒定血型時(shí)，抗體效價(jià)低，抗原位點(diǎn)少，易誤定共四十七頁(yè)

ABO亞型亞型是指屬同一血型抗原，但抗原結(jié)構(gòu)或抗原位點(diǎn)數(shù)有一定(yīdìng)差異。最多見(jiàn)的最有意義亞型是A型中的A1、A2（A1A、A1B、A2B)。A2B含有A1抗體。凡在血型鑒定過(guò)程中出現(xiàn)不明顯或可疑結(jié)果時(shí)應(yīng)做亞型鑒定。共四十七頁(yè)4、血型(xuèxíng)鑒定共四十七頁(yè)正向直接定型：用已知抗體(kàngtǐ)血清檢查紅細(xì)胞的抗原反轉(zhuǎn)定型：用已知血型的紅細(xì)胞檢查血清中抗體

正定型(dìngxíng) 反定型(dìngxíng)

抗A抗B抗AB A細(xì)胞B細(xì)胞O細(xì)胞

+-+ -+- A- ++ + -- B+++- -- AB- - - + +- O

血型共四十七頁(yè)三、交叉(jiāochā)配血、輸血原則

1、交叉(jiāochā)配血主側(cè)交叉配血：次側(cè)交叉配血:：共四十七頁(yè)

2、輸血(shūxuè)原則

輸血前復(fù)查血型，做交叉配血;輸同型血，多個(gè)不同血源間互相交叉配血;嚴(yán)格掌握輸血指征;提倡(tíchàng)成分輸血

共四十七頁(yè)意義(yìyì)輸血；輔助診斷新生兒溶血?。黄鞴僖浦?；遺傳(yíchuán)分析；其他共四十七頁(yè)二、Rh系統(tǒng)(xìtǒng)與臨床意義

1900年發(fā)現(xiàn)ABO血型，1940年發(fā)現(xiàn)Rh血型?？乖蠧cDEe五種(wǔzhǒnɡ)，一般以D定型。含有D抗原的紅細(xì)胞稱(chēng)為Rh陽(yáng)性，不含D抗原的為Rh陰性.我國(guó)人群漢族Rh（+）占99.7％，Rh(-)占0.3％。共四十七頁(yè)約80%以上Rh陰性受血者在接受Rh陽(yáng)性血液后能產(chǎn)生抗體。首次輸血不合不發(fā)生輸血反應(yīng),但當(dāng)Rh(-)第二次接受Rh(+)血液即刻(jíkè)發(fā)生，且嚴(yán)重，輸血前須定Rh血型共四十七頁(yè)本節(jié)重點(diǎn)內(nèi)容(nèirón