新疆沙棗多糖的提取、分離純化的研究

沙棗論文：新疆沙棗多糖的提取、分離純化的研究【中文摘要】多糖(polysaccharide)是由多個(gè)單糖分子縮合、失水而成,是一類分子機(jī)構(gòu)復(fù)雜且龐大的糖類物質(zhì)。凡符合高分子化合物概念的碳水化合物及其衍生物均稱為多糖。多糖在自然界分布極廣,也非常重要。多糖具有特殊的生物活性,在人體中具有抗病毒、抗感染、抗放射等多種生物學(xué)功能。新疆種植沙棗面積廣泛,因此從新疆沙棗中提取多糖在經(jīng)濟(jì)以及減少資源損失上都有廣泛的開發(fā)前景。本文以新疆沙棗為原料,通過常規(guī)熱水提取、超聲波輔助提取和微波輔助提取三種方法,進(jìn)行正交試驗(yàn),得出最優(yōu)提取工藝。并采用乙醇沉淀,正丁醇、三氯乙酸以及正丁醇-三氯乙酸法去蛋白,以及DEAE-52柱層析對多糖進(jìn)行分離純化,HPLC和SephadexG-100凝膠柱層析證實(shí)為單一組分。研究結(jié)果表明：1.傳統(tǒng)熱水法提取沙棗多糖的最佳工藝為提取溫度80℃,提取時(shí)間1h,水料比35：1,提取2次,提取率為5.1%。微波輔助提取沙棗多糖的最佳工藝為微波功率450W,微波處理時(shí)間2.5min,水料比25：1,提取率為8.9%。超聲波輔助提取沙棗多糖的最佳工藝為超聲波功率120W,超聲時(shí)間40min,溫度40℃,料液比40：1,提取率為7.5%。綜合分析各種因素,微波輔助提取為最優(yōu)提取方法。2.沙棗多糖的粗提物經(jīng)醇沉后,采用正丁醇、三氯乙酸以及正丁醇-三氯乙酸法去蛋白,并對其三種方法的去蛋白效果進(jìn)行比較,結(jié)果表明：采用正丁醇-20%三氯乙酸法去蛋白的效果最佳,其多糖損失率和蛋白去除率都在理想范圍內(nèi),多糖損失率為35.23%,蛋白質(zhì)去除率為13.23%。3.經(jīng)去蛋白并透析后的多糖溶液過DEAE-52柱層析純化后,得到兩種多糖(XM1和XM2),經(jīng)HPLC和SephadexG-100凝膠柱層析證實(shí)其均為單一組分。【英文摘要】Polysaccharideisakindofhighmoleculecompound,whichiscomprehensivedistributinginnature.Polysaccharidesisnotonlytheenergyresourceorfabricmaterials,butalsoithastheinformationalfunctionthatcancomparewithnucleicacidandprotein,italsohasthebiologicalfunctionthatparticipateineverylifeactivity,antivirus,antinfection,resistradiationandsoon.Theangustifoliahaslargegrowareainsinkiang,soextractedPolysaccharidesfromoleasterhasextensiveexploderforegroundbasedoneconomyanddecreasetheresourcelosing.Inthispaper,theangustifoliaisproducedinsinkiang.Themainresearchobjectistoresearchseveralmethodsofextractingangustifoliapolysaccharide.Usingthetraditionalhotwaterextraction,microwave-assistedextractionmethod,ultrasound-assistedextractionmethod,respectivelyorthogonaltest,istofingtheoptimumextraction.Theextractingofpolysaccharidesfromangustifoliawasprecipitatedbyethanol.Polysaccharideispurifiedbyn-butanol,20%trichloroacetic,n-butanol-20%trichloroaceticmethodtoremoveprotein,andthenfollowedbyDEAE-52columnchromatography.PolysaccharideisshowntobeasinglehomogeneouscomponentbyHPLCandSephadexG-100columnchromatography.theantoxidationactivitiesofpolysaccharidesisstudied.Theresultsshowedthat:1.Traditionalhotwaterextractionofpolysaccharideoptimumconditionsareasfollows:extractiontemperature80℃,extractiontime1h,water:angustifolia=35:1,Extractiontimes2.Theextractionrateis5.1%.Microwave-assistedextractionofAngustifoliapolysaccharideoptimumconditionsareasfollows:Extractingpower450W,extractiontime2.5min,water:angustifolia=25:1,Theextractionrateis8.98%.Ultrasonicextractionauxiliaryangustifoliapolysaccharideoptimumconditionsareasfollows:Ultrasonicpower120W,extractiontime40min,extractiontemperature40℃,water:angustifolia=40:1,Theextractionrateis7.5%.Consideringvariousfactors,microwave-assistedextractionistheoptimalextractionmethod.2.Theextractingofpolysaccharidesfromangustifoliawereprecipitatedbyethanol.Polysaccharideispurifiedbyn-butanol,20%trichloroacetic,n-butanol-20%trichloroaceticmethodtoremoveprotein,andcomparedwiththisthreemethods.Theresultsshowedthat:itisthebestwaytoremoveproteinfromPolysaccharideusingn-butanol-20%trichloroaceticmethod,thepolysaccharideslosingrateis35.23%andtheproteinremovedrateis13.23%.3.ThepolysaccharidesthathasbeenremovedproteinfollowedbyDEAE-52columnchromatography,andweobtainedtwokindsofpolysaccharides.AndtheyareshowntobetwosinglehomogeneouscomponentsbyHPLCandSephadexG-100columnchromatography.【關(guān)鍵詞】沙棗多糖提取分離純化【英文關(guān)鍵詞】angustifoliapolysaccharideextractionseparationandpurification【目錄】新疆沙棗多糖的提取、分離純化的研究

摘要

5-6

ABSTRACT

6

第一章文獻(xiàn)綜述

9-20

1.1沙棗概述

9-11

1.1.1沙棗簡介

9

1.1.2沙棗中營養(yǎng)成分的研究

9-10

1.1.3沙棗的加工現(xiàn)狀

10-11

1.2多糖的研究概況

11-12

1.3植物多糖的研究現(xiàn)狀

12-18

1.3.1植物多糖的提取方法

12-14

1.3.2植物多糖的分離與純化工藝

14-16

1.3.3植物多糖的純度鑒定與分子量檢測

16

1.3.4植物多糖的生物活性研究

16-18

1.4立題意義、研究內(nèi)容及創(chuàng)新點(diǎn)

18-20

1.4.1立題意義

18-19

1.4.2研究內(nèi)容

19

1.4.3技術(shù)路線

19-20

第二章沙棗中多糖的提取技術(shù)研究

20-33

2.1材料與方法

20-22

2.1.1材料和設(shè)備

20

2.1.2實(shí)驗(yàn)方法

20-22

2.2結(jié)果與分析

22-31

2.2.1原料的預(yù)處理

22

2.2.2提取溶劑的選擇

22-23

2.2.3還原糖的測定

23-24

2.2.4多糖的測定

24

2.2.5常規(guī)熱水提取多糖的研究

24-26

2.2.6微波輔助提取法

26-29

2.2.7超聲波輔助提取法

29-31

2.3沙棗多糖的純度

31-32

2.4三種提取方法的比較

32

2.5小結(jié)

32-33

第三章沙棗多糖分離純化工藝的研究

33-43

3.1材料與方法

33-37

3.1.1材料和設(shè)備

33

3.1.2實(shí)驗(yàn)方法

33-37

3.2結(jié)果與分析

37-42

3.2.1蛋白含量的測定

37

3.2.2脫蛋白方法的比較