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文檔簡介
福建省平潭縣新世紀學(xué)校2025屆高考生物四模試卷注意事項:1.答卷前,考生務(wù)必將自己的姓名、準考證號、考場號和座位號填寫在試題卷和答題卡上。用2B鉛筆將試卷類型(B)填涂在答題卡相應(yīng)位置上。將條形碼粘貼在答題卡右上角"條形碼粘貼處"。2.作答選擇題時,選出每小題答案后,用2B鉛筆把答題卡上對應(yīng)題目選項的答案信息點涂黑;如需改動,用橡皮擦干凈后,再選涂其他答案。答案不能答在試題卷上。3.非選擇題必須用黑色字跡的鋼筆或簽字筆作答,答案必須寫在答題卡各題目指定區(qū)域內(nèi)相應(yīng)位置上;如需改動,先劃掉原來的答案,然后再寫上新答案;不準使用鉛筆和涂改液。不按以上要求作答無效。4.考生必須保證答題卡的整潔。考試結(jié)束后,請將本試卷和答題卡一并交回。一、選擇題(本大題共7小題,每小題6分,共42分。)1.《柳葉刀》近期發(fā)表的一項研究指出,新冠肺炎患者病情嚴重與細胞因子風(fēng)暴(簡稱CS)相關(guān)。病毒入侵機體后,受感染的上皮細胞和免疫細胞產(chǎn)生約15種細胞因子幫助抵御病毒,細胞因子會引起更多免疫細胞透過毛細血管并激活這些免疫細胞,被激活的免疫細胞則會產(chǎn)生更多的細胞因子,即細胞因子風(fēng)暴(CS)。由于肺部毛細血管極為豐富,故血管通透性增加后將產(chǎn)生極其嚴重的后果,除此以外CS還會引起多種器官的衰竭。以下有關(guān)新冠肺炎的敘述錯誤的是()A.新冠肺炎患者產(chǎn)生細胞因子風(fēng)暴(CS)是一個負反饋調(diào)節(jié)過程B.新冠肺炎患者肺部毛細血管通透性增加會導(dǎo)致肺部組織水腫C.肺炎患者富含毛細血管的器官(如腎臟)也可能受CS損傷D.服用使免疫細胞增殖受阻的藥物(如類固醇)可緩解患者的癥狀2.2019年11月3日,杭州馬拉松圓滿落下帷幕。下列有關(guān)運動員在奔跑過程中的生理調(diào)節(jié)的敘述,正確的是()A.馬拉松跑者運動后產(chǎn)生大量乳酸導(dǎo)致血漿pH明顯下降B.馬拉松跑者聽到發(fā)令槍聲后奔跑,這個過程中存在電信號—化學(xué)信號的轉(zhuǎn)換C.奔跑過程中,位于人體垂體的溫覺感受器能感受到溫度的變化D.馬拉松跑者大量失鹽導(dǎo)致內(nèi)環(huán)境滲透壓下降,使得機體尿量減少3.如圖所示為某種單基因遺傳病的系譜圖,下列有關(guān)敘述錯誤的是()A.此圖中I1一定是雜合子B.II2與正常男性結(jié)婚,生出正常孩子的概率為1/3或1/4C.此圖不可以表示抗維生素D佝僂病遺傳的家系D.I代的這對夫婦再生一個男孩,正常的概率是1/44.洋蔥根尖分生區(qū)某個細胞的細胞周期中,甲、乙、丙不同階段的細胞中染色體組數(shù)和每條染色體上DNA分子數(shù)如圖所示。下列敘述正確的是()A.甲→乙細胞內(nèi)最重要的變化是核糖體增生B.甲→乙→丙過程代表一個完整的細胞周期C.乙階段有些細胞的染色體縮短到最小程度D.丙階段細胞發(fā)生染色體的著絲粒一分為二5.研究發(fā)現(xiàn)四環(huán)素類抗生素有與細菌核糖體結(jié)合能力強。對人類副作用小等優(yōu)點,結(jié)合下圖分析,說法錯誤的是()A.若a過程出現(xiàn)差錯,必然引起蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)改變B.四環(huán)素通過抑制蛋白質(zhì)的合成起到抗菌效果C.c過程需要逆轉(zhuǎn)錄酶,e過程需要RNA復(fù)制酶D.四環(huán)素可能對細菌的a、b過程也有一定的影響6.下列敘述與所給的概念模型不相符的是()A.若該圖表示能量流動,則E可表示羊攝入的能量,F(xiàn)可代表羊同化的能量,G、H可分別代表被下一營養(yǎng)級攝入的能量和羊糞便中的能量B.若該圖表示誘變育種,則E可表示誘變因素,F(xiàn)可代表處理材料,G、H可說明變異的不定向性C.若該圖表示無氧呼吸,則E可表示葡萄糖,F(xiàn)可代表丙酮酸,G可代表CO2和酒精,H可代表乳酸D.若該圖表示體液免疫,則E可表示抗原和淋巴因子,F(xiàn)可代表B細胞,G、H可分別代表漿細胞和記憶細胞7.抗維生素D佝僂病是一種伴X染色體顯性遺傳病,下列關(guān)于該病的敘述正確的是()A.人群中女性患者明顯多于男性患者B.女性患者體細胞內(nèi)最多含有兩個致病基因C.在一個患病家族中,每一代都有人患病D.男性患者的精子中,至少帶1個致病基因8.(10分)如圖表示果酒和果醋生產(chǎn)過程中的物質(zhì)變化情況,有關(guān)敘述錯誤的是()A.需要O2參與的是過程③④⑤B.導(dǎo)致過程④⑤差異的原因是糖源是否充足C.過程②④所需要的最適溫度相同D.過程①②在酵母菌細胞中的場所相同二、非選擇題9.(10分)利用細胞工程技術(shù)可以生產(chǎn)單克隆抗體和“人鼠嵌合抗體”,在人類征服疾病方面展現(xiàn)出誘人的前景?;卮鹣铝袉栴}:(1)將小鼠骨髓瘤細胞與經(jīng)抗原免疫過的B細胞融合,形成雜交瘤細胞,動物細胞融合的誘導(dǎo)因素有____、____、電激等。對融合的細胞需要進行篩選、克隆培養(yǎng)和____,進而獲得可以產(chǎn)生單克隆抗體的細胞群體。(2)臨床發(fā)現(xiàn),利用上述方法產(chǎn)生的抗體具有外源性,會被人體免疫系統(tǒng)清除。科學(xué)家通過分析抗體的結(jié)構(gòu)發(fā)現(xiàn),抗體由“C區(qū)”和“V區(qū)”構(gòu)成,引起人體免疫反應(yīng)的主要是“C區(qū)”??茖W(xué)家通過“人鼠嵌合抗體”成功解決了這個問題,制備“人鼠嵌合抗體”時,先從小鼠雜交瘤細胞中提取RNA,在____酶的作用下形成DNA,擴增篩選得到編碼抗體____的基因,再與人的基因通過DNA連接酶連接后,插入適當?shù)谋磉_載體,導(dǎo)人宿主細胞表達。與鼠源單克隆抗體相比,“人鼠嵌合抗體”的優(yōu)點是____。10.(14分)甲醇酵母菌是基因工程中常用的受體菌,研究人員將人的膠原蛋白基因?qū)爰状冀湍妇胁⒊晒Ρ磉_。回答下列問題。(1)獲取目的基因是實施基因工程的第一步,獲取目的基因的方法有_____、__________(答出兩種)。(2)要使膠原蛋白基因在甲醇酵母菌中表達,需要先構(gòu)建基因表達載體而不是直接將基因?qū)胧荏w細胞,原因是_________________和_________________。(3)甲醇酵母菌可高效表達外源蛋白質(zhì)并分泌到細胞外,但自身蛋白質(zhì)分泌到培養(yǎng)基中的很少,這一特點的優(yōu)點在于_____________,甲醇酵母菌分泌的膠原蛋白的結(jié)構(gòu)與人的幾乎完全相同,從細胞結(jié)構(gòu)的角度分析,其原因可能是_______。(4)在構(gòu)建基因表達載體時,用兩種不同的限制酶分別切割目的基因的兩端和質(zhì)粒,使目的基因和質(zhì)粒獲得不同的黏性末端,其目的是______________。11.(14分)鴯鹋油提取自澳洲動物鴯鹋(一種當?shù)爻R婙B類)的背部脂肪,具有很多用途,如促進傷口愈合,緩解關(guān)節(jié)炎等,也常與一些抗菌成分混合制成抗菌藥物,近年來受到研究人員的關(guān)注。(1)隨著抗菌藥物被廣泛使用,病原菌的抗藥性基因頻率發(fā)生___________(填“定向”或“不定向”)改變,人們迫切希望發(fā)現(xiàn)新結(jié)構(gòu)的抗菌化合物。(2)前期研究發(fā)現(xiàn)鴯鹋油的水溶性較差,所以不能在___________培養(yǎng)基上出現(xiàn)清晰的抑菌圈,故將醇鵲油與乙醇和Tween81(一種乳化劑)混合均勻制成乳液。為確定鴯鹋油的最小抑菌濃度(MIC),研究人員進行了以下實驗:①將大腸桿菌、金黃色葡萄球菌和沙門氏菌分別___________到LB培養(yǎng)基中,在37℃搖床條件下培養(yǎng)。搖床振蕩培養(yǎng)的原因是___________。②一段時間后將上述培養(yǎng)基稀釋為一定濃度的菌懸液,加入不同稀釋濃度的鴯鹋油乳液并振蕩混勻,培養(yǎng)21h后測定菌體的存活狀況,結(jié)果如下表。鴯鹋油濃度/%菌體生長情況大腸桿菌金黃色葡萄球菌沙門氏菌1+++1.11156+++1.11313+++1.11625-++1.1125--+1.125--+1.15--+注:“+”表示有菌生長;“-”表示無菌生長。上述結(jié)果顯示:_______________。(3)常見抗菌藥物青霉素的抗菌機理是抑制細菌細胞壁的合成。有人提出鴯鹋油可增大菌體細胞膜的通透性。已知多數(shù)細菌體內(nèi)存在β—半乳糖苷酶,可催化乳糖水解生成_________________和半乳糖,鄰硝基酚-β半乳糖苷(ONPG)是一種乳糖類似物,可進入菌體,被β-半乳糖苷酶水解為鄰硝基苯酚(一種黃色物質(zhì))。分光光度計可定量檢測溶液中某種物質(zhì)的含量。為確定鵲油能否增大菌體細胞膜通透性,請你根據(jù)上述原理寫出實驗思路____________。12.圖為某草原生態(tài)系統(tǒng)中部分生物構(gòu)成的食物網(wǎng)簡圖,請據(jù)圖分析并回答下列問題:(1)調(diào)查發(fā)現(xiàn),該草原生長著紫花苜蓿、黑麥草、燕麥草等多種綠色植物,這些綠色植物___(填“能”或“不能”)構(gòu)成一個生物種群,判斷理由是_____。(2)圖中處于最高營養(yǎng)級的生物為________,鷹和蛇的種間關(guān)系為___。不能選用樣方法調(diào)查鼠的種群密度,原因是鼠____。有人認為鼠以綠色植物為食,還在草原上打洞,會破壞草原,故應(yīng)該將其徹底消滅,請從保持生態(tài)系統(tǒng)穩(wěn)定性的角度分析不可以徹底消滅鼠的原因:___________(3)草原上的植物可以保持水土,防風(fēng)固沙,草原上的長河落日、西風(fēng)烈馬與草原的翠綠草色相映成趣,吸引了很多人來游玩,這體現(xiàn)了生物多樣性的___價值。(4)在草原放牧過程中,一定要適當控制兔、鼠、蝗蟲的數(shù)量,從能量流動的角度分析,這么做的目的是___________
參考答案一、選擇題(本大題共7小題,每小題6分,共42分。)1、A【解析】
反饋調(diào)節(jié)是指系統(tǒng)本身工作的效果,反過來又作為信息調(diào)節(jié)該系統(tǒng)的工作,這種方式叫反饋調(diào)節(jié),受病毒侵染的免疫細胞會產(chǎn)生細胞因子,細胞因子繼續(xù)激活更多的免疫細胞產(chǎn)生更多的細胞因子,這種調(diào)節(jié)方式叫正反饋調(diào)節(jié)?!驹斀狻緼、根據(jù)題干信息“細胞因子會引起更多免疫細胞透過毛細血管并激活這些免疫細胞,被激活的免疫細胞則會產(chǎn)生更多的細胞因子”可知,新冠肺炎患者產(chǎn)生細胞因子風(fēng)暴(CS)是一個正反饋調(diào)節(jié)過程,A錯誤;B、毛細血管通透性增加,導(dǎo)致血漿滲透壓降低,引起肺部組織水腫,B正確;C、CS還會引起多種器官的衰竭可知肺炎患者富含毛細血管的器官(如腎臟)也可能受CS損傷,C正確;D、服用使免疫細胞增殖受阻的藥物,使免疫細胞產(chǎn)生較少的細胞因子,有利于患者癥狀的緩解,D正確。故選A。2、B【解析】
多細胞動物絕大多數(shù)細胞并不能直接與外部環(huán)境接觸,他們周圍的環(huán)境就是動物體內(nèi)細胞外面的液體,叫做細胞外液,也稱為內(nèi)環(huán)境,包括血漿、組織液和淋巴等。血漿中含有多種無機鹽,包括Na+、K+、Ca2+、Mg2+等離子以及Cl-、HCO3-、H2PO4-等負離子,這些離子對于維持血漿的正常濃度,酸堿平衡和神經(jīng)肌肉的興奮性等都是非常重要的。內(nèi)環(huán)境的任何變化都會引起機體自動調(diào)節(jié)組織和器官的活動,使他們產(chǎn)生一些反應(yīng)來減少內(nèi)環(huán)境的變化,由這種通過調(diào)節(jié)反應(yīng)形成的動物機體內(nèi)部環(huán)境相對穩(wěn)定的狀態(tài),叫做穩(wěn)態(tài)。要維持內(nèi)環(huán)境的穩(wěn)定,動物體就必須能及時感知內(nèi)環(huán)境的變化,并及時做出反應(yīng)加以調(diào)整,這些活動都依靠神經(jīng)系統(tǒng)和內(nèi)分泌系統(tǒng)的活動來完成?!驹斀狻緼、血漿中存在緩沖物質(zhì),如碳酸氫鈉,磷酸氫鈉等可使血液的酸堿度不會發(fā)生很大的變化,從而維持在相對穩(wěn)定的狀態(tài),A錯誤;B、馬拉松跑者聽到發(fā)令槍聲后奔跑,這個過程中涉及到神經(jīng)系統(tǒng)的反射活動,該反射為聽覺感受器→傳入神經(jīng)→神經(jīng)中樞→傳出神經(jīng)→效應(yīng)器肌肉,有多個中間神經(jīng)元的參與,在神經(jīng)元之間涉及到電信號—化學(xué)信號的轉(zhuǎn)換,B正確;C、奔跑過程中,位于人體下丘腦的溫覺感受器能感受到溫度的變化,C錯誤;D、馬拉松跑者大量出汗,水份減少,滲透壓升高,此時抗利尿激素增多,腎小管集合管重吸收水增多,尿量減少,D錯誤。故選B。3、C【解析】
遺傳系譜圖中兩個親本都患病但生育了正常的兒子,因此判定該病為顯性遺傳病,但不能區(qū)分是常染色體遺傳還是伴性遺傳。【詳解】A、無論是常染色體遺傳還是伴性遺傳,Ⅱ1中的正常基因一定有一個來自于Ⅰ1,因此Ⅰ1一定是雜合子,A正確;B、若該病為常染色體顯性,推斷親本的基因型均為Aa,因此Ⅱ2的基因型應(yīng)該為1/3AA,2/3Aa,與正常男子aa婚配,生出正常孩子的概率為;若該病為伴X染色體顯性遺傳,推斷親本的基因型分別為XAXa,XAY,因此II2的基因型應(yīng)該為1/2XAXA、1/2XAXa,與正常的男子XaY婚配,生育正常孩子的概率為,B正確;C、抗維生素D佝僂病是伴X顯性遺傳病,該圖可以表示其遺傳的家系,C錯誤;D、若該病為常染色體顯性,推斷親本的基因型均為Aa,再生育一個男孩,正常的概率為1/4,若該病為伴X染色體顯性遺傳,推斷親本的基因型分別為XAXa、XAY,生一個男孩,正常的概率為1/4,D正確。故選C?!军c睛】根據(jù)遺傳系譜圖分析該遺傳病的遺傳方式是解題的突破點。4、C【解析】
題意顯示,圖中表示的是洋蔥根尖分生區(qū)某個細胞的細胞周期,即圖中表示的是有絲分裂過程:甲圖中細胞中染色體組數(shù)為2,每條染色體上DNA分子為1,可知圖甲代表的細胞為體細胞;圖乙中染色體組數(shù)和每條染色體上DNA分子均為2,說明該細胞為有絲分裂的前、中期細胞;圖丙中染色體組數(shù)為4,而每條染色體上DNA分子為1,說明丙細胞為有絲分裂后期的細胞。【詳解】A、甲→乙細胞內(nèi)最重要的變化是經(jīng)過DNA復(fù)制和有關(guān)蛋白質(zhì)的合成,并形成紡錘體和染色體,A錯誤;B、甲→乙→丙→甲過程經(jīng)歷了一個完整的細胞周期,B錯誤;C、乙階段表示的有絲分裂前、中期細胞,故乙階段的有些細胞的染色體縮短到最小程度,C正確;D、丙階段細胞有絲分裂后期的細胞,其中已經(jīng)發(fā)生了染色體的著絲粒一分為二,后期這些分離的染色體以相同的速率分別被紡錘絲拉向兩極,兩極之間的距離也加大了,這時原來的一套染色體已經(jīng)變成了完全相同的兩套,D錯誤。故選C。5、A【解析】
考查中心法則及其發(fā)展。生物體內(nèi)遺傳信息傳遞的一般規(guī)律是中心法則。(1)遺傳信息可以從DNA流向DNA,即DNA的復(fù)制。(2)可以從DNA流向RNA,進而流向蛋白質(zhì)即遺傳信息的轉(zhuǎn)錄和翻譯,后來,中心法則又補充了遺傳信息RNA流向RNA和RNA流向DNA兩條途徑。【詳解】A、DNA復(fù)制中發(fā)生差錯會導(dǎo)致基因突變,但由于密碼子的簡并性,其編碼的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)不一定改變,A錯誤;B、四環(huán)素類抗生素與細菌胞內(nèi)核糖體結(jié)合能力強,對蛋白質(zhì)的合成會有抑制作用,B正確;C、c過程為逆轉(zhuǎn)錄過程,該過程需要逆轉(zhuǎn)錄酶,e過程為RNA復(fù)制,需要RNA復(fù)制酶的催化,C正確;D、四環(huán)素類抗生素與細菌核糖體結(jié)合力強,因而影響了酶的合成,而a、b過程都需要大量的酶參與才能發(fā)生,所以對其也會有一定的影響,D正確。故選A。6、A【解析】
細胞呼吸包括有氧呼吸和無氧呼吸,其中無氧呼吸分為產(chǎn)酒精的和產(chǎn)乳酸的無氧呼吸。特異性免疫包括體液免疫和細胞免疫。【詳解】A、若該圖表示能量流動,則攝入量分為同化量和糞便中的能量,A錯誤;B、若該圖表示誘變育種,則E可表示誘變因素,F(xiàn)可代表處理材料,可以突變?yōu)椴煌牡任换?,故G、H可說明變異的不定向性,B正確;C、若該圖表示無氧呼吸,則E可表示葡萄糖,F(xiàn)可代表丙酮酸,G可代表CO2和酒精,H可代表乳酸,表示不同途徑的無氧呼吸,C正確;D、若該圖表示體液免疫,則E可表示抗原和淋巴因子,F(xiàn)可代表B細胞,G、H可分別代表漿細胞和記憶細胞,其中漿細胞可以分泌抗體,D正確。故選A。7、A【解析】
伴性遺傳指位于性染色體上的基因所控制的性狀表現(xiàn)出與性別相聯(lián)系的遺傳方式。自然界中由性染色體決定生物性別的類型,主要有XY型和ZW型,XY型在雌性的體細胞內(nèi),有兩個同型的性染色體,在雄性的體細胞內(nèi),有兩個異型的性染色體??咕S生素D佝僂病是一種伴X染色體顯性遺傳病,假設(shè)由A基因控制,則女性中基因型為XAXA、XAXa、XaXa,男性基因型為XAY、XaY?!驹斀狻緼、人群中女性患者(XAXa、XAXA)明顯多于男性患者(XAY),A正確;B、女性患者體細胞內(nèi)最多含有四個致病基因,如XAXA細胞內(nèi)的基因復(fù)制后即有四個,B錯誤;C、在一個患病家族中,不一定每一代都有人患病,如XaXa、XAY,后代若生兒子即正常,C錯誤;D、男性患者的精子中,至少帶0個致病基因,如含Y的精子,D錯誤。故選A。8、C【解析】
分析題圖:圖示是果酒和果醋生產(chǎn)過程中的物質(zhì)變化情況,其中①是細胞呼吸的第一階段,發(fā)生在細胞質(zhì)基質(zhì)中;②是無氧呼吸的第二階段,為酒精發(fā)酵,發(fā)生在細胞質(zhì)基質(zhì)中;③為有氧呼吸的第二、三階段,發(fā)生在線粒體中;④⑤均為醋酸發(fā)酵,發(fā)生在細胞質(zhì)基質(zhì)中?!驹斀狻緼、過程③為有氧呼吸的第二、三階段,發(fā)生在線粒體中,需要氧氣的參與;過程④⑤都是醋酸菌發(fā)酵產(chǎn)生醋酸的過程,也需要氧氣的參與,A正確;B、過程④是醋酸菌在缺少糖源時,將酒精變成乙醛,再將乙醛變成醋酸,過程⑤是醋酸菌在氧氣、糖源充足時,將葡萄糖轉(zhuǎn)變成醋酸,B正確;C、過程②④分別是酒精發(fā)酵和醋酸發(fā)酵的過程,需要的溫度不同,C錯誤;D、過程①為細胞呼吸的第一階段,發(fā)生在細胞質(zhì)基質(zhì)中,過程②為無氧呼吸的第二階段,發(fā)生在細胞質(zhì)基質(zhì)中,D正確。故選C?!军c睛】解答本題的關(guān)鍵是掌握酒精發(fā)酵和醋酸發(fā)酵的原理以及有氧呼吸和無氧呼吸的詳細過程,準確判斷圖中各個數(shù)字代表的過程的名稱,進而結(jié)合選項分析答題。二、非選擇題9、聚乙二醇(PEG)滅活的病毒專一抗體檢測逆轉(zhuǎn)錄“C區(qū)”降低人體對鼠源單克隆抗體的免疫排斥反應(yīng),提高治療效果【解析】
單克隆抗體是由單一B細胞克隆產(chǎn)生的高度均一、僅針對某一特定抗原表位的抗體。通常采用雜交瘤技術(shù)來制備,雜交瘤抗體技術(shù)是在細胞融合技術(shù)的基礎(chǔ)上,將具有分泌特異性抗體能力的致敏B細胞和具有無限繁殖能力的骨髓瘤細胞融合為B細胞雜交瘤。用具備這種特性的單個雜交瘤細胞培養(yǎng)成細胞群,可制備針對一種抗原表位的特異性抗體即單克隆抗體。【詳解】(1)聚乙二醇(PEG)、滅活的病毒、電激等可以誘導(dǎo)動物細胞融合。對融合的細胞需要進行篩選、克隆培養(yǎng)和專一抗體檢測,進而獲得可以產(chǎn)生單克隆抗體的細胞群體。(2)RNA逆轉(zhuǎn)錄變成DNA,需要逆轉(zhuǎn)錄酶的催化。引起人體免疫反應(yīng)的主要是“C區(qū)”,因此擴增篩選得到編碼抗體“C區(qū)”的基因。與鼠源單克隆抗體相比,“人鼠嵌合抗體”的優(yōu)點是降低人體對鼠源單克隆抗體的免疫排斥反應(yīng),提高治療效果?!军c睛】熟悉單克隆抗體的制備原理、過程及應(yīng)用是解答本題的關(guān)鍵。10、從基因文庫中獲取人工合成目的基因無表達所需的啟動子目的基因無復(fù)制原點(目的基因不能在受體細胞中穩(wěn)定存在)便于目的蛋白的分離和純化甲醇酵母菌有內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體防止目的基因和質(zhì)粒的自身環(huán)化、防止目的基因與質(zhì)粒反向連接【解析】
基因工程是狹義的遺傳工程,基因工程的基本原理是讓人們感興趣的基因(即目的基因)在宿主細胞中穩(wěn)定高效地表達。為了實現(xiàn)基因工程的目標,通常要有多種工具酶、目的基因、載體和宿主細胞等基本要素,并按照一定的程序進行操作,它包括目的基因的獲得、重組DNA的形成,重組DNA導(dǎo)入受體細胞也稱(宿主)細胞、篩選含有目的基因的受體細胞和目的基因的表達等幾個方面?;虮磉_載體的構(gòu)建(即目的基因與運載體結(jié)合)是實施基因工程的第二步,也是基因工程的核心。其構(gòu)建目的是使目的基因能在受體細胞中穩(wěn)定存在,并且可以遺傳給下一代,同時,使目的基因能夠表達和發(fā)揮作用?!驹斀狻浚?)獲取目的基因是實施基因工程的第一步,獲取目的基因的方法有從基因文庫中獲?。康幕蛐蛄形粗⑷斯ず铣桑康幕蛐蛄幸阎?。(2)單獨的目的基因容易丟失,且目的基因的表達需要啟動子和終止子,目的基因的復(fù)制需要復(fù)制原點,因此要使膠原蛋白基因在甲醇薛母菌中表達,需要先構(gòu)建基因表達載體而不是直接將基因?qū)胧荏w細胞。(3)甲醇酵母菌可高效表達外源蛋白質(zhì)并分泌到細胞外,但自身蛋白質(zhì)分泌到培養(yǎng)基中的很少,這樣分泌到細胞外的蛋白主要是我們需要的目的蛋白,這一特點的優(yōu)點在于便于目的蛋白的分離和純化。甲醇酵母菌分泌的膠原蛋白的結(jié)構(gòu)與人的幾乎完全相同,從細胞結(jié)構(gòu)的角度分析,其原因可能是甲醇酵母菌有內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體,可以對表達出的蛋白質(zhì)進行進一步的加工、運輸。(4)用一種酶切質(zhì)粒和目的基因,可能會引起質(zhì)?;蚰康幕蜃陨憝h(huán)化。在構(gòu)建基因表達載體時,用兩種不同的限制酶分別切割目的基因的兩端和質(zhì)粒,使目的基因和質(zhì)粒獲得不同的黏性末端,其目的是防止目的基因和質(zhì)粒的自身環(huán)化、防止目的基因與質(zhì)粒反向連接?!军c睛】本題重點在基因工程的步驟及原理,須在理解的基礎(chǔ)上加強識記。11、定向固體接種供氧、目的菌與營養(yǎng)物質(zhì)充分接觸大腸桿菌對鴯鹋油較為敏感,最小抑菌濃度約為1.11625%,對金黃色葡萄球菌的最小抑菌濃度約為1.1125%,并且鴯鹋油對沙門氏菌沒有表現(xiàn)出抑菌性葡萄糖將大腸桿菌(或其他細菌)置于培養(yǎng)液中培養(yǎng)一段時間,再加入ONPG和一定濃度(≥MIC)的鴯鹋油,對照組不加鴯鹋油。一段時間后利用分光光度計測量鄰硝基苯酚的量,記錄并比較。【解析】
微生物的實驗室培養(yǎng),常用到培養(yǎng)基,培養(yǎng)基,是指供給微生物、植物或動物(或組織)生長繁殖的,由不同營養(yǎng)物質(zhì)組合配制而成的營養(yǎng)基質(zhì)。抑菌圈法又叫擴散法,是利用待測藥物在瓊脂平板中擴散使其周圍的細菌生長受到抑制而形成透明圈,即抑菌圈,根據(jù)抑菌圈大小判定待測藥物抑菌效價的一種方法。【詳解】(1)隨著抗菌藥物被廣泛使用,抗藥性強的病原菌存活,病原菌的抗藥性基因頻率提高,發(fā)生定向改變。(2)鴯鹋油的水溶性較差,所以不能在固體培養(yǎng)基上出現(xiàn)清晰的抑菌圈。①將大腸桿菌、金黃色葡萄球菌和沙門氏菌分別接種到LB培養(yǎng)基中。搖床振蕩培養(yǎng)可以提高溶氧量、增加目的菌與營養(yǎng)物質(zhì)的接觸。②從表中可知,不同稀釋濃度的鴯鹋油乳液中沙門氏菌均有生長,說明鴯鹋油對沙門氏菌沒有表現(xiàn)出抑菌性。1.11625濃度下,大腸桿菌停止生長,1.1125濃度下,金黃色葡萄球菌停止生長,說明大腸桿菌對鴯鹋油較為敏感,最小抑菌濃度約為1.11625%,對金黃色葡萄球菌的最小抑菌濃度約為1.1125%。(3)乳糖由一分子半乳糖和一分子葡萄糖組成。鄰硝基酚-β半乳糖苷(ONPG)是一種乳糖類似物,可進入菌體,被β-半乳糖苷酶水解為鄰硝基苯酚(一種黃色物質(zhì))。分光光度計可定量檢測溶液中某種物質(zhì)的含量。為確定鵲油能否增大菌體細胞膜通透性,自變量是鵲油的有無,因變量是菌體細胞膜的通透性。觀測指標為鄰硝基苯酚的量。因此,實驗可設(shè)計為:將大腸桿菌(或
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