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發(fā)酵工程的培養(yǎng)基與無菌技術(shù)一、單項選擇題1.下列有關(guān)培養(yǎng)基的敘述,不正確的是()A.純化微生物和植物組織培養(yǎng)時常用的是固體培養(yǎng)基B.在固體培養(yǎng)基中加入無菌水稀釋,可直接用于擴大化培養(yǎng)細菌C.根據(jù)培養(yǎng)基上菌落的特征可初步判斷和鑒別細菌的類型D.用高壓蒸汽滅菌法對培養(yǎng)基滅菌時,初期需排氣1~2次,否則壓力達到溫度達不到2.下圖表示土壤中微生物為植物提供氮的過程,圖中①、②、③分別代表相關(guān)物質(zhì),下列有關(guān)說法,正確的是()A.①是N2、③是NH3,X代表的細菌異化作用類型是需氧型B.①是NH3、②是NOeq\o\al(-,3),固氮菌在生態(tài)系統(tǒng)中屬于消費者C.②是NH3、③是NOeq\o\al(-,3),X代表的細菌以有機物作為碳源D.在實驗室培養(yǎng)固氮菌可用二氧化碳為碳源的無氮培養(yǎng)基3.下列有關(guān)以CO2為唯一碳源的自養(yǎng)微生物所需營養(yǎng)物質(zhì)的描述中,錯誤的是()A.銨鹽和硝酸鹽等無機氮為該微生物提供必要的氮素B.碳源物質(zhì)不是該微生物的能源物質(zhì)C.水、無機鹽也是該微生物不可缺少的營養(yǎng)物質(zhì)D.瓊脂是該微生物的營養(yǎng)要素之一4.下列關(guān)于無菌操作技術(shù)的說法,正確的是()A.消毒僅能殺死物體表面的芽孢和孢子B.液態(tài)的牛奶可用巴氏消毒法消毒C.培養(yǎng)皿、膠頭吸管可用干熱滅菌法滅菌D.高壓蒸汽滅菌時間達到后立即排氣降溫5.(2023·江蘇鎮(zhèn)江高三模擬)微生物的計數(shù)方法有多種,下列有關(guān)敘述錯誤的是()A.用濾膜法測定飲用水中大腸桿菌數(shù)目時,需利用鑒別培養(yǎng)基培養(yǎng)后計數(shù)B.用平板劃線法和稀釋涂布平板法進行微生物計數(shù)時,結(jié)果往往比實際少C.用血球計數(shù)板進行微生物顯微計數(shù)時,高倍鏡下觀察不到完整的計數(shù)室D.用已知密度紅細胞懸液對待測菌液以比例計數(shù)法計數(shù)時,兩種液體需混合均勻6.(2023·江蘇泰州高三期末)稀釋涂布平板是常用的微生物培養(yǎng)方法,下列相關(guān)敘述正確的是()A.滅菌鍋中取出的培養(yǎng)基應(yīng)趁燙時倒平板,如此可對培養(yǎng)皿滅菌B.稀釋涂布平板法不可用于微生物的分離,可用于微生物的計數(shù)C.用此法估測的數(shù)值往往偏小,應(yīng)以菌落數(shù)最多的平板計數(shù)為準D.稀釋涂布平板法分離到的單菌落需進一步純化,可用平板劃線法7.下列有關(guān)微生物培養(yǎng)的敘述,正確的是()A.純化培養(yǎng)時,對培養(yǎng)皿皿蓋做標記,培養(yǎng)皿應(yīng)倒置放在恒溫培養(yǎng)箱內(nèi)的搖床上培養(yǎng)B.涂布接種時,需將涂布器蘸酒精后在酒精燈外焰上引燃,冷卻后再使用C.培養(yǎng)基采用高壓蒸汽滅菌,高壓滅菌加熱結(jié)束后,打開放氣閥使壓力表指針回到零后,開啟鍋蓋D.可用平板劃線操作對微生物進行分離和計數(shù)8.在做分離“分解尿素的細菌”實驗時,甲同學(xué)從對應(yīng)10-6培養(yǎng)基中篩選出大約150個菌落,而其他同學(xué)只選擇出大約50個菌落。下列有關(guān)敘述不正確的是()A.甲同學(xué)出現(xiàn)這種結(jié)果的原因可能是土樣不同B.可以將甲同學(xué)配制的培養(yǎng)基在不加土樣的情況下進行培養(yǎng)作為空白對照,以證明培養(yǎng)基是否受到污染C.讓其他同學(xué)用與甲同學(xué)一樣的土壤進行實驗,如果結(jié)果與甲同學(xué)一樣,則可證明甲同學(xué)無誤D.B選項的實驗思路遵循了實驗的對照原則,而C選項的沒有二、多項選擇題9.下列關(guān)于微生物培養(yǎng)和利用的敘述,正確的是()A.接種前要了解固體培養(yǎng)基是否被污染無需接種無菌水來培育檢測B.接種時連續(xù)劃線的目的是將聚集的菌體逐步稀釋獲得單個菌落C.以尿素為唯一氮源且含剛果紅的培養(yǎng)基可選擇和鑒別尿素分解菌D.利用尿素固體培養(yǎng)基可迅速殺死其他微生物,而保留利用尿素的微生物10.(2023·江蘇海門中學(xué)高三期末)野生型大腸桿菌菌株能在基本培養(yǎng)基上生長,氨基酸營養(yǎng)缺陷型突變株無法合成某種氨基酸,只能在完全培養(yǎng)基上生長,下圖為純化某氨基酸營養(yǎng)缺陷型突變株的部分流程圖,①②③④代表培養(yǎng)基,a、b、c表示操作步驟,d、e為菌落。下列敘述正確的是()A.圖中①②④為基本培養(yǎng)基,③為完全培養(yǎng)基B.a(chǎn)操作的目的是提高突變率,增加突變株的數(shù)量C.b的正確操作是用涂布器把菌液均勻地涂布在②表面D.經(jīng)c過程原位影印及培養(yǎng)后,可從④中挑取d菌落進行純化培養(yǎng)11.某生物興趣小組完成了“分離土壤中分解尿素的細菌并進行計數(shù)”的實驗,具體操作流程如圖所示。下列相關(guān)敘述正確的是()A.在酒精燈火焰附近稱取土壤并將其倒入錐形瓶中B.梯度稀釋時可用移液管或微量移液器進行操作C.振蕩的目的是為了增加尿素分解菌的濃度D.由圖示菌落計數(shù)結(jié)果可知10克土樣中的菌株數(shù)約為1.6×107個三、非選擇題12.牛奶是適合微生物生長的良好培養(yǎng)基。牛奶在飲用前都要用巴氏消毒法消毒,以殺死有害微生物。某小組為檢測自制酸奶是否被雜菌污染,進行了如圖所示操作。請回答下列問題:(1)取最終的牛奶稀釋液0.1mL在培養(yǎng)基上進行涂布,應(yīng)選擇的工具是圖2中的__________。(2)圖1所示方法為稀釋涂布平板法,理想情況下,培養(yǎng)一段時間后可在培養(yǎng)基表面形成菌落。若用該方法培養(yǎng)設(shè)置了3個培養(yǎng)皿,菌落數(shù)分別為65、63、64,則可以推測每毫升酸奶中所含細菌數(shù)為__________,運用這種方法統(tǒng)計的結(jié)果往往較實際值________(填“大”或“小”),如果培養(yǎng)基上出現(xiàn)__________的菌落,說明自制酸奶已被雜菌污染。(3)已知酸奶中的有益菌主要是乳酸菌,要進一步分離純化乳酸菌,應(yīng)采用圖3中______(填字母)所示的劃線分離操作,其正確操作過程中,劃線工具至少要灼燒______次。13.苯酚(C6H5OH)是重要的化工原料,被廣泛應(yīng)用于工業(yè)生產(chǎn)中,易形成污染,具有致癌、致畸和致突變作用。苯酚降解菌能分解工業(yè)廢水中的苯酚。自然界中能分解苯酚的微生物有幾百種,多為細菌、放線菌等。分離和純化高效降解苯酚的微生物的實驗流程如圖1所示:請回答下列問題:(1)在制作苯酚降解菌的富集培養(yǎng)基和平板分離培養(yǎng)基時,培養(yǎng)基中應(yīng)以________為唯一碳源,后者除基本營養(yǎng)成分外,還應(yīng)添加__________(物質(zhì)),然后用____________(方法)對培養(yǎng)基進行滅菌。(2)用平板劃線法分離得到的單個菌落大小、顏色、隆起度等不完全一致的原因是________________________________________________________________________。(3)對分離得到的某株苯酚降解菌進行菌株生長及苯酚降解實驗,結(jié)果如圖2所示。實驗結(jié)果表明此菌株適于降解的苯酚濃度為________g/L,判斷依據(jù)是___________________________________________________________________________________________。發(fā)酵工程的培養(yǎng)基與無菌技術(shù)一、單項選擇題1.下列有關(guān)培養(yǎng)基的敘述,不正確的是()A.純化微生物和植物組織培養(yǎng)時常用的是固體培養(yǎng)基B.在固體培養(yǎng)基中加入無菌水稀釋,可直接用于擴大化培養(yǎng)細菌C.根據(jù)培養(yǎng)基上菌落的特征可初步判斷和鑒別細菌的類型D.用高壓蒸汽滅菌法對培養(yǎng)基滅菌時,初期需排氣1~2次,否則壓力達到溫度達不到答案B2.下圖表示土壤中微生物為植物提供氮的過程,圖中①、②、③分別代表相關(guān)物質(zhì),下列有關(guān)說法,正確的是()A.①是N2、③是NH3,X代表的細菌異化作用類型是需氧型B.①是NH3、②是NOeq\o\al(-,3),固氮菌在生態(tài)系統(tǒng)中屬于消費者C.②是NH3、③是NOeq\o\al(-,3),X代表的細菌以有機物作為碳源D.在實驗室培養(yǎng)固氮菌可用二氧化碳為碳源的無氮培養(yǎng)基答案C3.下列有關(guān)以CO2為唯一碳源的自養(yǎng)微生物所需營養(yǎng)物質(zhì)的描述中,錯誤的是()A.銨鹽和硝酸鹽等無機氮為該微生物提供必要的氮素B.碳源物質(zhì)不是該微生物的能源物質(zhì)C.水、無機鹽也是該微生物不可缺少的營養(yǎng)物質(zhì)D.瓊脂是該微生物的營養(yǎng)要素之一答案D4.下列關(guān)于無菌操作技術(shù)的說法,正確的是()A.消毒僅能殺死物體表面的芽孢和孢子B.液態(tài)的牛奶可用巴氏消毒法消毒C.培養(yǎng)皿、膠頭吸管可用干熱滅菌法滅菌D.高壓蒸汽滅菌時間達到后立即排氣降溫答案B5.(2023·江蘇鎮(zhèn)江高三模擬)微生物的計數(shù)方法有多種,下列有關(guān)敘述錯誤的是()A.用濾膜法測定飲用水中大腸桿菌數(shù)目時,需利用鑒別培養(yǎng)基培養(yǎng)后計數(shù)B.用平板劃線法和稀釋涂布平板法進行微生物計數(shù)時,結(jié)果往往比實際少C.用血球計數(shù)板進行微生物顯微計數(shù)時,高倍鏡下觀察不到完整的計數(shù)室D.用已知密度紅細胞懸液對待測菌液以比例計數(shù)法計數(shù)時,兩種液體需混合均勻答案B6.(2023·江蘇泰州高三期末)稀釋涂布平板是常用的微生物培養(yǎng)方法,下列相關(guān)敘述正確的是()A.滅菌鍋中取出的培養(yǎng)基應(yīng)趁燙時倒平板,如此可對培養(yǎng)皿滅菌B.稀釋涂布平板法不可用于微生物的分離,可用于微生物的計數(shù)C.用此法估測的數(shù)值往往偏小,應(yīng)以菌落數(shù)最多的平板計數(shù)為準D.稀釋涂布平板法分離到的單菌落需進一步純化,可用平板劃線法答案D7.下列有關(guān)微生物培養(yǎng)的敘述,正確的是()A.純化培養(yǎng)時,對培養(yǎng)皿皿蓋做標記,培養(yǎng)皿應(yīng)倒置放在恒溫培養(yǎng)箱內(nèi)的搖床上培養(yǎng)B.涂布接種時,需將涂布器蘸酒精后在酒精燈外焰上引燃,冷卻后再使用C.培養(yǎng)基采用高壓蒸汽滅菌,高壓滅菌加熱結(jié)束后,打開放氣閥使壓力表指針回到零后,開啟鍋蓋D.可用平板劃線操作對微生物進行分離和計數(shù)答案B8.在做分離“分解尿素的細菌”實驗時,甲同學(xué)從對應(yīng)10-6培養(yǎng)基中篩選出大約150個菌落,而其他同學(xué)只選擇出大約50個菌落。下列有關(guān)敘述不正確的是()A.甲同學(xué)出現(xiàn)這種結(jié)果的原因可能是土樣不同B.可以將甲同學(xué)配制的培養(yǎng)基在不加土樣的情況下進行培養(yǎng)作為空白對照,以證明培養(yǎng)基是否受到污染C.讓其他同學(xué)用與甲同學(xué)一樣的土壤進行實驗,如果結(jié)果與甲同學(xué)一樣,則可證明甲同學(xué)無誤D.B選項的實驗思路遵循了實驗的對照原則,而C選項的沒有答案D二、多項選擇題9.下列關(guān)于微生物培養(yǎng)和利用的敘述,正確的是()A.接種前要了解固體培養(yǎng)基是否被污染無需接種無菌水來培育檢測B.接種時連續(xù)劃線的目的是將聚集的菌體逐步稀釋獲得單個菌落C.以尿素為唯一氮源且含剛果紅的培養(yǎng)基可選擇和鑒別尿素分解菌D.利用尿素固體培養(yǎng)基可迅速殺死其他微生物,而保留利用尿素的微生物答案AB10.(2023·江蘇海門中學(xué)高三期末)野生型大腸桿菌菌株能在基本培養(yǎng)基上生長,氨基酸營養(yǎng)缺陷型突變株無法合成某種氨基酸,只能在完全培養(yǎng)基上生長,下圖為純化某氨基酸營養(yǎng)缺陷型突變株的部分流程圖,①②③④代表培養(yǎng)基,a、b、c表示操作步驟,d、e為菌落。下列敘述正確的是()A.圖中①②④為基本培養(yǎng)基,③為完全培養(yǎng)基B.a(chǎn)操作的目的是提高突變率,增加突變株的數(shù)量C.b的正確操作是用涂布器把菌液均勻地涂布在②表面D.經(jīng)c過程原位影印及培養(yǎng)后,可從④中挑取d菌落進行純化培養(yǎng)答案BCD11.某生物興趣小組完成了“分離土壤中分解尿素的細菌并進行計數(shù)”的實驗,具體操作流程如圖所示。下列相關(guān)敘述正確的是()A.在酒精燈火焰附近稱取土壤并將其倒入錐形瓶中B.梯度稀釋時可用移液管或微量移液器進行操作C.振蕩的目的是為了增加尿素分解菌的濃度D.由圖示菌落計數(shù)結(jié)果可知10克土樣中的菌株數(shù)約為1.6×107個答案ABD三、非選擇題12.牛奶是適合微生物生長的良好培養(yǎng)基。牛奶在飲用前都要用巴氏消毒法消毒,以殺死有害微生物。某小組為檢測自制酸奶是否被雜菌污染,進行了如圖所示操作。請回答下列問題:(1)取最終的牛奶稀釋液0.1mL在培養(yǎng)基上進行涂布,應(yīng)選擇的工具是圖2中的__________。(2)圖1所示方法為稀釋涂布平板法,理想情況下,培養(yǎng)一段時間后可在培養(yǎng)基表面形成菌落。若用該方法培養(yǎng)設(shè)置了3個培養(yǎng)皿,菌落數(shù)分別為65、63、64,則可以推測每毫升酸奶中所含細菌數(shù)為__________,運用這種方法統(tǒng)計的結(jié)果往往較實際值________(填“大”或“小”),如果培養(yǎng)基上出現(xiàn)__________的菌落,說明自制酸奶已被雜菌污染。(3)已知酸奶中的有益菌主要是乳酸菌,要進一步分離純化乳酸菌,應(yīng)采用圖3中______(填字母)所示的劃線分離操作,其正確操作過程中,劃線工具至少要灼燒______次。答案(1)B(2)6.4×107小(形狀、大小、顏色)不同(3)B513.苯酚(C6H5OH)是重要的化工原料,被廣泛應(yīng)用于工業(yè)生產(chǎn)中,易形成污染,具有致癌、致畸和致突變作用。苯酚降解菌能分解工業(yè)廢水中的苯酚。自然界中能分解苯酚的微生物有幾百種,多為細菌、放線菌等。分離和純化高效降解苯酚的微生物的實驗流程如圖1所示:請回答下列問題:(1)在制作苯酚降解菌的富集培養(yǎng)基和平板分離培養(yǎng)基時,培養(yǎng)基中應(yīng)以________為唯一碳源,后者除基本營養(yǎng)成分外,還應(yīng)添加__________(物質(zhì)),然后用____________(方法)對培養(yǎng)基進行滅菌。(2)用平板劃線法分離得到的單個菌落大小、顏色、隆起度等不完全一致的原因是______________________________________________________________

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