《病原微生物基礎(chǔ)》(研究生)全冊(cè)配套完整課件

《病原微生物基礎(chǔ)》(研究生)全冊(cè)配套完整課件病原微生物學(xué)基礎(chǔ)BIOL130088.01病原微生物的特性病原微生物所引起的疾病微生物致病的機(jī)理微生物疾病診斷、預(yù)防與治療公共衛(wèi)生及安全重點(diǎn)：與人類(lèi)常見(jiàn)疾病相關(guān)的微生物,同時(shí)會(huì)兼顧新發(fā)及人畜共患病原微生物課程介紹課程安排

緒論：病原微生物學(xué)的發(fā)展

病原菌總論：

病原菌結(jié)構(gòu)與致病關(guān)系生物安全細(xì)菌感染與免疫細(xì)菌病診斷、預(yù)防與治療

病原菌各論：

球菌、桿菌、弧菌、螺旋菌及相關(guān)疾病動(dòng)物源性細(xì)菌、新發(fā)疾病生物安全相關(guān)其他病原菌病毒學(xué)總論：

病毒形態(tài)結(jié)構(gòu)、復(fù)制及感染免疫病毒學(xué)各論：

呼吸道病毒肝炎

HIV及艾滋病腸道病毒皰疹病毒及其他病毒其他病原及疾?。弘昧Ｒ约罢婢?lèi)疾病課程安排相關(guān)教材病原生物學(xué)醫(yī)學(xué)微生物學(xué)病毒學(xué)其他微生物相關(guān)網(wǎng)上資料及學(xué)術(shù)雜志參考資料平時(shí)(30%)

期末開(kāi)卷筆試（70％）考核標(biāo)準(zhǔn)聯(lián)系方式

授課教師：張雪蓮辦公地址：500號(hào)樓305室電話(huà)：55665073Email:xuelianzhang@緒論

一、微生物與病原微生物二、微生物與人類(lèi)關(guān)系三、醫(yī)學(xué)微生物學(xué)發(fā)展簡(jiǎn)史

四、任務(wù)與展望一、微生物與病原微生物概念微生物(microorganism)是一類(lèi)肉眼看不見(jiàn)，有一定形態(tài)結(jié)構(gòu)，能在適宜環(huán)境中生長(zhǎng)繁殖的細(xì)小生物。微生物繁殖快，分布廣，結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單，種類(lèi)繁多。病原微生物(pathogenicmicrobes)

能引起人類(lèi)、動(dòng)物、植物疾病的，具有致病性的微生物稱(chēng)為病原微生物。分類(lèi)

結(jié)構(gòu)特點(diǎn)、遺傳特性及分化程度區(qū)分MicroorganismsNon-cellularorganismProkaryotesEukaryotesOthersPrionsViroidFungiBacteriumVirus二、微生物與人類(lèi)的關(guān)系１．微生物在人類(lèi)生活中的應(yīng)用工業(yè)農(nóng)業(yè)醫(yī)藥日常生活２．微生物與人類(lèi)健康MicrobesandhumansVeryfewmicrobesarealwayspathogenicManymicrobesarepotentiallypathogenicMostmicrobesareneverpathogenic條件性病原微生物正常菌群（Normalflora）健康成年人大約有1013個(gè)體細(xì)胞，正常菌數(shù)高達(dá)1014?；ド?/p>

“可分可合，合則兩利”MicrobialLoadson“External”Surfaces?Largeintestine1014?Skin1012?Vagina1010?Mouth1010?Nose1010?Throat1010正常菌群組成

常居菌群（Residentflora）

有相當(dāng)固定數(shù)量的細(xì)菌組成，有規(guī)律定居在特定部位。過(guò)路菌群（transentflora）

為非致病和潛在致病菌組成，來(lái)自周?chē)h(huán)境。微生態(tài)平衡常居菌群發(fā)生紊亂，過(guò)路菌群可能大量繁殖引起疾病。微生物與人的互生關(guān)系人體：“溫暖的搖籃”生活場(chǎng)所營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)微生物提供：保護(hù)人體免遭致病微生物的侵襲刺激免疫發(fā)育及免疫應(yīng)答形成維生素、消化酶等人體不能合成的物質(zhì)排毒作用條件致病菌1、菌群失調(diào)

（二重感染）粘膜細(xì)胞粘膜細(xì)胞發(fā)病保護(hù)病原正常菌群腸腔正常菌群形成保護(hù)層正常菌群形成排泄物免疫刺激大劑量病菌抗微生物藥物宿主因素：免疫抑制，代謝失衡物理破壞：輻射、化學(xué)損傷、燒傷2、定位轉(zhuǎn)移正常菌群由原籍生境轉(zhuǎn)移至外籍生境或本來(lái)無(wú)菌生存的位置上。大腸桿菌：腸道呼吸道肺炎甲型鏈球菌：尿路感染尿道血液口腔菌血癥醫(yī)學(xué)微生物學(xué)（medicalmicrobiology)

主要研究與醫(yī)學(xué)有關(guān)的病原微生物的生物學(xué)特性、致病性、免疫機(jī)制、特異性診斷及防治原則。三、醫(yī)學(xué)微生物學(xué)發(fā)展簡(jiǎn)史1676年自制世界上第一架顯微鏡，描述了微生物的形態(tài)。正確描述了微生物的形態(tài)，為微生物的存在提供科學(xué)依據(jù)。微生物學(xué)發(fā)展史中的奠基者▲列文.胡克（荷蘭）Antonyvanleeuwenhoek(1632-1723)巴斯德：微生物學(xué)的奠基人－徹底否定了“自然發(fā)生學(xué)說(shuō)”

認(rèn)為破布中會(huì)自然產(chǎn)生老鼠，污泥中會(huì)生出泥鰍，我國(guó)古代也有“腐草化為螢”－

證實(shí)：發(fā)酵是由微生物引起

發(fā)現(xiàn)好酒中有一種微生物，就是今天知道的酵母；而酸敗的酒中帶有一類(lèi)比酵母小的多的微生物，現(xiàn)在我們知道是細(xì)菌－免疫學(xué)：預(yù)防接種

炭疽，狂犬疫苗－其他：巴斯徳消毒法

將葡萄提取液短暫加熱，來(lái)減少細(xì)菌引起的酸?。ǖ蜏鼐S持法63℃維持30分鐘，高溫瞬時(shí)法72℃處理15秒）巴斯德（LouisPasteur）

1822－1895巴斯徳研究院巴斯徳工作室曲頸瓶試驗(yàn)早期有意識(shí)利用無(wú)菌技術(shù)法國(guó)的廚師--尼可萊阿佩爾（Nicolas,Appert）。拿破侖懸賞征求的食品儲(chǔ)存方法，阿佩爾花了14年的時(shí)間。他是把食品先加熱，然后把它密封起來(lái)與空氣隔絕。1809年拿破侖獎(jiǎng)勵(lì)了阿佩爾1萬(wàn)2千法郎，阿佩爾公開(kāi)了他的發(fā)明。這項(xiàng)重要發(fā)明當(dāng)時(shí)還不能完全說(shuō)清道理，直到巴斯德證實(shí)了微生物以后才為大家所理解和應(yīng)用。

科赫：病原細(xì)菌學(xué)的奠基人創(chuàng)立固體培養(yǎng)基，分離純培養(yǎng)創(chuàng)立細(xì)菌染色方法及實(shí)驗(yàn)動(dòng)物感染法發(fā)現(xiàn)傳染病病原炭疽桿菌與炭疽病分枝桿菌與肺結(jié)核（獲得諾貝爾獎(jiǎng)）霍亂弧菌與霍亂提出科赫法則RobertKoch(1843-1910)

科赫法則判定某種微生物引起特定疾病，必須同時(shí)滿(mǎn)足相關(guān)性：這種微生物必須在所有患該種疾病的生物體內(nèi)都存在，但在健康生物中不存在可分離培養(yǎng)：必須將這種微生物分離出來(lái)，作純種培養(yǎng)可人工感染：當(dāng)用這種分離出來(lái)的微生物接種到一個(gè)健康寄主時(shí)，必須能夠引起同樣的疾病可再分離：必須能夠從接種感染的生物體內(nèi)再次分離得到這種微生物發(fā)現(xiàn)病原——細(xì)菌1877 炭疽病 炭疽芽孢桿菌 科赫1877 化膿 葡萄球菌 科赫 淋病 淋病奈瑟氏球菌 Neisser

傷寒熱 傷寒沙門(mén)氏菌 Eberth

化膿 鏈球菌 Ogston

結(jié)核病 結(jié)核分枝桿菌 科赫 霍亂 霍亂弧菌 科赫 白喉 白喉棒桿菌 Klebs

破傷風(fēng) 破傷風(fēng)梭菌 Nicolaier

腹瀉 大腸桿菌 Escherich

肺炎 肺炎球菌 Fraenkel

腦膜炎 腦膜炎奈瑟氏球菌 Weicheselbaum

食物中毒 腸炎沙門(mén)氏菌 Gaertner

產(chǎn)氣壞疽 產(chǎn)氣莢膜梭菌 Welch

鼠疫 鼠疫耶爾森氏菌 Kitasato,Yersin

肉毒 肉毒梭菌 vanErmengem

痢疾 痢疾志賀氏菌 Shiga

副傷寒 副傷寒沙門(mén)氏菌 Schottmuller

梅毒 梅毒螺旋體 Schaudinn,Hoffman1906 白日咳 白日咳博德特氏菌 Bordet,Gengou▲病毒學(xué)的發(fā)展伊凡諾夫斯基（俄國(guó)）從病葉中提取出一種比細(xì)菌更小的“可濾過(guò)性感染物”；認(rèn)為是不同于細(xì)菌的新感染物—病毒。（1892）。斯坦利（美國(guó)）首次分離并提純了煙草花葉病病毒。許多動(dòng)物、植物、細(xì)菌、人類(lèi)病毒相繼發(fā)現(xiàn)。人類(lèi)傳染病中約80%由病毒引起。3000年起源于印度或埃及病癥：發(fā)熱、水泡性紅腫死亡率：30％以上；僥幸存活，永不得病，伴有麻臉或失明人工免疫—戰(zhàn)勝天花天花病毒(Smallpoxvirus)種痘術(shù)的西傳－康復(fù)者接觸病人不會(huì)得?。?567－1572安徽太平縣人發(fā)明，廣泛使用－取患者的痘瘡中漿液接種他人－1689年，俄國(guó)人來(lái)中國(guó)學(xué)習(xí)種痘術(shù)－1718年，由土耳其傳入英國(guó)－發(fā)表《接種牛痘的原因與效果調(diào)查》－第二年，奧地利、意大利、德國(guó)開(kāi)始接種EdwardJenner(1749－1823)“種痘”1805年，英國(guó)傳教士皮爾遜將牛痘苗帶入我國(guó)。1806，廣州流行，鄭崇謙設(shè)局為1000多人接種，時(shí)隔117年，種痘術(shù)又回到發(fā)源地。種痘術(shù)的東歸1980年5月，WHO宣布消滅了天花！美國(guó)亞特蘭大CDC俄羅斯Koltsovo的國(guó)家病毒和生物技術(shù)中心

天花病毒的保留一?；覊m引起的偉大發(fā)現(xiàn)：Fleming發(fā)現(xiàn)青霉素（1929）弗萊明、錢(qián)恩、弗洛里共獲1945諾貝爾生理醫(yī)學(xué)獎(jiǎng)抗生素的發(fā)現(xiàn)與應(yīng)用幻想醫(yī)師（埃里希）的神奇子彈

--染料子彈，殺滅錐蟲(chóng)--606砷凡納明（1909）開(kāi)創(chuàng)了現(xiàn)代抗微生物化療的新紀(jì)元PaulEhrlich多馬克與百浪多息磺胺藥物的發(fā)現(xiàn)

1939諾貝爾生理醫(yī)學(xué)獎(jiǎng)“白色瘟疫”的克星

1944年，鏈霉素，可怕傳染?。航Y(jié)核的克星

瓦克斯曼，1952年諾貝爾生理醫(yī)學(xué)獎(jiǎng)磺酰胺類(lèi)紅霉素頭孢菌素類(lèi)萬(wàn)古霉素喹諾酮類(lèi)氟化喹諾酮類(lèi)唑烷酮類(lèi)1948年，四環(huán)素出現(xiàn)，這是最早的“廣譜”抗生素氯霉素，金霉素，灰黃霉素，螺旋霉素…60年代初，共發(fā)現(xiàn)600多種抗生素抗生素的發(fā)現(xiàn)和臨床使用，是20世紀(jì)醫(yī)學(xué)技術(shù)最重要的成就之一，使人類(lèi)壽命延長(zhǎng)10年醫(yī)學(xué)微生物學(xué)飛躍發(fā)展時(shí)期20世紀(jì)中期以來(lái),--免疫學(xué)的形成、發(fā)展和獨(dú)立--微生物學(xué)與細(xì)胞生物學(xué)、分子生物學(xué)--病原微生物學(xué)檢測(cè)手段現(xiàn)代化--微生物基因組計(jì)劃的實(shí)施新病原體的發(fā)現(xiàn)1976年嗜肺軍團(tuán)菌致病性細(xì)菌1982年幽門(mén)螺桿菌1992年霍亂弧菌O139血清群1996年腸出血性大腸埃希菌O157其他1981年獲得性免疫缺陷綜合征即艾滋?。ˋIDS）1983年分離到艾滋病病原體--人類(lèi)免疫缺陷病毒（HIV）1968年乙型肝炎病毒（HBV）1973年甲型肝炎病毒顆粒（HAV）

1982年，普辛那發(fā)現(xiàn)感染性朊病毒四、任務(wù)與展望充分利用基因組學(xué)，系統(tǒng)生物學(xué)現(xiàn)代研究手段加強(qiáng)致病機(jī)制，免疫機(jī)制研究，研制有效疫苗創(chuàng)建靈敏快速的診斷方法預(yù)防和逆轉(zhuǎn)耐藥性開(kāi)發(fā)新型抗病原微生物藥物第二章病原菌總論第一節(jié)細(xì)菌的結(jié)構(gòu)與致病第二節(jié)細(xì)菌的感染與免疫第三節(jié)細(xì)菌感染的診斷和預(yù)防第四節(jié)細(xì)菌感染的治療與耐藥性第五節(jié)生物安全

第一節(jié)細(xì)菌結(jié)構(gòu)與致病了解細(xì)菌形態(tài)和結(jié)構(gòu)對(duì)研究細(xì)菌的致病性、免疫性以及細(xì)菌鑒別、診斷和治療有重要理論和實(shí)際意義。一．細(xì)菌的結(jié)構(gòu)與形態(tài)細(xì)菌(bacterium)是屬于原核型細(xì)胞的一種單胞生物,形體微小,結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單。無(wú)成形細(xì)胞核、也無(wú)核仁和核膜，除核蛋白體外無(wú)其他細(xì)胞器。Thediameterofmostcocciareabout1.0μmMostrodsareabout2-3μminlengthand0.3-0.5μm(diameter)E.coli

VibriocholeraStreptococcus

分類(lèi)基本結(jié)構(gòu)特殊結(jié)構(gòu)表層結(jié)構(gòu)細(xì)胞壁、細(xì)胞膜莢膜內(nèi)部結(jié)構(gòu)細(xì)胞質(zhì)、核糖體、核質(zhì)芽孢外部結(jié)構(gòu)菌毛、鞭毛

細(xì)菌的基本結(jié)構(gòu)和特殊結(jié)構(gòu)肽聚糖（peptidoglycan）革蘭陽(yáng)性菌聚糖骨架、四肽側(cè)鏈、五肽交聯(lián)橋三維立體結(jié)構(gòu)，堅(jiān)固

15～50層革蘭陰性菌聚糖骨架、四肽側(cè)鏈二維平面結(jié)構(gòu)，疏松

1～2層細(xì)胞壁溶菌酶作用位點(diǎn)青霉素作用位點(diǎn)G+磷壁酸（teichoicacid）--抗原性很強(qiáng)，重要表面抗原--調(diào)節(jié)離子參與某些酶活性表達(dá)，如Mg2+--類(lèi)似于菌毛，粘附細(xì)胞表面，致病力相關(guān)G-脂多糖（lipopolysaccharide，LPS）--脂質(zhì)A，核心多糖，特異性多糖構(gòu)成，又稱(chēng)內(nèi)毒素--脂質(zhì)A，內(nèi)毒素主要毒性部分，無(wú)種屬特異性--核心多糖具有屬特異性--特異性多糖種類(lèi)、排列順序及空間構(gòu)想不同，決定細(xì)菌抗原特異性L(fǎng)OS（lipooligosaccharide）并非所有革蘭陰性菌外膜的糖脂成分都呈LPS結(jié)構(gòu)，一些革蘭陰性菌（腦膜炎奈瑟菌、淋病奈瑟菌、流感嗜血桿菌）外膜糖脂的糖為短鏈分枝狀聚糖，與哺乳動(dòng)物細(xì)胞膜的鞘糖脂成分非常相似，稱(chēng)為脂寡糖（lipooligosaccharide,LOS）。LOS是重要的毒力因子，它的一些表位模擬了宿主細(xì)胞的結(jié)構(gòu)，從而逃避宿主免疫細(xì)胞的識(shí)別。L型細(xì)菌1935年，英國(guó)Lister研究院人員發(fā)現(xiàn)而得名；細(xì)菌細(xì)胞壁缺陷型，形態(tài)多樣、細(xì)小、生長(zhǎng)緩慢；肽聚糖結(jié)構(gòu)合成被抑制或受到直接破壞，在高滲環(huán)境中生長(zhǎng)；溶酶體和青霉素常作為人工誘導(dǎo)劑；‘‘friedegg’’morphology組織間質(zhì)性炎癥，慢性感染，潛伏感染等臨床上癥狀明顯，標(biāo)本細(xì)菌培養(yǎng)陰性者，考慮L型菌感染的可能型分子機(jī)制：cellenvelopestress,DNArepair,ironhomeostasis,outermembranebiogenesis,anddrugefflux/ABCtransportersRef:GloverWA,YangY,ZhangY(2009)PLoSONE4(10):e7316青霉素結(jié)合蛋白參與肽聚糖合成，青霉素作用靶點(diǎn)蛋白突變引起與?-內(nèi)酰胺抗生素結(jié)合親和力發(fā)生變化，產(chǎn)生耐藥蛋白分泌系統(tǒng)-I、II、III、VI和V型分泌系統(tǒng)I型，分泌蛋白直接從胞質(zhì)到達(dá)細(xì)菌表面，大腸桿菌溶血素;Ⅱ型，分泌蛋白通過(guò)Sec依賴(lài)分泌通路到達(dá)外周質(zhì)間隙，然后其N(xiāo)端的信號(hào)肽被切割，再通過(guò)外膜上的通道蛋白跨外膜轉(zhuǎn)運(yùn);Ⅲ型，所分泌的效應(yīng)分子直接從胞質(zhì)輸送到宿主的真核細(xì)胞;IV型，系統(tǒng)轉(zhuǎn)運(yùn)的都是一些大分子物質(zhì);V型,自主轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白系統(tǒng),通過(guò)sec依賴(lài)的途徑被分泌穿過(guò)內(nèi)膜，然后依靠自身的轉(zhuǎn)位傳輸至外膜;雙組分信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)系統(tǒng)：組氨酸蛋白激酶和反應(yīng)調(diào)節(jié)蛋白細(xì)胞膜抗吞噬作用粘附作用—生物膜抗損害作用—溶菌酶，補(bǔ)體、抗體、抗生素等莢膜二.生長(zhǎng)繁殖與新陳代謝1.生長(zhǎng)繁殖的條件

--充足的營(yíng)養(yǎng)--適宜的溫度（BodyTem.）--合適的酸堿度（7.2-7.6）--必要的氣體環(huán)境（兼性厭氧）2.細(xì)菌生長(zhǎng)繁殖的方式與速度細(xì)菌一般以簡(jiǎn)單的二分裂法進(jìn)行無(wú)性繁殖，個(gè)別細(xì)菌如結(jié)核桿菌偶有分枝繁殖的方式。大腸桿菌等在適宜的條件下，分裂一次僅需20min，分支桿菌等繁殖較慢，需18-24h才分裂一次。細(xì)菌生長(zhǎng)繁殖可分為4個(gè)期：遲緩期(lagphase)：調(diào)整期，是細(xì)菌初到新環(huán)境的適應(yīng)期。此時(shí)菌體增大、代謝活躍、合成所需酶系統(tǒng)。RNA含量明顯增多，DNA無(wú)變化，此時(shí)細(xì)菌數(shù)并不增加。對(duì)數(shù)期（logphase）：細(xì)菌迅速分裂繁殖，活菌數(shù)以幾何級(jí)數(shù)增長(zhǎng)，生長(zhǎng)曲線(xiàn)近斜線(xiàn)。該期病原菌致病力最強(qiáng)，其形態(tài)染色及生理均較典型，對(duì)抗菌藥物敏感。3.生長(zhǎng)曲線(xiàn)

穩(wěn)定期（stationaryphase）：因營(yíng)養(yǎng)消耗、代謝產(chǎn)物蓄積等，此時(shí)新繁殖的活菌與死菌平衡，活菌數(shù)最多。該期形態(tài)染色不特異，產(chǎn)生毒素等代謝產(chǎn)物?？咕幬锿ǔ２幻舾?。衰亡期（declinephase）：細(xì)菌死亡速度加大，繁殖速度變小。如不移植到新培養(yǎng)基，最終可全部死亡。此期菌體變形或自溶，染色不典型。4.細(xì)菌的新陳代謝及其醫(yī)學(xué)意義代謝：細(xì)菌細(xì)胞內(nèi)發(fā)生各種化學(xué)反應(yīng)的總稱(chēng)，包括合成與分解兩大類(lèi)。分解代謝：大分子物質(zhì)降解成小分子物質(zhì)，并且產(chǎn)生能量的過(guò)程。合成代謝：細(xì)胞利用簡(jiǎn)單的小分子物質(zhì)合成復(fù)雜大分子的過(guò)程，需要消耗能量的過(guò)程。

糖發(fā)酵試驗(yàn)吲哚試驗(yàn)甲基紅試驗(yàn)檸檬酸鹽利用試驗(yàn)VP試驗(yàn)硫化氫試驗(yàn)?zāi)蛩孛冈囼?yàn)分解代謝產(chǎn)物及臨床意義熱原質(zhì)（pyrogen）毒素與毒性酶（toxinandenzyme）色素（pigment）抗生素（antibiotic）細(xì)菌素（bactericin）維生素（vitamin）合成代謝產(chǎn)物及醫(yī)學(xué)意義第二節(jié)細(xì)菌的感染與免疫感染：指微生物侵入宿主機(jī)體后與宿主相互作用并引起不同程度的病理過(guò)程，是微生物與宿主個(gè)體、細(xì)胞和分子水平相互作用的生物學(xué)現(xiàn)象。免疫：抗感染免疫，是機(jī)體抵抗病原微生物及其有害產(chǎn)物，產(chǎn)生一系列免疫應(yīng)答的過(guò)程。入侵（Invasion）:粘附并定植于某種細(xì)胞、組織。生長(zhǎng)（Growth）:抵抗和逃避宿主免疫防御機(jī)制，并適應(yīng)宿主環(huán)境進(jìn)行增值和侵襲擴(kuò)散。致?。–ausingdisease）:釋放毒素或誘發(fā)超敏反應(yīng)，引起機(jī)體組織器官損傷。（一）細(xì)菌感染半數(shù)致死量（medianlethaldose，LD50）或半數(shù)感染量（medianinfectivedose，ID50）：它表示在規(guī)定時(shí)間內(nèi)，通過(guò)指定感染途徑，使一定體重或年齡的某種動(dòng)物半數(shù)死亡或感染所需最小細(xì)菌數(shù)或毒素量，LD50可作為判斷細(xì)菌毒力的參考指標(biāo)。

1、粘附與侵襲粘附是引起感染的關(guān)鍵第一步。黏附素：細(xì)菌表面的蛋白質(zhì)或多糖受體：靶細(xì)胞表面的糖蛋白或糖脂黏附素與受體具有高度特異性和組織特異性涉及粘附的細(xì)菌結(jié)構(gòu)G-菌毛

表面蛋白或菌毛頂端的蛋白質(zhì)。G+

菌體表面毛發(fā)樣突出物作用：黏附素具抵抗纖毛運(yùn)動(dòng)、腸蠕動(dòng)、尿液沖刷的清除作用。有利于細(xì)菌在局部的定植，與細(xì)菌致病性密切相關(guān)。抵御宿主免疫系統(tǒng)莢膜：如肺炎鏈球菌微莢膜類(lèi)物質(zhì)：多糖、多肽

--如A群鏈球菌M蛋白、

--傷寒桿菌表面的Vi抗原、

--大腸埃希菌表面K抗原等。

蛋白酶類(lèi)：流感嗜血桿菌產(chǎn)生透明質(zhì)酸酶、鏈激酶等。2、生物膜（Biofilm）是正常菌群與上皮細(xì)胞表面受體結(jié)合而黏附，并分泌胞外的多糖聚合物，形成的膜狀物。細(xì)菌以非常精細(xì)的方式相互粘連，形成的一種特殊的具有高度組織化的多細(xì)胞結(jié)構(gòu)，能發(fā)揮屏障和占位性保護(hù)作用，使外來(lái)病菌不能定植而通過(guò)侵入門(mén)戶(hù)侵襲機(jī)體。生物膜形成與生長(zhǎng)少量細(xì)菌黏附定植（settleandadheretoasurface）分泌多聚糖形成基質(zhì)層（Secretpolysaccharidetoformmatrix）更多的細(xì)菌參與，形成復(fù)雜的結(jié)構(gòu)，可進(jìn)行營(yíng)養(yǎng)和排泄循環(huán)，類(lèi)似一個(gè)細(xì)菌的家園（atownofmicrobes）內(nèi)部細(xì)菌生長(zhǎng)緩慢，與正常生長(zhǎng)細(xì)菌有不同的表型和表達(dá)譜（differentphenotypeandexpressionprofile）Cellsexperiencedifferentenvironmentalconditions生物膜相關(guān)的疾病齲齒、牙周病導(dǎo)尿管相關(guān)疾病人工心臟瓣膜、搭橋氣管插鏡隱形眼鏡biofilm(red)onaleadremovedfromaheartpacemakerBiofilmmakesanti-bacterialtherapymoredifficult.3、毒素細(xì)菌產(chǎn)生的損害機(jī)體組織、器官，并引起生理功能紊亂的大分子物質(zhì)。按其來(lái)源、性質(zhì)和作用的不同，可分為外毒素和內(nèi)毒素兩大類(lèi)。1、主要由G+菌產(chǎn)生2、化學(xué)本質(zhì)蛋白質(zhì)，不耐熱，一般菌體生長(zhǎng)時(shí)合成后分泌至菌體外3、毒性作用強(qiáng)、對(duì)組織細(xì)胞有很強(qiáng)的選擇性臨床表現(xiàn)有特異性4、抗原性強(qiáng)，可刺激機(jī)體產(chǎn)生的抗毒素中和外毒素，用于治療或緊急預(yù)防5、可用甲醛脫毒制成類(lèi)毒素用于免疫預(yù)防外毒素對(duì)宿主細(xì)胞的親嗜性和作用方式

破傷風(fēng)痙攣毒素肉毒毒素白喉毒素葡萄球菌毒性休克綜合征毒素1A群鏈球菌致熱毒素

霍亂弧菌腸毒素葡萄球菌腸毒素

神經(jīng)毒素細(xì)胞毒素腸毒素外毒素肽鏈結(jié)構(gòu)A-B型毒素：有兩個(gè)不同功能的肽鏈構(gòu)成，A為毒性中心，決定致病方式和致病特點(diǎn)；B識(shí)別靶細(xì)胞膜上特異性受體，介導(dǎo)A發(fā)揮作用，決定毒素對(duì)宿主細(xì)胞的親和性。單肽鏈毒素：只有一條肽鏈，不被水解為A、B鏈，無(wú)A、B獨(dú)立功能區(qū)。小分子多肽毒素：為十幾或幾十個(gè)氨基酸殘基的短肽鏈，分子量小于5kDa。AB毒素：合成時(shí)為一條肽鏈，分泌時(shí)水解為A、B或不水解，但有獨(dú)立的A和B功能區(qū)。A-B型毒素作用模式單獨(dú)的毒性A亞單位，不能自行進(jìn)入易感細(xì)胞，

B亞單位無(wú)毒，能與宿主易感細(xì)胞表面的特殊受體結(jié)合。

A-nB毒素：一條A，若干條B鏈。

AaAbB毒素：炭疽毒素為一條B鏈（保護(hù)性抗原），兩條不同A鏈組合（水腫因子和致死因子）外毒素超抗原作用其他A-B型毒素：1980年，Scott首次將肉毒毒素注射入人眼肌，治療斜視，開(kāi)始了將其用于治療人類(lèi)疾病的探索。1989年，美國(guó)FDA批準(zhǔn)A型肉毒毒素用以治療12歲以上人的肌肉紊亂性斜視、偏側(cè)面肌痙攣、眼瞼痙攣、肌張力障礙和運(yùn)動(dòng)失調(diào)等疾病治療。A型肉毒毒素是目前治療痙攣性發(fā)音困難的最有效的方法。肉毒毒素在美容中的應(yīng)用。毒素的臨床使用1、主要由G—菌產(chǎn)生2、化學(xué)成分為細(xì)胞壁外膜中脂多糖，耐高溫，細(xì)菌死亡裂解后釋放4、抗原性弱，感染后體內(nèi)一般不產(chǎn)生抗毒素，也不能制成類(lèi)毒素3、各種細(xì)菌產(chǎn)生的內(nèi)毒素毒性作用基本相似內(nèi)毒素內(nèi)毒素的毒性作用1、發(fā)熱反應(yīng)：IL-1，IL-6，TNF-a

等致熱源表達(dá)上升2、白細(xì)胞反應(yīng)：引起早期粒細(xì)胞減少血癥，以后繼發(fā)粒細(xì)胞增多血癥3、內(nèi)毒素血癥：血管舒縮機(jī)能紊亂,微循環(huán)衰竭,低血壓，缺氧，休克4、彌漫性血管內(nèi)凝血：活化補(bǔ)體c3，引起由補(bǔ)體介導(dǎo)的各種反應(yīng)等，皮膚出血滲血。細(xì)菌內(nèi)毒素導(dǎo)致體溫升高細(xì)胞核巨噬細(xì)胞細(xì)菌內(nèi)毒素白細(xì)胞介素-1液泡血管前列腺素腦垂體巨噬細(xì)胞吞入革蘭氏陰性細(xì)菌細(xì)菌在液泡中被降解，釋放內(nèi)毒素，誘導(dǎo)細(xì)胞合成白介素-1巨噬細(xì)胞將白介素-1釋放到血管，進(jìn)入腦部白介素-1誘導(dǎo)下丘腦調(diào)高機(jī)體的體溫控制，引起高燒下丘腦高燒LPS作用分子機(jī)制LPS與LBP結(jié)合并將其轉(zhuǎn)運(yùn)到細(xì)胞的膜上，與膜CD14結(jié)合形成復(fù)合物，通過(guò)跨膜分子將信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)到細(xì)胞內(nèi)。由于CD14沒(méi)有跨膜區(qū)和細(xì)胞內(nèi)段，因此不能直接和細(xì)胞內(nèi)進(jìn)行信息交流。推測(cè)存在一個(gè)或多個(gè)跨膜蛋白與LPS-CD14復(fù)合物一起啟動(dòng)細(xì)胞活化信號(hào)的傳遞。TLR4介導(dǎo)LPS并激活下游信號(hào)通路。兩種自然突變小鼠C3H/HeJ和C57BL/10ScCr小鼠對(duì)LPS的攻擊不發(fā)生或發(fā)生較低的反應(yīng)，即對(duì)LPS具有耐受性。分子遺傳學(xué)研究發(fā)現(xiàn)這兩種小鼠位于LPS基因座的TLR4基因發(fā)生了突變；TLR4基因敲除小鼠其表型與C3H/HeJ小鼠相似。TLR2基因缺陷的中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞對(duì)LPS的反應(yīng)正常；小鼠TLR2基因敲除不影響巨噬細(xì)胞對(duì)LPS的信號(hào)傳導(dǎo)。上述結(jié)果表明TLR4（而不是TLR2）在機(jī)體對(duì)LPS的反應(yīng)中扮演不可缺少的角色。BacterialLipopolysaccharideActivatesNF-kBthroughToll-likeReceptor4(TLR-4)inCulturedHumanDermalEndothelialCells

THEJOURNALOFBIOLOGICALCHEMISTRYVol.275,No.15,IssueofApril14,pp.11058–11063,2000外源性?xún)?nèi)源性呼吸道消化道皮膚粘膜血液節(jié)肢動(dòng)物性傳播4、細(xì)菌的感染途徑和類(lèi)型細(xì)菌感染來(lái)源傳播途徑患者帶菌者病畜和帶菌動(dòng)物不感染（noinfection）隱性感染（inapparentinfection）潛伏感染（latentinfection）顯性感染（apparentinfection）帶菌狀態(tài)（carrierstate）病原菌和宿主力量的對(duì)比和臨床表現(xiàn)按病情緩急急性感染（acuteinfection）慢性感染（chronicinfection）感染發(fā)生部位與性質(zhì)局部感染（localinfection）全身感染（systemicinfection）感染類(lèi)型1.毒血癥toxemia

病原菌只在局部繁殖,產(chǎn)生外毒素入血,引起相應(yīng)的臨床表現(xiàn)（破傷風(fēng)、白喉等）。2.菌血癥bacteremia

病原菌由局部感染處侵入血液，但未在血液中生長(zhǎng)繁殖（常為一過(guò)性）如傷寒桿菌感染的菌血癥期。全身感染的不同表現(xiàn)3.敗血癥septicemia

病原菌侵入血液并在血中大量繁殖，引起較嚴(yán)重的臨床癥狀。4.膿毒血癥pyemia

化膿性細(xì)菌在引起敗血癥的基礎(chǔ)上，細(xì)菌隨血流擴(kuò)散到其它器官，并引起新的化膿性病灶。5.內(nèi)毒素血癥endotoxemiaG-菌引起的敗血癥，細(xì)菌在血液中繁殖、裂解釋放內(nèi)毒素，引起的感染類(lèi)型。（二）抗細(xì)菌感染的免疫非特異性免疫：包括機(jī)體的屏障結(jié)構(gòu)，吞噬細(xì)胞的吞噬功能和正常組織及體液中的抗菌物質(zhì)。特異性免疫：包括以抗體作用為中心的體液免疫和致敏淋巴細(xì)胞及其產(chǎn)生的淋巴因子為中心的細(xì)胞免疫。第一道防線(xiàn)：宿主體表的防御功能1．物理屏障：機(jī)械的阻擋和排除作用2．化學(xué)屏障：分泌液中化學(xué)物質(zhì)的局部抗菌作用3．微生物屏障：正常菌群的拮抗作用皮脂分泌淚液唾液皮膚屏障臘質(zhì)分泌汗液胃酸、消化酶腸道菌群粘膜屏障溶菌酶

排泄物（沖洗作用）屏障結(jié)構(gòu)的組成血腦屏障胎盤(pán)屏障陰道粘膜消化道粘膜粘膜粘膜：分泌產(chǎn)生的粘液，粘附入侵物，進(jìn)而排除之支氣管上皮覆蓋粘膜層粘膜免疫的應(yīng)用：口服疫苗第二道防線(xiàn)：吞噬與炎癥也是一種非特異性的防御反應(yīng)游走和趨化識(shí)別與結(jié)合吞入殺滅細(xì)胞吞噬作用病原菌刺激細(xì)胞，產(chǎn)生趨化因子，吸引中性粒細(xì)胞等向病灶移動(dòng)、黏附吞噬細(xì)胞受體識(shí)別“病原體相關(guān)分子模式”（PAMP）將入侵物吞入、降解吞噬細(xì)胞：主要是白細(xì)胞及其衍生細(xì)胞、巨噬細(xì)胞血液白細(xì)胞的數(shù)量是感染的主要指標(biāo)紅細(xì)胞白細(xì)胞血小板細(xì)菌偽足吞噬小體溶酶體吞噬溶酶體抗原肽/II型MHC降解物質(zhì)外吐白細(xì)胞的吞噬作用巨噬細(xì)胞還負(fù)責(zé)加工呈遞抗原，分泌細(xì)胞因子(干擾素、白介素等)，促進(jìn)免疫細(xì)胞生長(zhǎng)完全吞噬和不完全吞噬TollLikeReceptor(TLR)Transmembranereceptorsonthesurfaceofmacrophages,dendritic,andepithelialcellsAbletorecognizevarioustypesofpathogenpatternsToll:Adrosophilareceptorfordorso-ventralpolarityduringembryogenesis.LaterplaysaroleintheimmuneresponseagainstfungalinfectionProposedDimerArchitectureoftheTLR3EctodomainTLRinMammalsMorethan10membershavebeenidentified.BelongstoInterleukin-1receptors(IL-1Rs)superfamilyTwopartsExtracellular:Leucinerichrepeat,bindstopathogenIntracellular:Toll/IL-1receptordomain,signaltransducitonWhatPatternArePRRLookingfor?Pathogen-AssociatedMolecularPatterns(PAMPs)Patternsthatare:Notsharedwiththehost;Sharedbymanyrelatedpathogens;Relativelyinvariant(donotevolverapidly)Examples:theflagellinofbacterialflagella;thepeptidoglycanofGram-positivebacteria;thelipopolysaccharide(LPS,alsocalledendotoxin)ofGram-negativebacteria;dsRNA,andunmethylatedDNAPAMPsforToll-likeReceptorTheTLRSignaling

PathwayMyD88PathwaySamewithIL-1RMyD88IndependentpathwaysPathogenRecognitionandInnateImmunity.Cell.124:784-801.2006.Toll-dependentselectionofmicrobialantigensforpresentationbydendriticcells.Nature440:808-12.2006第三道防線(xiàn)：特異性免疫特異性：僅針對(duì)特定的入侵物的誘發(fā)免疫力的抗原，產(chǎn)生專(zhuān)門(mén)的抗體后天獲得性：需要個(gè)體后天接觸抗原產(chǎn)生，產(chǎn)生獲得性免疫需要一定時(shí)間（7-10d）記憶性：再次接觸抗原后，免疫強(qiáng)度增強(qiáng)，反應(yīng)更為迅速獲得性免疫系統(tǒng)

黏膜免疫系統(tǒng)體液免疫，產(chǎn)生特異性抗體細(xì)胞免疫：以T細(xì)胞為主抗體細(xì)菌毒素細(xì)胞受體抗體的作用：直接中和抗體中和細(xì)菌毒素，避免其與細(xì)胞受體結(jié)合，產(chǎn)生毒性抗體的作用：誘導(dǎo)吞噬作用胞外細(xì)菌“抗體包被”Fc受體識(shí)別，引起吞噬作用胞內(nèi)降解抗體包圍細(xì)菌造成細(xì)菌被吞噬抗體的作用：誘導(dǎo)補(bǔ)體反應(yīng)血漿中的細(xì)菌補(bǔ)體補(bǔ)體活化直接裂解細(xì)菌或吞噬、降解抗體包被細(xì)菌造成補(bǔ)體系統(tǒng)的活化，直接殺死細(xì)菌或造成細(xì)菌被吞噬降解T淋巴細(xì)胞類(lèi)別CD4＋T細(xì)胞又稱(chēng)輔助T細(xì)胞，分泌細(xì)胞因子，激活增強(qiáng)天然殺傷細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、顆粒細(xì)胞殺菌能力CD8＋T細(xì)胞又稱(chēng)細(xì)胞毒性T細(xì)胞直接造成目標(biāo)細(xì)胞死亡誘導(dǎo)感染細(xì)胞凋亡，釋放病原菌，抗體參與TH細(xì)胞的中心作用抗原受體抗原活化抗體抗原呈遞細(xì)胞細(xì)胞因子細(xì)胞因子T細(xì)胞B細(xì)胞細(xì)胞毒性T細(xì)胞巨噬細(xì)胞顆粒細(xì)胞天然殺傷細(xì)胞依賴(lài)抗體的細(xì)胞毒性細(xì)胞

T細(xì)胞的核心作用TH細(xì)胞是免疫應(yīng)答的中心環(huán)節(jié)：接受外界抗原刺激釋放細(xì)胞因子，激活各種免疫細(xì)胞促進(jìn)B細(xì)胞增殖并產(chǎn)生抗體形成細(xì)胞毒性T細(xì)胞（TC），殺死目標(biāo)細(xì)胞1．胞外寄生菌的抗感染免疫胞外菌寄居在宿主細(xì)胞外的組織間隙和血液、淋巴液、組織液等體液中

葡萄球菌、鏈球菌、志賀菌、霍亂弧菌、破傷風(fēng)梭菌等胞外菌感染的防御主要靠吞噬細(xì)胞清除黏膜免疫和體液免疫是其主要獲得性免疫機(jī)制2．胞內(nèi)寄生菌的抗感染免疫胞內(nèi)菌兼性（facultative）和專(zhuān)性（obligate）專(zhuān)性胞內(nèi)菌立克次體、衣原體兼性胞內(nèi)菌結(jié)核分枝桿菌、麻風(fēng)分枝桿菌、傷寒沙門(mén)菌、布魯菌、嗜肺軍團(tuán)菌、產(chǎn)單核細(xì)胞李氏菌胞內(nèi)感染的防御功能主要靠T淋巴細(xì)胞為主的細(xì)胞免疫

第三節(jié)細(xì)菌感染的診斷和預(yù)防

（一）細(xì)菌感染的診斷1．病癥的觀察2.檢測(cè)細(xì)菌或其抗原1）直接涂片顯微鏡檢查2）分離培養(yǎng)3）生化反應(yīng)4）抗原檢測(cè)與分析3．血清學(xué)檢測(cè)-

利用免疫學(xué)技術(shù)4．檢測(cè)細(xì)菌遺傳物質(zhì)-利用分子生物學(xué)技術(shù)1）核酸雜交技術(shù)2）PCR技術(shù)3）DNA芯片細(xì)菌感染的診斷DiagnosisStrategyforBacterialInfection1、病癥觀察了解癥狀分析感染部位推測(cè)感染病原各種皮疹的比較萊姆病麻疹單純皰疹病毒水痘2、顯微鏡檢查取樣觀察病原的形態(tài)特征，確定病原的性質(zhì)，了解感染的情況直接涂片觀察免疫細(xì)胞的數(shù)量，了解體內(nèi)炎癥情況陰道分泌物涂片，顯示奈氏雙球菌感染3、微生物培養(yǎng)及生化分析從血液、腦脊液等樣品中分離微生物，進(jìn)行培養(yǎng)，了解微生物的：營(yíng)養(yǎng)需要、代謝特征宿主上、中：微生物對(duì)糖的利用下：微生物對(duì)檸檬酸的利用用于快速診斷的培養(yǎng)基試劑盒4、免疫學(xué)技術(shù)利用抗原抗體反應(yīng)的特異性來(lái)診斷特定的病原感染。對(duì)于顯微鏡下難以看見(jiàn)的病毒等微生物的感染尤其有用。主要針對(duì)蛋白質(zhì)準(zhǔn)備抗體抗原（細(xì)菌、病毒或其組成部分）分離純化注射采血分離抗體標(biāo)記抗體標(biāo)記抗體標(biāo)記物：酶：加入合適的試劑后可顯色熒光分子：可發(fā)出熒光放射性同位素：產(chǎn)生射線(xiàn)檢測(cè)病原體采樣（血、組織）抗原包被加入抗體洗去多余抗體定量讀數(shù)顯色免疫熒光技術(shù)用產(chǎn)生熒光的分子代替酶免疫學(xué)技術(shù)的問(wèn)題抗原-抗體間的結(jié)合并非唯一，常有交叉反應(yīng)和非特異反應(yīng)抗體是混合物，不同的抗體分子可以和不同的對(duì)象結(jié)合需要嚴(yán)格設(shè)置對(duì)照實(shí)驗(yàn)5、分子生物學(xué)方法核酸雜交生物芯片PCR核酸序列分析核酸雜交利用核苷酸間的特異性配對(duì)進(jìn)行檢測(cè)將DNA點(diǎn)在膜上將雙鏈DNA變性為單鏈DNA加入根據(jù)特殊檢測(cè)要求設(shè)計(jì)的標(biāo)記探針斑點(diǎn)雜交DNA轉(zhuǎn)移雜交（SouthernBlot）電泳將DNA片段分開(kāi)將DNA從膠轉(zhuǎn)移到膜在膜上進(jìn)行雜交、顯色得到有關(guān)基因位置的信息生物芯片——高度密集的核酸雜交借助微量精密操作技術(shù)高效率地認(rèn)識(shí)不同情況下基因表達(dá)一般過(guò)程：將不同的基因點(diǎn)在介質(zhì)（玻璃，高分子材料等）上從細(xì)胞中提取總RNA，并用熒光或同位素標(biāo)記將細(xì)胞RNA與介質(zhì)上的基因（DNA）進(jìn)行雜交，洗去未雜交的RNA用生物芯片掃描儀測(cè)定每一點(diǎn)上的信號(hào)，確定細(xì)胞中是否有特定的RNA及RNA的水平生物芯片6400點(diǎn)的芯片（12x14mm）生物芯片生物芯片在微生物疾病診斷中的應(yīng)用一次試驗(yàn)診斷所有病原體和疾病蛋白質(zhì)芯片：用類(lèi)似的技術(shù)結(jié)合抗原-抗體反應(yīng)原理，進(jìn)行高效率的免疫學(xué)檢測(cè)多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（PCR）通過(guò)擴(kuò)增微量的核酸來(lái)靈敏地檢測(cè)病原原理：模板：樣品中原有的核酸引物：DNA復(fù)制必須要有一小段DNA作為先導(dǎo)物，可以設(shè)計(jì)特殊引物來(lái)擴(kuò)增特定的DNA序列高溫多聚酶：能在高溫下保持活性的酶高溫DNA變性成單鏈，低溫DNA鏈間又配對(duì)稱(chēng)為雙鏈PCR衛(wèi)生良好的衛(wèi)生習(xí)慣和生活方式環(huán)境衛(wèi)生控制傳播媒介預(yù)防接種（疫苗）（二）微生物疾病的特異性免疫預(yù)防疫苗作用的原理免疫系統(tǒng)具有記憶性：在產(chǎn)生成熟B細(xì)胞和T細(xì)胞時(shí)，會(huì)形成一部分記憶細(xì)胞，供再次接觸同一抗原時(shí)作出快速反應(yīng)免疫記憶性常可維持終身可以人工模擬這第一次感染，從而使人體獲得免疫記憶被動(dòng)免疫與主動(dòng)免疫主動(dòng)免疫——預(yù)防接種。往往需要較多的時(shí)間才能產(chǎn)生效果為了對(duì)入侵物作出即時(shí)反應(yīng)，可通過(guò)被動(dòng)免疫進(jìn)行：被動(dòng)免疫：注射針對(duì)入侵物的專(zhuān)一性抗體1．人工主動(dòng)免疫(artificialactiveimmunity)1）菌苗2）亞單位疫苗3）類(lèi)毒素5）合成肽疫苗4）核酸疫苗6）治療性疫苗是采用人工方法接種菌苗或類(lèi)毒素，使機(jī)體通過(guò)免疫系統(tǒng)的應(yīng)答，產(chǎn)生特異性免疫力。活菌苗死菌苗2．人工被動(dòng)免疫

(artificialpassiveimmunity)

給機(jī)體注入含有特異性抗體或淋巴因子等免疫物質(zhì)，使機(jī)體能較快獲得免疫力稱(chēng)人工被動(dòng)免疫。1）抗毒素（antitoxin）2）抗菌免疫血清（antibacterialimmuneserum）3）胎盤(pán)（丙種）免疫球蛋白（immunoglobulin）4）細(xì)胞因子制劑（cytokine）：多用于病毒感染人工自動(dòng)免疫與人工被動(dòng)免疫比較

人工自動(dòng)免疫人工被動(dòng)免疫免疫物質(zhì)免疫力出現(xiàn)時(shí)間免疫力保持時(shí)間用途抗原慢（注射后2～4周）長(zhǎng)（數(shù)月～數(shù)年）預(yù)防抗體或淋巴因子快（即時(shí)生效）短（2～3周）治療或應(yīng)急預(yù)防減毒活疫苗用人工方法使病原微生物變異減毒方法：在體外連續(xù)培養(yǎng)，使病原物丟失毒性因子從自然界中篩選的病原微生物無(wú)毒株優(yōu)點(diǎn)：病原物能復(fù)制、繁殖，最大限度地模擬真實(shí)的感染過(guò)程，免疫效果好，疫苗用量少缺點(diǎn)：安全性差，不易保存廣泛使用的有：卡介苗（牛結(jié)核分枝桿菌），脊髓灰質(zhì)炎疫苗等滅活疫苗用物理化學(xué)方法將病原微生物殺死，但仍保留原有的免疫原性滅活方法如：用甲醛使病原物的蛋白質(zhì)變性?xún)?yōu)點(diǎn)：安全性較好缺點(diǎn)：效果不如減毒活疫苗，疫苗用量大大多數(shù)現(xiàn)用疫苗屬這一類(lèi)亞單位疫苗提取病原物的一部分組份，作為疫苗優(yōu)點(diǎn)：安全性更好缺點(diǎn)：效果最差已投入使用的并不多如乙肝表面抗原作為乙肝病毒的疫苗基因工程疫苗：基因工程技術(shù)生產(chǎn)微生物抗原作為疫苗優(yōu)點(diǎn)：安全性最好，易于生產(chǎn)缺點(diǎn)：效果差已使用的如基因工程生產(chǎn)的乙肝病毒表面抗原疫苗新技術(shù)－－基因工程疫苗利用痘苗病毒（牛痘）的優(yōu)良疫苗特性，通過(guò)基因工程手段加入病原微生物的基因，作為疫苗痘苗病毒進(jìn)入體內(nèi)后會(huì)被吞噬，或進(jìn)行感染復(fù)制，表達(dá)該基因，使抗原得到有效的呈遞。激發(fā)體液和細(xì)胞免疫疫苗新技術(shù)

－－DNA疫苗（基因疫苗）將病原微生物的基因克隆到一個(gè)質(zhì)粒載體中，用基因槍的方法注射到被免疫者的肌肉中，進(jìn)行免疫接種基因在肌肉細(xì)胞中表達(dá)，進(jìn)行內(nèi)源型呈遞某些DNA序列也可激發(fā)免疫系統(tǒng)的活性治療性疫苗多針對(duì)持續(xù)性感染、帶菌者和潛伏感染人群微生物抗原基因與不同細(xì)胞因子組成并表達(dá)嵌合性疫苗打破機(jī)體的免疫耐受，提高對(duì)病原體特異性的免疫應(yīng)答水平可結(jié)合治療性的藥物疫苗存在的問(wèn)題疫苗安全性問(wèn)題：現(xiàn)有的疫苗，效果越好，安全性越差并非所有的病原物都有疫苗，如：快速變化的微生物血清型抑制免疫系統(tǒng)的病毒第四節(jié)抗菌治療與細(xì)菌耐藥性抗菌藥物：用于殺滅或抑制細(xì)菌生長(zhǎng)的物質(zhì)。

抗生素（antibiotic）和合成藥物（Syntheticdrug）抗生素：是指某些微生物代謝過(guò)程中產(chǎn)生的一類(lèi)抗菌物質(zhì)，大多有放線(xiàn)菌和絲狀真菌產(chǎn)生。合成藥物：在抗生素母核中加入不同側(cè)鏈或通過(guò)母核結(jié)構(gòu)改造而獲得為半合成抗生素，完全化學(xué)合成的為化學(xué)合成抗菌藥物?？咕幬锟咕V：指抗菌藥的抗菌范圍廣譜類(lèi)：對(duì)多種細(xì)菌有抑制殺滅作用如氟喹諾酮類(lèi)、四環(huán)素類(lèi)、氯霉素等。窄譜類(lèi)：對(duì)一種或有限的幾種病原微生物有抑制、殺滅作用的；如青霉素G、異煙肼等。最小抑菌濃度（Minimalinhibitoryconcentration):--體外抑制細(xì)菌生長(zhǎng)的最低濃度最小殺菌濃度（Minimumbactericidalconcentration）

--體外可以殺滅細(xì)菌的最低濃度抗菌活性測(cè)定Disctesting抗生素作用機(jī)制作用細(xì)胞壁

:b-Lactamsb-Lactam抑制四肽側(cè)鏈上D-Ala與五肽交聯(lián)橋之間的聯(lián)接，不能形成細(xì)胞壁的肽聚糖交聯(lián)立體構(gòu)象作用細(xì)胞壁:糖肽類(lèi)Glycopeptide萬(wàn)古霉素（Vancomycin）DifferentfrompenicillinVancomycin可通過(guò)氫鍵與UDP-胞壁酰五肽末端的D-Ala-D-Ala結(jié)合進(jìn)而抑制肽聚糖的延伸或肽鏈交聯(lián)蛋白質(zhì)翻譯:大環(huán)內(nèi)酯類(lèi)

（Macrolides）與核糖體50S亞基結(jié)合，抑制新合成的肽基tRNA分子從核蛋白體受體部位（A位）移至肽酰基結(jié)合部位（P位），阻斷轉(zhuǎn)肽作用和mRNA的位移，進(jìn)而抑制蛋白質(zhì)的合成蛋白質(zhì)合成:氨基糖甙類(lèi)Aminoglycosides與核糖體30S亞基結(jié)合將已接上甲酰蛋氨酰-tRNA解離，抑制蛋白質(zhì)合成的起始阻止核糖體與釋放因子結(jié)合，阻斷已合成蛋白質(zhì)的釋放耳聾易感基因的突變:12SrRNAA1555G,C1494T蛋白質(zhì)合成:四環(huán)素類(lèi)（Tetracycline）BlocktRNAacceptance與30S亞基A位結(jié)合，阻止氨?；鵷RNA同核蛋白體結(jié)合,影響蛋白質(zhì)合成初始階段和釋放光譜抗生素

Gram+/-,aerobic/anaerobic,mycoplasma,spirochetes,rickettsia,chlamydia轉(zhuǎn)錄調(diào)控:利福平（Rifampin）與細(xì)菌DNA依賴(lài)的RNA聚合酶beta亞基結(jié)合，抑制mRNA的合成Gm(+)rodsandcocci,TBandleprosy抑制核酸代謝:磺胺類(lèi)Sulphonamidesp-aminobenzoicacid+pteridinedihydropteroatesynthasedihydropteroicacidsulphonamidesdihydrofolicacidtetrahydrofolicacidDNA螺旋：喹諾酮（Quinolones）作用于細(xì)菌DNA復(fù)制過(guò)程中的DNA回旋酶干擾細(xì)菌DNA的合成,導(dǎo)致DNA降解和細(xì)菌死亡干擾DNA復(fù)制：

甲硝唑（Metronidazole）Metronidazole:原生動(dòng)物感染，厭氧菌等DNA鏈斷裂細(xì)菌耐藥性耐藥菌：指細(xì)菌與抗菌藥物反復(fù)接觸后對(duì)藥物的敏感性降低甚至消失。有些細(xì)菌還同時(shí)耐受多種抗菌藥物，即多重耐藥性，甚至產(chǎn)生藥物依賴(lài)性。含鏈霉素培基

痢疾桿菌依鏈株

長(zhǎng)期培養(yǎng)

基因突變類(lèi)型誘變劑有否分：自發(fā)突變，誘發(fā)突變ＤＮＡ序列改變多少分：點(diǎn)突變，多點(diǎn)突變遺傳信息改變與否分：同義突變，錯(cuò)義突變，無(wú)義突變細(xì)菌的變異:突變（Mutation）自發(fā)突變誘導(dǎo)突變：形態(tài)結(jié)構(gòu)變異

3-6%食鹽

鼠疫耶氏菌多形態(tài)性

陳舊培基物

青霉素、溶菌酶

正常形態(tài)細(xì)菌

L型變異抗體或補(bǔ)體

(部分或完全失去胞壁)

特殊結(jié)構(gòu)的變異

42-43℃

炭疽桿菌失去形成芽胞能力,毒性降低

10-20天

變形桿菌0.1%石炭酸遷徙生長(zhǎng)（H）點(diǎn)狀生長(zhǎng)、單個(gè)菌落（O）鞭毛變異毒力變異增強(qiáng)

β棒狀噬菌體

白喉棒狀桿菌

獲得白喉毒素減弱

膽汁、甘油、馬鈴薯培養(yǎng)基

牛分枝桿菌卡介苗

13年(230代)

細(xì)菌的變異:水平轉(zhuǎn)移（HorizontalGeneTransfer）細(xì)菌接合細(xì)菌轉(zhuǎn)導(dǎo)細(xì)菌轉(zhuǎn)化插入序列（insertionsequence,IS）是最小的轉(zhuǎn)位因子，＜2kb，不攜帶任何已知與插入功能無(wú)關(guān)的基因區(qū)域轉(zhuǎn)座子（transposon,Tn）＞2kb，除攜帶與轉(zhuǎn)位有關(guān)的基因外，還攜帶耐藥性基因、抗金屬基因、毒素基因及其他結(jié)構(gòu)基因?？赡芘c細(xì)菌的多重耐藥性有關(guān)。IS

ISResistanceGene(s)Tn轉(zhuǎn)位因子（transposableelement）轉(zhuǎn)座子的特征轉(zhuǎn)座子攜帶耐藥或毒素基因Tn1Tn2Tn3AP（氨芐青霉素）Tn4AP、SM（鏈霉素）、Su（磺胺）Tn5Km（卡那霉素）Tn6KmTn7TMP（甲氧芐氨嘧啶）、SMTn9Cm（氯霉素）Tn10Tc（四環(huán)素）tn551Em（紅霉素）Tn971EmTn1681大腸埃希菌（腸毒素基因）細(xì)菌耐藥機(jī)制細(xì)菌耐藥的遺傳機(jī)制細(xì)菌耐藥的生化機(jī)制細(xì)菌耐藥性的分類(lèi)（一）固有耐藥性概念：細(xì)菌對(duì)某種抗菌藥物的天然耐藥性。特點(diǎn)：始終如一，細(xì)菌的種屬特性所決定。發(fā)生條件：細(xì)菌沒(méi)有藥物作用的靶位。

細(xì)菌耐藥的遺傳機(jī)制概念：正常情況下，敏感的細(xì)菌中出現(xiàn)了對(duì)抗菌藥物有耐藥性的菌株。發(fā)生條件：1.

染色體突變細(xì)菌染色體突變使細(xì)菌產(chǎn)生了耐藥性。突變的頻率與抗菌藥物的使用無(wú)關(guān)。但藥物存在形成的選擇性壓力則有利于耐藥突變株的存活，最終使其成為優(yōu)勢(shì)群體。以單一耐藥性為主，一般是穩(wěn)定的，很少丟失。（二）獲得耐藥性

2.質(zhì)粒介導(dǎo)的耐藥性R質(zhì)粒使細(xì)菌對(duì)抗菌藥物產(chǎn)生耐藥性。且在菌細(xì)胞之間通過(guò)接合和轉(zhuǎn)導(dǎo)等方式進(jìn)行傳遞。特點(diǎn)：①可以從宿主菌檢出R質(zhì)粒；②以多重耐藥性常見(jiàn)；③容易因質(zhì)粒丟失成為敏感株；④耐藥性可經(jīng)接合轉(zhuǎn)移。

3.轉(zhuǎn)座子介導(dǎo)的耐藥性轉(zhuǎn)座子常帶有耐藥基因，使細(xì)菌產(chǎn)生耐藥性。

細(xì)菌耐藥的生化機(jī)制鈍化酶的產(chǎn)生藥物作用靶位改變靶標(biāo)過(guò)表達(dá)胞壁通透性的改變主動(dòng)外排機(jī)制產(chǎn)生可互補(bǔ)途徑環(huán)境菌的耐藥組學(xué)分析（Resistome）常見(jiàn)耐藥菌金黃色葡萄球菌

--60年代MRSA，1997年出現(xiàn)VISA革蘭氏陰性菌

--大腸埃希氏，銅綠假單胞菌等，其中最重要的產(chǎn)超廣譜b內(nèi)酰胺酶（ESBL）、AmpCb內(nèi)酰胺酶菌株腸球菌

--多重耐藥菌株，耐萬(wàn)古霉素腸球菌（VRE）抗酸桿菌

--耐多藥，泛耐藥菌株“超級(jí)細(xì)菌”“超級(jí)細(xì)菌”泛指臨床上出現(xiàn)的多重耐藥菌，如耐甲氧西林金黃色葡萄球菌（MRSA）、抗萬(wàn)古霉素腸球菌（VRE）、耐多藥肺炎鏈球菌（MDRSP）、多重抗藥性結(jié)核桿菌（MDR-TB），以及碳青霉烯酶肺炎克雷伯菌（KPC）等。產(chǎn)NDM-1耐藥細(xì)菌，即攜帶新德里金屬β-內(nèi)酰胺酶（NDM-1）基因，對(duì)絕大多數(shù)抗生素不再敏感的細(xì)菌。年份株數(shù)%2002-2010年華山醫(yī)院臨床碳青霉烯類(lèi)耐藥肺炎克雷伯菌檢出率產(chǎn)KPC型碳青霉烯酶肺炎克雷伯菌的藥物敏感性抗菌藥物解釋抗菌藥物解釋阿米卡星R頭孢吡肟R慶大霉素R頭孢哌酮/舒巴坦R氨芐西林R頭孢西丁R氨芐西林/舒巴坦R亞胺培南R哌拉西林R美羅培南R哌拉西林/他唑巴坦R厄他培南R頭孢唑啉R環(huán)丙沙星R頭孢呋辛R復(fù)方磺胺甲噁唑R頭孢噻肟R亞胺培南(Etest)>32mg/ml頭孢他啶R美羅培南(Etest)>32mg/ml細(xì)菌耐藥性的控制策略科學(xué)合理使用抗菌藥物

--限制使用藥物

--合理選擇藥物

--正確劑量、療程和方法嚴(yán)格執(zhí)行消毒隔離制度，預(yù)防交叉感染抗菌藥物的聯(lián)合使用和“輪休”研制新抗菌藥物新型藥物的研究開(kāi)發(fā)抗菌藥物的發(fā)現(xiàn)動(dòng)物機(jī)體評(píng)價(jià)藥物(pre‘70)靶標(biāo)的發(fā)現(xiàn)及化合物的優(yōu)化(’70)計(jì)算機(jī)和結(jié)構(gòu)生物學(xué)在藥物研發(fā)中應(yīng)用(‘80s)高通量篩選highthroughputscreening(HTS)(‘80s-’90s)各類(lèi)方法綜合(today)HTS,rational,theoretical,animalmodels…基于藥靶的新藥開(kāi)發(fā)策略篩選抗菌藥物靶點(diǎn)的基本原則：基因?qū)Σ≡纳婊蚋腥臼欠裰匾蛟诓≡⑵渌婧松镆约叭祟?lèi)中的分布情況具有發(fā)展高通量篩選的生物化學(xué)信息Structure-basedDrugDesignMolecularBiology,GenomicsProteomics,SystemsbiologyX-raycrystallography,NMR,StructureactivityrelationshipComputer-assisteddrugdesigntoinventnewinhibitorsHighthroughputscreeningtotestlargenumbersofcompoundsin:(i)isolatedtarget;(ii)culturedpathogen;(iii)animalmodelOptimizingcompounddesigningIGPS作為靶標(biāo)篩選新型抗TB分子MTBH37RvIGPSstructure推測(cè)活性位點(diǎn)蛋白與小分子dockingLeft:planform；right:planview.

符合Lipinski’s法則化合物的分子量小于500道爾頓化合物結(jié)構(gòu)中的氫鍵給體(包括羥基、氨基等)的數(shù)量不超過(guò)5個(gè)化合物中氫鍵受體的數(shù)量不超過(guò)10個(gè)化合物的脂水分配系數(shù)的對(duì)數(shù)值(logP)在-2到5之間化合物中可旋轉(zhuǎn)鍵的數(shù)量不超過(guò)10個(gè)抗菌活性評(píng)價(jià)其他方面藥物代謝動(dòng)力力學(xué)（Pharmacokinetics）吸收分布（Absorption&distribution）體內(nèi)代謝、排泄（Metabolism&excretion）安全性（Safety）急毒、慢毒、致癌、致畸、過(guò)敏、生殖力影響后期（Latedevelopment）生產(chǎn)工藝及流程、中試臨床試驗(yàn)：phaseI,II&III調(diào)整、新藥上市申報(bào)藥物研發(fā):12-15Year+$500million生物安全生物安全生物安全（biosafety）：是生物技術(shù)安全的簡(jiǎn)稱(chēng)狹義地：指現(xiàn)代生物技術(shù)的研究、開(kāi)發(fā)、應(yīng)用及轉(zhuǎn)基因生物可能對(duì)生物多樣性、生態(tài)環(huán)境和人類(lèi)健康產(chǎn)生潛在的危害。廣義地：指與生物有關(guān)的各種因素對(duì)社會(huì)、經(jīng)濟(jì)、人類(lèi)健康及生態(tài)環(huán)境所產(chǎn)生的危害或潛在風(fēng)險(xiǎn)。

病原微生物的安全問(wèn)題：

-病原微生物實(shí)驗(yàn)室的安全隱患

-生物武器

-生物恐怖

-重大傳染病的暴發(fā)流行

病原微生物與生物安全病原微生物生物安全的核心：

--防擴(kuò)散和防感染國(guó)內(nèi)外相關(guān)法律法規(guī)和標(biāo)準(zhǔn)國(guó)際

WHO《實(shí)驗(yàn)室生物安全手冊(cè)》中國(guó)《中華人民共和國(guó)傳染病防治法》《病原微生物實(shí)驗(yàn)室生物安全管理?xiàng)l例》《中華人民共和國(guó)國(guó)境衛(wèi)生檢疫法》《中華人民共和國(guó)進(jìn)出境動(dòng)植物檢疫法》《突發(fā)公共衛(wèi)生事件應(yīng)急條例》《醫(yī)療廢物管理?xiàng)l例》病原微生物危害評(píng)估確定生物安全防護(hù)水平依據(jù)危害評(píng)估制定微生物操作、儀器設(shè)備操作程序與管理規(guī)程評(píng)價(jià)微生物實(shí)驗(yàn)室安全狀況的依據(jù)病原微生物危害程度分類(lèi)病原微生物危害程度分類(lèi)的主要依據(jù)微生物的致病性微生物的傳播方式和宿主范圍當(dāng)?shù)厮邆涞挠行ьA(yù)防措施當(dāng)?shù)厮邆涞挠行е委煷胧┎≡⑸镂：Τ潭确诸?lèi)《病原微生物實(shí)驗(yàn)室生物安全管理?xiàng)l例》

4類(lèi)第四類(lèi)：危險(xiǎn)程度最低第三類(lèi)：第二類(lèi)：第一類(lèi)：危險(xiǎn)程度最高

《實(shí)驗(yàn)室生物安全通用要求》和

WHO《生物安全手冊(cè)》4級(jí)Ⅰ級(jí)：危險(xiǎn)程度最低

Ⅱ級(jí)：

Ⅲ級(jí)：

Ⅳ級(jí)：危險(xiǎn)程度最高高致病性病原微生物國(guó)內(nèi)外病原微生物危害程度分類(lèi)比較《病原微生物實(shí)驗(yàn)室生物安全管理?xiàng)l例》《實(shí)驗(yàn)室生物安全通用要求》(GB19489-2004)WHO《生物安全手冊(cè)》(第三版，2004)四類(lèi)在通常情況下不會(huì)引起人類(lèi)或者動(dòng)物疾病的微生物。

Ⅰ級(jí)（低個(gè)體危害，低群體危害）不會(huì)導(dǎo)致健康工作者和動(dòng)物致病的細(xì)菌、真菌、病毒和寄生蟲(chóng)等生物因子。Ⅰ級(jí)（無(wú)或極低的個(gè)體和群體危險(xiǎn)）不太可能引起人或動(dòng)物致病的微生物。

病原微生物的危害等級(jí)劃分和標(biāo)準(zhǔn)

三類(lèi)能夠引起人類(lèi)或者動(dòng)物疾病，但一般情況下對(duì)人、動(dòng)物或者環(huán)境不構(gòu)成嚴(yán)重危害，傳播風(fēng)險(xiǎn)有限，實(shí)驗(yàn)室感染后很少引起嚴(yán)重疾病，并且具備有效治療和預(yù)防措施的微生物。

Ⅱ級(jí)(中等個(gè)體危害，有限群體危害)能引起人或動(dòng)物發(fā)病，但一般情況下對(duì)健康工作者、群體、家畜或環(huán)境不會(huì)引起嚴(yán)重危害的病原微生物。實(shí)驗(yàn)室感染不導(dǎo)致嚴(yán)重疾病，具備有效治療和預(yù)防措施，并且傳播風(fēng)險(xiǎn)有限。

Ⅱ級(jí)（個(gè)體危險(xiǎn)中等，群體危險(xiǎn)低）病原微生物能夠?qū)θ嘶騽?dòng)物致病，但對(duì)實(shí)驗(yàn)室工作人員、社區(qū)、牲畜或環(huán)境不易導(dǎo)致嚴(yán)重危害。實(shí)驗(yàn)室暴露也許會(huì)引起嚴(yán)重感染，但對(duì)感染有有效的預(yù)防和治療措施，并且疾病傳播的危險(xiǎn)有限。管理?xiàng)l例 通用要求 WHO安全手冊(cè)國(guó)內(nèi)外病原微生物危害程度分類(lèi)比較

國(guó)內(nèi)外病原微生物危害程度分類(lèi)比較二類(lèi)能夠引起人類(lèi)或者動(dòng)物嚴(yán)重疾病，比較容易直接或者間接在人與人、動(dòng)物與人、動(dòng)物與動(dòng)物間傳播的微生物。Ⅲ級(jí)（高個(gè)體危害，低群體危害）能引起人類(lèi)或動(dòng)物嚴(yán)重疾病，或造成嚴(yán)重經(jīng)濟(jì)損失，但通常不能因偶然接觸而在個(gè)體間傳播，或能使用抗生素、抗寄生蟲(chóng)藥治療的病原微生物。Ⅲ級(jí)（個(gè)體危險(xiǎn)高，群體危險(xiǎn)低）病原微生物通常能引起人或動(dòng)物的嚴(yán)重疾病，但一般不會(huì)發(fā)生感染個(gè)體向其他個(gè)體的傳播，并且對(duì)感染有有效的預(yù)防和治療措施。管理?xiàng)l例 通用要求 WHO安全手冊(cè)

國(guó)內(nèi)外病原微生物危害程度分類(lèi)比較一類(lèi)能夠引起人類(lèi)或動(dòng)物嚴(yán)重疾病的微生物，以及我國(guó)尚未發(fā)現(xiàn)或者已經(jīng)宣布消滅的微生物。

Ⅳ級(jí)(高個(gè)體危害，高群體危害)能引起人類(lèi)或動(dòng)物非常嚴(yán)重的疾病，一般不能治愈，容易直接或間接或因偶然接觸在人與人，人與動(dòng)物，動(dòng)物與動(dòng)物間傳播的病原微生物。Ⅳ級(jí)（個(gè)體和群體的危險(xiǎn)均高）病原微生物通常能引起人或動(dòng)物的嚴(yán)重疾病，并且很容易發(fā)生個(gè)體之間的直接或間接傳播，對(duì)感染一般沒(méi)有有效的預(yù)防和治療措施。管理?xiàng)l例 通用要求 WHO安全手冊(cè)病原微生物實(shí)驗(yàn)室的分級(jí)級(jí)別處理對(duì)象BSL-1對(duì)人體、動(dòng)植物或環(huán)境危害較低，不具有對(duì)健康成人、動(dòng)植物致病的致病因子。BSL-2對(duì)人體、動(dòng)植物或環(huán)境具有中等危害或具有潛在危險(xiǎn)的致病因子，對(duì)健康成人、動(dòng)植物和環(huán)境不會(huì)造成嚴(yán)重危害，具有有效的預(yù)防和治療措施。BSL-3對(duì)人體、動(dòng)植物或環(huán)境具有高度危險(xiǎn)性，主要通過(guò)氣溶膠使人類(lèi)傳染上嚴(yán)重的甚至是致命的疾病，或?qū)?dòng)植物和環(huán)境具有高度危害的致病因子。通常有預(yù)防治療措施。BSL-4對(duì)人體、動(dòng)植物或環(huán)境具有高度危險(xiǎn)性，通過(guò)氣溶膠途徑傳播或傳播途徑不明或未知的危險(xiǎn)的致病因子。沒(méi)有預(yù)防治療措施。生物安全柜概念超凈工作臺(tái)生物安全柜生物安全柜的分級(jí)Ⅰ級(jí)生物安全柜Ⅱ級(jí)生物安全柜Ⅲ級(jí)生物安全柜Ⅰ級(jí)生物安全柜可開(kāi)啟前窗在負(fù)壓下操作表面風(fēng)速在75-100fpm排出的氣體經(jīng)HEPA過(guò)濾保護(hù)操作人員和環(huán)境適用于要求生物安全等級(jí)1、2、3的工作適用于樣品不需保護(hù)的實(shí)驗(yàn)工作Ⅱ級(jí)生物安全柜可開(kāi)啟前窗從前開(kāi)口向內(nèi)的氣流用于保護(hù)人員經(jīng)HEPA過(guò)濾后向下送的層流，以保護(hù)樣品排出的氣體采用HEPA過(guò)濾器過(guò)濾則用于保護(hù)環(huán)境表面風(fēng)速在75-100fpm

適用于要求生物安全等級(jí)為(Ⅰ-Ⅲ）的工作生物安全柜Ⅲ級(jí)生物安全柜箱體完全封閉，將微生物與人完全隔離；通過(guò)手套箱操作。保護(hù)工作人員、產(chǎn)品和環(huán)境。一般無(wú)定型產(chǎn)品，需特殊定貨?？蓪⑷舾蒊II級(jí)生物安全柜連在一起使用全部生物流程的操作均在柜內(nèi)完成，以確保安全。各級(jí)生物安全柜之間的差別生物安全柜級(jí)別正面氣流速度（m/s）氣流循環(huán)量(%)是否需要排風(fēng)管道

室內(nèi)循環(huán)排出室外量Ⅰ級(jí)0.381000否Ⅱ級(jí)A2型0.517030否Ⅱ級(jí)B2型0.510100需要Ⅲ級(jí)完全封閉0100需要菌（毒）種和樣本分類(lèi)

A類(lèi)感染性物質(zhì)

指在運(yùn)輸過(guò)程中當(dāng)人或動(dòng)物與之接觸時(shí)，能導(dǎo)致永久性的殘疾構(gòu)成生命威脅或致死疾病。UN2814（使人染病或使人和動(dòng)物都染?。?/p>

UN2900（僅使動(dòng)物染?。?/p>

B類(lèi)感染性物質(zhì)

未達(dá)到A級(jí)標(biāo)準(zhǔn)的感染性物質(zhì)，其聯(lián)合國(guó)編號(hào)為UN3373。UN3291（醫(yī)療廢物）

UN3373（臨床標(biāo)本）菌（毒）種和樣本的運(yùn)輸路陸運(yùn)輸：專(zhuān)用汽車(chē)，不能乘坐出租車(chē)或公共汽車(chē)等交通工具。包裝容器和標(biāo)識(shí)符合要求水路、鐵路、航空運(yùn)輸發(fā)生泄漏2小時(shí)內(nèi)報(bào)告菌（毒）種和樣本的包裝基本的三層包裝系統(tǒng)，適用于所有的感染性物質(zhì)（1）主容器：用于裝標(biāo)本的水密性、防滲漏的主容器。該容器用足量的吸附性材料進(jìn)行包裹，以便在發(fā)生滲漏時(shí)可以吸收所有液體。（2）中層包裝：第二層耐用的、水密性、防滲漏的包裝，把主容器裝入其中并對(duì)其保護(hù)作用。幾個(gè)加緩沖襯墊的主容器可置于同一個(gè)中層包裝內(nèi)，但應(yīng)使用足量的吸收性材料，以便在發(fā)生滲漏時(shí)可以吸收所有液體。（3）外包裝：中層包裝置于外包裝內(nèi)，并加墊適宜的緩沖材料。外包裝應(yīng)能保護(hù)其內(nèi)容物在運(yùn)輸時(shí)不受外界的影響（例如遭受物理性損壞）。外層容器的最小一面的尺寸至少應(yīng)為10cm×10cm。A類(lèi)感染性物質(zhì)的包裝要求A類(lèi)B類(lèi)單位內(nèi)部感染性物質(zhì)的運(yùn)送要求單位內(nèi)部如病房、采樣點(diǎn)到實(shí)驗(yàn)室大樓，以及不同建筑物間的樣本轉(zhuǎn)移應(yīng)使用兩層包裝系統(tǒng)泄露應(yīng)急處理（１）一旦暴露于任何感染性物質(zhì)，正確的應(yīng)對(duì)措施是不管采用何種洗消劑，要盡快對(duì)接觸的部位進(jìn)行清洗或消毒。即便某種感染性物質(zhì)接觸了破損皮膚，用肥皂和水或消毒劑清洗受影響的部位也可降低感染的危險(xiǎn)。如因包件受損而懷疑人體接觸了感染性物質(zhì)時(shí)，應(yīng)盡快就醫(yī)。泄露應(yīng)急處理（２）對(duì)于所有感染性物質(zhì)（包括血液）的溢出物，可采用以下清除程序：（1）戴手套和穿防護(hù)服，必要時(shí)還需有臉部和眼部防護(hù)。（2）用布或紙巾覆蓋并吸收溢出物。（3）向布或紙巾上傾倒消毒劑，包括其周?chē)鷧^(qū)。（4）使用消毒劑時(shí)，從溢出區(qū)域的外圍開(kāi)始，朝向中心進(jìn)行處理。泄露應(yīng)急處理（３）（5）處理約30分鐘后，清除這些物質(zhì)。如果現(xiàn)場(chǎng)有碎玻璃或其他銳器，則用鑷子或硬質(zhì)紙板收集并將其存放于防刺穿容器內(nèi)以待處理。（6）對(duì)溢出區(qū)清潔和消毒（如有必要，重復(fù)2-5步）。（7）將受污染材料置于防漏、防刺穿的廢棄物處理容器內(nèi)。（8）經(jīng)成功的消毒后，向主管機(jī)構(gòu)通報(bào)溢出事件，并說(shuō)明現(xiàn)場(chǎng)清除污染工作，同時(shí)做好事故處理記錄。廢棄物的處理處理原則

所有感染性材料

實(shí)驗(yàn)室內(nèi)清除污染高壓滅菌或焚燒細(xì)菌學(xué)總論復(fù)習(xí)提綱微生物與病原微生物微生物類(lèi)型：細(xì)胞核從無(wú)到有，簡(jiǎn)單到復(fù)雜細(xì)菌三種形態(tài)：球菌、桿菌、螺形菌兩大結(jié)構(gòu)：基本結(jié)構(gòu)和特殊結(jié)構(gòu)細(xì)胞壁:G+,G-區(qū)別，L型菌細(xì)菌生長(zhǎng)周期，各期特點(diǎn)感染粘附相關(guān)的重要細(xì)菌及作用生物膜形成及特點(diǎn)內(nèi)、外毒素致病特點(diǎn)抗感染免疫三道防線(xiàn)及意義細(xì)菌免疫及體液免疫特點(diǎn)和作用感染結(jié)局：隱形感染，顯性感染，帶菌細(xì)菌學(xué)診斷：細(xì)菌、生化、核酸特異性防治：人工主動(dòng)（各類(lèi)疫苗、類(lèi)毒素）人工被動(dòng)（抗毒素、血清、球蛋白等）特異性治療：抗生素耐藥性：自發(fā)和誘發(fā)耐藥耐藥遺傳機(jī)制耐藥生化機(jī)制病原性球菌一.葡萄球菌二