2024年高中生物新教材同步選擇性必修第三冊(cè)練透第3章 第1節(jié) 重組DNA技術(shù)的基本工具

2024年高中生物新教材同步選擇性必修第三冊(cè)練透第1節(jié)重組DNA技術(shù)的基本工具題組一基因工程的概念和工具酶1．玉米的PEPC酶固定CO2的能力較水稻的強(qiáng)60倍。我國(guó)科學(xué)家正致力于將玉米的PEPC基因?qū)胨局?，以提高水稻產(chǎn)量。下列有關(guān)該應(yīng)用技術(shù)的敘述，不正確的是()A．該技術(shù)是在DNA水平上進(jìn)行設(shè)計(jì)和施工的B．該技術(shù)的操作環(huán)境是生物體內(nèi)C．該技術(shù)的原理是基因重組D．該技術(shù)的優(yōu)點(diǎn)是定向產(chǎn)生人類需要的生物類型2．科學(xué)家把兔子血紅蛋白基因?qū)氪竽c桿菌細(xì)胞中，在大腸桿菌細(xì)胞中合成了兔子的血紅蛋白。下列關(guān)于這一先進(jìn)技術(shù)的理論依據(jù)，不正確的是()A．所有生物共用一套遺傳密碼B．基因能控制蛋白質(zhì)的合成C．兔子血紅蛋白基因與大腸桿菌的DNA都是由四種脫氧核苷酸構(gòu)成，都遵循相同的堿基互補(bǔ)配對(duì)原則D．兔子與大腸桿菌有共同的原始祖先3．據(jù)圖所示，有關(guān)工具酶功能的敘述不正確的是()A．限制性內(nèi)切核酸酶可以切斷a處B．DNA聚合酶可以連接a處C．解旋酶可以使b處解開D．DNA連接酶可以連接c處4．限制酶和DNA連接酶是基因工程的工具酶，下列有關(guān)說(shuō)法正確的是()A．DNA連接酶能將單個(gè)核苷酸加到已有的核苷酸片段上形成磷酸二酯鍵B．限制酶只能切割雙鏈DNA片段，不能切割煙草花葉病毒的核酸C．E.coliDNA連接酶既能連接黏性末端，也能連接平末端D．限制酶主要從原核生物中分離純化而來(lái)，所以也能剪切自身的DNA5．限制酶是一種核酸切割酶，可辨識(shí)并切割DNA分子上特定的脫氧核苷酸序列。如圖所示為四種限制酶BamHⅠ、EcoRⅠ、HindⅢ以及BglⅡ的識(shí)別序列，箭頭表示每一種限制酶的特定切割位點(diǎn)，切割出來(lái)的DNA片段末端可以互補(bǔ)黏合的是__________(限制酶)，其正確的末端互補(bǔ)序列應(yīng)該為()A．BamHⅠ和EcoRⅠ；末端互補(bǔ)序列為AATT—B．BamHⅠ和HindⅢ；末端互補(bǔ)序列為GATC—C．EcoRⅠ和HindⅢ；末端互補(bǔ)序列為AATT—D．BamHⅠ和BglⅡ；末端互補(bǔ)序列為GATC—6．(2023·江蘇南京高二期中)下列關(guān)于如圖所示黏性末端的說(shuō)法，錯(cuò)誤的是()A．DNA連接酶能催化磷酸基團(tuán)和脫氧核糖之間形成化學(xué)鍵B．甲、乙黏性末端是由不同的限制酶切割而成的C．切割甲的限制酶也能識(shí)別由甲、乙片段形成的重組DNA分子D．甲、乙黏性末端可形成重組DNA分子題組二“分子運(yùn)輸車”——載體7．質(zhì)粒是基因工程中常用的載體。下列有關(guān)質(zhì)粒的說(shuō)法，正確的是()A．質(zhì)粒上的基因表達(dá)不遵循中心法則，所以可用作外源DNA分子的載體B．具有某些標(biāo)記基因，以便為目的基因的表達(dá)提供條件C．質(zhì)粒上的抗生素合成基因可作為標(biāo)記基因D．作為外源DNA分子的載體，質(zhì)粒需具有限制酶能夠切割的位點(diǎn)8．(2023·河北秦皇島高二期末)下列有關(guān)基因工程中載體的說(shuō)法，正確的是()A．基因工程中使用的載體只有質(zhì)粒B．質(zhì)粒是細(xì)胞質(zhì)中能夠自我復(fù)制的環(huán)狀DNA分子C．噬菌體可以作為動(dòng)物基因工程的載體D．天然質(zhì)粒均可以直接作為載體將目的基因送入受體細(xì)胞9．如表列舉了幾種限制酶的識(shí)別序列及其切割位點(diǎn)(箭頭表示相關(guān)酶的切割位點(diǎn))。如圖是酶切后產(chǎn)生的幾種末端。下列有關(guān)說(shuō)法正確的是()A．BamHⅠ切割的是氫鍵，AluⅠ切割的是磷酸二酯鍵B．Sau3AⅠ和BamHⅠ切割的序列產(chǎn)生的片段能夠相連，連接后的片段還能被Sau3AⅠ切割C．DNA連接酶能連接②⑤，不能連接②④D．E.coliDNA連接酶和T4DNA連接酶都能連接①③，且連接效率低10．某線性DNA分子含有5000個(gè)堿基對(duì)(bp)，先用限制酶a切割，再把得到的產(chǎn)物用限制酶b切割，得到的DNA片段大小如表。限制酶a和b的識(shí)別序列和切割位點(diǎn)如圖所示。下列有關(guān)敘述不正確的是()a酶切割產(chǎn)物(bp)b酶再次切割產(chǎn)物(bp)2100；1400；1000；5001900；200；800；600；1000；500A.a酶與b酶切斷的化學(xué)鍵相同B．a(chǎn)酶與b酶切出的黏性末端能相互連接C．a(chǎn)酶與b酶切割該DNA分子位點(diǎn)分別有3個(gè)和5個(gè)D．限制酶將一個(gè)DNA分子片段切成兩個(gè)片段需消耗兩個(gè)水分子11．下列有關(guān)限制性內(nèi)切核酸酶的敘述，正確的是()A．用限制酶酶切獲得一個(gè)外源基因時(shí)得到兩個(gè)切口，有2個(gè)磷酸二酯鍵被斷開B．限制酶識(shí)別序列越短，則該序列在DNA中出現(xiàn)的概率就越大C．—CATG↓—和—G↓GATCC—序列被限制酶切出的黏性末端可用DNA連接酶連接D．只有用相同的限制酶處理含目的基因的片段和質(zhì)粒，才能形成重組質(zhì)粒12．(2023·福建泉州高二期末)如表為常用的限制性內(nèi)切核酸酶(限制酶)及其識(shí)別序列和切割位點(diǎn)，由此推斷以下說(shuō)法，正確的是()限制酶名稱識(shí)別序列和切割位點(diǎn)限制酶名稱識(shí)別序列和切割位點(diǎn)BamHⅠKpnⅠEcoRⅠSau3AⅠHindⅡSmaⅠ注：Y＝C或T，R＝A或G。A．限制酶SmaⅠ切割后形成的末端可用E.coliDNA連接酶連接B．Sau3AⅠ限制酶的切割位點(diǎn)在識(shí)別序列的外部C．BamHⅠ和Sau3AⅠ兩種限制酶切割后形成不同的黏性末端D．一種限制酶一定只能識(shí)別一種核苷酸序列13.根據(jù)基因工程的有關(guān)知識(shí)，回答下列問(wèn)題：(1)限制酶切割DNA分子后產(chǎn)生的DNA片段，其末端類型通常有________________________和__________________。(2)質(zhì)粒載體用限制酶X(識(shí)別的序列由6個(gè)核苷酸組成)切割后產(chǎn)生的片段如下：eq\b\lc\\rc\(\a\vs4\al\co1(AATTC……G,G……CTTAA))該酶識(shí)別的序列為__________________，切割的部位是________________________________。(3)為使切割后的載體與目的基因相連，含有目的基因的DNA除可用限制酶X切割外，還可用限制酶Y切割，兩種酶共同的特點(diǎn)是______________________________________________________________________________________________________________________________。(4)按其來(lái)源不同，基因工程中所使用的DNA連接酶有兩類，即________DNA連接酶和________DNA連接酶，其中后者只能連接一種末端。(5)基因工程中除質(zhì)粒外，______________和______________也可作為載體。14．(2021·全國(guó)乙，38節(jié)選)用DNA重組技術(shù)可以賦予生物以新的遺傳特性，創(chuàng)造出更符合人類需要的生物產(chǎn)品。在此過(guò)程中要使用多種工具酶，其中4種限制性內(nèi)切核酸酶的切割位點(diǎn)如圖所示。回答下列問(wèn)題：(1)常用的DNA連接酶有E.coliDNA連接酶和T4DNA連接酶，題圖中__________________酶切割后的DNA片段可以用E.coliDNA連接酶連接，題圖中________________________切割后的DNA片段可以用T4DNA連接酶連接。(2)DNA連接酶催化目的基因片段與質(zhì)粒載體片段之間形成的化學(xué)鍵是__________________。(3)DNA重組技術(shù)中所用的質(zhì)粒載體具有一些特征，如質(zhì)粒DNA分子上有復(fù)制原點(diǎn)，可以保證質(zhì)粒在受體細(xì)胞中______________；質(zhì)粒DNA分子上有_____________________________，便于外源DNA的插入；質(zhì)粒DNA分子上有標(biāo)記基因(如某種抗生素抗性基因)，利用抗生素可篩選出含質(zhì)粒載體的宿主細(xì)胞，方法是____________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________。第2節(jié)基因工程的基本操作程序第1課時(shí)目的基因的篩選與獲取、基因表達(dá)載體的構(gòu)建題組一目的基因的篩選與獲取1．(2023·陜西西安高二調(diào)研)基因工程操作“四步曲”的正確順序是()①目的基因的篩選與獲?、趯⒛康幕?qū)胧荏w細(xì)胞③基因表達(dá)載體的構(gòu)建④目的基因的檢測(cè)與鑒定A．①②③④ B．④①③②C．①③②④ D．③①②④2．下列關(guān)于PCR技術(shù)的敘述，正確的是()A．PCR技術(shù)建立在對(duì)擴(kuò)增的目的基因序列完全已知的基礎(chǔ)上B．該技術(shù)需要解旋酶和耐高溫的DNA聚合酶C．該技術(shù)需要一對(duì)特異性的引物，要求一對(duì)引物的序列是互補(bǔ)的D．該技術(shù)應(yīng)用DNA半保留復(fù)制原理，也需要模板、原料、能量、酶等條件3．用PCR擴(kuò)增下面的DNA片段：5′GACCTGTGGAAGC……CATACGGGATTG3′3′CTGGACACCTTCG……GTATGCCCTAAC5′供選擇的引物有：①5′GACCTGTGGAAGC3′②5′CATACGGGATTG3′③5′GTATGCCCTAAC3′④5′CAATCCCGTATG3′共四種，應(yīng)選擇()A．①②B．②③C．③④D．①④4．(2023·河北邢臺(tái)高二月考)用PCR技術(shù)特異性地拷貝“X基因”，經(jīng)四輪循環(huán)后產(chǎn)物中有五種不同的DNA分子。下列有關(guān)敘述錯(cuò)誤的是()A．第一輪循環(huán)得到2個(gè)DNA分子，即①②各一個(gè)B．第二輪循環(huán)得到4個(gè)DNA分子，即①②③④各一個(gè)C．第三輪循環(huán)得到8個(gè)DNA分子，其中有2個(gè)是等長(zhǎng)的，也就是有2個(gè)⑤D．第四輪循環(huán)得到16個(gè)DNA分子，其中有4個(gè)⑤題組二基因表達(dá)載體的構(gòu)建5．基因工程的核心是構(gòu)建基因表達(dá)載體，下列不屬于載體作用的是()A．載體能防止目的基因被受體細(xì)胞限制酶“切割”B．載體能協(xié)助目的基因在受體細(xì)胞中復(fù)制C．載體含有啟動(dòng)子和終止子協(xié)助目的基因表達(dá)D．載體具有標(biāo)記基因，便于篩選含目的基因的受體細(xì)胞6．下列關(guān)于基因表達(dá)載體的說(shuō)法，不正確的是()A．基因表達(dá)載體的構(gòu)建是基因工程的核心步驟B．基因表達(dá)載體包含啟動(dòng)子、目的基因、終止子、標(biāo)記基因等C．終止子位于目的基因的下游，能夠終止翻譯過(guò)程D．不同的目的基因所需的啟動(dòng)子不一定相同7．(2023·銀川高二階段考)科學(xué)家利用質(zhì)粒(如圖)成功構(gòu)建了蛛絲蛋白基因的重組質(zhì)粒，并在家蠶絲腺細(xì)胞中獲得大量蛛絲蛋白。下列有關(guān)說(shuō)法錯(cuò)誤的是()A．為防止目的基因自身環(huán)化，可以用限制酶XbaⅠ和SacⅠ來(lái)切割目的基因B．構(gòu)建基因表達(dá)載體時(shí)選用蠶絲蛋白基因的啟動(dòng)子利于基因在家蠶絲腺細(xì)胞中表達(dá)C．啟動(dòng)子是DNA聚合酶的識(shí)別和結(jié)合部位，可以驅(qū)動(dòng)遺傳信息的轉(zhuǎn)錄D．基因表達(dá)載體中的標(biāo)記基因可以用來(lái)鑒別與選擇含有蛛絲蛋白基因的受體細(xì)胞8．(2023·江蘇南通高二期中)如圖表示pBR322質(zhì)粒和人生長(zhǎng)激素基因所在片段的結(jié)構(gòu)信息，將二者構(gòu)建的重組質(zhì)粒導(dǎo)入受體菌并進(jìn)行篩選。下列有關(guān)敘述正確的是()注：AmpR為氨芐青霉素抗性基因，TetR為四環(huán)素抗性基因。A．可選擇的限制酶組合是酶E和酶GB．所選用的受體菌不能含有AmpR和TetR基因C．用含氨芐青霉素的培養(yǎng)基就能篩選出含重組質(zhì)粒的受體菌D．同時(shí)用三種限制酶處理圖中質(zhì)粒，電泳后可得到3個(gè)條帶9．RT－PCR是以提取的RNA為模板，經(jīng)逆轉(zhuǎn)錄獲得與之互補(bǔ)的DNA(cDNA)序列，再以cDNA序列為模板進(jìn)行目的片段的擴(kuò)增，具體過(guò)程如圖所示。下列有關(guān)RT－PCR的敘述，正確的是()A．過(guò)程1需要使用耐高溫的DNA聚合酶B．過(guò)程2中的引物B可與mRNA互補(bǔ)配對(duì)C．游離的脫氧核苷酸只能加到引物的5′端D．RT－PCR可用于對(duì)RNA病毒的檢測(cè)與鑒定10．研究人員用如圖1中質(zhì)粒和圖2中含目的基因的片段構(gòu)建重組質(zhì)粒(圖中標(biāo)注了相A．構(gòu)建重組質(zhì)粒的過(guò)程應(yīng)選用BclⅠ和HindⅢ兩種限制酶B．使用DNA連接酶將酶切后的質(zhì)粒和目的基因片段進(jìn)行重組C．能在添加四環(huán)素的培養(yǎng)基上生存的一定是含有重組質(zhì)粒的大腸桿菌D．利用PCR鑒定含目的基因的大腸桿菌時(shí)應(yīng)選用引物甲和引物丙11．(2023·哈爾濱高二期末)下列有關(guān)PCR的敘述，錯(cuò)誤的是()A．PCR的原理是DNA半保留復(fù)制，解旋和復(fù)制不是同時(shí)進(jìn)行的B．PCR的過(guò)程主要包括變性→延伸→復(fù)性，溫度逐漸降低C．PCR技術(shù)擴(kuò)增時(shí)，一個(gè)DNA分子經(jīng)過(guò)n輪復(fù)制共需引物2n－1對(duì)D．常采用瓊脂糖凝膠電泳來(lái)鑒定PCR的產(chǎn)物12．聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR)是一種用于擴(kuò)增特定DNA片段的分子生物學(xué)技術(shù)。下列關(guān)于PCR引物的敘述，不正確的是()A．為保證模板鏈與引物結(jié)合的效率，兩種引物之間盡量避免存在互補(bǔ)序列B．為了便于將擴(kuò)增的DNA片段與載體連接，可在引物的3′端加上限制酶識(shí)別序列C．在兩種引物上設(shè)計(jì)加入不同的限制酶識(shí)別序列，主要目的是使目的基因定向插入載體并可避免目的基因自身環(huán)化D．復(fù)性所需的溫度、時(shí)長(zhǎng)和延伸所需的溫度、時(shí)長(zhǎng)均與引物有關(guān)13．基因工程中可以通過(guò)PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因?；卮鹣铝袉?wèn)題：(1)生物體細(xì)胞內(nèi)的DNA復(fù)制開始時(shí)，解開DNA雙鏈的酶是______________。在體外利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因時(shí)，使反應(yīng)體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是_______________。上述兩個(gè)解鏈過(guò)程的共同點(diǎn)是破壞了DNA雙鏈分子中的______________________________。(2)目前在PCR反應(yīng)中不使用大腸桿菌DNA聚合酶的主要原因是______________________________________________________________________________________________________。(3)含有限制酶的細(xì)胞中通常還具有相應(yīng)的甲基化酶，這兩種酶對(duì)DNA分子有相同的作用序列，但具有不同的催化功能。甲基化酶可以對(duì)DNA序列進(jìn)行修飾，使限制酶不能對(duì)這一序列進(jìn)行識(shí)別和切割。含有某種限制酶的細(xì)胞，可以利用限制酶切割外源DNA，但不破壞細(xì)胞自身的DNA，其原因可能有：①___________________________________________________________________________________________________________________________________；②_____________________________________________________________________________________________________________________________________________________________。(4)利用PCR擴(kuò)增目的基因的過(guò)程由高溫變性(90℃以上)、低溫復(fù)性(50℃左右)、適溫延伸(72℃左右)三個(gè)步驟構(gòu)成一個(gè)循環(huán)，為使得DNA聚合酶能夠重復(fù)利用，選用的酶應(yīng)在_______處理后仍然具備催化活性。14．(2023·江蘇鎮(zhèn)江高二聯(lián)考)某質(zhì)粒上有SalⅠ、HindⅢ、BamHⅠ三種限制酶切割位點(diǎn)，同時(shí)還含有四環(huán)素抗性基因和氨芐青霉素抗性基因。利用此質(zhì)粒獲得轉(zhuǎn)基因抗鹽煙草的過(guò)程如圖1所示，請(qǐng)回答下列問(wèn)題：(1)將抗鹽基因?qū)霟煵菁?xì)胞內(nèi)，使煙草植株產(chǎn)生抗鹽性狀，這種新性狀(變異性狀)的來(lái)源屬于____________。(2)如果將抗鹽基因直接導(dǎo)入煙草細(xì)胞，一般情況下，煙草不會(huì)具有抗鹽特性，原因是抗鹽基因在煙草細(xì)胞中不能________，也不能______________________________________________。(3)在構(gòu)建重組質(zhì)粒時(shí)，應(yīng)選用______________________兩種酶對(duì)質(zhì)粒和含抗鹽基因的DNA進(jìn)行切割，以保證重組DNA序列的唯一性。(4)如圖2表示運(yùn)用影印培養(yǎng)法(使一系列培養(yǎng)皿的相同位置上能出現(xiàn)相同菌落的一種接種培養(yǎng)方法)檢測(cè)基因表達(dá)載體是否導(dǎo)入了農(nóng)桿菌。培養(yǎng)基除了含有細(xì)菌生長(zhǎng)繁殖必需的成分外，培養(yǎng)基A和培養(yǎng)基B分別還含有____________、____________。從檢測(cè)篩選的結(jié)果分析，含有目的基因的是____________(填圖2中的數(shù)字)菌落中的細(xì)菌。第2課時(shí)題組一將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞1．我國(guó)科學(xué)家獨(dú)創(chuàng)的花粉管通道法，可以使目的基因借助花粉管通道進(jìn)入受體細(xì)胞，是一種十分簡(jiǎn)便經(jīng)濟(jì)的方法，對(duì)此認(rèn)識(shí)正確的是()A．不必構(gòu)建表達(dá)載體就可以直接導(dǎo)入B．此方法可用于轉(zhuǎn)基因動(dòng)物C．受體細(xì)胞只能是植物的卵細(xì)胞D．有時(shí)可以取代農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法2．(2023·福建南平高二檢測(cè))下列關(guān)于將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞的敘述，錯(cuò)誤的是()A．用一定濃度的CaCl2溶液處理大腸桿菌，以改變大腸桿菌細(xì)胞的生理狀態(tài)B．將目的基因轉(zhuǎn)入微生物細(xì)胞常用顯微注射法C．對(duì)于動(dòng)物來(lái)說(shuō)，受體細(xì)胞一般是受精卵D．通過(guò)基因工程大量獲得胰島素時(shí)，受體細(xì)胞選擇酵母菌比大腸桿菌更有優(yōu)勢(shì)題組二目的基因的檢測(cè)與鑒定3．(2023·吉林白城高二期末)利用外源基因在受體細(xì)胞中表達(dá)，可生產(chǎn)人類所需要的產(chǎn)品。下列各項(xiàng)中能說(shuō)明目的基因在受體細(xì)胞中完成了表達(dá)的是()A．從酵母菌細(xì)胞中提取到人干擾素蛋白B．山羊乳腺細(xì)胞中檢測(cè)到人生長(zhǎng)激素DNA序列C．大腸桿菌中檢測(cè)到人胰島素基因及其mRNAD．棉花二倍體細(xì)胞中檢測(cè)到細(xì)菌的抗蟲基因4．目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞后，需要檢測(cè)目的基因是否可以維持穩(wěn)定和表達(dá)其遺傳特性。下列關(guān)于目的基因的檢測(cè)和鑒定的敘述，正確的是()A．目的基因能否在受體細(xì)胞中穩(wěn)定遺傳的關(guān)鍵是能否轉(zhuǎn)錄出mRNAB．可采用PCR檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄和翻譯C．可從轉(zhuǎn)基因生物中提取蛋白質(zhì)來(lái)檢測(cè)目的基因是否翻譯成相應(yīng)蛋白質(zhì)D．抗蟲、抗病檢驗(yàn)用于確定轉(zhuǎn)基因生物是否具備相關(guān)性狀屬于分子水平的檢測(cè)題組三基因工程基本操作程序5．下列敘述不正確的是()A．啟動(dòng)子是RNA聚合酶識(shí)別和結(jié)合的位點(diǎn)B．在基因工程的基本步驟中，不進(jìn)行堿基互補(bǔ)配對(duì)的是將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞C．細(xì)菌常常用作基因工程的受體細(xì)胞，主要原因是繁殖速度快D．某醫(yī)學(xué)遺傳研究所成功培育出第一頭攜帶人白蛋白基因的轉(zhuǎn)基因牛，可以想象這頭牛發(fā)生了基因突變6．科學(xué)家將人的生長(zhǎng)激素基因與某種細(xì)菌(不含抗生素抗性基因)的DNA分子進(jìn)行重組，并成功地在該細(xì)菌中得以表達(dá)(如圖)。下列相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是()A．過(guò)程①合成人生長(zhǎng)激素基因的過(guò)程需要用到逆轉(zhuǎn)錄酶B．過(guò)程③是將重組質(zhì)粒溶于緩沖液后與經(jīng)Ca2＋處理的細(xì)菌B混合C．成功導(dǎo)入了重組質(zhì)粒的細(xì)菌B在含有氨芐青霉素的培養(yǎng)基上不能生長(zhǎng)D．可采用抗原—抗體雜交技術(shù)檢測(cè)工程菌中生長(zhǎng)激素基因是否成功表達(dá)7．科學(xué)家通過(guò)改變一種名為NR2B的基因研制出了轉(zhuǎn)基因超級(jí)小鼠Hobbie－J，Hobbie－J比普通老鼠更加聰明，大腦運(yùn)轉(zhuǎn)更加迅速，它能夠輕松完成迷宮任務(wù)。下列關(guān)于Hobbie－J產(chǎn)生過(guò)程的描述，錯(cuò)誤的是()A．NR2B基因可通過(guò)PCR技術(shù)進(jìn)行擴(kuò)增B．改變后的NR2B基因作為目的基因，可直接注入小鼠受精卵內(nèi)C．通常采用顯微注射技術(shù)將改變后的NR2B基因重組質(zhì)粒導(dǎo)入小鼠受精卵內(nèi)D．可采用PCR等技術(shù)檢測(cè)改變后的NR2B基因是否插入到小鼠染色體DNA8．下列敘述正確的是()A．欲培育出在肝細(xì)胞特異性表達(dá)目的基因的轉(zhuǎn)基因小鼠，需將基因表達(dá)載體導(dǎo)入小鼠肝細(xì)胞B．PCR擴(kuò)增目的基因需設(shè)計(jì)特異性的引物C．構(gòu)建表達(dá)載體需要限制酶和RNA聚合酶D．通過(guò)PCR檢測(cè)目的基因是否完成表達(dá)9．(2023·江蘇淮安高二質(zhì)檢)α1-抗胰蛋白酶缺乏癥是北美常見(jiàn)的一種單基因遺傳病，患者成年后會(huì)出現(xiàn)肺氣腫及其他疾病，嚴(yán)重者甚至死亡。利用基因工程技術(shù)將控制該酶合成的基因?qū)胙虻氖芫?，最終培育出能在乳腺細(xì)胞表達(dá)人α1-抗胰蛋白酶的轉(zhuǎn)基因羊，從而更容易獲得這種酶。下列關(guān)于該過(guò)程的敘述中，錯(cuò)誤的是()A．載體上綠色熒光蛋白基因(GFP基因)的作用是便于篩選含有目的基因的受體細(xì)胞B．將目的基因?qū)胙蚴芫阎?，可以使用顯微注射法C．培養(yǎng)出的轉(zhuǎn)基因羊的所有細(xì)胞中都含有該目的基因，故該羊有性生殖產(chǎn)生的后代也都能產(chǎn)生α1-抗胰蛋白酶D．轉(zhuǎn)基因母羊乳腺細(xì)胞中α1-抗胰蛋白酶基因才會(huì)得以表達(dá)，因此可以從乳汁中提取α1-抗胰蛋白酶10．研究人員用三種基因探針，通過(guò)分子雜交技術(shù)分別對(duì)某動(dòng)物三種細(xì)胞中的mRNA進(jìn)行檢測(cè)，結(jié)果(有無(wú)雜交帶)如表所示。下列說(shuō)法正確的是()探針細(xì)胞輸卵管細(xì)胞未成熟紅細(xì)胞胰島B細(xì)胞卵清蛋白基因探針有無(wú)無(wú)β-珠蛋白基因探針無(wú)有無(wú)胰島素基因探針無(wú)無(wú)有A.不出現(xiàn)雜交帶表明相應(yīng)基因不表達(dá)B．三種探針中的核苷酸序列相同C．三種細(xì)胞中蛋白質(zhì)種類完全不同D．用上述探針?lè)謩e檢測(cè)三種細(xì)胞的DNA，實(shí)驗(yàn)結(jié)果不變11．(2023·山東煙臺(tái)高二期中)如圖是利用轉(zhuǎn)基因技術(shù)培育新品種植物的部分操作程序，下列相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是()A．過(guò)程①需使用不同的限制酶切割B．過(guò)程②需用T4DNA連接酶連接C．過(guò)程③需采用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法介導(dǎo)D．過(guò)程④需采用選擇性培養(yǎng)基進(jìn)行篩選12．番茄葉片受害蟲的損傷后，葉肉細(xì)胞迅速合成蛋白酶抑制劑，抑制害蟲的消化作用。人們嘗試將番茄的蛋白酶抑制劑基因?qū)胗衩祝詫?duì)付猖獗的玉米螟。如圖為培育轉(zhuǎn)基因抗蟲玉米的流程圖，下列有關(guān)敘述正確的是()A．用限制性內(nèi)切核酸酶切割番茄的DNA得到的產(chǎn)物就是蛋白酶抑制劑基因B．用Ca2＋處理玉米受體細(xì)胞，有利于含目的基因的重組質(zhì)粒導(dǎo)入C．重組Ti質(zhì)粒應(yīng)有RNA聚合酶識(shí)別和結(jié)合的部位，以啟動(dòng)蛋白酶抑制劑基因的轉(zhuǎn)錄D．若將目的基因?qū)胗衩谆ǚ奂?xì)胞，通過(guò)花藥離體培養(yǎng)可獲得穩(wěn)定遺傳的轉(zhuǎn)基因玉米13.(2023·河北承德高二期末)科學(xué)家通過(guò)基因工程技術(shù)，將蘇云金桿菌的Bt抗蟲蛋白基因轉(zhuǎn)入到普通棉株細(xì)胞內(nèi)，并成功實(shí)現(xiàn)了表達(dá)，從而培育出了能抗棉鈴蟲的棉花植株——抗蟲棉。其大致過(guò)程如圖所示，分析回答下列問(wèn)題：(1)用Ti質(zhì)粒作為載體，是因?yàn)門i質(zhì)粒上有____________，它能將Bt抗蟲蛋白基因整合到棉花細(xì)胞的____________________上。(2)將Bt抗蟲蛋白基因?qū)朊藁?xì)胞內(nèi)采用的方法是____________________。將基因表達(dá)載體轉(zhuǎn)入農(nóng)桿菌，首先必須用________處理農(nóng)桿菌。(3)檢測(cè)Bt抗蟲蛋白基因在抗蟲棉中是否成功表達(dá)，在分子水平上的檢測(cè)方法是___________；要確定抗蟲棉是否具有抗蟲特性，還需要進(jìn)行____________水平的鑒定。14．大腸桿菌pUC18質(zhì)粒是基因工程中常用的載體。某限制酶在此質(zhì)粒上的唯一酶切位點(diǎn)位于LacZ基因中，如果沒(méi)有插入外源基因，LacZ基因便可表達(dá)出β-半乳糖苷酶。當(dāng)培養(yǎng)基中含有IPTG和X－gal時(shí)，X－gal便會(huì)被β-半乳糖苷酶水解成藍(lán)色，大腸桿菌將形成藍(lán)色菌落。反之，則形成白色菌落。如圖表示利用此質(zhì)粒實(shí)施基因工程的主要流程。請(qǐng)分析并回答下列問(wèn)題：(1)對(duì)已獲得的目的基因可利用__________技術(shù)進(jìn)行擴(kuò)增。(2)目的基因插入質(zhì)粒構(gòu)建重組質(zhì)粒的過(guò)程中，需要用DNA連接酶恢復(fù)____________鍵。(3)將試管Ⅰ中的物質(zhì)和大腸桿菌共同置于試管Ⅱ的目的是________________；大腸桿菌需事先用Ca2＋進(jìn)行處理，目的是________________________________________________________________________________________________________________________________________。(4)將試管Ⅱ中的菌液接種于選擇培養(yǎng)基上培養(yǎng)，培養(yǎng)基中應(yīng)含有大腸桿菌必需的物質(zhì)____________________________________和生長(zhǎng)因子，還應(yīng)加入IPTG、X－gal以及氨芐青霉素，其中加入氨芐青霉素的作用是篩選出____________________________________________________________________________________________________________________________。(5)若觀察到培養(yǎng)基上出現(xiàn)__________色菌落，則說(shuō)明大腸桿菌中已成功導(dǎo)入了重組質(zhì)粒。如果作為受體細(xì)胞的大腸桿菌也含有LacZ基因，則不利于重組質(zhì)粒的篩選，原因是__________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________。第3節(jié)基因工程的應(yīng)用題組一基因工程在農(nóng)牧業(yè)方面的應(yīng)用1．下列說(shuō)法正確的是()A．基因工程培育的抗蟲植物也能抗病毒B．動(dòng)物基因工程的應(yīng)用是培育體型巨大、品質(zhì)優(yōu)良的珍稀動(dòng)物C．基因工程可用來(lái)培育高產(chǎn)、穩(wěn)產(chǎn)、品質(zhì)優(yōu)良和抗逆性強(qiáng)的作物D．科學(xué)家將必需氨基酸含量多的蛋白質(zhì)導(dǎo)入植物體中，以提高氨基酸的含量2．科學(xué)家利用基因工程培育出了耐鹽的轉(zhuǎn)基因棉花新品系，下列相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是()A．可通過(guò)農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法將重組質(zhì)粒導(dǎo)入受體細(xì)胞B．含耐鹽基因的棉花細(xì)胞可經(jīng)植物組織培養(yǎng)獲得完整植株C．可用較高濃度的鹽水澆灌來(lái)鑒定棉花植株的耐鹽性D．如果目的基因的核苷酸序列是全部未知的，可用PCR技術(shù)得到大量目的基因3．(2023·湖南益陽(yáng)高二期末)SOD是一種抗氧化酶，它能將Oeq\o\al(－,2)轉(zhuǎn)化成H2O2，增強(qiáng)植物的抗逆性。如圖為培育農(nóng)作物新品種的一種方式。下列有關(guān)敘述正確的是()A．過(guò)程①可以用動(dòng)物病毒作為載體B．從該農(nóng)作物新品種的細(xì)胞中檢測(cè)出了SOD基因，說(shuō)明該基因工程成功了C．新品種的獲得屬于可遺傳的變異，可能將抗逆性狀遺傳給子代D．基因工程又叫重組DNA技術(shù)，所用工具酶有限制酶、DNA連接酶和載體4．(2023·河南平頂山高二聯(lián)考)科研人員將野生大豆GsSAMS基因(S－腺苷甲硫氨酸合成酶基因)導(dǎo)入水稻，獲得轉(zhuǎn)基因株系，與野生型相比轉(zhuǎn)基因水稻的鹽堿脅迫耐受性明顯提高。下列有關(guān)說(shuō)法錯(cuò)誤的是()A．推測(cè)GsSAMS基因會(huì)阻礙植物滲透調(diào)節(jié)過(guò)程相關(guān)基因的表達(dá)B．培育轉(zhuǎn)基因水稻的核心工作是過(guò)程①構(gòu)建基因表達(dá)載體C．導(dǎo)入基因表達(dá)載體可采用過(guò)程②③農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法侵染水稻愈傷組織D．過(guò)程④依據(jù)植物細(xì)胞的全能性原理題組二基因工程在醫(yī)藥衛(wèi)生及食品工業(yè)方面的應(yīng)用5．基因工程應(yīng)用廣泛，成果豐碩。下列不屬于基因工程應(yīng)用的是()A．制造能降解石油的“超級(jí)細(xì)菌”B．利用乳腺生物反應(yīng)器生產(chǎn)藥物C．從大腸桿菌細(xì)胞內(nèi)獲得干擾素D．培育青霉菌并從中提取青霉素6．利用轉(zhuǎn)基因山羊乳腺生物反應(yīng)器生產(chǎn)丁酰膽堿酯酶，可治療有機(jī)磷中毒。下列有關(guān)敘述錯(cuò)誤的是()A．應(yīng)該用山羊乳腺中特異表達(dá)的基因的啟動(dòng)子構(gòu)建基因表達(dá)載體B．通過(guò)體細(xì)胞克隆可將丁酰膽堿酯酶基因傳遞給子代C．通過(guò)顯微注射技術(shù)將基因表達(dá)載體導(dǎo)入山羊乳腺細(xì)胞D．山羊乳腺細(xì)胞可將肽鏈加工成具有一定空間結(jié)構(gòu)的丁酰膽堿酯酶7．從轉(zhuǎn)基因牛、羊乳汁中提取藥物工藝簡(jiǎn)單，甚至可直接飲用治病。如果將藥用蛋白基因轉(zhuǎn)入動(dòng)物如牛、羊的膀胱上皮細(xì)胞中，從轉(zhuǎn)基因牛、羊尿液中提取藥物比從乳汁中提取藥物的更大優(yōu)越性在于()A．技術(shù)簡(jiǎn)單B．膀胱上皮細(xì)胞容易表達(dá)藥用蛋白C．膀胱上皮細(xì)胞全能性較高D．無(wú)論是雌性還是雄性個(gè)體，在任何發(fā)育時(shí)期都可以產(chǎn)生所需藥物8．(2023·江蘇無(wú)錫高二期末)接種疫苗是預(yù)防傳染病的重要措施。如圖為一種以人復(fù)制缺陷腺病毒(缺失EI基因)為載體的某埃博拉病毒疫苗研制流程。下列有關(guān)敘述錯(cuò)誤的是()A．構(gòu)建含GP基因的質(zhì)粒時(shí)，需要使用限制酶和DNA連接酶B．在重組腺病毒中，GP基因上游必須有啟動(dòng)子以驅(qū)動(dòng)其復(fù)制和表達(dá)C．疫苗在人體內(nèi)發(fā)揮作用的過(guò)程中，腺病毒起載體作用D．疫苗中的重組腺病毒在人體內(nèi)不能復(fù)制，對(duì)接種者比較安全9．(2023·廣東珠海高二期中)如圖為轉(zhuǎn)基因抗凍番茄培育過(guò)程的示意圖(其中AmpR為氨芐青霉素抗性基因)。下列敘述正確的是()A．質(zhì)粒上的抗性基因有利于篩選含目的基因的細(xì)胞和促進(jìn)目的基因的表達(dá)B．過(guò)程①選用限制酶PstⅠ、AluⅠ對(duì)含目的基因的DNA和質(zhì)粒進(jìn)行剪切C．過(guò)程②可用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法將含目的基因的表達(dá)載體導(dǎo)入受體細(xì)胞D．過(guò)程④中可利用含氨芐青霉素的培養(yǎng)基對(duì)植株進(jìn)行篩選10．(2023·北京昌平高二期中)戊型肝炎病毒是一種RNA病毒，其基因組中ORF2基因編碼的A．利用特定引物對(duì)病毒RNA進(jìn)行PCR擴(kuò)增即可獲得目的基因B．戊型肝炎病毒與大腸桿菌遺傳物質(zhì)相同，所以能實(shí)現(xiàn)基因的重組C．構(gòu)建基因表達(dá)載體時(shí)，需將編碼pORF2的DNA與啟動(dòng)子連接D．利用該方法獲得的疫苗會(huì)誘發(fā)體液免疫和細(xì)胞免疫并可以產(chǎn)生記憶細(xì)胞11．(2023·貴州安順高二月考)如圖是科研人員利用乙烯形成酶的反義基因，通過(guò)轉(zhuǎn)基因技術(shù)獲得耐儲(chǔ)存的轉(zhuǎn)基因番茄的過(guò)程。下列相關(guān)敘述不正確的是()A．該轉(zhuǎn)基因技術(shù)所用的目的基因是乙烯形成酶基因B．乙烯形成酶的反義基因與乙烯形成酶基因的區(qū)別是轉(zhuǎn)錄的模板鏈不同C．由圖可知，過(guò)程⑤依據(jù)的原理是堿基互補(bǔ)配對(duì)原則D．轉(zhuǎn)基因番茄中乙烯含量低的原因可能是乙烯形成酶基因的翻譯過(guò)程受阻12．科學(xué)家培養(yǎng)的轉(zhuǎn)基因牛乳腺細(xì)胞能夠合成并分泌人的凝血因子，這是動(dòng)物乳房作為生物反應(yīng)器研究的重大進(jìn)展。下列敘述正確的是()A．在該轉(zhuǎn)基因牛中，人凝血因子基因只存在于乳腺細(xì)胞，而不存在于其他體細(xì)胞中B．提高基因表達(dá)水平是指設(shè)法使牛的乳腺細(xì)胞中含有更多的人的凝血因子基因C．人凝血因子基因開始轉(zhuǎn)錄后，DNA聚合酶以DNA分子的一條鏈為模板合成mRNAD．轉(zhuǎn)基因牛需要進(jìn)入泌乳期才能批量生產(chǎn)人的凝血因子13．如圖為利用生物技術(shù)獲得生物新品種的過(guò)程，據(jù)圖回答下列問(wèn)題：(1)在基因工程中，A表示目的基因，如果直接從蘇云金桿菌中獲得抗蟲基因，①過(guò)程使用的酶是________________；B表示構(gòu)建的基因表達(dá)載體，其組成除了目的基因外，還必須有啟動(dòng)子、終止子、復(fù)制原點(diǎn)以及________________等，其中啟動(dòng)子是________________酶識(shí)別和結(jié)合的部位。(2)B→C為轉(zhuǎn)基因綿羊的培育過(guò)程，其中②過(guò)程常用的方法是________________，使用的綿羊受體細(xì)胞為________________，④過(guò)程用到的生物技術(shù)主要有動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)和__________。若轉(zhuǎn)基因綿羊可通過(guò)分泌的乳汁來(lái)生產(chǎn)人類蛋白質(zhì)，在基因表達(dá)載體中，目的基因的首端必須含有____________________________________，這種轉(zhuǎn)基因動(dòng)物被稱為______________。(3)B→D為轉(zhuǎn)基因抗蟲棉的培育過(guò)程，其中③過(guò)程常用的方法是________________，若使用的棉花受體細(xì)胞為體細(xì)胞，⑤表示的生物技術(shù)是____________________。要確定目的基因(抗蟲基因)導(dǎo)入受體細(xì)胞后，是否能穩(wěn)定遺傳并表達(dá)，需進(jìn)行檢測(cè)和鑒定工作，檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA的方法是________________。14．(2023·河北衡水高二期中)為提高棉花的耐鹽能力，研究者將徑柳匙葉草液泡膜Na＋/K＋逆向轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白基因(TaNHX2基因)轉(zhuǎn)移到棉花細(xì)胞內(nèi)，獲得耐鹽棉花?；卮鹣铝袉?wèn)題：(1)在目的基因的獲取時(shí)會(huì)用到限制酶，該酶主要來(lái)源于原核細(xì)胞，而原核細(xì)胞中DNA是裸露的，推斷限制酶不切割自身DNA的原因是_________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________。(2)通過(guò)逆轉(zhuǎn)錄的方法獲得的TaNHX2基因若要正常表達(dá)，需要在基因上連接調(diào)控序列______________，采用PCR技術(shù)對(duì)目的基因進(jìn)行擴(kuò)增時(shí)必須有引物，原因是_____________________________________________________________________________________________________。引物不能循環(huán)利用的原因是_______________________________________________________________________________________________________________________________________。(3)將目的基因?qū)朊藁?xì)胞有多種方法，我國(guó)獨(dú)創(chuàng)的方法是__________________，為檢測(cè)棉花轉(zhuǎn)基因是否成功，可采用個(gè)體水平的檢測(cè)方法，即___________________________________________________________________________________________________________________，完成轉(zhuǎn)基因的棉花表現(xiàn)出耐鹽特性的機(jī)理是___________________________________________________________________________________________________________________，使棉花耐鹽性增強(qiáng)。第4節(jié)蛋白質(zhì)工程的原理和應(yīng)用題組一蛋白質(zhì)工程1．下列關(guān)于蛋白質(zhì)工程的說(shuō)法，錯(cuò)誤的是()A．蛋白質(zhì)工程能定向改造蛋白質(zhì)分子的結(jié)構(gòu)，使之更加符合人類需要B．蛋白質(zhì)工程是在分子水平上對(duì)蛋白質(zhì)分子直接進(jìn)行操作，定向改變分子的結(jié)構(gòu)C．蛋白質(zhì)工程能產(chǎn)生自然界中不曾存在的新型蛋白質(zhì)分子D．蛋白質(zhì)工程的操作起點(diǎn)是從預(yù)期的蛋白質(zhì)功能出發(fā)，設(shè)計(jì)出相應(yīng)的基因，并借助基因工程實(shí)現(xiàn)2．(2023·陜西咸陽(yáng)高二期末)某生物中發(fā)現(xiàn)一種基因的表達(dá)產(chǎn)物是具有較強(qiáng)抗菌性和溶血性的多肽P1，科研人員預(yù)期在P1的基礎(chǔ)上研發(fā)抗菌性強(qiáng)但溶血性弱的蛋白質(zhì)藥物，下一步要做的是()A．構(gòu)建含目的肽DNA片段的表達(dá)載體B．合成編碼多肽P1的DNA片段C．設(shè)計(jì)抗菌性強(qiáng)但溶血性弱的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)D．利用抗原—抗體雜交的方法對(duì)表達(dá)產(chǎn)物進(jìn)行檢測(cè)3．(2023·河北唐山高二期末)科學(xué)家將胰島素的第28和29位的氨基酸調(diào)換順序，成功獲得了速效胰島素，生產(chǎn)速效胰島素時(shí)需要定向改造的對(duì)象是()A．胰島素 B．胰島素mRNAC．胰島素基因 D．胰島B細(xì)胞4．蛋白質(zhì)工程是在深入了解蛋白質(zhì)分子的結(jié)構(gòu)與功能關(guān)系的基礎(chǔ)上進(jìn)行的，它最終要達(dá)到的目的是()A．分析蛋白質(zhì)的三維結(jié)構(gòu)B．研究蛋白質(zhì)的氨基酸組成C．獲取編碼蛋白質(zhì)的基因序列信息D．改造現(xiàn)有蛋白質(zhì)或制造新的蛋白質(zhì)5．蛋白質(zhì)工程中，要對(duì)蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)進(jìn)行設(shè)計(jì)改造，必須通過(guò)改造或合成基因來(lái)完成，而不直接改造蛋白質(zhì)的原因是()A．缺乏改造蛋白質(zhì)所必需的工具酶B．改造基因易于操作且改造后能夠遺傳C．人類對(duì)大多數(shù)蛋白質(zhì)高級(jí)結(jié)構(gòu)知之甚少D．蛋白質(zhì)中氨基酸的排列順序千變?nèi)f化，操作難度大6．(2023·福建泉州高二質(zhì)檢)下列不屬于蛋白質(zhì)工程的成果的是()A．改造蛋白質(zhì)類酶的結(jié)構(gòu)，提高其熱穩(wěn)定性B．生產(chǎn)鼠—人嵌合抗體C．將干擾素分子中的半胱氨酸替換為絲氨酸D．將人的胰島素基因整合到大腸桿菌體內(nèi)生產(chǎn)胰島素題組二蛋白質(zhì)工程與基因工程的比較7．下列有關(guān)基因工程和蛋白質(zhì)工程的敘述，錯(cuò)誤的是()A．基因工程是一種在體外進(jìn)行的重組DNA技術(shù)B．通過(guò)蛋白質(zhì)工程可以獲得功能更符合人類需求的蛋白質(zhì)C．基因工程可以改造出更符合人類需求的新的生物類型和生物產(chǎn)品D．基因工程和蛋白質(zhì)工程分別在DNA分子水平和蛋白質(zhì)分子水平上進(jìn)行設(shè)計(jì)和施工8．(2023·天津河北區(qū)高二診斷)基因工程與蛋白質(zhì)工程的區(qū)別是()A．基因工程需對(duì)基因進(jìn)行操作，蛋白質(zhì)工程不對(duì)基因進(jìn)行操作B．基因工程合成的是天然存在的蛋白質(zhì)，蛋白質(zhì)工程可以合成非天然存在的蛋白質(zhì)C．基因工程是分子水平操作，蛋白質(zhì)工程是細(xì)胞水平(或性狀水平)操作D．基因工程完全不同于蛋白質(zhì)工程9．已知生物體內(nèi)有一種轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白Y，由300個(gè)氨基酸組成。如果將Y中157位的L-異亮氨酸變成亮氨酸，261位的酪氨酸變成絲氨酸，改變后的蛋白質(zhì)Y1不但保留了原有Y的功能，且具備了催化活性。下列說(shuō)法正確的是()A．蛋白質(zhì)工程和基因工程的根本區(qū)別是操作對(duì)象的差異B．可以通過(guò)對(duì)Y蛋白基因進(jìn)行修飾或人工合成獲得Y1蛋白基因C．蛋白質(zhì)工程操作過(guò)程中，不需要酶和載體作為工具D．細(xì)胞內(nèi)合成Y1蛋白與Y蛋白的過(guò)程中，遺傳信息的流向是相反的10．干擾素是動(dòng)物體內(nèi)的一種蛋白質(zhì)，可以用于治療病毒的感染和癌癥，但在體外保存相當(dāng)困難。如圖是利用蛋白質(zhì)工程設(shè)計(jì)保存干擾素的生產(chǎn)流程圖，據(jù)圖分析，下列敘述不正確的是()A．圖中構(gòu)建新的干擾素模型的主要依據(jù)是蛋白質(zhì)的預(yù)期功能B．圖中新的干擾素基因必須加上啟動(dòng)子和終止子才能表達(dá)C．圖中改造干擾素結(jié)構(gòu)的實(shí)質(zhì)是改造干擾素基因的結(jié)構(gòu)D．圖中各項(xiàng)技術(shù)并沒(méi)有涉及基因工程技術(shù)11．(2023·安徽黃山高二期中)蛋白質(zhì)工程取得的進(jìn)展向人們展示出誘人的前景，下列有關(guān)說(shuō)法正確的是()A．蛋白質(zhì)工程的基礎(chǔ)是蛋白質(zhì)分子的結(jié)構(gòu)規(guī)律及其與生物功能的關(guān)系B．蛋白質(zhì)工程與天然蛋白質(zhì)合成的流程相同C．蛋白質(zhì)工程在各個(gè)領(lǐng)域有廣泛應(yīng)用D．當(dāng)前限制蛋白質(zhì)工程發(fā)展的關(guān)鍵因素是基因工程技術(shù)還不成熟12．如圖是科學(xué)家對(duì)鼠源雜交瘤抗體進(jìn)行改造，生產(chǎn)出效果更好的鼠—人嵌合抗體的過(guò)程。下列有關(guān)說(shuō)法錯(cuò)誤的是()A．生產(chǎn)鼠—人嵌合抗體的過(guò)程屬于蛋白質(zhì)工程B．對(duì)鼠源雜交瘤抗體進(jìn)行改造的難點(diǎn)是設(shè)計(jì)嵌合抗體的空間結(jié)構(gòu)C．對(duì)鼠源雜交瘤抗體進(jìn)行改造，是通過(guò)基因定點(diǎn)誘變技術(shù)改造基因?qū)崿F(xiàn)的D．鼠—人嵌合抗體的使用對(duì)人體的副作用減少13．賴氨酸是人體必需氨基酸之一，能促進(jìn)人體發(fā)育、增強(qiáng)免疫功能，并有提高中樞神經(jīng)組織功能的作用。某農(nóng)科所科技人員欲通過(guò)將玉米某種蛋白酶改造成“M酶”，從而大大提高玉米種子中賴氨酸的含量，以期待培育出高賴氨酸玉米新品種。請(qǐng)回答下列問(wèn)題：(1)科技人員先從“提高玉米種子中賴氨酸的含量”這一功能出發(fā)，預(yù)期構(gòu)建出________的結(jié)構(gòu)，再推測(cè)出相對(duì)應(yīng)目的基因的____________序列，最終合成“M酶”基因。(2)科技人員獲得“M酶”基因后，常利用________技術(shù)在體外將其大量擴(kuò)增，此過(guò)程需要一種特殊的酶是________________________________。(3)“M酶”基因只有插入______________________________，才能確?！癕酶”基因在玉米細(xì)胞中穩(wěn)定遺傳?？萍既藛T將“M酶”基因?qū)胗衩准?xì)胞中需要借助________的運(yùn)輸。(4)依據(jù)__________________________的原理，可將含有“M酶”基因的玉米細(xì)胞培育成轉(zhuǎn)“M酶”基因的玉米植株。為了確保育種成功，科技人員需要通過(guò)_______________________，從個(gè)體水平加以鑒定。14.(2022·湖南，22)水蛭是我國(guó)的傳統(tǒng)中藥材，主要藥理成分水蛭素為水蛭蛋白中重要成分之一，具有良好的抗凝血作用。擬通過(guò)蛋白質(zhì)工程改造水蛭素結(jié)構(gòu)，提高其抗凝血活性。回答下列問(wèn)題：(1)蛋白質(zhì)工程流程如圖所示，物質(zhì)a是__________________________，物質(zhì)b是__________。在生產(chǎn)過(guò)程中，物質(zhì)b可能不同，合成的蛋白質(zhì)空間構(gòu)象卻相同，原因是_________________________________________________________________________________________________。(2)蛋白質(zhì)工程是基因工程的延伸，基因工程中獲取目的基因的常用方法有_____________________________________________、__________________________________________________和利用PCR技術(shù)擴(kuò)增。PCR技術(shù)遵循的基本原理是____________________________________。(3)將提取的水蛭蛋白經(jīng)甲、乙兩種蛋白酶水解后，分析水解產(chǎn)物中的肽含量及其抗凝血活性，結(jié)果如圖所示。推測(cè)兩種處理后酶解產(chǎn)物的抗凝血活性差異主要與肽的______(填“種類”或“含量”)有關(guān)，導(dǎo)致其活性不同的原因是___________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________。(4)若要比較蛋白質(zhì)工程改造后的水蛭素、上述水蛭蛋白酶解產(chǎn)物和天然水蛭素的抗凝血活性差異，簡(jiǎn)要寫出實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)思路。章末檢測(cè)試卷(三)(滿分：100分)一、選擇題(本題包括18小題，每小題3分，共54分)1．(2023·江蘇泰州高二模擬)下列有關(guān)酶的敘述，正確的是()A．DNA連接酶以DNA的一條鏈為模板，將單個(gè)脫氧核苷酸連接起來(lái)B．限制性內(nèi)切核酸酶識(shí)別特定的核苷酸序列并在特定位點(diǎn)切割DNA分子C．DNA聚合酶可將兩個(gè)DNA分子片段連接起來(lái)D．逆轉(zhuǎn)錄酶是以RNA為模板指導(dǎo)核糖核苷酸連接合成DNA的酶2．基因工程中，需使用特定的限制酶切割目的基因和質(zhì)粒，便于重組和篩選。已知限制酶Ⅰ的識(shí)別序列和切點(diǎn)是—G↓GATCC—，限制酶Ⅱ的識(shí)別序列和切點(diǎn)是—↓GATC—。根據(jù)圖示判斷，下列操作正確的是()A．目的基因和質(zhì)粒均用限制酶Ⅱ切割B．目的基因和質(zhì)粒均用限制酶Ⅰ切割C．質(zhì)粒用限制酶Ⅰ切割，目的基因用限制酶Ⅱ切割D．質(zhì)粒用限制酶Ⅱ切割，目的基因用限制酶Ⅰ切割3．如圖為某質(zhì)粒限制酶酶切圖譜。某基因不含圖中限制酶識(shí)別序列。為使PCR擴(kuò)增的該基因與該質(zhì)粒構(gòu)建重組質(zhì)粒，則擴(kuò)增的該基因兩端需分別引入哪兩種限制酶的識(shí)別序列()A．NdeⅠ和BamHⅠB．NdeⅠ和XbaⅠC．XbaⅠ和BamHⅠD．EcoRⅠ和KpnⅠ4．(2023·貴州遵義高二檢測(cè))下列與DNA粗提取和鑒定有關(guān)的敘述，正確的是()A．預(yù)冷的酒精可使DNA更容易析出B．DNA在2mol·L－1的NaCl溶液中溶解度較低C．鑒定粗提取的DNA時(shí)，對(duì)照組與實(shí)驗(yàn)組的區(qū)別是加不加二苯胺試劑D．用同樣方法從等體積兔血和雞血中提取的DNA量相近5.科學(xué)家設(shè)法將生長(zhǎng)激素基因?qū)肫渌矬w(細(xì)胞)內(nèi)，從而獲取大量的生長(zhǎng)激素，應(yīng)用于侏儒癥的早期治療。部分過(guò)程如圖所示，下列有關(guān)分析錯(cuò)誤的是()A．人的生長(zhǎng)激素mRNA只能從人的垂體細(xì)胞中提取B．過(guò)程①需要逆轉(zhuǎn)錄酶的參與C．過(guò)程②之前可用同一種限制性內(nèi)切核酸酶處理目的基因和質(zhì)粒D．人的生長(zhǎng)激素基因可以導(dǎo)入其他生物細(xì)胞內(nèi)，說(shuō)明生物之間共用一套遺傳密碼6．(2023·河北邯鄲高二診斷)下列有關(guān)抗蟲基因表達(dá)載體的敘述，正確的是()A．切割含抗蟲基因的DNA片段和載體必須用同一種限制酶B．抗蟲基因表達(dá)載體中要有啟動(dòng)子和終止密碼子C．抗蟲基因表達(dá)載體必須具備標(biāo)記基因，其作用是篩選含有目的基因的受體細(xì)胞D．抗蟲基因的表達(dá)啟動(dòng)于復(fù)制原點(diǎn)7．如圖1為某種質(zhì)粒簡(jiǎn)圖，圖2表示某外源DNA上的目的基因，小箭頭所指分別為限制性內(nèi)切核酸酶EcoRⅠ、BamHⅠ、HindⅢ的酶切位點(diǎn)。下列有關(guān)敘述錯(cuò)誤的是()A．在基因工程中若只用一種限制酶完成對(duì)質(zhì)粒和外源DNA的切割，則可選EcoRⅠB．如果將一個(gè)外源DNA分子和一個(gè)質(zhì)粒分別用EcoRⅠ酶切后，再用DNA連接酶連接，形成一個(gè)含有目的基因的重組DNA，此重組DNA中EcoRⅠ酶切位點(diǎn)有1個(gè)C．D．一個(gè)圖1所示的質(zhì)粒分子經(jīng)EcoRⅠ切割后，含有2個(gè)游離的磷酸基團(tuán)8．如圖為利用生物技術(shù)獲得生物新品種的過(guò)程，下列有關(guān)說(shuō)法錯(cuò)誤的是()A．a(chǎn)→b過(guò)程中一般用4種脫氧核苷酸為原料，并加入兩種引物B．b→c為轉(zhuǎn)基因綿羊的培育過(guò)程，常選用的受體細(xì)胞是受精卵C．a(chǎn)→b過(guò)程利用了DNA半保留復(fù)制的原理，需要使用RNA聚合酶D．b→d為轉(zhuǎn)基因植物的培育過(guò)程，其中④過(guò)程常用的方法是農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法9．(2023·安徽六安高二期末)有些膀胱上皮細(xì)胞可以產(chǎn)生一種稱為尿血小板溶素的膜蛋白?？茖W(xué)家將人的生長(zhǎng)激素基因插入小鼠基因組內(nèi)制成膀胱生物反應(yīng)器，使小鼠膀胱可以合成人的生長(zhǎng)激素，并分泌到尿液中。下列有關(guān)說(shuō)法正確的是()A．人的生長(zhǎng)激素基因只存在于小鼠的膀胱上皮細(xì)胞中B．需要將尿血小板溶素基因與生長(zhǎng)激素基因的啟動(dòng)子重組在一起C．需用顯微注射法將基因表達(dá)載體導(dǎo)入膀胱上皮細(xì)胞中D．只在小鼠細(xì)胞中檢測(cè)到人的生長(zhǎng)激素基因，不能說(shuō)明該技術(shù)已獲得成功10．某研究小組為了研制預(yù)防禽流感病毒的疫苗，開展了前期研究工作。其簡(jiǎn)要的操作流程如圖所示。下列有關(guān)敘述錯(cuò)誤的是()eq\x(禽流感病毒)eq\o(→,\s\up7(提取))eq\x(RNA)eq\o(→,\s\up7(①))eq\x(DNA)eq\o(→,\s\up7(選擇性),\s\do5(擴(kuò)增))eq\x(Q基因)eq\o(→,\s\up7(②))eq\x(攜帶Q基因的重組質(zhì)粒)eq\o(→,\s\up7(③))eq\x(導(dǎo)入大腸桿菌)eq\o(→,\s\up7(④))eq\x(表達(dá)Q蛋白)A．步驟①所代表的過(guò)程是逆轉(zhuǎn)錄B．步驟②需使用限制性內(nèi)切核酸酶和DNA連接酶C．步驟③可用Ca2＋處理大腸桿菌，使細(xì)胞從一種能吸收周圍環(huán)境中DNA分子的生理狀態(tài)恢復(fù)到常態(tài)D．11．(2023·江蘇徐州高二期中)科學(xué)家為提高玉米中賴氨酸的含量，計(jì)劃將天冬氨酸激酶中第352位的蘇氨酸替換為異亮氨酸，將二氫吡啶二羧酸合成酶中第104位的天冬酰胺替換為異亮氨酸。下列有關(guān)說(shuō)法正確的是()A．蛋白質(zhì)工程和基因工程的根本區(qū)別是操作對(duì)象的差異B．對(duì)天冬氨酸激酶的改造需要以基因工程為基礎(chǔ)C．蛋白質(zhì)工程操作過(guò)程中，不需要酶和載體作為工具D．經(jīng)改造后的玉米賴氨酸含量提高這一性狀不可遺傳12．胰島素可以用于治療糖尿病，但是胰島素被注射到人體后，會(huì)堆積在皮下，要經(jīng)過(guò)較長(zhǎng)的時(shí)間才能進(jìn)入血液，而進(jìn)入血液的胰島素又容易分解，因此，治療效果受到影響。如圖是用蛋白質(zhì)工程設(shè)計(jì)速效胰島素的生產(chǎn)過(guò)程，請(qǐng)據(jù)圖推斷，下列相關(guān)說(shuō)法不正確的是()A．新的胰島素的預(yù)期功能是構(gòu)建新胰島素結(jié)構(gòu)模型的主要依據(jù)B．通過(guò)人工合成形成的新基因應(yīng)與原基因結(jié)合后轉(zhuǎn)移到大腸桿菌等受體細(xì)胞中才能得到準(zhǔn)確表達(dá)C．若要利用大腸桿菌生產(chǎn)速效胰島素，需用到的生物工程有蛋白質(zhì)工程、基因工程和發(fā)酵工程D．圖中合成出新的胰島素基因最關(guān)鍵的一步是構(gòu)建新的胰島素模型13．基因編輯是指將外源DNA片段導(dǎo)入到細(xì)胞染色體特定位點(diǎn)或刪除基因內(nèi)部的片段，定點(diǎn)改造基因，獲得預(yù)期的生物體基因序列發(fā)生遺傳改變的技術(shù)。如圖是對(duì)某生物B基因進(jìn)行編輯的過(guò)程，該過(guò)程中用sgRNA可指引Cas9酶(一種能切割DNA的酶)結(jié)合到特定的切割位點(diǎn)。下列敘述正確的是()A．sgRNA是合成Cas9酶的模板B．sgRNA的堿基序列與靶基因堿基序列能夠全部互補(bǔ)C．Cas9酶可在特定切割位點(diǎn)斷裂核苷酸之間的磷酸二酯鍵D．B基因被編輯后因不能轉(zhuǎn)錄而無(wú)法表達(dá)相關(guān)蛋白質(zhì)14．如圖1表示某DNA片段及限制酶酶切位點(diǎn)，用限制酶XhoⅠ和SalⅠ分別處理該DNA片段后，酶切產(chǎn)物電泳分離的結(jié)果如圖2所示。下列敘述錯(cuò)誤的是()A．不同的限制酶切割DNA后形成的黏性末端可能相同B．限制酶XhoⅠ與限制酶SalⅠ識(shí)別的核苷酸序列不同C．泳道①②分別是限制酶XhoⅠ和限制酶SalⅠ處理得到的產(chǎn)物D．用限制酶XhoⅠ和限制酶SalⅠ同時(shí)處理該DNA片段，可得到6種電泳產(chǎn)物15．如圖為利用基因工程培育抗蟲植株的示意圖。下列相關(guān)敘述不正確的是()A．②的構(gòu)建需要限制性內(nèi)切核酸酶和DNA連接酶參與B．③侵染植物細(xì)胞后，重組Ti質(zhì)粒整合到④的染色體上C．即使④的染色體上含抗蟲基因，⑤也不一定能表現(xiàn)出抗蟲性狀D．⑤只要表現(xiàn)出抗蟲性狀就表明植株發(fā)生了可遺傳變異16．研究人員通過(guò)RNA沉默技術(shù)，特異性降低蘋果細(xì)胞內(nèi)多酚氧化酶基因的表達(dá)水平，使蘋果被切開后即使長(zhǎng)時(shí)間暴露在空氣中也不會(huì)被氧化褐變。如圖是此過(guò)程原理示意圖，下列有關(guān)敘述不正確的是()A．細(xì)胞內(nèi)多酚氧化酶基因的表達(dá)包括圖示中的①②過(guò)程B．將目的基因成功導(dǎo)入蘋果細(xì)胞中需限制酶、DNA連接酶和RNA聚合酶C．“RNA沉默”的含義是mRNA不能翻譯產(chǎn)生多酚氧化酶D．目的基因的表達(dá)序列與多酚氧化酶基因的表達(dá)序列互補(bǔ)，且要同時(shí)在同一細(xì)胞內(nèi)表達(dá)17．(2023·河南開封高二期中)引物的設(shè)計(jì)是影響PCR擴(kuò)增反應(yīng)的效率和特異性的關(guān)鍵因素。下列相關(guān)敘述正確的是()A．引物的堿基數(shù)量越少則復(fù)性溫度越低，目標(biāo)DNA獲得率越高B．根據(jù)需要可在引物的5′端添加限制酶識(shí)別序列、點(diǎn)突變序列等C．兩種引物的復(fù)性溫度差異較大，可減少引物與模板的非特異性結(jié)合D．引物的G、C含量越高，結(jié)合特異性越強(qiáng)，越利于目標(biāo)DNA的擴(kuò)增18．(2023·河北保定高二聯(lián)考)亞洲棉的突變型光籽和野生型毛籽是一對(duì)相對(duì)性狀，研究發(fā)現(xiàn)，亞洲棉某突變體的光籽表型與8號(hào)染色體的～880kb至～903kb區(qū)間相關(guān)，研究人員根據(jù)野生型毛籽棉的該區(qū)間設(shè)計(jì)連續(xù)的重疊引物進(jìn)行PCR，擴(kuò)增后電泳結(jié)果如圖所示。下列有關(guān)說(shuō)法不正確的是()A．提取該突變體和野生型亞洲棉的8號(hào)染色體上的DNA進(jìn)行PCR擴(kuò)增B．圖中PCR產(chǎn)物的鑒定是通過(guò)瓊脂糖凝膠電泳來(lái)進(jìn)行的C．據(jù)圖分析可知，相對(duì)分子質(zhì)量較大的擴(kuò)增產(chǎn)物與點(diǎn)樣處的距離較近D．該突變體出現(xiàn)的根本原因是引物6對(duì)應(yīng)區(qū)間發(fā)生了堿基對(duì)的替換二、非選擇題(本題包括4小題，共46分)19．(9分)將乙肝病毒表面抗原基因?qū)氩葺?xì)胞中，由此可獲得用來(lái)預(yù)防乙肝的一種新型疫苗，為預(yù)防乙肝開辟了一條新途徑。請(qǐng)回答下列問(wèn)題：(1)獲得乙肝病毒表面抗原基因后，常利用____________技術(shù)進(jìn)行擴(kuò)增。把基因轉(zhuǎn)入農(nóng)桿菌內(nèi)(2)使用農(nóng)桿菌將乙肝病毒表面抗原基因?qū)氩葺?xì)胞中，農(nóng)桿菌中的Ti質(zhì)粒上的T－DNA可將乙肝病毒表面抗原基因轉(zhuǎn)移至草莓細(xì)胞中的____________上。目的基因進(jìn)入草莓細(xì)胞內(nèi)并在草莓細(xì)胞內(nèi)維持穩(wěn)定和表達(dá)，這個(gè)過(guò)程稱為______________________________________。(3)在基因工程操作過(guò)程中，需要用__________酶和__________酶構(gòu)建基因表達(dá)載體，基因表達(dá)載體要有________________，以便篩選出含有目的基因的受體細(xì)胞。(4)在分子水平上，可采用______________的方法來(lái)檢測(cè)轉(zhuǎn)基因草莓果實(shí)提取液中有無(wú)相應(yīng)的抗原。20．(11分)(2023·四川內(nèi)江高二期中)近十年來(lái)，PCR技術(shù)(聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng))成為分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室里的一種常規(guī)手段，其原理是利用DNA半保留復(fù)制，在試管中進(jìn)行DNA的人工復(fù)制(如圖)，在很短的時(shí)間內(nèi)，將DNA擴(kuò)增幾百萬(wàn)倍甚至幾十億倍，使實(shí)驗(yàn)所需要的遺傳物質(zhì)不再受限于活的生物體?；卮鹣铝袉?wèn)題：(1)加熱至94℃的目的是打開________鍵，這一步稱為變性。(2)當(dāng)溫度降低時(shí)，引物與模板__________端結(jié)合，在DNA聚合酶的作用下，引物沿模板延伸，最終合成兩個(gè)DNA分子。(3)PCR技術(shù)的必要條件，除了模板、原料、能量、酶以外，至少還需要三個(gè)條件，即：液體環(huán)境、適宜的________和__________，前者由PCR儀自動(dòng)調(diào)控，后者則靠________來(lái)維持。(4)DNA的復(fù)制需要引物，其主要原因是________________________________________。復(fù)性溫度的設(shè)置跟引物有關(guān)，________________________________________，復(fù)性溫度設(shè)定越高；若復(fù)性溫度太低，會(huì)造成________________________，不但會(huì)造成非目標(biāo)DNA片段多，而且會(huì)出現(xiàn)無(wú)序擴(kuò)增。21．(12分)(2023·河北石家莊高二調(diào)研)如圖1是某基因工程中構(gòu)建重組質(zhì)粒的過(guò)程示意圖，載體質(zhì)粒P0具有四環(huán)素抗性基因(TetR)和氨芐青霉素抗性基因(AmpR)。請(qǐng)回答下列問(wèn)題：(1)EcoRⅤ酶切位點(diǎn)為eq\a\vs4\al\co1(…GAT↓ATC…,…CTA↑TAG…)，EcoRⅤ酶切出來(lái)的線性載體P1為________末端。(2)用TaqDNA聚合酶進(jìn)行PCR擴(kuò)增獲得的目的基因片段，其兩端各自帶有一個(gè)腺嘌呤脫氧核苷酸。載體P1用酶處理，在兩端各添加了一個(gè)堿基為________的脫氧核苷酸，形成P2；P2和目的基因片段在____________酶作用下，形成重組質(zhì)粒P3。(3)為篩選出含有重組質(zhì)粒P3的菌落，采用含有不同抗生素的平板進(jìn)行篩選，得到A、B、C三類菌落，其生長(zhǎng)情況如表(“＋”代表生長(zhǎng)，“－”代表不生長(zhǎng))。根據(jù)表中結(jié)果判斷，應(yīng)選擇的菌落是______(填表中字母)類，另外兩類菌落質(zhì)粒導(dǎo)入情況分別是________________、________________________。平板類型菌落類型ABC無(wú)抗生素＋＋＋氨芐青霉素＋＋－四環(huán)素＋－－氨芐青霉素＋四環(huán)素＋－－(4)為鑒定篩選出的菌落中是否含有正確插入目的基因的重組質(zhì)粒，擬設(shè)計(jì)引物進(jìn)行PCR鑒定。圖2所示為甲、乙、丙3條引物在正確重組質(zhì)粒中的相應(yīng)位置，PCR鑒定時(shí)應(yīng)選擇的一對(duì)引物是__________________________。某學(xué)生用圖中另外一對(duì)引物從某一菌落的質(zhì)粒中擴(kuò)增出了400bp片段，原因是________________________________________________________。22．(14分)(2023·湖南永州高二期末)科研人員通過(guò)轉(zhuǎn)基因技術(shù)培育出超量表達(dá)P蛋白的轉(zhuǎn)基因甜玉米。在超量表達(dá)P基因載體的構(gòu)建中，含P基因的DNA片段以及Ti質(zhì)粒的酶切位點(diǎn)如圖所示，其中強(qiáng)啟動(dòng)子能驅(qū)動(dòng)基因的持續(xù)轉(zhuǎn)錄。請(qǐng)回答下列問(wèn)題：(1)以RNA為模板，通過(guò)RT－PCR技術(shù)可獲取P基因。進(jìn)行RT－PCR時(shí)一般要加入4種脫氧核糖核苷三磷酸(dNTP)而不是脫氧核苷酸，其原因是_______________________________________________________________________________________________________________，同時(shí)需加入的酶有________________________。為了特異性擴(kuò)增P基因序列，需根據(jù)_______________________________設(shè)計(jì)特異性引物。(2)在構(gòu)建基因表達(dá)載體時(shí)，應(yīng)優(yōu)先選用的限制酶是________________，這樣操作不僅使P基因在玉米植株中超量表達(dá)，還可利用T－DNA__________的特性，最終使P基因__________________________________________________________。(3)將農(nóng)桿菌液浸泡過(guò)的玉米愈傷組織進(jìn)行植物組織培養(yǎng)時(shí)，培養(yǎng)基中需加入________，篩選出的愈傷組織經(jīng)再分化過(guò)程形成叢芽，最終獲得轉(zhuǎn)基因玉米植株。(4)對(duì)轉(zhuǎn)基因再生玉米植株進(jìn)行鑒定時(shí)發(fā)現(xiàn)，有些植株雖有P基因，但幾乎沒(méi)有P蛋白，造成該現(xiàn)象的原因可能有_____________________________________________________________________________________________________________________________________________。重點(diǎn)突破練(三)題組一基因工程的工具1．1972年，伯格首先在體外進(jìn)行了DNA改造的研究，成功地構(gòu)建了第一個(gè)體外重組DNA分子。下列相關(guān)敘述正確的是()A．不同的DNA分子必須用同一種限制酶切割，才能產(chǎn)生相同的黏性末端B．DNA連接酶、DNA聚合酶、RNA聚合酶和逆轉(zhuǎn)錄酶都能催化形成磷酸二酯鍵C．當(dāng)限制酶在它識(shí)別序列的中心軸線兩側(cè)將DNA的兩條鏈分別切開時(shí)，產(chǎn)生的是平末端D．限制酶和DNA連接酶的作用部位不同2．(2023·云南昆明高二期末)限制酶a和b的識(shí)別序列與切割位點(diǎn)如圖所示。下列敘述正確的是()A．相同DNA分子被a酶切割的概率一般高于b酶B．a(chǎn)酶、b酶均能切割氫鍵和磷酸二酯鍵C．能被a酶識(shí)別并切割的序列也能被b酶切割D．基因工程中同時(shí)用a酶、b酶兩種酶切割質(zhì)粒能防止其自身環(huán)化3．(2023·河北滄州高二期中)如圖是質(zhì)粒的示意圖，其中ori為復(fù)制原點(diǎn)，AmpR為氨芐青霉素抗性基因，TetR為四環(huán)素抗性基因，箭頭表示限制性內(nèi)切核酸酶的酶切位點(diǎn)。若要得到一個(gè)能在氨芐青霉素培養(yǎng)基上生長(zhǎng)而不能在四環(huán)素培養(yǎng)基上生長(zhǎng)的含重組質(zhì)粒的細(xì)胞，應(yīng)選擇合適的酶切位點(diǎn)是()4．若要利用某目的基因(圖甲)和P1噬菌體載體(圖乙)構(gòu)建重組DNA(圖丙)，限制性內(nèi)切核酸酶的酶切位點(diǎn)分別是BglⅡ(A↓GATCT)、EcoRⅠ(G↓AATTC)和Sau3AⅠ(↓GATC)。下列分析正確的是()A．用EcoRⅠ切割目的基因和P1噬菌體載體B．用BglⅡ和EcoRⅠ切割目的基因和P1噬菌體載體C．用BglⅡ和Sau3AⅠ切割目的基因和P1噬菌體載體D．用EcoRⅠ和Sau3AⅠ切割目的基因和P1噬菌體載體5．如圖是利用基因工程技術(shù)生產(chǎn)疫苗的部分過(guò)程，其中PstⅠ、SmaⅠ、EcoRⅠ、ApaⅠ為四種限制性內(nèi)切核酸酶。下列有關(guān)說(shuō)法正確的是()A．圖示過(guò)程是基因工程的核心步驟，所需的限制性內(nèi)切核酸酶一般來(lái)自真核生物B．圖示中構(gòu)建基因表達(dá)載體時(shí)，需用到EcoRⅠ、SmaⅠ兩種限制性內(nèi)切核酸酶C．一種限制性內(nèi)切核酸酶只能識(shí)別一種特定的核糖核苷酸序列并在特定的位點(diǎn)切割D．卡那霉素抗性基因的存在有利于將含有抗原基因的細(xì)胞篩選出來(lái)題組二基因工程的基本操作程序及應(yīng)用6．(2023·吉林通化高二期末)下列關(guān)于基因工程技術(shù)的敘述，正確的是()A．切割質(zhì)粒的限制酶均特異性地識(shí)別6個(gè)核苷酸序列B．PCR反應(yīng)中溫度的周期性改變是為了DNA聚合酶催化不同的反應(yīng)C．載體質(zhì)粒通常采用抗生素合成基因作為篩選標(biāo)記基因D．抗蟲基因即使成功地插入到植物細(xì)胞染色體上也未必能正常表達(dá)7．科學(xué)研究發(fā)現(xiàn)Notch基因編碼一類高度保守的細(xì)胞表面受體，通過(guò)與其相應(yīng)的配體結(jié)合調(diào)控細(xì)胞增殖、分化和凋亡等。為了研究Notch基因表達(dá)產(chǎn)物的功能，科學(xué)家構(gòu)建含Notch基因的重組質(zhì)粒，并使其在大腸桿菌中表達(dá)。下列相關(guān)分析錯(cuò)誤的是()A．表達(dá)是指在基因的指導(dǎo)下，經(jīng)過(guò)轉(zhuǎn)錄和翻譯，產(chǎn)生相應(yīng)的蛋白質(zhì)B．重組質(zhì)粒除含Notch基因外，還應(yīng)具備啟動(dòng)子、終止子、標(biāo)記基因等C．可通過(guò)PCR技術(shù)檢測(cè)Notch基因是否被成功表達(dá)D．利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因時(shí)，高溫代替了解旋酶的功能8．(2023·四川內(nèi)江高二質(zhì)檢)實(shí)時(shí)熒光定量PCR可用于對(duì)樣品中特定DNA序列進(jìn)行定量分析。將熒光標(biāo)記的Taqman探針與待測(cè)樣本DNA混合，當(dāng)探針完整時(shí)，不產(chǎn)生熒光。在PCR過(guò)程中，與目的基因結(jié)合的探針被TaqDNA聚合酶水解，R與Q分離后，在特定光的激發(fā)下R發(fā)出熒光，隨著循環(huán)次數(shù)的增加，熒光信號(hào)強(qiáng)度增加，通過(guò)實(shí)時(shí)檢測(cè)熒光信號(hào)強(qiáng)度，可得Ct值(達(dá)到熒光閾值所經(jīng)歷的循環(huán)次數(shù))。下列相關(guān)敘述正確的是()A．報(bào)告熒光基團(tuán)R連接在探針的3′端B．該反應(yīng)體系中并未加入ATP，所以新鏈的合成不需要消耗能量C．TaqDNA聚合酶在該反應(yīng)中的作用只有形成磷酸二酯鍵D．Ct值越小，說(shuō)明樣品中特定DNA序列的含量越多9．人乳鐵蛋白是乳汁中主要的鐵結(jié)合蛋白，可提高人體吸收鐵的能力，增強(qiáng)免疫力。研究者通過(guò)生物工程技術(shù)制備山羊乳腺生物反應(yīng)器，過(guò)程如圖所示。下列相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是()A．①過(guò)程構(gòu)建的表達(dá)載體含有組織特異性啟動(dòng)子B．②過(guò)程通常在顯微鏡下進(jìn)行去核、注入等操作C．該過(guò)程培養(yǎng)的山羊所有組織細(xì)胞均能分泌人乳鐵蛋白D．該過(guò)程利用了轉(zhuǎn)基因、核移植和胚胎移植等工程技術(shù)1