奧曲肽對(duì)急性壞死性胰腺炎肺損傷的治療作用

1/1奧曲肽對(duì)急性壞死性胰腺炎肺損傷的治療作用奧曲肽對(duì)急性壞死性胰腺炎肺損傷的治療作用【摘要】目的觀察奧曲肽對(duì)急性壞死性胰腺炎(acutenecrotizcpancreatitis,ANP)大鼠肺損傷的治療作用，并探討其機(jī)制。

方法選用大鼠63只,在胰膽管內(nèi)注射5%?；悄懰徕c溶液誘導(dǎo)大鼠ANP模型。

觀察奧曲肽對(duì)ANP大鼠肺組織形態(tài)及細(xì)胞因子變化的影響。

結(jié)果奧曲肽治療組較ANP+NS組肺濕/干重顯著降低，PaO2明顯提高，肺泡灌洗液中蛋白質(zhì)含量［奧曲肽組為(339.972.5)mg/L］和白細(xì)胞計(jì)數(shù)明顯下降或呈下降趨勢(shì)。

同時(shí)，血漿內(nèi)毒素、血清TNF和NO2-/NO3-水平及肺組織NOS活性顯著降低，肺組織血管內(nèi)皮細(xì)胞和導(dǎo)管上皮細(xì)胞一氧化氮合酶(NOS)表達(dá)下調(diào)，肺組織病理學(xué)改變減輕。

結(jié)論奧曲肽對(duì)ANP大鼠并發(fā)肺損傷有一定的治療作用，其機(jī)制與其對(duì)內(nèi)毒素、腫瘤壞死因子-和一氧化氮等炎癥介質(zhì)的調(diào)節(jié)作用有關(guān)。

Beneficialeffectsofoctreotideonthelunginjuryfollowingexperimentalacutenecroticpancreatitisinrats【Abstract】ObjectiveToinvestigatethepossiblebeneficialeffectsofoctreotideonthelunginjuryfollowingacutenecrotizingpancreatitis(ANP)andthemechanisms.MethodsTheANPmodelofratwasestablishedbyinjectionof5%sodiumtaurocholateintothecholedochus.ResultsOctreotidecoulddecreaseWet/drylungratiosignificantlyatallindicatedtime-point.At12thhafterinductionofANP,PaO2,proteincontentinBALF,plasmaendotoxinlevel,serumNO2-/NO2-,andNOSactivityweremuchlowerinoctreotide-treatedratsthanthoseinuntreatedgroup(P＜0.05).LeukocytecountinBALFwasalsodecreasedwithsomeextentbutwithoutstatisticalsignificant(P＞0.05).SerumconcentrationofTNFwaslowerdramaticallyinoctreotide-treatedgroupthaninANP+NSgroup.Pathologicalstudiesshowedthatinflammatorycellinfiltrationandpulmonaryinterstitialedemawereimproved,andtypeIIepithelialcellswerewellpreservedinoctreotide-treatedgroup.ConclusionOctreotideshoweditsbeneficialeffectsonlunginjuryinbothfunctionalandmorphologicalterationsduringthecourseofANP.Regulatoryrolesofoctreotideonpro-inflammatoryfactors,suchasendotoxin,TNF,andNOcouldbeconsideredasoneofthemajormechanismsunderthissituation.【Keywords】Acutepancreatitis；Somatostatin；Acuterespiratorydistresssyndrome；Cytokine我們以?；悄懰徕c誘導(dǎo)大鼠，觀察奧曲肽對(duì)急性壞死性胰腺炎(acutenecroticpancreatitis,ANP)大鼠肺臟形態(tài)和功能變化的影響以及對(duì)炎癥介質(zhì)的調(diào)節(jié)作用，現(xiàn)報(bào)道如下。

材料和方法1.實(shí)驗(yàn)動(dòng)物與主要試劑：

雄性Spraque-Dawley大鼠63只，體重300～350g。

TNF測(cè)試盒為Endogen公司產(chǎn)品。

2.方法：

(1)ANP模型制備：

大鼠實(shí)驗(yàn)前禁食12h，自由飲水。

ANP模型制備參照文獻(xiàn)［1］。

假手術(shù)組(shamoperation,SO)大鼠僅作剖腹術(shù)。

(2)實(shí)驗(yàn)分組：

大鼠隨機(jī)分3組：

ANP+NS組(n=21)、ANP+奧曲肽組(n=21)和SO組(n=21)。

ANP奧曲肽治療組術(shù)后2、5、8、11h分次于后肢根部皮下注射奧曲肽(Novartis公司產(chǎn)品)生理鹽水溶液(1mg/L)，劑量為(15g/kg體重)；ANP+NS組注射等容積生理鹽水。

(3)觀察項(xiàng)目：

術(shù)后3、6、12h分別處死大鼠，取材觀察下列指標(biāo)：

①肺濕/干重；②動(dòng)脈血氧分壓(PaO2,mmHg)；③肺泡灌洗液(bronchoalveolarlavagefluid,BALF)白細(xì)胞計(jì)數(shù)、蛋白質(zhì)測(cè)定；④血漿內(nèi)毒素含量，采用偶氮顯色法測(cè)定；⑤血清TNF含量，采用ELISA測(cè)定；⑥血清NO含量(mol/L)，采用硝酸還原酶法測(cè)定血清NO2-/NO3-的含量間接反映NO的生成量；3.統(tǒng)計(jì)學(xué)方法：

Studentt檢驗(yàn)。

結(jié)果1.肺濕/干重比變化：

ANP制備后3h始肺濕/干重(4.250.52)較SO組顯著增高［(4.020.50),P＜0.05］,至12h達(dá)峰值(5.920.64)；奧曲肽治療組術(shù)后3、6、12h分別為4.040.48、4.160.49、4.980.36，顯著低于ANP+NS組各相應(yīng)時(shí)點(diǎn)值(P＜0.05)。

2.PaO2變化：

術(shù)后12h,ANP+NS組PaO2(76.17.6)mmHg較SO組顯著降低［(99.61.1)mmHg，P＜0.05(1mmHg=0.133kPa)］。

奧曲肽治療組PaO2［(92.911.0)mmHg］顯著增高，與SO組［(99.61.1)mmHg］相比差異無(wú)顯著性(P＞0.05)。

3.BALF中白細(xì)胞計(jì)數(shù)、蛋白質(zhì)含量變化：

ANP制備后BALF中白細(xì)胞計(jì)數(shù)呈遞增趨勢(shì)，于術(shù)后12h達(dá)(1628.6453.6)109個(gè)/L，顯著高于SO組［(414.3106.9)109個(gè)/L，P＜0.05］。

奧曲肽治療組BALF中白細(xì)胞計(jì)數(shù)較ANP+NS組下降，但差異無(wú)顯著性(P＞0.05)。

術(shù)后12h，ANP+NS組BALF中蛋白質(zhì)含量［(467.260.1)mg/L］較SO組顯著增加［(158.127.9)mg/L,P＜0.05］；奧曲肽組BALF中蛋白質(zhì)含量為(339.972.5)mg/L,較ANP+NS組顯著降低(P＜0.05)。

4.血漿內(nèi)毒素變化：

ANP制備后3、6h各組間血漿內(nèi)毒素水平變化差異無(wú)顯著性(P＞0.05)；術(shù)后12h，ANP+NS組血漿內(nèi)毒素達(dá)(0.3000.063)EU/ml，明顯高于SO組［(0.0450.012)EU/ml,P＜0.05］;奧曲肽治療組為(0.1160.025)EU/ml，顯著低于ANP+NS組(P＜0.05)。

5.血清TNF含量變化：

術(shù)后3、6、12h，ANP組血清TNF分別為(249.190.3)ng/L、(55.916.4)ng/L、和(623.5100.4)ng/L,顯著高于SO組［(2.02.7)ng/L,P＜0.05］。

奧曲肽治療組分別為(44.619.5)ng/L、(4.43.2)ng/L和(143.138.2)ng/L,明顯低于ANP+NS組(P＜0.05)。

6.血清NO2-/NO3-含量、肺組織NOS活性、及組織化學(xué)染色結(jié)果：

術(shù)后12h，ANP+NS組血清NO2-/NO3-含量為(99.8728.76)mol/L,較SO組［(39.166.19)mol/L］顯著增加，奧曲肽治療組血清NO2-/NO3-含量為(59.206.20)mol/L，較ANP+NS組明顯下降(P＜0.05)。

ANP+NS組肺組織NOS活性為(3.790.32)U/mg蛋白,高于SO組［(1.740.31)U/mg蛋白，P＜0.05］；奧曲肽治療組為(2.610.29)U/mg蛋白，較ANP+NS組顯著降低(P＜0.05)。

組織化學(xué)研究結(jié)果顯示，SO組支氣管上皮、肺血管內(nèi)皮及神經(jīng)纖維NOS表達(dá)弱陽(yáng)性；ANP+NS組表達(dá)強(qiáng)陽(yáng)性；奧曲肽治療組NOS表達(dá)較ANP+NS組減弱。

7.病理學(xué)變化：

ANP光鏡下表現(xiàn)為肺泡壁增厚，間質(zhì)充血水腫，大量中性白細(xì)胞浸潤(rùn)。

奧曲肽治療組上述病變減輕。

電鏡下，ANP組見(jiàn)Ⅱ型上皮細(xì)胞變形，板層小體排空至間質(zhì)；微血管內(nèi)皮細(xì)胞腫脹，可見(jiàn)微血栓形成；肺泡腔內(nèi)大量炎癥細(xì)胞和紅細(xì)胞滲出，肺泡萎陷。

奧曲肽治療組病理改變減輕。

討論我們的實(shí)驗(yàn)結(jié)果發(fā)現(xiàn)BALF中白細(xì)胞數(shù)增加，肺泡間隔大量中性粒細(xì)胞浸潤(rùn)；超微結(jié)構(gòu)進(jìn)一步顯示大量中性粒細(xì)胞、單核細(xì)胞貼壁并游出血管外，提示活化的中性粒細(xì)胞或單核細(xì)胞可能參與了ANP肺損傷。

本研究結(jié)果提示，ANP大鼠血液中TNF、內(nèi)毒素及NO的水平均顯著增高，肺組織中NOS