人轉化生長因子β2(TGFβ2)ELISA試劑盒實驗步驟

第第頁人轉化生長因子β2（TGFβ2）ELISA試劑盒試驗步驟中文別名:人轉化生長因子Β2（TGFΒ2）ELISA試劑盒英文名稱:Humantransforminggrowthfactorsβ2,TGFβ2ElisaKit特異性：可檢測樣本中的人轉化生長因子β2，且與其仿佛物無明顯交叉反應。種屬：人保管溫度：28℃樣本類型：血清、血漿、組織勻漿、細胞培養(yǎng)上清和其他生物液體背景：轉化生長因子β2（TGFβ2）前體蛋白由19個氨基酸的信號肽、283個氨基酸的前區(qū)和112個氨基酸的成熟區(qū)構成。人TGFβ2成熟區(qū)與人TGFβ1和TGFβ3的同源性分別為71%和80%，與小鼠TGFβ2的同源性為97%。它可由各類細胞表達，包含破骨細胞、胸腺上皮細胞、角蛋白細胞、肝細胞、胃的主細胞和衛(wèi)星細胞等。TGFβ2具有顯著的種屬交叉生物活性，如人TGFβ2對小鼠細胞具有活性，而豬TGFβ2對兔細胞具有活性等。TGFβ2具有4種基本活性：是大部分類型細胞的生長抑制因子；可加強細胞外基質的沉積；具有免疫抑制作用，抑制抗原遞呈細胞表達IL12和CD40L，上調IL10分泌；在胚胎發(fā)育期表達于離散區(qū)域，如上皮、心肌、手足的軟骨和骨骼、神經系統(tǒng)，提示其具有特異性的功能。工作原理：本試劑盒采用的是雙抗體夾心法酶聯(lián)免疫吸附檢測技術（ELISA）。測定樣品中人轉化生長因子β2水平。向預先包被了抗人轉化生長因子β2抗體的酶標孔中，加入標準品和樣本，溫育后，加入生wu素標記的抗轉化生長因子β2抗體。再與HRP標記的鏈霉親和素結合，形成免疫復合物，再經過溫育和洗滌，去除未結合的酶，然后加入顯色底物TMB，產生藍色，并在酸的作用下轉化成最終的黃色。最終，在450nm處測定反應孔樣品吸光度（OD）值，樣本中的人轉化生長因子β2濃度與OD值成正比，通過繪制標準曲線計算出樣本中人轉化生長因子β2的濃度。產品描述試劑名稱數(shù)量試劑名稱數(shù)量96孔板（預包被）196孔板覆膜2標準品2稀釋液1×45mL檢測溶液A1×120μL檢測溶液B1×120μLTMB底物1×9mL停止液1×6mL濃洗滌液（30×）1×20mL使用說明書1需自備的設備及試劑45010nm濾光片的酶標儀（建議儀器使用前提前預熱）單道或多道微量加液器及吸頭稀釋樣品的EP管蒸餾水或去離子水吸水紙盛放洗液的容器試劑盒的儲存及有效期未開封的試劑盒：全部試劑均按試劑瓶標簽上所示保管。請留意，收到試劑盒后請盡快將TMB洗滌液，停止液保管于4℃，其他試劑保管于20℃。使用后的試劑盒：剩余試劑仍需依照試劑瓶標簽所示的溫度保管，開封后的酶標板要加干燥劑后密封保管于20℃，躲避潮濕。穩(wěn)定性經測定，試劑盒在有效期內按介紹溫度保管，其活性降低率小于5%。為減小外部因素對試劑盒破壞前后檢測值的影響，試驗室的環(huán)境條件需盡量保持全都，尤其是試驗室內溫度、濕度及溫育條件。其次由同一試驗員來進行操作可減少人為誤差。注意：試劑盒內酶標條可拆卸，按試驗需求可分多