2025版高考生物一輪總復(fù)習(xí)第10單元生物技術(shù)與工程第38課動物細(xì)胞工程教師用書

第38課動物細(xì)胞工程?學(xué)業(yè)質(zhì)量水平要求?1．結(jié)合詳細(xì)實(shí)例，說出動物細(xì)胞工程的技術(shù)原理。(生命觀念、科學(xué)思維)2．針對生產(chǎn)生活中的實(shí)際問題，從動物細(xì)胞工程動身，嘗試提出解決方案并進(jìn)行設(shè)計(jì)。(生命觀念、科學(xué)探究)考點(diǎn)一動物細(xì)胞培育1．動物細(xì)胞培育及其條件(1)動物細(xì)胞培育：從動物體中取出相關(guān)的組織，將它分散成單個(gè)細(xì)胞，然后在相宜的培育條件下，讓這些細(xì)胞生長和增殖的技術(shù)。(2)動物細(xì)胞培育的條件①養(yǎng)分：除糖類、氨基酸、無機(jī)鹽、維生素之外，通常還需加入血清等一些自然成分。eq\a\vs4\al(②無菌、無,毒環(huán)境)eq\b\lc\{(\a\vs4\al\co1(培育液和培育用具進(jìn)行滅菌處理及在無菌環(huán)境,下操作定期更換培育液，清除代謝物))③溫度、pH和滲透壓相宜的溫度：36.5±0.5℃；相宜的pH：7.2～7.4；滲透壓也是須要考慮的一個(gè)重要環(huán)境參數(shù)。④氣體環(huán)境eq\b\lc\{(\a\vs4\al\co1(95%的空氣：其中O2為細(xì)胞代謝必需的,5%的CO2：維持培育液的pH))2．動物細(xì)胞培育的過程(1)過程(2)體外培育的動物細(xì)胞類型①一類細(xì)胞能夠懸浮于培育液中生長增殖。②另一類則須要貼附于某些基質(zhì)表面才能生長繁殖，而且還會發(fā)生接觸抑制現(xiàn)象，從而使細(xì)胞停止分裂增殖。(3)生長特點(diǎn)①細(xì)胞貼壁：將細(xì)胞懸液放入培育瓶內(nèi)，置于相宜環(huán)境中培育，懸液中分散的細(xì)胞很快就貼附在瓶壁上，稱為細(xì)胞貼壁。②接觸抑制：當(dāng)貼壁細(xì)胞分裂生長到表面相互接觸時(shí)，細(xì)胞停止分裂增殖的現(xiàn)象稱為細(xì)胞的接觸抑制。(4)原代培育和傳代培育①原代培育：通常指分瓶之前的細(xì)胞培育，即動物組織經(jīng)處理后的初次培育。②傳代培育：指分瓶之后的細(xì)胞培育。3．干細(xì)胞培育及其應(yīng)用(1)分布：存在于早期胚胎、骨髓和臍帶血等多種組織和器官中。(2)類型：胚胎干細(xì)胞和成體干細(xì)胞等。(3)胚胎干細(xì)胞：簡稱ES細(xì)胞，存在于早期胚胎中，具有分化為成年動物體內(nèi)的任何一種類型的細(xì)胞，并進(jìn)一步形成機(jī)體的全部組織和器官甚至個(gè)體的潛能。(4)成體干細(xì)胞①分布：成體組織或器官內(nèi)。②類型：骨髓中的造血干細(xì)胞、神經(jīng)系統(tǒng)中的神經(jīng)干細(xì)胞和睪丸中的精原干細(xì)胞等。③特性：一般認(rèn)為，成體干細(xì)胞具有組織特異性，只能分化成特定的細(xì)胞或組織，不具有發(fā)育成完整個(gè)體的實(shí)力。(5)應(yīng)用①有著自我更新實(shí)力及分化潛能的干細(xì)胞，與組織、器官的發(fā)育、再生和修復(fù)等親密相關(guān)，因而在醫(yī)學(xué)上有著廣泛的應(yīng)用。②胚胎干細(xì)胞必需從胚胎中獲得，這涉及倫理問題，因而限制了它在醫(yī)學(xué)上的應(yīng)用。③誘導(dǎo)多能干細(xì)胞a．概念：通過體外誘導(dǎo)成纖維細(xì)胞，所獲得的類似胚胎干細(xì)胞的一種細(xì)胞，簡稱iPS細(xì)胞。b．優(yōu)點(diǎn)：不涉及倫理問題；理論上可以避開免疫排斥反應(yīng)。1．動物細(xì)胞培育是動物細(xì)胞工程的基礎(chǔ)。 (√)2．體外培育動物細(xì)胞，只需賜予足夠的養(yǎng)分即可。 (×)3．在進(jìn)行細(xì)胞培育時(shí)，需置于含有95%O2和5%CO2的混合氣體環(huán)境中。 (×)4．進(jìn)行傳代培育的動物細(xì)胞均可干脆用離心法收集。 (×)5．已分化的T細(xì)胞、B細(xì)胞等也能被誘導(dǎo)為iPS細(xì)胞。 (√)【教材細(xì)微環(huán)節(jié)命題】1．(選擇性必修3P44旁欄思索)進(jìn)行動物細(xì)胞培育時(shí)常用胰蛋白酶分散細(xì)胞，這說明細(xì)胞間的物質(zhì)主要是蛋白質(zhì)。用胃蛋白酶行嗎？胃蛋白酶作用的相宜pH約為2，當(dāng)pH大于6時(shí)，胃蛋白酶就會失去活性。而多數(shù)動物細(xì)胞培育的相宜pH為7.2～7.4，胃蛋白酶在此環(huán)境中沒有活性，所以用胃蛋白酶不行。2．(選擇性必修3P44正文)細(xì)胞在培育過程中分裂受阻的緣由是懸浮培育的細(xì)胞會因細(xì)胞密度過大、有害代謝物積累和培育液中養(yǎng)分物質(zhì)缺乏等因素而分裂受阻；對于貼壁細(xì)胞來說，除上述因素外，還會因?yàn)榻佑|抑制而停止分裂增殖。動物細(xì)胞培育與植物組織培育的比較比較項(xiàng)目動物細(xì)胞培育植物組織培育生物學(xué)原理細(xì)胞增殖細(xì)胞全能性培育基性質(zhì)液體固體培育結(jié)果子代細(xì)胞新的植株應(yīng)用是動物細(xì)胞工程的基礎(chǔ)①快速繁殖；②培育作物新品種；③細(xì)胞產(chǎn)物的工廠化生產(chǎn)；④作物脫毒培育條件無菌、相宜的溫度和pH、養(yǎng)分等取材簇新的動物組織離體的植物器官、組織或細(xì)胞培育對象分散的單個(gè)細(xì)胞離體的植物器官、組織或細(xì)胞過程原代培育、傳代培育脫分化、再分化細(xì)胞分裂、生長、分化特點(diǎn)①貼壁生長；②接觸抑制①脫分化形成愈傷組織；②再分化形成根、芽等考向1|動物細(xì)胞培育的過程分析1．下圖所示是某動物細(xì)胞培育時(shí)，培育液中活細(xì)胞和死亡細(xì)胞密度統(tǒng)計(jì)結(jié)果，下列相關(guān)敘述錯誤的是()A．試驗(yàn)中要限制胰蛋白酶溶液濃度和處理時(shí)間，以免損傷細(xì)胞B．培育液中應(yīng)適當(dāng)加入青霉素、鏈霉素，以避開雜菌污染C．曲線bc段變更的主要緣由是培育液中養(yǎng)分物質(zhì)不足及有害代謝產(chǎn)物積累D．培育至第6天時(shí)，新產(chǎn)生的細(xì)胞數(shù)等于死亡細(xì)胞數(shù)D解析：試驗(yàn)中要限制胰蛋白酶溶液濃度和處理時(shí)間，以免損傷細(xì)胞，A正確；培育液中應(yīng)適當(dāng)加入青霉素、鏈霉素，以避開雜菌污染，B正確；曲線bc段表示活細(xì)胞密度降低而死細(xì)胞密度增加，產(chǎn)生的主要緣由是培育液中養(yǎng)分物質(zhì)不足及有害代謝產(chǎn)物積累等，C正確；培育至第6天時(shí)，活細(xì)胞數(shù)等于死亡細(xì)胞數(shù)，而不是新產(chǎn)生的細(xì)胞數(shù)等于死亡細(xì)胞數(shù)，D錯誤。2．為檢測某藥物X的抗癌活性，在細(xì)胞培育板的每個(gè)孔中加入相同數(shù)量的肝癌細(xì)胞，使其貼壁生長，試驗(yàn)組加入溶于二甲基亞礬的藥物X，培育72小時(shí)后進(jìn)行計(jì)數(shù)，比較試驗(yàn)組和比照組每個(gè)孔中細(xì)胞數(shù)目。下列有關(guān)敘述錯誤的是()A．細(xì)胞培育液中通常須要加入血清等自然成分B．可用胰蛋白酶處理使肝癌細(xì)胞脫落下來并進(jìn)行計(jì)數(shù)C．比照組中應(yīng)加入等體積的無菌蒸餾水，其他條件一樣D．若試驗(yàn)組細(xì)胞數(shù)遠(yuǎn)低于比照組，可初步推斷此藥物有抗癌效果C解析：培育動物細(xì)胞時(shí)，細(xì)胞培育液中通常須要加入血清，A正確；對于已經(jīng)貼壁生長的動物細(xì)胞，可用胰蛋白酶處理，使肝癌細(xì)胞脫落下來并進(jìn)行計(jì)數(shù)，B正確；試驗(yàn)組加入溶于二甲基亞礬(溶劑)的藥物X，比照組中應(yīng)加入等體積的二甲基亞礬(溶劑)，C錯誤；分析試驗(yàn)結(jié)果可知，添加藥物X的試驗(yàn)組肝癌細(xì)胞數(shù)目比比照組少，可以初步推斷藥物X有抗癌效果，D正確?！炯挤偨Y(jié)】有關(guān)動物細(xì)胞培育學(xué)問點(diǎn)可歸納為4個(gè)“2”(1)培育材料為“2”：即動物胚胎、幼齡動物的組織和器官。(2)培育過程為“2”：即原代培育、傳代培育。(3)胰蛋白酶運(yùn)用“2”次：即原代培育和傳代培育中均運(yùn)用，目的是使細(xì)胞分散開。(4)細(xì)胞生長特點(diǎn)有“2”個(gè)：即貼壁生長和接觸抑制?？枷?|干細(xì)胞培育及其應(yīng)用的分析3．干細(xì)胞的培育勝利是動物細(xì)胞培育領(lǐng)域重大的成就之一，下列相關(guān)敘述錯誤的是()A．干細(xì)胞存在于早期胚胎、骨髓和臍帶血等多種組織和器官中B．胚胎干細(xì)胞具有分化為成年動物體內(nèi)的任何一種類型的細(xì)胞的潛能C．成體干細(xì)胞是成體組織或器官內(nèi)的干細(xì)胞，具有組織特異性D．iPS細(xì)胞只能由成纖維細(xì)胞轉(zhuǎn)化形成D解析：iPS細(xì)胞最初是由成纖維細(xì)胞轉(zhuǎn)化而來的，后來發(fā)覺已分化的T細(xì)胞、B細(xì)胞等也能被誘導(dǎo)為iPS細(xì)胞。4．現(xiàn)在有一個(gè)嬰兒在誕生后醫(yī)院為他保留了臍帶血，在他以后生長發(fā)育過程中假如出現(xiàn)了某種難治療的疾病，就可以通過血液中的干細(xì)胞來為他治病，關(guān)于這個(gè)實(shí)例說法正確的是()A．用干細(xì)胞培育出人體須要的器官用來移植治病，須要激發(fā)細(xì)胞的全部全能性B．用臍帶血中的干細(xì)胞能夠治療這個(gè)孩子全部的疾病C．假如要移植用他的干細(xì)胞培育出的器官，須要用到細(xì)胞培育技術(shù)D．假如要移植用他的干細(xì)胞培育出的器官，應(yīng)當(dāng)長期給他運(yùn)用免疫抑制藥物C解析：用干細(xì)胞培育出人體須要的器官用來移植治療，只要誘導(dǎo)細(xì)胞分化成該組織、器官即可，不需激發(fā)其全部全能性，A錯誤；臍帶血中含有大量未成熟的造血干細(xì)胞，將臍帶血細(xì)胞移植，對白血病、再生障礙性貧血等惡性血液病的治療具有療效，B錯誤；臍帶血移植屬自體移植，基本不會發(fā)生免疫排斥反應(yīng)，不須要長期給他運(yùn)用免疫抑制藥物，D錯誤?？键c(diǎn)二動物細(xì)胞融合技術(shù)與單克隆抗體1．動物細(xì)胞融合技術(shù)(1)概念：使兩個(gè)或多個(gè)動物細(xì)胞結(jié)合形成一個(gè)細(xì)胞的技術(shù)。(2)結(jié)果：形成雜交細(xì)胞，且具有原來兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞的遺傳信息。(3)誘導(dǎo)方法：PEG融合法、電融合法和滅活病毒誘導(dǎo)法等。(4)意義：突破了有性雜交的局限，使遠(yuǎn)緣雜交成為可能。(5)應(yīng)用①是探討細(xì)胞遺傳、細(xì)胞免疫、腫瘤和培育生物新品種等的重要手段。②雜交瘤技術(shù)為制造單克隆抗體開拓了新途徑。2．單克隆抗體及其應(yīng)用(1)單克隆抗體的制備①制備原理a．B淋巴細(xì)胞特點(diǎn)：每個(gè)B淋巴細(xì)胞只分泌一種特異性抗體。b．骨髓瘤細(xì)胞特點(diǎn)：能在體外大量增殖。c．雜交瘤細(xì)胞的特點(diǎn)：既能大量增殖，又能產(chǎn)生特定抗體。②制備過程(2)單克隆抗體的應(yīng)用①作診斷試劑，在多種疾病的診斷和病原體鑒定中發(fā)揮重要作用。②用于運(yùn)載藥物和治療疾病。1．動物體細(xì)胞融合后的雜交細(xì)胞仍舊是二倍體細(xì)胞。 (×)2．與植物原生質(zhì)體融合相比，動物細(xì)胞融合特有的誘導(dǎo)因素有滅活的病毒。 (√)3．單克隆抗體的制備可從未經(jīng)免疫的小鼠體內(nèi)提取B淋巴細(xì)胞。 (×)4．單克隆抗體制備過程中的兩次篩選目的相同。 (×)【教材細(xì)微環(huán)節(jié)命題】1．(選擇性必修3P48相關(guān)信息)病毒滅活的含義是滅活是指用物理或化學(xué)手段使病毒或細(xì)菌失去感染實(shí)力，但是并不破壞這些病原體的抗原結(jié)構(gòu)。2．(選擇性必修3P49圖2-16拓展)B淋巴細(xì)胞、骨髓瘤細(xì)胞和雜交瘤細(xì)胞各有何特點(diǎn)？免疫的B淋巴細(xì)胞：能產(chǎn)生單一抗體，但不能無限增殖。骨髓瘤細(xì)胞：能無限增殖，不能產(chǎn)生抗體。雜交瘤細(xì)胞：既能產(chǎn)生特定的抗體，又能在培育條件下進(jìn)行無限增殖。3．(選擇性必修3P50思索·探討拓展)抗體—藥物偶聯(lián)物中真正起治療作用的物質(zhì)是相關(guān)藥物。是單克隆抗體嗎？為什么？不是，單克隆抗體所起的作用是將藥物定向帶到靶細(xì)胞所在位置，借助其導(dǎo)向作用，在原位殺死癌細(xì)胞，這樣既不損傷正常細(xì)胞，又削減了用藥劑量。1．植物體細(xì)胞雜交和動物細(xì)胞融合的比較項(xiàng)目植物體細(xì)胞雜交動物細(xì)胞融合原理細(xì)胞膜的流淌性和植物細(xì)胞的全能性細(xì)胞膜的流淌性步驟酶解法去掉細(xì)胞壁后，誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合，形成雜種體細(xì)胞，再經(jīng)過植物組織培育形成雜種植株分散成單個(gè)細(xì)胞后誘導(dǎo)細(xì)胞融合誘導(dǎo)方法物理法：電融合法、離心法等；化學(xué)法：PEG融合法、高Ca2＋—高pH融合法等PEG融合法、電融合法、滅活病毒誘導(dǎo)法等結(jié)果形成雜種植株形成雜種細(xì)胞2．單克隆抗體制備的兩次篩選項(xiàng)目第一次篩選其次次篩選篩選緣由誘導(dǎo)融合后得到多種雜交細(xì)胞，另外還有未融合的細(xì)胞由于小鼠在生活中還受到其他抗原的刺激，所以需經(jīng)過選擇性培育篩選方法用特定的選擇培育基篩選：未融合的細(xì)胞和同種細(xì)胞融合后形成的細(xì)胞(“BB”細(xì)胞、“瘤瘤”細(xì)胞)都會死亡，只有融合的雜交瘤細(xì)胞(“B瘤”細(xì)胞)才能生長用多孔培育皿培育，在每個(gè)孔只有一個(gè)雜交瘤細(xì)胞的狀況下起先克隆化培育和抗體檢測，經(jīng)多次篩選得到能產(chǎn)生特異性抗體的細(xì)胞群篩選目的得到雜交瘤細(xì)胞得到能分泌所需抗體的雜交瘤細(xì)胞考向1|動物細(xì)胞融合分析1．下圖為動物細(xì)胞融合示意圖，相關(guān)敘述錯誤的是()A．圖中C為滅活的病毒，此外還可用物理或化學(xué)方法誘導(dǎo)細(xì)胞融合B．圖中過程①發(fā)生了細(xì)胞膜的融合，體現(xiàn)了細(xì)胞膜的選擇透過性C．圖中過程②表示有絲分裂D．動物細(xì)胞融合技術(shù)可用于制備單克隆抗體B解析：圖中C為滅活的病毒，此外還可用物理或化學(xué)方法誘導(dǎo)細(xì)胞融合，A正確；圖中過程①發(fā)生了細(xì)胞膜的融合，體現(xiàn)了細(xì)胞膜的流淌性，B錯誤；圖中過程②表示有絲分裂，C正確；利用動物細(xì)胞融合技術(shù)可獲得雜交瘤細(xì)胞，進(jìn)而制備單克隆抗體，D正確。2．下列關(guān)于動物細(xì)胞融合與植物體細(xì)胞雜交技術(shù)的說法正確的是()A．基本原理相同B．誘導(dǎo)細(xì)胞融合的方法相同C．細(xì)胞融合前的處理過程相同D．融合后都須要進(jìn)行篩選D解析：植物體細(xì)胞雜交的原理為細(xì)胞膜的流淌性、植物細(xì)胞的全能性，而動物細(xì)胞融合利用的是細(xì)胞膜的流淌性和細(xì)胞增殖，A錯誤；動物細(xì)胞融合常用滅活的病毒誘導(dǎo)，而植物體細(xì)胞雜交不能，B錯誤；動物細(xì)胞融合前需用胰蛋白酶、膠原蛋白酶等處理使細(xì)胞分散開，植物體細(xì)胞雜交時(shí)常用纖維素酶和果膠酶去除細(xì)胞壁，C錯誤；誘導(dǎo)融合后會形成多種融合細(xì)胞，還有未融合細(xì)胞，因此都要進(jìn)行篩選，D正確?！疽族e提示】(1)滅活的病毒能使細(xì)胞膜上的蛋白質(zhì)分子和脂質(zhì)分子重新排布，細(xì)胞膜打開，細(xì)胞發(fā)生融合。(2)就目前常用的細(xì)胞融合方法來看，不管是用物理方法、化學(xué)方法，還是生物方法，其融合率都未達(dá)到100%。僅用兩個(gè)細(xì)胞融合，其效率太低，不肯定能得到融合細(xì)胞。更重要的是，即使兩個(gè)細(xì)胞已發(fā)生融合，也并不肯定是探討者期望得到的細(xì)胞類型?？枷?|單克隆抗體的制備過程、特點(diǎn)及其應(yīng)用的分析3．(2024·湖北名校模擬)隨著單克隆技術(shù)與分子生物學(xué)的發(fā)展，單克隆技術(shù)在植物探討中發(fā)揮著越來越重要的作用。在對植物成分進(jìn)行定性和定量探討中，科學(xué)家制備了甘草酸—人血清白蛋白的融合蛋白，以此為抗原制備了抗甘草酸的單克隆抗體。下列相關(guān)敘述正確的是()A．甘草酸—人血清白蛋白的融合蛋白可使植物產(chǎn)生免疫反應(yīng)，分別出相應(yīng)的B淋巴細(xì)胞B．誘導(dǎo)融合后，培育基中漿細(xì)胞、漿細(xì)胞—漿細(xì)胞這兩種細(xì)胞無需用特定培育基篩選C．雜交瘤細(xì)胞培育時(shí)須要加入生長素等激素、血清D．單克隆抗體不能從動物細(xì)胞培育液中干脆獲得B解析：植物沒有免疫反應(yīng)，A錯誤；漿細(xì)胞、漿細(xì)胞—漿細(xì)胞這兩種細(xì)胞不能增殖，自動凋亡，因此不須要篩選，B正確；生長素是植物激素，不能用于動物細(xì)胞培育，C錯誤；單克隆抗體屬于分泌蛋白，能從動物細(xì)胞培育液中干脆獲得，D錯誤。4．(2024·山東煙臺模擬)科研人員在雜交瘤細(xì)胞的基礎(chǔ)上，將兩種雜交瘤細(xì)胞融合獲得了雙雜交瘤細(xì)胞，能夠產(chǎn)生雙特異性抗體，該抗體可同時(shí)結(jié)合α、β兩種抗原。下列說法錯誤的是()A．制備雙特異性抗體時(shí)需將抗原α、β分別注射到小鼠體內(nèi)，獲得免疫小鼠的脾臟細(xì)胞B．用解離液處理免疫小鼠的脾臟細(xì)胞獲得單細(xì)胞，再與小鼠的骨髓瘤細(xì)胞融合后可獲得兩種雜交瘤細(xì)胞C．可用PEG試劑促進(jìn)兩種雜交瘤細(xì)胞的融合，勝利融合后經(jīng)過篩選可獲得雙雜交瘤細(xì)胞D．在腫瘤治療方面研制與腫瘤細(xì)胞和抗腫瘤藥物結(jié)合的雙特異性抗體，能特異性殺死腫瘤細(xì)胞B解析：將抗原α、β分別注射到小鼠體內(nèi)，獲得免疫小鼠的脾臟細(xì)胞，引起機(jī)體的體液免疫，使?jié){細(xì)胞分泌相應(yīng)抗體，A正確；解離液能固定并殺死細(xì)胞，故不能用解離液處理，應(yīng)當(dāng)用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理，才能達(dá)到將脾臟細(xì)胞分散成單個(gè)細(xì)胞的目的，B錯誤；PEG為細(xì)胞融合劑，能夠促進(jìn)兩種雜交瘤細(xì)胞融合，勝利融合后，還要進(jìn)行篩選，獲得所需的雙雜交瘤細(xì)胞，C正確；結(jié)合雙特異性抗體的特點(diǎn)，研制與腫瘤細(xì)胞和抗腫瘤藥物結(jié)合的雙特異性抗體，能夠特異性殺死腫瘤細(xì)胞，D正確?？键c(diǎn)三動物體細(xì)胞核移植技術(shù)和克隆動物1．動物細(xì)胞核移植技術(shù)的概念和類型(1)概念①供體：動物一個(gè)細(xì)胞的細(xì)胞核。②受體：去掉細(xì)胞核的卵母細(xì)胞。③結(jié)果：重新組合的細(xì)胞發(fā)育成新胚胎，繼而發(fā)育成動物個(gè)體。(2)類型哺乳動物核移植可分為胚胎細(xì)胞核移植和體細(xì)胞核移植。2．體細(xì)胞核移植的過程3．體細(xì)胞核移植技術(shù)的應(yīng)用前景及存在的問題(1)應(yīng)用前景①畜牧生產(chǎn)中：加速家畜遺傳改良進(jìn)程，促進(jìn)優(yōu)良畜群繁育。②醫(yī)藥衛(wèi)生領(lǐng)域：轉(zhuǎn)基因克隆動物作為生物反應(yīng)器，生產(chǎn)醫(yī)用蛋白。③治療人類疾?。恨D(zhuǎn)基因克隆動物細(xì)胞、組織和器官作為異種移植等。④使人類更深化地了解胚胎發(fā)育及蒼老過程。⑤愛護(hù)瀕危物種方面：增加動物的存活數(shù)量。(2)存在問題①體細(xì)胞核移植技術(shù)的勝利率特別低。②探討相對落后。③克隆動物存在健康問題，表現(xiàn)出遺傳和生理缺陷等。1．減數(shù)分裂Ⅱ期(MⅡ期)卵母細(xì)胞中的“核”其實(shí)是紡錘體—染色體復(fù)合物。文中所說的“去核”是去除該復(fù)合物。 (√)2．動物細(xì)胞核移植技術(shù)中利用顯微操作法去核沒有穿透卵母細(xì)胞透亮帶。 (×)3．動物細(xì)胞核移植的事實(shí)上移入的是整個(gè)供體細(xì)胞。 (√)4．體細(xì)胞核移植流程中重構(gòu)胚的形成與激活操作方法沒有區(qū)分。 (×)【教材細(xì)微環(huán)節(jié)命題】1．(選擇性必修3P52正文)在動物體細(xì)胞核移植中，非人靈長類動物的體細(xì)胞核移植特別困難的主要緣由是一方面是供體細(xì)胞的細(xì)胞核在去核卵母細(xì)胞中不能完全復(fù)原其分化前的功能狀態(tài)，這導(dǎo)致了胚胎發(fā)育率低；另一方面是對非人靈長類動物胚胎進(jìn)行操作的技術(shù)尚不完善。2．(選擇性必修3P54思索·探討)核移植技術(shù)中必需先去掉受體卵母細(xì)胞的細(xì)胞核的緣由是保證核移植動物的核遺傳物質(zhì)全部來自供體細(xì)胞。1．動物體細(xì)胞核移植過程分析(1)原理：動物體細(xì)胞的細(xì)胞核具有全能性。(2)受體細(xì)胞：MⅡ期的卵母細(xì)胞。選用該細(xì)胞的緣由：①卵母細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)內(nèi)存在激發(fā)細(xì)胞核全能性表現(xiàn)的物質(zhì)。②卵母細(xì)胞體積大，便于操作。③卵母細(xì)胞內(nèi)卵黃多，養(yǎng)分物質(zhì)豐富。(3)將供體細(xì)胞注入去核的卵母細(xì)胞①細(xì)胞核移植技術(shù)中注入去核卵母細(xì)胞中的不是供體細(xì)胞核，而是整個(gè)細(xì)胞，伴隨著兩細(xì)胞融合，體現(xiàn)出細(xì)胞膜具有肯定的流淌性的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)。②核移植時(shí)，一般先用電融合法使供體和受體細(xì)胞融合形成重構(gòu)胚，再用物理或化學(xué)方法激活重構(gòu)胚，使其完成細(xì)胞分裂和發(fā)育進(jìn)程。(4)涉及的生物技術(shù)：動物細(xì)胞培育技術(shù)、動物細(xì)胞融合技術(shù)、核移植技術(shù)、胚胎移植技術(shù)等。其中，核移植是核心技術(shù)。2．克隆動物的遺傳特點(diǎn)克隆動物的親本有3個(gè)，即體細(xì)胞核供體、卵母細(xì)胞細(xì)胞質(zhì)供體和代孕母體。(1)體細(xì)胞核供體：克隆動物細(xì)胞核基因來自體細(xì)胞核供體，克隆動物的性狀與體細(xì)胞核供體基本相同。(2)卵母細(xì)胞細(xì)胞質(zhì)供體：克隆動物的細(xì)胞質(zhì)基因來自卵母細(xì)胞，克隆動物的性狀與卵母細(xì)胞供體部分相同。(3)代孕母體：沒有為克隆動物供應(yīng)遺傳物質(zhì)，克隆動物的性狀與代孕母體沒有干脆關(guān)系。1．下列對動物核移植技術(shù)的描述錯誤的是()A．體細(xì)胞核移植的過程中可通過顯微操作去核法去除卵母細(xì)胞中的核B．用于體細(xì)胞核移植的卵母細(xì)胞通常要在體外培育到MⅡ期C．通過體細(xì)胞核移植方法生產(chǎn)的克隆動物與核供體性狀并不完全相同D．非人靈長類動物的體細(xì)胞核移植特別困難，至今沒有勝利實(shí)例D解析：體細(xì)胞核移植的過程中可通過顯微操作去核法去除卵母細(xì)胞中的核，A正確；用于體細(xì)胞核移植的卵母細(xì)胞通常要在體外培育至減數(shù)分裂Ⅱ期，B正確；體細(xì)胞核移植中，重組細(xì)胞的遺傳物質(zhì)有部分來自去核卵母細(xì)胞，因此克隆動物的性狀與核供體性狀不完全相同，C正確；在動物體細(xì)胞核移植中，非人靈長類動物的體細(xì)胞核移植特別困難，我國科學(xué)家經(jīng)過多年努力，攻克了障礙，勝利獲得了體細(xì)胞克隆猴，D錯誤。2．下列敘述中，不屬于動物體細(xì)胞核移植技術(shù)的應(yīng)用前景的是()A．加速家畜遺傳改良進(jìn)程，促進(jìn)優(yōu)良畜群繁育B．轉(zhuǎn)基因動物作為生物反應(yīng)器，生產(chǎn)很多寶貴的醫(yī)用蛋白C．可以用于檢測有毒物質(zhì)，推斷某種物質(zhì)的毒性D．利用自身細(xì)胞核移植培育相應(yīng)的組織器官C解析：“用于檢測有毒物質(zhì)，推斷某種物質(zhì)的毒性”是動物細(xì)胞培育技術(shù)的應(yīng)用之一，不是動物體細(xì)胞核移植技術(shù)的應(yīng)用。3．(2024·遼寧卷)下圖是利用體細(xì)胞核移植技術(shù)克隆優(yōu)質(zhì)奶牛的簡易流程圖，有關(guān)敘述正確的是()A．后代丁的遺傳性狀由甲和丙的遺傳物質(zhì)共同確定B．過程①須要供應(yīng)95%空氣和5%CO2的混合氣體C．過程②常運(yùn)用顯微操作去核法對受精卵進(jìn)行處理D．過程③將激活后的重組細(xì)胞培育至原腸胚后移植B解析：后代丁的細(xì)胞核的遺傳物質(zhì)來自甲，細(xì)胞質(zhì)的遺傳物質(zhì)來自乙，則丁的遺傳性狀由甲和乙的遺傳物質(zhì)共同確定，A錯誤；動物細(xì)胞培育中須要供應(yīng)95%空氣(保證細(xì)胞的有氧呼吸)和5%CO2(維持培育液的pH)的混合氣體，B正確；過程②常運(yùn)用顯微操作去核法對卵母細(xì)胞進(jìn)行處理，C錯誤；過程③將激活后的重組細(xì)胞培育至囊胚或桑葚胚后移植，D錯誤?！久}動態(tài)】針對人們生產(chǎn)或生活的某一需求，考查動物細(xì)胞的培育條件及過程，考查單克隆抗體的制備及應(yīng)用，考查體細(xì)胞核移植及克隆動物。難度中檔，呈現(xiàn)形式為選擇題或非選擇題。1．(2024·浙江1月選考)下圖為動物成纖維細(xì)胞的培育過程示意圖。下列敘述正確的是()A．步驟①的操作不須要在無菌環(huán)境中進(jìn)行B．步驟②中用鹽酸溶解細(xì)胞間物質(zhì)使細(xì)胞分別C．步驟③到④的分瓶操作前常用胰蛋白酶處理D．步驟④培育過程中不會發(fā)生細(xì)胞轉(zhuǎn)化[思維培育]C解析：動物細(xì)胞培育過程須要無菌操作，故步驟①的操作須要在無菌環(huán)境中進(jìn)行，A錯誤；動物細(xì)胞培育過程須要用胰蛋白酶、膠原蛋白酶等處理動物組織，分散成單個(gè)細(xì)胞，制成細(xì)胞懸液，B錯誤；傳代培育時(shí)須要用胰蛋白酶處理貼壁生長的細(xì)胞，使之分散成單個(gè)細(xì)胞，再分瓶培育，C正確；步驟④為傳代培育過程，該過程中部分細(xì)胞可能發(fā)生細(xì)胞轉(zhuǎn)化，核型變更，D錯誤。2．(2024·山東卷)一個(gè)抗原往往有多個(gè)不同的抗原確定簇，一個(gè)抗原確定簇只能刺激機(jī)體產(chǎn)生一種抗體，由同一抗原刺激產(chǎn)生的不同抗體統(tǒng)稱為多抗。將非洲豬瘟病毒衣殼蛋白p72注入小鼠體內(nèi)，可利用該小鼠的免疫細(xì)胞制備抗p72的單抗，也可以從該小鼠的血清中干脆分別出多抗。下列說法正確的是()A．注入小鼠體內(nèi)的抗原純度對單抗純度的影響比對多抗純度的影響大B．單抗制備過程中通常將分別出的漿細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合C．利用該小鼠只能制備出一種抗p72的單抗D．p72部分結(jié)構(gòu)變更后會出現(xiàn)原單抗失效而多抗仍有效的狀況[思維培育]D解析：單抗的制作須要篩選，而多抗不須要篩選，抗原純度越高，產(chǎn)生的多抗純度越高，因此抗原純度對單抗純度的影響比對多抗純度的影響小，A錯誤；單抗制備過程中通常將分別出的B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合，B錯誤；非洲豬瘟病毒衣殼蛋白p72上有多種抗原確定簇，一個(gè)抗確定簇只能刺激機(jī)體產(chǎn)生一種抗體，所以向小鼠體內(nèi)注入p72后，可以刺激小鼠產(chǎn)生多種抗p72的單抗，C錯誤；p72部分結(jié)構(gòu)變更只變更了部分抗原確定簇，因此由這部分抗原確定簇產(chǎn)生的抗體失效，但由其他抗原確定簇刺激機(jī)體產(chǎn)生的抗體有效，所以多抗仍有效，D正確。3．(2024·湖南卷，節(jié)選)M基因編碼的M蛋白在動物A的肝細(xì)胞中特異性表達(dá)?，F(xiàn)設(shè)計(jì)試驗(yàn)，將外源DNA片段F插入M基因的特定位置，再通過核移植、胚胎培育和胚胎移植等技術(shù)獲得M基因失活的轉(zhuǎn)基因克隆動物A，流程如圖所示?；卮鹣铝袉栴}：(1)在無菌、無毒等相宜環(huán)境中進(jìn)行動物A成纖維細(xì)胞的原代和傳代培育時(shí)，須要定期更換培育液，目的是_____________________________________________________________________________________________________________。(2)與胚胎細(xì)胞核移植技術(shù)相比，體細(xì)胞核移植技術(shù)的勝利率更低，緣由是_____________________________________________________________________________________________________________________________________。(3)鑒定轉(zhuǎn)基因動物：以免疫小鼠的________淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞進(jìn)行融合，篩選融合雜種細(xì)胞，制備M蛋白的單克隆抗體，簡要寫出利用此抗體確定克隆動物A中M基因是否失活的試驗(yàn)思路：______________________________________________________________________________________________。[思維培育]解析：(1)在無菌、無毒等相宜環(huán)境中進(jìn)行動物A成纖維細(xì)胞的原代和傳代培育時(shí)，須要定期更換培育液，目的是清除代謝物，防止細(xì)胞代謝物積累對細(xì)胞自身造成危害。(2)由于動物胚胎細(xì)胞分化程度低，復(fù)原其全能性相對簡單，動物體細(xì)胞分化程度高，復(fù)原其全能性特別困難，故與胚胎細(xì)胞核移植技術(shù)相比，體細(xì)胞核移植技術(shù)的勝利率低。(3)先給小鼠注射特定抗原使之發(fā)生免疫反應(yīng)，之后從小鼠脾臟中獲得已經(jīng)免疫的B淋巴細(xì)胞。誘導(dǎo)B淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合，利用選擇培育基篩選出雜交瘤細(xì)胞，制備M蛋白的單克隆抗體。假如M基因已經(jīng)失活，則克隆動物A中無法產(chǎn)生M蛋白的單克隆抗體，則可利用抗原—抗體雜交技術(shù)進(jìn)行檢測。答案：(1)清除代謝產(chǎn)物，防止細(xì)胞代謝物積累對細(xì)胞自身造成危害(2)動物胚胎細(xì)胞分化程度低，復(fù)原其全能性相對簡單，動物體細(xì)胞分化程度高，復(fù)原其全能性特別困難(3)B用特定抗原刺激小鼠，然后取出已免疫的B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合，看篩選出的雜交瘤細(xì)胞能否產(chǎn)生M蛋白的單克隆抗體，假如不能產(chǎn)生，說明M基因在克隆動物A中已失活1．(科學(xué)試驗(yàn)和探究情境)某探討小組為測定藥物對體外培育細(xì)胞的毒性，打算對某種動物的肝腫瘤細(xì)胞(甲)和正常肝細(xì)胞(乙)進(jìn)行動物細(xì)胞培育。下列敘述正確的是()A．制備肝細(xì)胞懸液時(shí)能用胃蛋白酶代替胰蛋白酶處理肝組織B．恒溫培育箱中的